生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
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生理学实验1 蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备一、目的和原理蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动与温血动物近似,但其离体组织所需的生活条件比较简单,且易于控制,因此在生理学实验中常用其离体组织或器官作为实验标本。
例如:蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本,可用来观察和研究兴奋性、兴奋过程、刺激引起兴奋的条件、兴奋在神经-肌接头处的传递、肌肉收缩的特点等多种生理现象,所以,制备坐骨神经-腓肠肌标本,是生理学实验的一项基本操作技术。
本实验的目的是:学习并掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的方法,为以后的神经肌肉实验打下基础。
二、实验对象蛙或蟾蜍三、器材和用品蛙板、蛙针、蛙钉、剪刀(2把)、镊子(2把)、玻璃针、锌铜弓、培养皿、滴管、棉线、棉球、尸体盘(以上用品合称蛙类解剖器械一套)及任氏液。
四、方法与步骤1.破坏脑脊髓选一活泼健壮的蛙或蟾蜍,用清水冲洗干净。
左手握蛙,用食指下压吻端,拇指按压背部,使头前俯;右手持蛙针由吻端沿正中线向尾端触划,所触到的凹陷处即是枕骨大孔所在部位。
将蛙针由此垂直刺入皮下,再将针尖折向前方,经枕骨大孔进入颅腔,左右搅动捣毁脑组织(图1-1)。
然后将蛙针退出至刺入点皮下,再将针尖向后插入椎管捣毁脊髓。
图1-12.剪除前部躯干及内脏在骶髂关节以上1厘米处用粗剪刀剪断脊柱,并将前部躯干及所有内脏一并剪去,仅保留一段腰骶部脊柱和后肢。
在所留脊柱的腹侧两旁可看到坐骨神经丛。
剪下的部分置于尸体盘内。
3.剥皮左手捏住脊柱断端,右手捏住断端边缘的皮肤,向下剥掉后肢的全部皮肤,标本置于盛有任氏液的培养皿中待用,皮肤弃去。
洗净双手和器械,以免蛙或蟾蜍皮肤的分泌物损害神经和肌肉。
4.分离两后肢将下肢标本腹侧向上用蛙钉固定于蛙板上,用玻璃针沿脊柱两侧分离两条坐骨神经;在两条坐骨神经下各穿一线,于靠近脊柱处将其分别结扎,并在扎线与脊柱之间剪断神经;左手用结扎线提起坐骨神经,右手持剪刀或玻璃针向下游离,直至坐骨神经出盆腔处;将游离的两条坐骨神经分别置于两侧大腿的肌肉上。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、实验结果五、实验结论一、实验目的本次实验的主要目的是通过坐骨神经腓肠肌标本制备,了解人体肌肉组织的结构和特点。
同时,通过对标本制备过程中各个步骤的操作,掌握标本制备技能和方法。
二、实验原理1. 坐骨神经腓肠肌标本制备原理坐骨神经腓肠肌标本制备是指将动物或人体组织切割成薄片并进行染色处理,使其能够在显微镜下观察。
在这个过程中,需要进行以下几个步骤:(1)取样:从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
(2)固定:将组织样品放入固定液中进行固定处理。
(3)包埋:将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理。
(4)切片:将包埋后的组织样品切成薄片。
(5)染色:将切片进行染色处理,使其能够在显微镜下观察。
2. 坐骨神经腓肠肌结构原理坐骨神经腓肠肌是人体下肢的一部分,由坐骨神经支配。
它主要由三个部分组成:大腿后侧的半膜状肌、半腱状肌和小腿后侧的胫长伸肌。
这三个部分都是由肌纤维束组成的,每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
三、实验步骤1. 取样:从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
2. 固定:将组织样品放入10%福尔马林液中进行固定处理,固定时间为24小时。
3. 包埋:将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理,包埋时间为48小时。
4. 切片:将包埋后的组织样品切成厚度为5微米左右的薄片。
5. 染色:将切片进行染色处理,常用染色方法有HE染色法和Masson染色法等。
本次实验采用HE染色法进行染色处理。
6. 封片:将染好色的切片放入玻璃片上,加上封片胶,用玻璃片盖住,使其能够在显微镜下观察。
四、实验结果经过以上步骤的操作,制备出了坐骨神经腓肠肌标本。
在显微镜下观察到了肌纤维束组成的三个部分:半膜状肌、半腱状肌和胫长伸肌。
每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
五、实验结论通过本次实验,我们了解到了坐骨神经腓肠肌标本制备的基本步骤和操作方法,并且通过观察标本结构,掌握了人体肌肉组织的结构和特点。
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
本实验旨在通过制备坐骨神经腓肠肌标本的过程,掌握基础的组织学实验技能,同时加深对神经肌肉解剖结构的理解。
材料与方法:
材料:成年大鼠标本、无水乙醇、石蜡、光学显微镜、麻醉手套、组织取样器、组织取样盒、理化试管架等。
1.准备标本
用麻醉手套将成年大鼠净化神经集中于坐骨神经下1-2厘米范围内,然后将腓肠肌标本从骨骼中取出。
2.固定标本
将取出的腓肠肌标本置于10%的无水乙醇中固定24小时;
3.去水
从10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%到80%的无水乙醇渐次去除,每步时间为1小时;
4.透明
将固定去水的腓肠肌标本分别置于50%敌敌畏-乙醇溶液、70% 敌敌畏-乙醇溶液和100% 敌敌畏透明液溶液中,每步时间为2小时,至标本彻底透明。
5.包埋
取出已透明的腓肠肌标本,置于石蜡组织取样盒中,根据实验需求,选择合适的包埋方向。
6.取薄片
将石蜡包埋的腓肠肌标本取出,用微型切片机切制厚度为5微米的切片,将切片拉直后在干净的水晶片上展开。
7.染色与制成玻片
用哈里斯血液染色将切片染色,脱色后洗净水片后,在水晶片上滴几滴覆盖剂,然后用平凡玻片将组织接口反过来盖住薄片,压紧即可。
实验成果:
经过制备和染色后,我们取得了成年大鼠坐骨神经腓肠肌的标本,通过光学显微镜的观察与检测,我们发现该标本包含完整的腓肠肌结构及肌纤维分离范围。
切片上清晰可见腓肠肌内有明显的核团和细胞质呈透明状,同时染色后肌纤维呈现出红色,血管呈现出蓝色,系统性地展示了腓肠肌肌纤维和血管位置的分布情况。
结论与意义:。
坐骨神经-腓肠肌标本制备骨骼肌单收缩及其总和以及Powerlab实验系统的使用二、实验目的:1. 学习蛙类动物单毁髓与双毁髓方法,并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 了解电刺激的极性法则和方法,学习肌肉收缩的记录方法。
3. 观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系、骨骼肌的单收缩过程和肌肉收缩的总和以及强直收缩现象, 了解肌肉收缩过程的时相变化以及刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。
三、实验原理:腓肠肌由许多肌纤维组成,刺激腓肠肌时,不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。
当刺激强度过小时,不引起肌肉发生收缩反应,此时的刺激为阈下刺激。
而能引起肌肉发生收缩反应的最小刺激强度,为阈刺激。
当全部肌纤维同时收缩时,则出现最大的收缩反应。
这时,即使再增大刺激强度,肌肉收缩的力量也不再随之加大,该刺激强度为最适刺激强度。
肌肉组织对于一个阈上强度的刺激,发生一次迅速的收缩反应,称为单收缩。
单收缩一般要经历潜伏期、收缩期和舒张期三个过程。
当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时,则出现多个收缩反应的叠加,叫做强直收缩。
当后一收缩发生在前一收缩的舒张期,即发生不完全强直收缩;当后一收缩发生在前一收缩的收缩期,各自的收缩则完全融合,肌肉出现持续的收缩状态,即产生完全强直收缩。
四、实验材料:青蛙五、实验步骤:1. 制备坐骨神经-腓肠肌标本:1) 洗干净实验动物2) 双毁髓,剥制后肢,分离两后肢3) 分离坐骨神经4) 游离腓肠肌5) 分离股骨头6) 标本检验7) 电刺激极性法则的验证2. 连接实验装置:将换能器的输出线接至RM6240生理记录装置的2通道,电刺激信号接至肌槽的电极上。
然后把制备好的坐骨神经-腓肠肌标本股骨固定在肌槽上。
将固定肌肉的棉线另一端接在张力换能器上,保持适度松紧,将坐骨神经搭在肌槽的电极上。
3. 设置通道放大器和刺激器:1) 打开PowerLab电源,检查USB线连接2) 打开Chart5中文版3) 设置通道数为24) 设置通道2-桥式放大器:量程5mV,低通10Hz,调零5) 设置刺激器:刺激方式选脉冲,脉冲数1,手动方式,量程10V,振幅100mV,标记通道1,频率1Hz,持续时间1mS,4. 开始测试:1) 打开刺激器面板和点右下角”开始“按钮2) 点右上角调节采样速度(“走纸速度”)3) 菜单打开设置刺激器的脉冲数2个或5个,重新打开刺激器面板4) 调节走纸速度为400六、实验结果:图1. 蛙坐骨神经—腓肠肌标本图(二)坐骨神经-腓肠肌标本在Powerlab实验系统中所记录下的数据1.通过不断调整刺激强度,使肌肉收缩的幅度适中,记录单收缩的曲线(图2-1 )。
实验二-坐骨神经标本—腓肠肌标本的制备一、实验目的:1.学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠肌的制备方法。
3.了解电刺激的极性法则。
二、实验原理:1、牛蛙作为实验动物的优势:离体实验是动物生理学主要的实验方法之一。
两栖动物是冷血动物,其基本生理机能与温血动物近似,而其离体组织器官维持活性所需要的条件比较简单,因此它常被选为生理学实验提供离体组织或器官的实验动物。
蟾蜍或青蛙坐骨神经—腓肠肌在任氏液中可维持生理活性数小时,在其基础上还可进一步制作神经干标本、腓肠肌标本,可用于研究肌肉收缩的特性,神经和肌肉的兴奋性、传导性,刺激与反应的关系,神经肌肉接头活动等生理活动及相关机制,甚至还可以用于药物筛选如抗疲劳药物的模型。
其中牛蛙人工养殖成本低产出率高,相对蟾蜍要更安全。
因此,本次实验选择牛蛙作为实验对象。
2、锌铜弓刺激检测标本活性的原理:锌铜弓在溶液中沾湿以后,锌的表面电离出正离子,里面形成负离子;而铜的表面电离出负离子,里面形成正离子。
当用锌铜弓接触活组织时,电流便沿着锌一活组织→铜的方向流动而产生刺激效应。
所以锌相当于正极,面铜相当于负极发挥刺激作用;当断开时,则发生相反的效应。
锌的金属电势比铜低,形成一定的电势差(就相当于有电压),锌铜弓是把一根锌棒和一根铜棒一端焊在一起,另一段分开,则接触样本(例如神经干)时,会引起样本局部去极化,引发动作电位。
三、实验器材:牛蛙,常用手术器械(手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针),蜡盘,蛙板(木质或硬泡沫塑料),玻璃板,固定针,锌铜弓,培养皿或不锈钢盘,污物缸,滴管,纱布,粗棉线,任氏液。
四、实验流程和步骤:1.牛蛙的双毁髓一手握住牛蛙,背部向上。
用拇指压住牛蛙的背部,食指按压其头部前端,使头端向下低垂;另一手持毁髓针,由两眼之间沿中线向后触划,当触及两耳中间的凹陷处(此处与两眼的连线成等边三角形)时,持针手即感觉针尖下陷,此处即是枕骨大孔的位置。
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备、分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响【课程名称】【实验名称】【实验性质】【器材】蟾蜍或蛙;任氏液;二道生理记录仪、双脉冲刺激器、肌槽、常规手术器械、玻璃分针、毁髓针、锌铜弓、解剖盘、烧杯、滴灌、任氏液等。
【实验目的】1.学习坐骨神经–腓肠肌标本的制备方法。
2.分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响。
【实验原理】刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下,不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小,两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间(即单收缩)时,肌肉收缩表现为一连串的单收缩;若增大刺激频率,使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间,而小于单收缩时,肌肉呈现不完全强直收缩;若继续增加刺激频率,使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间,肌肉则表现出完全强直收缩。
【实验步骤】1、双毁髓:左手握蟾蜍,背部向上。
用食指按压其头部前端,拇指压住躯干的背部,使头向前俯;右手持毁髓针,由两眼之间中线向后方划触,触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。
将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔,然后针尖向前刺入颅腔,在颅腔内搅动,以毁脑组织。
再将毁髓针退至枕骨大孔,针尖转向后方,与脊柱平行刺入椎管,以捣毁脊髓。
脊髓彻底捣毁时,可看到蟾蜍后肢突然蹬直,然后瘫软,此时的动物为双毁髓动物。
2、剥制后肢标本:左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤,右手持手术剪横向剪断皮肤,然后往后肢方向撕剥皮肤。
剪开腹壁肌肉,用手术镊提起内脏,翻向头部,在看清支配后肢的脊神经发出部位后,于其前方剪断脊柱。
3、分离两后肢:将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上,右手持金冠剪纵向剪开脊柱,再剪开耻骨联合,使两后肢完全分离。
4、分离坐骨神经:将一侧后肢的脊柱端腹面向上,用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经,股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝,找出坐骨神经,剪断盖在上方的梨状肌,完全暴露坐骨神经,剪去支配腓肠肌之外的分支,再剪去脊柱及肌肉,只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。
一、实验目的1. 学习并掌握青蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 观察腓肠肌的形态结构,了解其基本组织构成。
3. 掌握神经肌肉兴奋性的检测方法,观察神经刺激对肌肉收缩的影响。
二、实验原理青蛙作为一种常用的实验动物,其坐骨神经-腓肠肌标本具有以下特点:1. 腓肠肌体积较大,易于观察。
2. 坐骨神经与腓肠肌紧密相连,便于观察神经对肌肉的影响。
3. 腓肠肌在任氏液中可以保持生理活性,便于观察肌肉收缩。
实验过程中,通过破坏青蛙的脑和脊髓,使其失去意识,然后进行坐骨神经-腓肠肌标本的制备。
制备过程中,需要观察腓肠肌的形态结构,并检测神经刺激对肌肉收缩的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:青蛙、任氏液、手术剪、手术镊、眼科镊、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器。
2. 实验仪器:显微镜、解剖镜、电子刺激器、放大镜。
四、实验步骤1. 青蛙的处死与固定:取青蛙一只,用自来水冲洗干净。
左手握住青蛙,使其背部向上,用大拇指或食指使头前俯。
右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管,然后将探针改向前刺入颅腔内,左右搅动探针,捣毁脑组织。
接着将探针抽回至进针处,再向后刺入脊椎管,反复提插捣毁脊髓。
此时如青蛙四肢松软,呼吸消失,表明脑和脊髓已完全破坏。
2. 坐骨神经-腓肠肌标本的制备:在骶髂关节水平以上1~2cm处剪断脊柱,左手握住青蛙后肢,用拇指压住骶骨,使青蛙头与内脏自然下垂。
右手持手术剪,沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部,留下后肢。
用手术剪和眼科剪仔细分离坐骨神经和腓肠肌,用细线将腓肠肌两端固定在蛙板上。
3. 神经肌肉兴奋性的检测:将电子刺激器连接到坐骨神经上,调节刺激强度和频率,观察腓肠肌的收缩情况。
记录不同刺激强度和频率下腓肠肌的收缩幅度和频率。
4. 观察腓肠肌的形态结构:在显微镜下观察腓肠肌的横切片,观察其形态结构,包括肌纤维、肌束、血管等。
五、实验结果与分析1. 腓肠肌的形态结构:在显微镜下观察到腓肠肌由肌纤维组成,肌纤维呈长条状,相互平行排列。
坐骨神经腓肠肌标本的制备和神经干动作电位
的观察与传导速度的测定
一、实验目的:
1.学习蛙类动物双毁髓的实验方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
3.观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形,并了解其产生的原理。
4.学习蛙和蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
二、实验材料:
1.实验对象:蟾蜍
2.实验器材:常规手术器械(粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊)蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。
三、实验原理:
神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位,标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干的一段施加刺激,从另一端引导传来的神兴奋冲动,可以记录出双相电位,加入在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损伤,阻断其兴奋传导能力,这时候记录出的动作电位就成为单相电位。
神经细胞的动作电位是以全或无的方式产生的。
但是,复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。
如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位,两引导点之间的距离为m,在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。
即可按照公式v=m/s来计算出兴奋的传导速度。
蛙类的坐骨神经干属于混合性神经,其中包含有粗细不等的各种纤维,其直径一般为3-29um,其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维,传导速度在正常室温下为35-40 m/s。
神经每兴奋一次极其在兴奋以后的回复过程中,其兴奋性都要经历一次周期性的变化,其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化,首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋,然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激,用于检查神经的兴奋阈值和所引起的动作电位的幅度,以判定神经兴奋性的变化。
四、实验方法及步骤:
1、坐骨神经干标本制备
(1)破坏脑与脊髓:
取蛙一只,用自来水冲洗干净,左手持蛙,用食指下压其吻部,拇指按压在其骶髂关节下方,使其头尽量前俯,右手持探针沿两眼之间中线向后方轻划,至触及头颈部正中的凹陷处,即为枕骨大孔的位置。
用探针在凹陷处垂直刺入枕骨大孔,再将其针尖转向前刺入颅腔,左右搅动探针,彻底捣毁脑组织;然后缓慢地把探针退至枕骨大孔处,将其转向后方,与脊柱平行捻动探针使其刺入整个椎管,彻底捣毁脊
髓。
彻底捣毁脊髓时,可看到动物后肢突然蹬直,然后瘫软。
(2)剪去躯干上部及内脏
在骶髂关节前1 cm处用金冠剪(粗剪)剪断脊柱(可在下肢前端)。
沿脊柱切口向下剪开两侧腹部皮肤至耻骨处,将头、前肢、内脏及腹部软组织全部剪掉,放于污物盘,只保留下端脊柱和下肢。
在腹侧脊柱两旁可看到腰骶神经丛。
注意切勿触及或损伤坐骨神经。
(3)剥后肢皮肤
左手持镊子夹住脊髓断端,右手捏住断端边缘,剥掉全部后肢皮肤。
注意不要握住或接触坐骨神经。
将全部皮肤剥除后,把标本置于盛有任氏液的培养皿中。
将手和手术器械洗净,以免皮肤分泌物、血液污染神经标本。
(4)分离两腿
在任氏液里把标本上的血迹冲洗干净,用镊子从背位夹住脊柱将标本提起,剪去向上突出的骶骨(避开坐骨神经),然后沿正中线用粗剪刀将脊柱分为两半,再从耻骨联合中央剪开两后肢。
将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。
(5)制备坐骨神经标本
取出一侧下肢,用蛙钉固定于蛙板上,固定时要注意使坐骨神经和腓肠肌朝上。
先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经,神经干应尽可能分离的长一些。
要求上自脊髓附近的主干,下沿腓总神经或胫神经一直分离至踝关节附近止。
坐骨神经在膝关节后分为胫神经和腓神经两支,如要制备腓神经,则在分叉的下端将胫神经剪断,膝关节附近
的腓神经表面有肌肉和筋膜覆盖,仔细分离并沿腓肠肌沟一直下行分离至跟踺,然后将棉线用任氏液浸泡后,在脊髓侧坐骨神经起始处和跟腱处将神经结扎,在结扎的外侧将神经干剪断,制成坐骨神经-腓神经标本。
另外,也可保留胫神经而将腓神经剪断,制成坐骨神经-胫神经标本。
将制备好的神经干标本浸于任氏液中数分钟,待其兴奋性稳定后开始实验。
注意在分离过程中,应把神经周围的结缔组织去除干净,并把神经的细小分支剪断,但要注意不要用金属器械碰触神经,也不要对神经过度牵拉。
实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。
制备好的标本应如下:
图1 坐骨神经腓肠肌标本示意图
2、神经干动作电位的观察
(1)连接实验装置:将刺激电极连接刺激输出,记录电极连接到1通道和2通道,注意避免接触不良或连接错误,注意地线的连接。
(2)将神经标本置于神经屏蔽盒的电极上将神经的近中枢端置于刺激电极上,外周端置于记录电极上。
(3)进入生物信号采集处理系统,设置参数进行测定。
五、实验结果及讨论:
1.神经干动作电位:
所测得蟾蜍坐骨神经干复合动作电位图如下,神经干受刺激后,记录的动作电位即为双相动作电位。
2.神经干动作电位的传导速度测定
本实验采用两个通道同时记录由两对引导电极记录下的动作电位来计算动作电位传导速度。
先分别测量从刺激伪迹到两个动作电位起始点的时间,设上线为t1,下线为t2,求出t2-t1的时间差值。
然后再测量标本屏蔽盒中两对引导电极起始电极之间的距离d,则神经冲动的传导速度V=d/(t2-t1)。
通过实验,我们测得t1=1.9ms,t2=2.2ms,d=1cm,V=33.33m/s。
相比标准值(35-40)来说偏低,可能因为神经纤维放置时间过长,不够湿润而使传导速度下降。
六、注意事项:
1、在制备标本时,避免过度牵拉神经,不可用手或金属器械触碰神经干。
2、避免动物皮肤分泌物(蟾酥、血液等)污染神经和肌肉,也不要用水冲洗,以免影响组织机能。
3、制备标本时,要随时用任氏液润湿神经和肌肉,防止干燥。
4、分离神经时,一定要把周围结缔组织剥离干净。
5、实验要迅速,以免时间过长影响标本活性(兴奋性)。
(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收获,努力就一定可以获得应有的回报)。