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PI3KAktmTOR通路抑制剂影响乳腺癌干细胞对内分泌治疗和靶向治疗耐药性的研究一、本文概述乳腺癌作为全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其治疗一直是医学领域的研究热点。
近年来，随着内分泌治疗和靶向治疗的广泛应用，乳腺癌患者的生存期得到了显著延长。
然而，乳腺癌干细胞（Breast Cancer Stem Cells，BCSCs）的存在及其对内分泌治疗和靶向治疗的耐药性，成为了乳腺癌复发和转移的重要原因。
因此，探索乳腺癌干细胞耐药性的机制，并寻找能够逆转耐药性的药物，对于提高乳腺癌的治疗效果具有重要意义。
PI3K/Akt/mTOR通路是细胞内一条重要的信号转导通路，参与调控细胞的生长、增殖、凋亡等多个生物学过程。
近年来，越来越多的研究表明，PI3K/Akt/mTOR通路的异常激活与乳腺癌的发生、发展及耐药性密切相关。
因此，针对PI3K/Akt/mTOR通路的抑制剂在乳腺癌治疗中展现出了良好的应用前景。
本研究旨在探讨PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂对乳腺癌干细胞耐药性的影响及其机制。
我们将通过体外实验和体内实验，系统研究PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂对乳腺癌干细胞生长、增殖、凋亡的影响，以及其对内分泌治疗和靶向治疗耐药性的逆转作用。
我们还将深入探讨PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂逆转耐药性的分子机制，以期为乳腺癌的治疗提供新的思路和方法。
通过本研究的开展，我们期望能够为乳腺癌的治疗提供新的药物靶点和治疗策略，为提高乳腺癌患者的生存质量和预后提供有力支持。
二、材料与方法本研究使用了乳腺癌干细胞系，包括对内分泌治疗和靶向治疗敏感的细胞系以及对这些治疗耐药的细胞系。
所有细胞系均来源于ATCC （美国典型培养物保藏中心）或本实验室保藏。
PI3KAktmTOR通路抑制剂（具体药物名称）、内分泌治疗药物（具体药物名称）以及靶向治疗药物（具体药物名称）均购自Sigma-Aldrich公司（美国）。
细胞培养基、胎牛血清等细胞培养相关试剂购自Gibco公司（美国）。
如何选择关键靶点PI3K、AKT和mTOR的抑制剂？针对癌症中的PI3K / AKT信号通路-07-23 订阅号APExBIOPI3K / AKT信号通路的异常激活会导致癌症的发展。
PI3K家族分为四类：I类，II类，III类和IV类。
I类可以进一步分为IA和IB类。
本文主要介绍IA类PI3K。
IA类PI3K是由调节性p85亚基和催化性p110亚基组成的异二聚体。
前者由PIK3R1（p85α，p55α和p50α）和PIK3R2（p85β）基因编码，后者由PIK3CA（p110α），PIK3CB（p110β）和PIK3CD （p110δ）编码。
PI3K的信号传导是在细胞表面受体激活时触发的。
p85与活化的受体酪氨酸激酶（RTK）或相关的衔接蛋白的结合激活催化亚基并使其更接近质膜。
在那里，p110磷酸化磷脂酰肌醇4,5-二磷酸（PIP2，质膜的次要组分）以产生磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸（PIP3），其作为激活各种效应蛋白（包括AKT）的第二信使。
AKT的活化是通过3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1（PDK1）和mTOR复合物2（TORC2）的磷酸化完成的。
反过来，AKT的激活导致TORC1的激活，AKT和TORC1均调节促进细胞的存活、生长和增殖等途径。
另外，p110α和p110δ可以被Ras（GTP酶转换蛋白）进一步激活，Ras不与p110β结合。
Rac和Cdc42蛋白有助于激活p110β以响应G蛋白偶联受体（GPCR）激活。
TORC1信号传导还充当负反馈调节机制以抑制来自RTK的信号传导。
最后，肿瘤抑制因子PTEN使PIP3去磷酸化并返回PIP2（图1）。
图1 PI3K（IA类） / AKT信号通路的激活（此图列出了多种抑制剂，不知如何选择抑制剂的可作为参考）图2 PI3K（IA 类） / AKT信号通路的药理学抑制。
PI3K通路可以在多个节点上被药理学抑制，包括pan-PI3K和同种型特异性抑制剂，只靶向TORC1或同时靶向TORC1和TORC2的mTOR抑制剂以及AKT抑制剂，这些抑制剂可以直接抑制PI3K活性。
探讨MAPKs和PI3K信号通路在胃癌中的作用及意义发表时间：2015-11-23T16:33:02.980Z 来源：《河南中医》2015年8月供稿作者：王凤吴志峰黄秀清林丽琳翁剑武刘彪陈秀[导读] 莆田学院福建莆田磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号转导通路是细胞内两条重要的促增殖和抗凋亡通路。
王凤吴志峰黄秀清林丽琳翁剑武刘彪陈秀娇徐丽（莆田学院福建莆田 351100）【摘要】目的：通过检测胃癌及癌旁组织中Akt，ERK1/2，Bcl-2及NF-κB的表达，探讨MAPKs和PI3K信号通路之间的关系及其在胃癌发展过程的作用。
方法：应用免疫组织化学技术检测62对胃癌及癌旁组织中Akt，ERK1/2，Bcl-2和NF-κB蛋白的表达情况。
结果：胃癌中Akt，ERK1/2，Bcl-2及NF-κB蛋白的阳性表达率均高于其癌旁组织，差异具有统计学意义（P均<0.05）。
胃癌组织Akt蛋白表达与ERK1/2蛋白表达呈正相关（rs=0.272，P=0.026）结论：MAPKs信号通路、PI3K信号通路激活与胃癌的发生发展密切相关。
【关键词】MAPKs；PI3K；胃癌【中图分类号】R735.2 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）8-0840-02To Discuss the Role of MAPKs and PI3K Pathways in Gastric Cancer and Their SignificanceWang Feng,Wu Zhi-Feng,Huang Xiu-Qing,Lin Li-Lin,Weng Jian-Wu, Liu Biao,Chen Xiu-Jiao, Xu Li(Putian University,Fujian,Putian,351100)【ABSTRACT】Objective：To investigate the expression of Akt，ERK1/2，Bcl-2 and NF-κB in gastric cancer and it’s adjacent tissues,then to discuss the relationship between MAPKs and PI3K pathways and their role in the development process of gastric cancer.Methods：Expression of Akt，ERK1/2，Bcl-2 and NF-κB proteins were examined in 62 gastric cancer and adjacent tissues by immunohistochemical technique.Result：The positive rate of Akt，ERK1/2，Bcl-2 and NF-κB proteins were all significantly higher in gastric cancer than it’s adjacent tissues,the difference has statistically significant(p<0.05). Expression of Akt and ERK1/2 proteins were in a positive correlation(rs=0.282, p=0.026).Conclusion：The actination of MAPKs and PI3K pathways is closely related to the development of gastric cancer.【Key words】MAPKs pathway; PI3K pathway; Gastric cancer磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（PI3K/Akt）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号转导通路是细胞内两条重要的促增殖和抗凋亡通路。
抑制自噬增加 PI3K／AKT／mTOR 信号通路抑制剂引起的胃癌细胞死亡斯庆图娜拉;刘磊【摘要】目的：为了研究3-MA 是否可能增强胃癌细胞对 PI3K／mTOR 抑制剂NVP-BEZ235的敏感性。
方法以胃癌 SNU16细胞系为研究对象，SNU16细胞用不同浓度的 NVP-BEZ235（10 nM、20 nM 和50 nM）处理24 h。
实验分为四组：Control 组，20 nM NVP-BEZ235组，5 mM 3-MA 组，20 nM NVP-BEZ235联合5mM 3-MA 组。
MTT 法用来检测不同组内细胞的生存率，Western blotting 用来检测 Cleaved Caspase-3和 Cytochrome C 的表达水平。
结果MTT 结果表明 NVP-BEZ235能抑制 SNU16细胞的增殖，3-MA 增强了NVP-BEZ235对 SNU16细胞的增殖抑制作用。
Western blotting 结果表明NVP-BEZ235增加了 Cleaved Caspase-3和 Cytochrome C 的表达，而 NVP-BEZ235联合3-MA 会进一步诱导 Cleaved Caspase-3和 Cytochrome C 蛋白的表达。
结论3-MA 通过抑制自噬增加了 SNU16细胞对 NVP-BEZ235的敏感性。
%Objective To study whether 3-MA can enhance the sensitivity of inhibitor NVP-BEZ235 to gastric canc-er cell.Methods SNU16 cells were treated by different coneentrations of NVP-BEZ235(10 nM,20 nM and 50 nM)for 24 h.Next,SNU16 cells were divided into four groups:Control group,20 nM NVP-BEZ235 group,5 mM 3-MA group, 20 nM NVP-BEZ235 combined with 5 mM 3-MA group.MTT assay was used to examine the proliferation inhibition of SNU16 cells.Western blotting was used to detect a change in protein level of Cleaved Caspase-3 and CytochromeC.Re-sults MTT assay showed that growth inhibition rates among thegroups with different levels of NVP-BEZ235 was sta-tistically significant.NVP-BEZ235 combined with 3-MA enhanced the inhibition ratio of cell compared with NVP-BEZ235 group.Western blotting showed that Cleaved Caspase-3 and Cytochrome C were increased in cells following treated with NVP-BEZ235,and then 3-MA enhanced the expression of these proteins induced by NVP-BEZ235.Conclu-sion 3-MA sensitized SNU16 cells to NVP-BEZ235 by inhibition of auto-phagy.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】4页(P1457-1460)【关键词】胃癌;自噬;NVP-BEZ235;凋亡【作者】斯庆图娜拉;刘磊【作者单位】鄂尔多斯市中心医院，内蒙古鄂尔多斯 017000;鄂尔多斯市中心医院，内蒙古鄂尔多斯 017000【正文语种】中文【中图分类】R735.2尽管最近几年胃癌的发病率有所下降，但胃癌在我国恶性肿瘤中仍高居第一位。
PI3k／Akt蛋白及mRNA在60例胃癌中的表达及意义程玉;李建玲;刘海旺;李春辉【摘要】目的：探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶 B（Akt）在胃癌组织及远端正常组织中的表达情况，分析其表达与胃癌临床病理特征之间的关系。
方法应用免疫组化 S-P 法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测60例胃癌组织和25例正常胃组织（距癌边缘10 cm 以上的胃组织）中 PI3K、Akt 蛋白及 mRNA 的表达。
结果PI3K、Akt 在胃癌组织中的表达均明显高于在远端正常胃组织中的表达，差异有统计学意义（P ＜0．01），二者在胃癌组织中的表达均与胃癌的分化程度、TNM 分期、浸润深度、淋巴结转移情况相关（P ＜0．05）。
结论PI3k ／Akt 蛋白及 mRNA 参与了胃癌的发生、发展、浸润转移，在胃癌的癌变过程中起着重要作用。
%Objective To explore the expression of phosphoinositide 3 kinase (PI3K)and Akt in gastric carcinoma tissues and the distal normal tissues,and to analyze their correlation with the clinical pathologic characteristics of gastric cancer.Methods The S-P immunohistochemistry and RT-PCR were used to detect the expression of PI3K and Akt protein and mRNA in 60 cases of gastric carcinoma tissues and 25 cases of normal gastric mucosal tissues.Results The expression of PI3K and Akt in the gastric carcinoma tissues was significantly higher than that in the distal normal gastric tissues with statistical difference (P <0.05)and their expression in gastric carcinoma tissues was significantly related with the pathologic differentiation degree,TNM stage,invasion depth and lymph node metastasis (P <0.05).Conclusion PI3k/Akt protein and mRNA participate in the occurrence,development, infiltration and metastasisprocess of gastric cancer,and play an important role in the canceration of gastric carcinoma.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2015(000)010【总页数】4页(P1352-1354,1357)【关键词】胃肿瘤;1-磷脂酰肌醇 3-激酶;蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶;免疫组织化学;逆转录聚合酶链反应【作者】程玉;李建玲;刘海旺;李春辉【作者单位】承德医学院附属医院病理科，河北承德 067000;承德医学院附属医院麻醉科，河北承德 067000;承德医学院附属医院病理科，河北承德 067000;承德医学院附属医院病理科，河北承德 067000【正文语种】中文【中图分类】R735.2近年来，随着分子生物学的发展，信号转导通路已成为肿瘤发病机制和靶向治疗研究的热点。
PI3KAktmTOR通路抑制剂影响乳腺癌干细胞对内分泌治疗和靶向治疗耐药性的研究PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂影响乳腺癌干细胞对内分泌治疗和靶向治疗耐药性的研究目的：研究抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路中PI3K对乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)的作用及其对内分泌药物敏感性的影响；研究抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路中mTOR表达对曲妥珠单抗耐药的BCSCs的作用及对靶向治疗药物敏感性的影响。
方法：1.采用无血清培养液悬浮培养球囊细胞的方法富集乳腺癌细胞系MCF-7中的BCSCs,使用流式仪分选出ESA+CD44+CD24-/low亚群,并对其进行克隆培养。
构建表达芳香化酶CYP19的真核表达载体(pH β-Aro-CYP19),分别转染MCF-7中的BCSCs和非干细胞,从而获得高表达芳香化酶的BCSCs (BCSCs-CYP19)和非干细胞(MCF-7-CYP19)亚克隆。
通过MTT检测细胞增殖、划痕实验评价细胞迁移能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡、软琼脂克隆实验评价细胞克隆形成能力,比较单用PI3K靶向抑制剂BKM120及其联合内分泌治疗药物来曲唑对BCSCs-CYP19和MCF-7-CYP19的抑制作用的影响。
利用Western blot检测单药BKM120或联合来曲唑用药对PI3K/Akt/mTOR 通路中AKT1、PI3K、S6的蛋白表达水平的影响。
2.通过使用不同浓度的曲妥珠单抗持续作用BT4746个月得到曲妥珠单抗耐药细胞BT474R,并通过MTT试验证实BT474R构建成功。
采用无血清培养液悬浮培养球囊细胞的方法富集BT474和BT474R中的BCSCs,使用流式仪分选出ESA+CD44+CD24-low的BCSCs亚群,并对其进行克隆培养。
利用VVestern Blot检测PI3K/Akt/mTOR通路中PI3K、AKT1、S6、mTOR蛋白表达水平的改变,评价该通路在曲妥珠单抗耐药过程中的作用影响。
miR94Cp靶向PI3K/AKT信号通路调控皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的机制郭金兰甘才斌张洁董明亮马新苹（新乡市中心医院皮肤科，河南新乡403000）〔摘要〕目的探讨mO97-5p靶向磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路调控皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的机制。
方法实时荧光定量（qRT）-聚合酶链式反应（PCR）检测HaCaT和A431细胞中miR-3-5p的表达。
构建抑制miR-3-5p表达A431细胞株，噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡‘Western印迹检测PIK3R1、p-AKT、p-PI3K、细胞周期素（CyTiu、D-、Bcp和Bcl-0蛋白的表达。
采用双荧光素酶报告基因法和Western印迹验证miR97-5p 和PIK3R1的靶向关系。
结果qRTACR检测结果显示A431细胞中miR97Ap的表达显著高于HaCaT（P<4.45）。
MTT法、流式细胞术和Western印迹结果证实在抑制miRA7Ap表达的A431细胞中，p-AKT、p-PI3K、Cyc/nD-和Bcl-0的表达明显下调,PIK3R1和Box的表达显著上调，细胞的增殖活力减弱，凋亡率增加（均P<4.46）o PI3KAKT信号通路激活剂胰岛素样生长因子（IGF）9可以逆转抑制mO97Ap表达对A431细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。
结论mOA7Ap通过靶向下调PIK3R1激活PI3K/AKT信号通路促进皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖，抑制细胞凋亡。
〔关键词〕miAA7-ap；PI3KTKT信号通路;皮肤鳞状细胞癌;细胞增殖;凋亡〔中图分类号〕R739.5〔文献标识码〕A〔文章编号〕0）052202（2021）12259925;doi：10.3969/j.issn.0）052202.2021.12.041皮肤鳞状细胞癌是一种起源于皮肤或其附属物的恶性肿瘤，已严重威胁人类的健康⑴。
奥沙利铂通过抑制P13K／Akt增强胃癌对TRAIL的敏感性徐玲;曲秀娟;刘云鹏;刘静;张晔;侯科佐【摘要】目的研究P13K／Akt通路在TRAIL诱导凋亡中的作用，以及奥沙利铂对TRAIL诱导胃癌BGC823细胞凋亡的影响。
方法MTT法检测细胞存活率。
流式细胞术检测细胞凋亡。
Westernblot法检测Akt，p-Akt蛋白表达。
结果100ng／mL的TRAIL作用BGC823细胞16h，只引起轻度的细胞凋亡。
TRAIL可活化P13K／Akt通路，P13K抑制剂LY294002（25μmol／L）预处理细胞1h 后再予TRAIL作用16h，细胞凋亡比率明显升高（12．7％±3．1％vs3．5％±1．1％，P〈0．05）。
38μg/mL奥沙利铂可抑制P13K／Akt通路的活化，进而增强细胞对TRAIL的敏感性，细胞凋亡率提高到35．5％±4．5％，P〈0．05。
结论奥沙利铂通过抑制TRAIL诱导的P13K／Akt活化，增强胃癌BGC823细胞对TRAIL的敏感性。
【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2010(000)009【总页数】3页(P703-705)【关键词】TRAIL;奥沙利铂;胃癌;P13K／Akt;凋亡【作者】徐玲;曲秀娟;刘云鹏;刘静;张晔;侯科佐【作者单位】中国医科大学附属第一医院肿瘤内科,沈阳110001【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌是世界范围内最常发生的恶性肿瘤之一，多数患者在诊断时已经是晚期，5年生存率只有10%～15% ［1］。
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）是肿瘤坏死因子家族的成员之一。
在体外研究中，TRAIL诱导许多肿瘤细胞的凋亡，对正常细胞毒性很小。
但胃癌细胞对TRAIL不敏感［2］。
TRAIL 与死亡受体 4（DR4）和死亡受体 5（DR5）结合后使受体三聚化，接着募集其他效应分子形成死亡诱导信号复合体（DISC），随后caspase活化，诱导凋亡发生。
PI3K-Akt信号通路阻断在乳腺癌治疗中的作用席广民;牛瑞芳【期刊名称】《中华肿瘤防治杂志》【年(卷),期】2007(14)3【摘要】分子靶向药物为肿瘤的治疗提供了新的方向。
抑制信号通路中一些小分子的活性,从而阻断某些信号的转导,成为肿瘤治疗中的新的策略。
在肿瘤的发生、发展过程中,经常伴有PI3K信号通路的异常改变。
过度激活PI3K-Akt信号通路之后,可以引起一系列的反应,包括细胞的生长、增殖和转移,上皮细胞向间叶细胞的转变以及血管的生成。
因此,这条信号通路成为人们比较感兴趣的分子治疗的靶标。
另外,在一些实验中,过度表达PI3K或者Akt,特别是当它们持续活化时,就足以引起细胞的恶性转变,并且能够使细胞产生耐药。
当PI3K-Akt信号通路被阻断之后,具有高水平Akt的细胞生长就会受到抑制,并且开始凋亡。
由于某些肿瘤细胞的存活和生长对PI3K-Akt信号通路的依赖,使分子靶向药物能够比较特异的杀死肿瘤细胞。
在过去的几年中,人们已经找到了一些此信号通路的抑制剂。
我们介绍了PI3K-Akt 信号通路以及阻断此信号通路在乳腺癌治疗中的应用,重点介绍pAkt和mTOR的分子抑制剂。
【总页数】4页(P230-233)【关键词】乳腺肿瘤/治疗;磷脂酰肌醇3激酶;Akt;分子抑制剂;综述文献【作者】席广民;牛瑞芳【作者单位】天津医科大学肿瘤医院中心实验室【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.PI3K/Akt信号通路在乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用及对策 [J], 林阳;章斌2.雌激素受体信号通路在乳腺癌发生和治疗中的作用 [J], 任爱雄3.雌激素受体信号通路在乳腺癌发生和治疗中的作用 [J], 江涛;刘志勇;刘凤恩4.VEGF介导PI3K-AKT信号通路在BMSCs移植治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用 [J], 陈珊珊;易敏春;周国忠;普跃昌;韩米华;胡毅;金华5.核因子κB信号通路在宫颈癌、乳腺癌发生发展及治疗中作用的机制研究进展[J], 徐晓琳; 田春艳; 耿云峰; 王伟龙; 张杰彪; 鞠吉雨; 赵春玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
