视网膜Egr-1与细胞外基质重塑通路对闪烁光诱导小鼠近视的调控

Egr-1介导的肿瘤基因—放射医治进展肿瘤医治的模式是综合医治，多种医治手腕的有机结合是现时期的探讨热点。

Egr-1基因域,含放射灵敏性的CArG盒/CC （A+T-rich）GG区，故具有放射诱导性,并调剂多种下游基因的转录,参与调剂正常细胞的增殖、分化、肿瘤凋亡等。

带有启动子的Egr-1基因与医治基因（如IFN-γ、TNF等）结合，利用前者的放射诱导性，在时刻、空间上调控基因的表达，使其产物局限于肿瘤或能够作用于全身的免疫系统，发挥放疗和生物医治的多重杀肿瘤效应。

1 Egr-1Egr-1是Shimizu等［1］学者于1992年在研究人HL-60细胞分化时第一次发觉人Egr-1基因，它属于即刻初期基因（immediate early gene,IEG）成员，后者还包括Egr-二、Egr-3、Egr-4,C-jun,C-fos 和WT1。

它们结构高度相似,在多种刺激因子如NGF（神经生长因子）、丝割裂原,组织纤维蛋白溶酶原激活质TPA和血清、离子射线,IGF-Ⅰ（胰岛素样生长因子Ⅰ）等的诱导下能够快速短暂的表达,对细胞初期生长起调剂作用。

C-fos、C-jun在某些恶性肿瘤中高表达属癌基因,WT1是Wilms瘤的抑癌基因,Egr-1是非小细胞肺癌的抑癌基因,还可能是结肠直肠癌抑癌基因［2］Egr-1基因其中SRE序列为血清反映元件的核心区域,含放射灵敏性的CArG盒/CC（A+T-rich）GG区，从而有放射诱导性。

目前肿瘤放射-基因医治研究的一个热点课题确实是利用Egr-1启动子的放射诱导性进行肿瘤放射-基因医治研究。

2 Egr-1与肿瘤基因-放射医治吕星［3］等学者用PCR法扩增了小鼠Egr-1基因的445 bp的调控序列,并将克隆后的调控序列接入pGL3荧光素酶报告质粒,再把质粒转染小鼠恶性黑色素瘤细胞B16,在同意～10 Gy不同剂量的60Coγ射线照射后,发觉转染细胞的裂解液中的荧光素酶活性较未照射者明显为高,并以 Gy剂量最为显著,约提高138%。

黑视素基因转染给光双极细胞部分恢复MNU诱导的视网膜感光细胞变性小鼠的视觉熊国吟;罗小鹏;杨昇炎;徐颖;董军【摘要】目的:探索定向转染内源性光感受蛋白黑视素(melanopsin/opsin4,Opn4)基因进入给光型双极细胞后,视网膜变性小鼠模型中视网膜神经元的光反应以及整体视觉行为的改变.方法:选用由甲基亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导的成年CD1小鼠作为视网膜变性模型.于P0～P1 CD1乳鼠视网膜底注射Grm6-Opn4-GFP质粒,Grm6-GFP作为阴性对照.通过电转进行基因转染.术后5周对基因转染小鼠腹腔注射MNU诱导视网膜感光细胞变性,对照组注射生理盐水,共设计5个实验组:正常对照组(normal)、生理盐水Grm6-Opn4-GFP对照组(NS+ melanopsin)、MNU诱导模型Grm6-Opn4-GFP治疗组(MNU+ melanopsin)、MNU诱导模型Grm6-GFP对照组(MNU+ GFP)和MNU诱导组(MNU).诱导后连续7d进行明暗箱测试,统计动物在暗箱中的活动时间比.随后进行视网膜电图(electroretinogram,ERG)测试,计算体现给光双极细胞光反应的b波峰值、潜伏期和反映视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)光反应的明视负波反应(photopic negative response,PhNR).利用免疫荧光法检测动物视网膜黑视素基因转导效果.结果:黑视素可以被定向转染进入视网膜给光双极细胞.明暗箱实验显示MNU诱导7d后Grm6-Opn4-GFP转染的CD1小鼠滞留在黑箱的时间显著长于未转染组(P＜0.05),ERG测试显示Grm6-Opn4-GFP转染的CD1小鼠的b波也有明显恢复(P＜0.05).结论:定向转染内源性光感受蛋白黑视素基因进入给光型双极细胞可部分恢复视网膜变性模型动物视觉.%AIM:To investigate the changes of light response and visual behavior after transfecting intrinsic photosensitive protein melanopsin (opsin 4,Opn4)into ON-bipolar cells in.a mouse retinal degeneration model.METHODS:N-methyl-N-nitrosourea (MNU)-induced CD1 mice served as the retinal degeneration model.CD1 mice on postnatal day 0 (P0) and postnatal day 1 (P1) were subretinally injected with Grm6-Opn4-GFP plasmid,and those injected with Grm6-GFP plasmid served as negative controlgroup.Electroporation was applied to transfect the plasmids into cells.Five weeks later,the transfected mice received intraperitoneal injection of MNU to induce the apoptosis of photosensory cells in 7 days.The mice were divided into 5 groups:normal control group,normal saline (NS) intraperitoneal injection with Grm6-Opn4-GFP transfection (NS + melanopsin) group,MNU intraperitoneal injection with Grm6-Opn4-GFP transfection (MNU + meanopsin) group,MNU intraperitoneal injection with Grm6-GFP transfection (MNU + GFP) group and MNU intraperitoneal injection (MNU) group.Visual behavior was tested by Dark/Light Box test for 7 days after MNU injection,in which the time spending in each area of the box was measured every day for each animal.Electroretinagram was applied to measure the peak amplitude and the latency time of b-wave,and photopic negative response (PhNR),which stand for the functions of ON-bipolar cells and retinal ganglioncells,respectively.Immunohistochemistry was performed to check the expression of melanopsin in the ON-bipolar cells in the transfected retina.RFSULTS:Melanopsin was specifically transfected into ON-bipolar cells and was expressed in the transfected cells.The dark/light box test showed that the mice in MNU + meanopsin group stayed significantlylonger in the dark zone than those in negative control group (P ＜0.05).Their b-waves tended to recover as well (P ＜ 0.05 vs negative control group).CONCLUSION:Specific transfection of melanopsin into ON-bipolar cells can partially restore the visual function of mice.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2013(029)007【总页数】7页(P1153-1159)【关键词】视网膜变性;黑视素;给光双极细胞;甲基亚硝基脲【作者】熊国吟;罗小鹏;杨昇炎;徐颖;董军【作者单位】暨南大学医学院病理生理学系,广东广州510632;暨南大学粤港澳中枢神经再生研究院,广东广州510632;暨南大学医学院病理生理学系,广东广州510632;暨南大学粤港澳中枢神经再生研究院,广东广州510632;暨南大学粤港澳中枢神经再生研究院,广东广州510632;暨南大学粤港澳中枢神经再生研究院,广东广州510632;暨南大学医学院病理生理学系,广东广州510632;暨南大学粤港澳中枢神经再生研究院,广东广州510632【正文语种】中文【中图分类】R329.21视网膜色素变性(retinitis pigmentosa，RP)是一种眼科常见的遗传性疾病。

Rho激酶抑制剂在青光眼治疗中的应用进展陈文诗;宋娜;张雨晴;杨雪娇;朱玮;杨先【摘要】青光眼是以特征性视神经萎缩和视野缺损为共同特征的不可逆性致盲性眼病,高眼压是其最主要的发病机制,而导致高眼压的主要原因是房水传统流出途径中小梁网的病理学改变导致的房水流出阻力增加.Rho激酶抑制剂(ROCKi)是直接作用于小梁网(TM)的降眼压药物,主要通过影响细胞骨架改变TM细胞形态、细胞运动、胞质分裂和平滑肌收缩等,从而增加房水流出、降低眼压,在美国和日本已被批准用于临床;具有改善视网膜血管灌注、促进视神经再生等作用,可能存在视神经保护作用;此外,具有减少滤过泡瘢痕化等作用.因此,ROCKi作为新型抗青光眼药物备受关注,本文将针对Rho/Rho激酶信号通路、ROCKi的作用机制及其临床应用展开综述.【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2019(019)008【总页数】4页(P1313-1316)【关键词】青光眼;Rho激酶抑制剂;小梁网;治疗【作者】陈文诗;宋娜;张雨晴;杨雪娇;朱玮;杨先【作者单位】266000 中国山东省青岛市,青岛大学附属医院眼科;266000 中国山东省青岛市,青岛大学附属医院眼科;266000 中国山东省青岛市,青岛大学附属医院眼科;266000 中国山东省青岛市,青岛大学附属医院眼科;266000 中国山东省青岛市,青岛大学附属医院眼科;266000 中国山东省青岛市,青岛大学附属医院眼科【正文语种】中文0引言青光眼作为第一大不可逆性致盲性眼病，是以特征性视神经萎缩和视野缺损为共同特征的疾病[1] 。

2010年全球青光眼患者约6000万人，预计2020年将达到8000万人，2040年全球将有1亿多青光眼患者，而中国2010年青光眼患者约有1600多万人，预计2020年将超过2000万人[2-3]。

在各种类型的青光眼中最常见的是开角型青光眼[3]。

高眼压是青光眼最主要的致病机制，导致眼压升高的主要原因是房水传统流出途径中小梁网(trabecular meshwork,TM)的病理学改变所致房水外流阻力增加[4]。

PEDF对氧诱导视网膜病变小鼠视网膜MCP-1表达的影响王亚娜;张磊【摘要】目的:观察色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derivedfactor,PEDF)在氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)中对小鼠视网膜新生血管(retinal neovascularization,RNV)和单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达的影响,探讨PEDF对缺血缺氧性视网膜病变的保护作用和机制.方法:取7日龄C57BL/6J新生小鼠160只,将120只7日龄小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)％的氧环境内饲养5d,然后返回正常氧环境中饲养5d,建立OIR模型;40只小鼠始终置于正常氧环境饲养.分别于12日龄和14日龄给予PEDF药物治疗组小鼠右眼玻璃体腔注射PEDF(2μg/μL)各1μL,给予PBS治疗对照组和正常对照组小鼠右眼玻璃体腔注射等量的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS).所有小鼠于17日龄麻醉处死后取视网膜,采用视网膜铺片和Lectin染色法观察各组小鼠病理性新生血管的生成情况;Western-blot检测PEDF和MCP-1蛋白在各组小鼠视网膜的表达;实时荧光定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测各组小鼠视网膜PEDF和MCP-1 mRNA的表达.结果:视网膜铺片和Lectin染色结果显示OIR模型组RNV面积较正常组显著增大,差异有统计意义(P<0.01),PEDF药物治疗组RNV面积较PBS治疗对照组明显减小,差异有统计意义(P<0.01).Western-blot和RT-PCR结果显示,OIR模型组MCP-1蛋白和mRNA的表达水平均明显高于正常组,差异有统计意义(均P<0.05);OIR模型组PEDF蛋白和mRNA的表达水平均明显低于正常组,差异有统计意义(均P<0.01);PEDF药物治疗组MCP-1蛋白和mRNA的表达量较PBS治疗对照组均显著减少,差异有统计意义(均P<0.05);PEDF药物治疗组MCP-1蛋白和mRNA的表达量较正常对照组升高,但差异均无统计学意义(均P>0.05).结论:PEDF能够抑制OIR小鼠视网膜新生血管形成,同时下调MCP-1在OIR小鼠视网膜的表达,后者可能是其抑制新生血管形成从而发挥视网膜保护作用的机制之一.【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2019(019)001【总页数】5页(P21-25)【关键词】氧诱导视网膜病变;色素上皮衍生因子;单核细胞趋化因子-1;视网膜新生血管【作者】王亚娜;张磊【作者单位】200137 中国上海市,上海中医药大学附属第七人民医院眼科;200137 中国上海市,上海中医药大学附属第七人民医院眼科【正文语种】中文0引言视网膜新生血管(retinal neovascularization，RNV)的形成是缺血缺氧性视网膜病变中最重要的病理过程，病变进一步发展可导致视功能不可逆性损害甚至丧失[1]。

EGR-1诱导IGF-1R表达促进前列腺癌细胞增生的
开题报告
开题报告：
背景和研究意义：
前列腺癌是一种常见的恶性肿瘤，对男性健康造成了极大的威胁。

虽然现在治疗手段得到了很大的进步，但仍然有很多前列腺癌患者需要化疗或手术治疗，这对患者身体和心理都带来了很大的负担。

因此需要深入研究前列腺癌相关的分子机制，为开发有效的治疗方法提供新的思路和途径。

EGR-1是一个早期反应基因，它参与了很多生物学过程的调控。

之前的研究显示，EGR-1参与了前列腺癌的发生和发展。

IGF-1R是一种受体酪氨酸激酶，在前列腺癌细胞生长和转移过程中起到了重要的作用。

因此，本研究旨在探讨EGR-1对前列腺癌细胞增生的调控机制，以及其与IGF-1R之间的相互作用，为开发新的治疗方法提供理论基础。

研究内容和方法：
1. 通过文献调查，了解EGR-1和IGF-1R在前列腺癌中的作用。

2. 采用实验室培养的前列腺癌细胞系PC-3，检测EGR-1与IGF-1R 的表达水平，并利用RNA干扰技术靶向下调EGR-1基因的表达。

3. 进行MTT实验和流式细胞术，检测EGR-1的干扰对前列腺癌细胞增生和细胞周期的影响。

4.使用Western blot检测IGF-1R的表达和信号通路的活性变化，并研究EGR-1与IGF-1R的相互作用。

预期结果和意义：
本研究将探究EGR-1在前列腺癌中的作用机制，揭示其与IGF-1R 之间的相互作用，并为开发新的靶向治疗方法提供新的思路和途径。

同时，对于认识前列腺癌的分子机制，以及启示其他恶性肿瘤的治疗也具有重要的意义。

视网膜疾病与视神经生长因子的研究取向神经生长因子是最早发现的神经细胞生长因子。

70 年代确定了它的氨基酸组成及顺序, 成为目前唯一被阐明结构的神经细胞生长因子, 它兼有神经元营养和促突起生长的双重效应, 对神经元的生长、发育、分化及再生和功能性表达均具有重要的调控作用。

标签：神经生长因子; 视网膜; 视神经Diseases of the retina and optic nerve growth factor research orientationZhang Weiguang【Abstract】Nerve growth factor is the earliest discovered neural cell growth factor. 70 time determined its amino acid composition and sequence, becoming only the current is the elucidation of the structure of nerve cell growth factor, it is both neuronal nutrition and promote neurite outgrowth of double effect, on neuronal growth, development, differentiation and regeneration and functional expression have important regulatory role.【Key words】Nerve growth factor; retina; optic nerveN GF 和N GF 原蛋白(p roN GF ) 的免疫反应性出现在大鼠视网膜神经节细胞(R GC)、M üller 细胞、视网膜色素上皮细胞(R PE) 以及与内界膜相邻的区域, 且糖尿病大鼠和非糖尿病大鼠N GF 和p roN GF 的免疫反应性的强度与分布相同, 表明N GF 在视网膜内可由神经元性和非神经元性细胞内源性合成。

视黄酸在实验性近视发生中作用的研究进展于曼容;戴锦晖【期刊名称】《中华实验眼科杂志》【年(卷),期】2017(035)006【摘要】近视是一种常见的导致视力障碍的眼科疾病，其患病率逐年升高，而目前临床上尚无有效的根治手段，原因在于近视的发病机制尚不明确。

目前与近视发生相关的因子很多，如多巴胺、视黄酸、胰高血糖素及ZENK（Zif269、EGR-1、NGFI—A或Krox-24）等。

视黄酸是维生素A的衍生物，是视网膜光感受器细胞中视蛋白结合物视黄醛的最终代谢产物。

许多研究表明视网膜与脉络膜中的视黄酸在近视发生中起到重要作用，可以调节近视相关的多种因子的作用，如转化生长因子-β、糖胺聚糖、基质金属蛋白酶（MMP）-2、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-2等。

本文基于眼内视黄酸的产生、代谢及作用，就视黄酸在形觉剥夺、光学离焦及色光诱导性近视等3种实验性近视发生中的作用做一综述，以期对今后的近视机制研究带来一些启发。

【总页数】4页(P552-555)【作者】于曼容;戴锦晖【作者单位】复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科卫生部近视眼重点实验室,上海200031;复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科卫生部近视眼重点实验室,上海200031【正文语种】中文【中图分类】R778.11【相关文献】1.信号转导通路在实验性近视发生机制中作用的研究进展 [J], 朱子诚;张金嵩2.视黄酸在实验性近视发生中作用的研究进展 [J], 于曼容3.全反视黄酸在豚鼠近视形成中的作用 [J], 李瑾;瞿小妹;褚仁远4.视黄酸与实验性近视关系的研究进展 [J], 王悦;李俊5.13-顺-视黄酸对实验性大鼠膀胱肿瘤抑制作用的实验研究 [J], 石炳毅;莫春柏;廖利民;梁春泉;李宁;张玉芝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

依达拉奉对小鼠视网膜急性光损伤的保护作用朱昭亮;张小玲;莫明树;胡晓【摘要】Objective To explore the protective effect of edaravone on light-induced acute retinal damage in mice.Methods Totally 30 adult BALB/C male mice (60 eyes in total) were randomly divided into normal group (n = 24), photodamage group ( n = 12), pre-photodamage edaravone-treated group ( n = 6), pre-photodamage saline-treated group ( n = 6), post-photodamage edaravone-treated group ( n = 6) and post-photodamage salinetreated group (n = 6).Mice were exposed to (12 000 ± 450)lux white light for 6 hours to establish acute retinal photodamage model.2 μL edaravone (11.5 × 10-6 mol/L) was used to interfere with acute retinal photodamage by intravitreal injection 2 hours before photodamage or immediately after photodamage.After 24 h dark repair,electroretinogram (ERG) was used to test the retinal function and TUNEL staining was used to detect the number of apoptotic retinal cells.All results were combined to evaluate edaravone's protective effect on retinal photodamage.Results ERG result showed that the amplitudes decreased significantly less in pre-photodamage edaravone-treated group than in photodamage group, pre-photodamage saline-treated group and post-photodamage edaravone-treated group (P ＜ 0.05).The number of TUNEL staining cells in the outer nuclear layer also decreased in prephotodamage edaravone-treated group compared with that in the other three groups (P＜0.05).Conclusion 2 μL edaravone (11.5 × 10-6 mol/L) can inhibit light-induced retinal cellsapoptosis in the outer nuclear layer by intravitreal injection before photodamage.The mechanism may be related to the elimination of free radicals.%目的探讨依达拉奉(edaravone)对小鼠视网膜急性光损伤的保护作用.方法 30只成年BALB/c雄性小鼠(左右眼共60只)随机分为正常组(n=24)、光损伤模型组(n=12)、损伤前给药组(n=6)、损伤前生理盐水组(n=6)、损伤后给药组(n=6)及损伤后生理盐水组(n=6);采用(12000±450)lux白光照射BALB/c小鼠6h 建立急性视网膜光损伤模型,给药组采用玻璃体腔注射2μL (11.5×10-6mol/L)依达拉奉,使用视网膜电图检测光损伤后视网膜功能学变化,TUNEL染色观察暗修复24h 后视网膜细胞凋亡的数目,综合评价依达拉奉对视网膜的保护作用.结果视网膜电图中损伤前给药组各波波幅相对于光损伤模型组、损伤前生理盐水组和损伤后给药组下降幅度明显减低(P＜0.05);TUNEL染色中损伤前给药组外核层细胞凋亡的数目相对于光损伤模型组、损伤前生理盐水组和损伤后给药组显著减少(P＜0.05).结论2μL (11.5×10-6mol/L)依达拉奉玻璃体腔注射可抑制光诱导的视网膜外核层细胞凋亡,其机制可能与自由基清除有关.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2011(032)003【总页数】4页(P359-362)【关键词】依达拉奉;光损伤;视网膜保护;BALB/c小鼠;TUNEL染色;凋亡【作者】朱昭亮;张小玲;莫明树;胡晓【作者单位】西安交通大学医学院第一附属医院眼科,陕西西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院眼科,陕西西安,710061;西安交通大学医学院遗传与分子生物学系,陕西西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院眼科,陕西西安,710061【正文语种】中文【中图分类】R774.1视网膜光损伤(retinal photodamage,RP)是导致与视力减退相关的眼底疾病的主要原因之一,例如日光性眼炎、医源性视力损伤及与年龄相关性黄斑病变(age-related macular degeneration,AMD)等[1-3]。

失明治疗研究获新突破即使视网膜遭到全面摧毁以致报废，其内部的小胶质细胞（一种免疫细胞）仍然可以自我繁殖，国立眼研究所的科学家们发现，这些细胞还可以恢复正常组织结构和功能。

这项发现为视网膜色素变性（retinitis pigmentosa，RP）和老年性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）这两种疾病是导致50岁以上人群失明的最常见原因。

文章在线发表在《Science Advances》。

视网膜是眼睛后部一层薄薄的细胞，包括感光细胞和向大脑传递视觉信息的其他神经元，小胶质细胞跟这些细胞混在一起，起维持视网膜健康作用。

其它中枢神经系统内也有小胶质细胞，在健康的视网膜中，神经元和小胶质细胞之间的交流对维持神经元向大脑发送信号的能力非常重要。

当视网膜受损，小胶质细胞还有另外一个作用：迅速迁移到损伤部位，去除不健康或垂死的细胞。

然而，它们也有能力去除健康细胞，导致视力下降。

研究表明，在AMD和RP这类退行性视网膜疾病中，抑制或消除小胶质细胞有助于保留光感受器，从而减缓视力衰退，可惜的是，小胶质细胞对支持视网膜神经元功能也很重要。

“在视网膜疾病中，炎症是促进神经元死亡的主要驱动力，”视网膜疾病神经元-胶质细胞相互作用部主任Wai T. Wong博士说。

“我们的研究是理解视网膜免疫系统控制方法的基础。

”这篇文章提供证据表明，在AMD、RP和视网膜损伤等眼部疾病中，免疫系统调控也是开发新疗法的可行途径。

Wong和同事为了测试没有小胶质细胞对视网膜正常功能有何影响，他们用药物PLX5622（Plexxikon）耗尽了小鼠视网膜内的小胶质细胞，该药物作用于小胶质细胞CSF-1受体，依赖于受体接收持续信号才能存活的小胶质细胞在信号中断后几天几乎完全消失，只有少数细胞聚集在视神经细胞周围（将信号从视网膜传递给大脑的神经纤维束）。

短时间内，小胶质细胞的丧失并不会影响神经元功能，因此，暂时清除小胶质细胞可缓解炎症、作为治疗视网膜退行性或炎性疾病的一种手段。