寄生虫病学粪便检查(一)

实验检验技术一、病原检查1.粪便检查（1）直接涂片法：适用于蠕虫卵、原虫检查（活滋养体检查和包囊的碘液检查）。

（2）浓集法1）加藤厚涂片法。

2）沉淀法：自然沉淀法主要用于蠕虫的检查、离心沉淀法、倒置沉淀法适于比重较大的蠕虫卵检查、汞碘醛离心沉淀法适于原虫滋养体、包囊、蠕虫卵和幼虫的检查；醛醚沉淀法适于蠕虫卵和原虫包囊的检查。

3）漂浮法：饱和盐水漂浮法适于各种线虫卵、带绦虫卵等检查；硫酸锌离心漂浮法适于原虫包囊、多数蠕虫卵等检查；蔗糖溶液漂浮法适于原虫包囊、卵囊或孢子囊检查。

4）尼龙袋集卵法：主要适于血吸虫卵检查。

（3）虫卵计数法1）改良加藤厚涂片法：适于各种蠕虫卵计数。

2）小管浮聚计数法：适于大多线虫卵计数（4）毛蚴孵化法：适于血吸虫病原体检查。

（5）钩蚴培养法：检出率较直接涂片法高7倍。

（6）带绦虫孕节检查法：肉眼可观察。

（7）常用原虫检查染色法：劳氏酸性品红-固绿染色法适于阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫检查、福氏快速苏木精染色法适于阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊检查、金胺-酚染色法和改良抗酸染色法适于隐孢子虫卵囊检查。

2.肛门外检查（1）肛门周围蛲虫虫卵检查：有透明胶纸法、棉签拭子法，适于蛲虫、带绦虫检查。

（2）肛门周围蛲虫成虫检查：在肛门附近发现白色小虫，可进一步鉴定。

3.血液及骨髓检查（1）检查微丝蚴：①新鲜血片检查法；②厚血膜法；③活微丝蚴浓集法；④离心浓集法。

（2）检查疟原虫：①新鲜血片检查法：采血、制片（薄血膜，厚血膜）、固定、染色；②定量血沉棕黄色层（QBC）检查法；③疟原虫计数法。

4.其他排泄物与分泌物检查（1）痰液检查：适于肺吸虫卵、溶组织内阿米巴滋养体、蛔蚴等检查，方法有：直接涂片法、消化沉淀法。

（2）尿液和鞘膜积液检查：适于检查班氏微丝蚴，可用离心法。

（3）阴道分泌物检查：适于检查阴道毛滴虫等，可用直接涂片法、悬滴法、涂片染色法。

（4）前列腺液检查：适于检查男性泌尿生殖道的阴道毛滴虫。

寄生虫病学粪便检查寄生虫病学粪便检查一、概述粪便检查是蠕虫病生前诊断的重要方法之一。

因为绝大多数的寄生性蠕虫都是寄生在消化道内的所以它们产生的卵、幼虫或节片也都是随着宿主的粪便排出体外的。

二、实验目的１、学会用涂片法、沉淀法和漂浮法来检查粪便中的蠕虫卵和球虫卵囊等。

２、在显微镜下辨别虫卵和卵囊并且能与粪便中的非寄生性物质相区别。

三、实验方法及器材方法：1、在显微镜下辨别虫卵和非寄生性物质 2、直接涂片法 3、饱和盐水漂浮法 4、水洗沉淀法 5、离心沉淀法 6、尼龙筛淘洗法器材：双目显微镜带虫卵的羊粪带虫卵的牛粪玻片盖玻片四、操作过程 1、在显微镜下辨别虫卵和非寄生性物质用工具挑取一粒绿豆或者黄豆大小的粪便置于玻片上涂匀盖上盖玻片直接低倍镜辨别虫卵和非寄生性物质 2、直接涂片法：滴水（在载玻片上滴上１－２滴甘油水或清水）--取样（用工具挑取一粒绿豆或者黄豆大小的粪便）--与水混合--搅拌均匀--将粗的粪渣拨去--摊匀（厚薄程度以能透视下面的字体为宜）--镜检（三片以上）优点：该方法操作简便、快速且不需要很多仪器设备对各种虫卵都有检出的可能。

缺点：捡出率很低。

甘油水：甘油：水＝１:１ 3、饱和盐水漂浮法(１）、原理：应用比重较虫卵大的溶液作为漂浮液使虫卵或卵囊等漂浮于液体表面以便于我们收集。

（２）、优缺点：优点：操作简便特别是对大多数的线虫卵及球虫卵囊等比重较轻的虫卵本办法具有特别的效果检出率很高。

因此在兽医预防和诊断的工作中应用十分广泛。

缺点：对比重较大的虫卵（如吸虫卵、棘头虫卵）检出的效果很差。

Ａ、取粪样（５－１０g)置于容器内--加少量的饱和盐水--搅拌成糊状--再加盐水（约１０－２０倍）搅拌均匀--过滤--静置（３０－４０分钟）用铁丝圈沾取粪液上浮膜--镜检。

4、水洗沉淀法 1）原理：寄生虫虫卵的比重比水重可自然沉于水底。

因此可利用自然沉淀的方法将虫卵集中于水底便于检查。

沉淀法多用于比重较大的虫卵如吸虫卵和棘头虫卵的检查。

实验一蠕虫学粪便检查法（一）一、内容1.直接涂片法；2.饱和盐水漂浮法；3.沉淀法；4.绵纶筛兜集卵法；5.各种蠕虫卵的特征。

二、参考资料蠕虫学粪便检查是蠕虫病生前诊断的重要方法。

因为大多数的寄生性蠕虫是寄生在家畜、家禽的消化道及其相连的器官（如肝脏、胰脏），有的寄生在呼吸器官和生殖器官（家禽），如后圆线虫、前殖吸虫。

寄生在这些部位的寄生虫，它们的虫卵、幼虫或节片都随着宿主的粪便排除体外，因此，通过粪便检查可以获得生前诊断。

除蠕虫以外，还有一些原生动物的寄生虫，如结肠小袋纤毛虫及球虫，它们的包囊或卵囊亦随着宿主的粪便排除体外，依靠粪便检查也可以建立生前诊断。

根据蠕虫学粪便检查的目的可分为：蠕虫虫体检查法：是从粪便中检查虫体或节片，如莫尼茨绦虫，一般以肉眼直接检查；蠕虫虫卵检查法：是从粪便中检查虫卵，如大多数的吸虫、绦虫和线虫；蠕虫幼虫检查法：是从粪便中检查幼虫，如牛、羊的网尾线虫等，随粪便排出的不是虫卵而是幼虫。

下面主要分述虫卵检查法。

1.蠕虫虫卵检查法（之一）：（1）直接涂片法：取一片洁净的载玻片，在玻片中央滴加1-2滴50％甘油生理盐水，然后用镊子或牙签挑取少量粪便，与甘油生理盐水混匀，并将粗粪渣推向一边，涂布均匀，作成涂片，涂片的厚薄以放到书上隐约可见下面的字迹为宜，加上盖玻片，置显微镜下检查，检查时先在低倍镜下顺序查找，如发现虫卵，再换高倍镜仔细观察。

如无甘油生理盐水时可以用常水代替，加甘油可使标本清晰，易于观察，并可防止涂膜很快变干燥。

但是检查原虫的滋养体，必须以生理盐水进行稀释，不应加甘油，否则会影响其运动而妨碍观察。

本法操作简单，能检查各种蠕虫卵，但检出率不高，特别是轻度感染时，往往得不到可靠结果，因此，本法只能为辅助的诊断方法，并且每次检查要重复观察8-10片，才能收到确实的效果。

（2）饱和盐水漂浮法：本法基本原理是采用比重比虫卵大的溶液，使虫卵浮集于液体的表面，形成一层虫卵液膜，然后蘸取此液膜，进行镜检。

肠道寄生虫粪便的病原学检查方法在实验动物病原检测中，寄生虫检测是其中重要的分支，也是体现实验动物质量不可或缺的一个方面。

寄生虫侵入宿主可在宿主体内产生多种有害作用包括夺取营养，机械性损伤，继发感染，毒性作用等，严重影响实验动物健康并降低实验动物的质量。

许多寄生虫生活史中虫卵、卵囊、或幼虫随宿主的粪便排出体外，这些都可以通过粪便寄生虫检查，确定是否感染寄生虫以及感染的种类和程度。

病原学检查是诊断寄生虫成虫及虫卵的重要的实验技术，采集粪便做粪便检查又是诊断实验动物消化道有无寄生虫感染比较常用的手段。

实验动物粪检的病原学方法有多种。

本文列举并介绍了一些目前比较常用的粪便寄生虫定性和定量的检查方法，旨在提高粪便寄生虫病原学检查的技术水平。

[Abstract] In the experimental animal pathogen detection，the parasite detection is one of the important branches，and it is also an indispensable aspect of the quality of experimental animals.Parasitic invasion of the host can produce a variety of harmful effects in the host body including the seizure of nutrients，mechanical damage，secondary infection，toxic effects，seriously affect the experimental animal health and reduce the quality of experimental animals.Many parasites in eggs and oocysts，or host larvae with the faeces excreted through feces，which can determine whether the parasite examination，parasite infection and infection type and degree.Etiological examination is an important diagnostic technique of parasite egg and adult feces collection，do stool examination is the diagnosis of digestive tract have no experimental animal parasitic infections more commonly used methods.There are many kinds of pathogenic methods in laboratory animal feces examination.This article lists and describes some of the more commonly used methods of qualitative and quantitative examination of fecal parasites，aimed at improving the technical level of fecal parasite pathogens.[Key words] Intestinal parasites；Stools；Pathogenic examination method；Laboratory animal quality根據现行的2001版中国国家标准实验动物寄生虫学检测方法，不同种属动物体内体外寄生虫有其适用的检测方法，这些方法是经过很多检测人员反复实践得出的结论。

寄生虫卵粪便检查法许多寄生虫的虫卵、卵囊或幼虫可随宿主的粪便排出体外。

通过检查粪便，可以确定是否感染寄生虫及其种类和感染强度。

粪便检查在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定上均具有重要意义。

一、目的及要求1、掌握直接涂片法、漂浮法、沉淀法检查寄生虫卵。

23、观察常见吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等寄生虫虫卵，掌握其一般特征。

二、实验内容（一）粪样采集及保存方法1.被检粪样应该是新鲜且未被污染，最好从直肠采取。

2.大动物按直肠检查的方法采集；小动物可将食指套上塑料指套，伸入直肠直接钩取粪便。

自然排出的粪便，要采取粪堆上部未被污染的部分。

3.采取的粪便应装入清洁的容器内。

采集用品最好一次性使用，如多次使用则每次都要清洗，相互不能污染。

4.采取的粪便应尽快检查，否则，应放在冷暗处或冰箱冷藏箱中保存。

当地不能检查需送出或保存时间较长时，可将粪样浸入加温至50～60℃、5％～10％福尔马林中，使其中的虫卵失去活力，但仍保持固有形态，还可以防止微生物的繁殖。

（二）直接涂片法（Examination of Direct Smears）在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴甘油与水的等量混合液（加甘油的好处是能使标本清晰，并防止过快蒸发变干），其上加少量粪便，用火柴棍儿仔细混匀。

再用镊子去掉大的注意涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时，纸上的字迹隐约可见为宜。

直接涂片法的优点是简便易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查；缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。

因此在实际工作中，需多检几片，以提高检出率。

检查虫卵时，先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分，发现疑似虫卵物时，再用高倍镜仔细观察。

因一般虫卵（特别是线虫卵）图1-1-1 直接涂片法示意另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。

取2～3g 粪样加清水2～3倍，充分混匀成悬液。

后用玻璃棒搅拌0.5—1min ，使之成回旋运动，在搅拌过程中迅速提起玻璃棒，将棒端附着的液体放于载片上涂开，加上盖片在镜下检查。

寄生虫病学粪便检查一、概述粪便检查是蠕虫病生前诊断的重要方法之一。

因为绝大多数的寄生性蠕虫都是寄生在消化道内的，所以它们产生的卵、幼虫或节片也都是随着宿主的粪便排出体外的。

二、实验目的１、学会用涂片法、沉淀法和漂浮法来检查粪便中的蠕虫卵和球虫卵囊等。

２、在显微镜下辨别虫卵和卵囊，并且能与粪便中的非寄生性物质相区别。

三、实验方法及器材方法：1、在显微镜下辨别虫卵和非寄生性物质 2、直接涂片法 3、饱和盐水漂浮法 4、水洗沉淀法 5、离心沉淀法 6、尼龙筛淘洗法器材：双目显微镜带虫卵的羊粪带虫卵的牛粪玻片盖玻片四、操作过程1、在显微镜下辨别虫卵和非寄生性物质用工具挑取一粒绿豆或者黄豆大小的粪便置于玻片上涂匀盖上盖玻片直接低倍镜辨别虫卵和非寄生性物质2、直接涂片法：滴水（在载玻片上滴上１－２滴甘油水或清水）--取样（用工具挑取一粒绿豆或者黄豆大小的粪便）--与水混合--搅拌均匀--将粗的粪渣拨去--摊匀（厚薄程度以能透视下面的字体为宜）--镜检（三片以上）优点：该方法操作简便、快速且不需要很多仪器设备，对各种虫卵都有检出的可能。

缺点：捡出率很低。

甘油水：甘油：水＝１:１3、饱和盐水漂浮法(１）、原理：应用比重较虫卵大的溶液作为漂浮液，使虫卵或卵囊等漂浮于液体表面，以便于我们收集。

（２）、优缺点：优点：操作简便，特别是对大多数的线虫卵及球虫卵囊等比重较轻的虫卵，本办法具有特别的效果，检出率很高。

因此，在兽医预防和诊断的工作中应用十分广泛。

缺点：对比重较大的虫卵（如吸虫卵、棘头虫卵）检出的效果很差。

Ａ、取粪样（５－１０g)置于容器内--加少量的饱和盐水--搅拌成糊状--再加盐水（约１０－２０倍）搅拌均匀--过滤--静置（３０－４０分钟）用铁丝圈沾取粪液上浮膜--镜检。

4、水洗沉淀法1）原理：寄生虫虫卵的比重比水重，可自然沉于水底。

因此可利用自然沉淀的方法，将虫卵集中于水底便于检查。

沉淀法多用于比重较大的虫卵如吸虫卵和棘头虫卵的检查。

肠道寄生虫粪便病原学检查肠道寄生虫有不同的发育阶段，当其发育到一定阶段后就可以在粪便中被检测出来，例如：蠕虫的虫卵、幼虫、成虫和节片，原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊还有一些节肢动物的成虫或幼虫，这是临床上最常见的寄生虫检查方式，下面我们来了解一下肠道寄生虫粪便病原学的检查手段。

一、粪便标本采集的注意事项首先，取样时应以含脓、血、黏液的部分为重点，尽量做到多部位取材，样本取材量应为5—10g，但若做自然沉淀或血吸虫毛蚴孵化检查法，取样量则需达到30g以上。

另外，蠕虫成虫及绦虫节片的检查则要留存患者24小时内的粪便样本。

其次，保存粪便样本的容器必须清洁、干燥，取样后要进行密封保存，以免受到水、尿液、粉尘、药物或泥土的干扰，容器以硬纸盒为最佳，并在容器外贴好标签，用以识别。

最后，粪便样本要在采集后的24小时之内送检，送检后的半小时内完成检查，或可在35—37摄氏度的条件下进行保存，以确保检测到新鲜的粪便样本，尤其是在检查运动的滋养体时，例如：阿米巴、鞭毛虫、纤毛虫。

二、肠道寄生虫的粪便病原学检查方式第一，直接涂片法。

此法操作简便，检出率高，常用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体以及卵囊。

可分为生理盐水直接涂片法和直接涂片染色法。

生理盐水直接涂片法，是指滴适量生理盐水在载玻片的中央，然后使用竹签取米粒大小粪便样本与其充分混合，而后继续用竹签将混合物涂成膜，制成涂片后再置于显微镜下观察，重复此操作三次，分别进行观察，以提升检出率。

直接涂片染色法一般使用碘液进行染色，只需将生理盐水直接涂片法中的生理盐水换成碘液即可，同样需重复涂片观察三次。

第二，浮聚法。

当原虫的包囊或虫卵处于比自身比重更大的溶液中时就会出现上浮并集中于液体表面现象。

可分为饱和盐水浮聚法、硫酸锌离心浮聚法、蔗糖离心浮聚法以及氯化锌溶液浮聚法。

饱和盐水浮聚法，此法多应用于检查钩虫卵，这是因为饱和盐水的比重为1.17-1.19，而钩虫卵的比重为1.085-1.09。

寄生虫病原学检查一粪便检查.粪便检查是诊断寄生虫病的基本方法。

为了取得准确的结果,送检标本必须新鲜,保存时间- -般不宜超过24小时。

如检查肠内原虫滋养体,最好立即检查,注意保温,或有条件时暂存在35~37C。

盛粪便的容器要干净,粪便中不可混人尿液和其他污染物,以免影响检查结果。

具体方法如下。

(一)直接涂片法用以检查蟎虫卵原虫包囊和滋养体。

方法简便,连续做3次涂片,可提高检出率。

1.蠕虫卵检查滴1滴生理盐水于洁净的载玻片上,用牙签挑取绿豆大小的粪便,在生理盐水中涂抹均匀;涂片厚度以透过玻片约可辨认书上的字迹为宜。

加盖片后用低倍镜或高倍镜观察。

需注意鉴别虫卵与粪便中的异物。

虫卵都具有一-定形状和大小,卵壳表面光滑整齐,具固有的色泽,卵内可见卵细胞或幼虫。

2.原虫检查(1)滋养体检查:涂片应较薄,方法同蠕虫卵检查。

温度愈接近体温,滋养体的活动愈明显,必要时可将涂片置保温台.上保持温度。

(2)包囊碘液染色检查:直接涂片方法同上,但以1滴碘液代替生理盐水。

若同时需检查活滋养体,可在玻片另. -侧滴1滴生理盐水,同上法涂抹粪便标本,再盖上盖片。

滴碘液的一-侧查包囊,另一侧查活滋养体。

(3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前最佳的方法为金胺-酚改良抗酸染色法。

其次为金胺酚染色法和改良抗酸染色法。

新鲜粪便或经10%甲醛溶液固定保存(4C,1个月内)的含卵囊粪便都可用这3种方法染色。

染色过程是先用金胺酚染色,再用改良抗酸染色法复染。

具体方法如下1.金胺-酚染色法2.改良抗酸染色法3.金胺酚染色-改良抗酸复染法（二）改良加藤法改良加藤法是一项用于检查寄生虫的辅助检查方法。

其。

适用于检查各种蠕虫卵。

方法简便，操作过程中虫卵不会散失。

效果较好。

过硬和过稀的粪便不宜使用本法。

泡沫状的粪便会在玻璃纸下形成许多微小气泡，妨碍镜检。

并可作虫卵定量检查。

此相检查可以用于判断相应的病征。

原理：是利用粪便定量或定性厚涂片，以增加视野中虫卵数，可作虫卵定量检查。

粪便检查（版本一）粪便检查是兽医临床上了解消化系统病例变化的一种辅助方法。

除了本书在粪便检查中所论述的粪便的感观检查（第五章第五节）之外，还需进行粪便的化学检查及显微镜检查。

一、粪便的化学检查（一）粪便酸碱度测定一般是用PH试纸测定粪便的PH。

粪便酸碱度与饲料成分及肠内容物的发酵或腐败过程有关。

草食动物的正常粪便，呈弱碱性反应，但马的粪球内部常为弱酸性。

当肠管内糖类发酵过程旺盛时，粪便的酸度增加，当蛋白质腐败分解过程旺盛时，粪便的碱度增加，见于胃肠炎等。

（二）粪便潜血检查粪便中混有不能用肉眼直接观察出来的少量血液叫做潜血。

整个消化系统不论那一部分出血，都可使粪便含有潜血。

所以粪便潜血检查对消化系统少量出血的诊断有重要的价值。

粪便潜血检查的原理与胃液潜血检查相同。

青草中含有过氧化氢酶，因此，草食动物的粪便应加热，以破坏酶的活性，防止干扰检查结果。

肉食动物应禁食肉类植物3天。

所用的玻片、试管应经洗液侵泡，以防器材上所粘附的血液而产生阳性使判断失误。

阳性结果，见于出血性胃肠炎、牛创伤性网胃炎、真胃溃疡、马肠系膜动脉栓塞、犬钩虫病以及其他能引起胃肠道出血的疾病。

二、粪便的显微镜检查由粪便的不同部分采取少许粪块，置于载玻片上，加少量生理盐水，用牙签混合并涂成薄层，以透过书报字迹为宜，用低倍显微镜观察。

如果粪便稀薄如水样，应置于试管内让其自行沉淀或是低速离心片刻，然后用吸管吸取沉渣，涂片镜检。

粪球表面或是内部肉眼可见的异物，如血凝块、浓汁、脓块、肠粘膜及伪膜等，仔细地挑选出来，置于载玻片上，加适量生理盐水，涂成薄层，加盖玻片镜检。

在检查中，应特别注意观察下列成分。

（一）寄生虫及微生物的检查见家畜寄生虫学及微生物学的有关章节。

（二）饲料残渣饲喂混合性饲料时，可见少量的植物细胞、沉淀颗粒及脂肪滴等。

植物细胞及植物组织，见有厚而光泽的细胞膜及叶绿素。

粪便中的脂肪滴多成圆形，颜色淡黄，可被苏丹III染成红色。

粪便中出现过多的脂肪滴为消化障碍，脂肪吸收不全的特征。