微生物学生复习思考题总汇

绪论1.什么是微生物？它包括那些类群？概念：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。

包括：原核类：细菌〔真细菌，古细菌〕，放线菌，蓝细菌，支原体，立克次氏体，衣原体等。

真核类：真菌〔酵母菌，霉菌，蕈菌〕，原生动物和显微藻类非细胞类：病毒，亚病毒〔类病毒，拟病毒，朊病毒〕2.人类迟至19世纪才真正认识微生物，其中主要客服了哪些重大障碍？显微镜的创造〔列文虎克〕灭菌技术的运用纯种别离培养技术的建立3.微生物有哪五大共性？其中最根本的是哪一个？为什么？五大共性：〔1〕体积小、面积大〔2〕吸收多、转化快〔3〕生长旺、繁殖快〔4〕适应强、易变异〔5〕分布广、种类多最根本的：〔1〕体积小、面积大原因：由于微生物是一个如此突出的小体积大面积系统，从而赋予它们具有不同于一切大生物的五大共性，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。

4.试述微生物的多样性（1）物种的多样性〔2〕生物代谢类型的多样性〔3〕代谢产物的多样性〔4〕遗传基因的多样性〔5〕生态类型的多样性5.微生物名人巴斯德（1）否认“自生说〞（2）预防接种（3）证明发酵是由微生物引起的（4）创造巴斯德消毒法第一章原核生物的形态、构造和功能1.细菌的根本形态分为几种？测量微生物大小常用单位是什么？细菌的形态极其简单，根本上只有球状、杆状和螺旋状三大类，仅少数为其他形状，如丝状，三角形，方形和圆盘形。

量度细菌大小的单位是um，而度量其亚细胞构造那么要用nm作单位。

2.试述G+和G-细菌细胞壁构G+：厚度大〔20～80nm〕，化学组成简单，一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸N-乙酰氨基葡萄糖〔G〕肽聚糖形成坚硬的多层三维网状结构N-乙酰胞壁酸〔N〕G+ 四肽链-肽桥交联甘油型磷壁酸核糖醇型G-：厚度较G+细菌薄，层次较多，成分较复杂，肽聚糖层很薄〔仅2～3cm〕故机械强度较G+细菌弱，主要包括外膜，肽聚糖层，壁膜间隙三个局部。

普通微生物复习思考题绪论1．什么是微生物的概念？包括哪些类群？2．简述微生物的五大共性。

3．微生物学发展各时期代表人物有哪些？他们的主要贡献是什么？第一章思考题1．细菌的一般构造和特殊构造是什么，扼要说明各部分的生理功能。

2．什么是革兰氏染色法？主要步骤是什么？其中哪一步是关键？3．革兰氏阳性细菌与阴性细菌细胞壁构造特点及成分区别。

4．什么是荚膜？说明其化学成分及生理功能。

5．什么是磷壁酸？说明其构造和功能。

6．芽孢的定义、结构，它的极强抗逆性是由那些结构决定的。

7. 糖被分几种类型？其化学组成和功能怎样？8．比较放线菌的构造特点、繁殖方式、菌落与细菌的菌落差别。

第二章思考题1.比较真核微生物与原核微生物细胞结构的异同，主要有哪些种类？2.简述酵母菌的形态特征、菌落特点、繁殖方式。

3.简述霉菌的形态特征，菌丝的特化结构、菌落特点、繁殖方式。

第三章思考题1．试述病毒的主要化学组成与结构，病毒有何特点？2．壳粒在壳体上不同排列有何对称机制，各自的形态是什么？3．简述噬菌体的形态特征。

4．烈性噬菌体的繁殖过程分几个阶段，有何特点？5. 温和噬菌体有哪几种存在方式？溶源性细菌有哪些特点？6．名词：烈性噬菌体、温和性噬菌体、溶源菌、前噬菌体、一步生长曲线第四章思考题：1. 简述微生物所需要的营养物质及其功能。

2. 简述微生物的四种营养类型，并举例说明之。

3. 简述微生物吸收营养的主要吸收方式，并比较它们的异同点。

4．什么是选择性培养基？试举例并说明其原理。

5．什么是鉴别性培养基？试举例说明其原理。

6．什么是碳源和氮源？实验室和发酵工业常用那些物质提供碳源和氮源？7．名词解释：(1) 生长因子；(2)培养基；(3)同型乳酸发酵； (4)异型乳酸发酵第五章思考题1．试比较有氧呼吸、无氧呼吸和发酵的异同点。

2. 说明呼吸链(电子传递链)的组成和ATP的产生方式。

3. 试从狭义和广义两个方面解释发酵概念。

4. 简述由EMP途径中间代谢产物——丙酮酸出发的6种发酵类型及其各自发酵产物。

微生物学课程思考题《微生物学》课程复习思考题绪论1.什么是微生物？它包括哪些类群？2.人类迟至19世纪才真正认识微生物其中主要克服了哪些重大障碍？3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？4.什么是微生物学？学习微生物学的任务是什么？5. 用一个具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物是人类的敌人，更是我们的朋友？（建议将一些具体事例延伸成为展板制作的题目）6. 为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”?7. 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人?（请不要简单罗列二个人的工作，而应该对他们的工作及意义进行评论）第一章1.试图示G+和G-细菌细胞壁的主要构造井简要说明其异同。

2.试图示肽聚糖的模式构造，并指出G+和G-细茵肽聚糖结构的差别。

3.试述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。

4.渗透调节皮层膨胀学说是如间解释芽袍耐热机制的？5.裂异形胞原体与始体．类支原体，浚酶体袍囊，磁小体。

第二章1.试解释菌物、真菌、酵母茵、霉菌和章菌。

2.试简介菌丝、茵丝体、菌丝球、真酵母、假酵母、芽痕、蒂痕、真菌丝、假菌丝等名词。

3.霉菌的营养菌丝恻气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化构造？4.试列表比较各种真菌胞子的特点。

5.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？第三章1.什么是真病毒？什么是亚病毒？2.病毒的一般太小如何？试图示病毒的典型构造。

3.病毒粒有哪几种对称形式？每种对称又有几类特殊外形？试各举一例。

4.什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。

5.什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？6.试解释溶源性、溶源菌、温和噬菌体。

第四章1.什么叫能源？试以能源为主、碳源为辅对微生物的营养类型进行分类。

2.什么叫生长因子？它包括哪几类化合物？微生物与生长因子的关系有哪几类？试举例加以说明。

3.什么叫水活度（a）？它对微生物的生命活动有间影响？对人类的生产实践w和日常生活有何意义？4.什么是选择性培养基？试举一例并分析其中的原理。

●从细菌生长繁殖的条件入手，如何进行细菌的人工培养？充足的营养成分、适合的酸碱度、合适的酸碱度、适宜的温度、一定的气体环境、渗透压等、及时高压灭菌、适宜的培养基●什么是生长曲线？简述其分期及各期意义。

迟缓期：细菌被接种培养基的最初一段时间，主要是适应新环境，同时为分裂繁殖作物质准备，此时细菌体积比较大，含有丰富的酶和中间代谢产物。

对数期：细菌分裂繁殖最快的时期，菌数以几何级数增长，研究细菌的最佳时期。

稳定期：由于营养物质的消耗，代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。

活菌数保持稳定。

一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。

衰退期：繁殖变慢，死菌数超过活菌数。

细菌形态发生改变，生理活动趋于停滞。

●如何利用细菌分解代谢产物鉴别细菌？糖发酵试验：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖IMViC 试验常用于肠道杆菌的鉴定：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）实验。

结果：大肠埃希菌：++-- 产气杆菌--++●简述细菌合成代谢产物在医药学上的意义。

1、热原质（致热源）：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。

产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。

2、毒素及侵袭性酶：①外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；②内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。

③侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。

3、色素：①水溶性；②脂溶性。

4、抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。

抗生素大多由放线菌和真菌产生。

5、细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。

细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。

6、维生素●简述微生物的分类及各类微生物的特点 P4●比较G+菌与G-菌细胞壁结构的异同，并简述细胞壁的功能细胞壁结构革兰阳性菌G+革兰阴性菌G-肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构肽聚糖厚度20～80nm 10～15nm肽聚糖层数可达50层仅1～2层肽聚糖含量占胞壁干重50～80% 仅占胞壁干重5～20%磷壁酸有无外膜无有细胞壁的功能：维持菌体固有的形态，并保护细菌抵抗低渗环境。

《微生物学》复习思考题第1章绪论1.名词解释：微生物，微生物学2.用具体事例说明人类与微生物的关系。

3.微生物包括哪些类群？4.为什么说巴斯徳和柯赫是微生物学的奠基人？5.试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友?第2章原核微生物1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞2.根据革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞蔗通透性來说明革兰氏染色的机制。

3.什么是芽胞？它在什么时候形成？试从英特殊的结构与成分说明芽抱的抗逆性。

渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽砲耐热机制的？4.立克次氏体有哪些与专性活细胞内寄生有关的特性？它们有什么特殊的生活方式？衣原体与立克次氏体都为专性活细胞内寄生，两者有何差别？5.螺旋体和螺旋菌有何不同？6.什么是缺般细菌？试简述四类缺率细菌的形成、特点和实践意义。

7.试述古生菌和细菌的主要区别。

8.什么是学名？什么是双名法？用具体的例子说明。

9.试根据细菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在白然界屮分布广泛。

10.细菌、粘细菌、放线菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特点？第三章真核微生物1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。

2.举例说明霉菌与酵母菌与人类的关系。

3.试列表说明真核微生物与原核微生物的主要区别。

4.试图示真核生物“9+2型”鞭毛的横切面构造，并简述其运动机理。

5.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？6.试比较细菌、放线菌、酵母菌和霧菌细胞蔗成分的异同，并讨论它们的原生质体的制备方法。

7.丝状真菌的营养菌丝和气生菌丝齐有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？8.试述真菌的砲子类型和特点。

第4章病毒I.名词解释：病毒粒子、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、裂解彊、类病毒、航病毒。

2.病毒区别于英他生物的特点是什么？根据你的理解，病毒应如何建义?3.试述病毒的主要化学组成及其功能。

4.病毒売体结构有哪几种对称形式？毒粒的主要结构类型有哪些？5.病毒核酸有哪些类型和结构特征?各类病毒基因纽的复制策略有何区别？6.病毒复制循环可分为哪几个阶段？齐个阶段的主要过程如何?（以T4噬菌体为例说明）7.病毒的非增殖性感染有哪几类?引起病毒非增殖性感染的原因是什么？&亚病毒有哪几类？各自有何特点？9.某发酵工厂生产菌株经常因噬菌体”感染”而不能正常生产,在排除了外部感染的可能性后有人认为是山于溶源性菌裂解所致，你的看法如何？并请设计一-实验证明Z。

微生物学绪论一、选择题b1. 大部分微生物（）。

A 是原生动物B 帮助改善生活质量C生活在海洋的底层D发现于外层空间。

c2. 适合所有微生物的特殊特征是（）。

A 它们是多细胞的B 细胞有明显的核C 只有用显微镜才能观察到D 可进行光合作用c3.人类通过微生物产生的食品有（）。

A 牛奶B 火腿C 酸乳酪D 黄瓜a4. 第一位观察到微生物的科学家是（）。

A Robert HookeB Louis PasteurC Joseph ListerD James T. Watsona5. 自然发生说的理论认为（）。

A 微生物来自无生命的物质B 大动物中发现有系统发育C人类是从类人猿进化的 D病毒是从细菌退化的d6. 广泛进行微生物研究的17世纪70年代荷兰商人（）。

A van GophB van HoogenstyneC van DyckD van Leeuwenhoekd7. 路易.巴斯德对微生物的贡献在于他（）。

A 发现了病毒B 提出了自然发生说理论C抨击了进化论D 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性b8. 阐明微生物是传染病原因的概念称为（）。

A 进化论B 病原菌学说C 生物学细胞论D 报酬递减论a9. 巴斯德采用曲颈瓶试验来（）。

A 驳斥自然发生学说B 证明微生物致病C 认识到微生物的化学结构D 提出细菌和原生动物分类系统b10. 在微生物学中采用化学治疗剂治疗传染病是由于（）。

A Hooke的工作B发现了抗生素C 阐明了DNA的结构D 发展了遗传工程D11.病毒研究工作的迅猛发展取决于（）。

A 光学显微镜B 暗视野显微镜C 紫外线显微镜D 电子显微镜B12.下列的所有特征均与病毒相联系，除了（）之外。

A 它们很少或没有其它的化学物质B 用抗生素干扰病毒的活性C 病毒引起麻疹、腮腺炎和（病毒性）风疹D 它们不是细菌的类型C13. 所有微生物的遗传物质是（）。

A A TPB DNPC DNAD AMPC14. 由一团缠绕的核酸和蛋白质外壳所包围的粒子是对（）最好的描述。

微⽣物学复习思考题微⽣物学复习思考题绪论p1-111、微⽣物的定义：通常是指那些微⼩、简单、⾁眼难以观察的⽣物。

2、微⽣物学的定义：就是研究微⽣物的科学，其研究范围包括微⽣物的多样性、微⽣物的⽣命活动规律及其对⼈类社会经济活动的影响。

3、为什么说巴斯德是微⽣物学的奠基⼈之⼀？答：彻底否定了⾃然发⽣说；证实发酵由微⽣物引起；发明了狂⽝病毒减毒疫苗制备⽅法；发明巴⽒消毒法。

4、为什么说柯赫是微⽣物学的奠基⼈之⼀？答：发明培养基并⽤其纯化微⽣物等⼀系列研究⽅法的创⽴；证实炭疽病因—炭疽杆菌；发现结核病原菌—结杆菌；柯赫⽒法则。

5、什么是柯赫⽒法则：6、微⽣物的特点是什么？答：⼤多数微⽣物⾁眼难以直接观察；微⽣物通常以独⽴的增殖单位存在；微⽣物结构较不复杂；微⽣物⽣长快速；微⽣物⼏乎⽆所不在。

种类繁多,分布⼴泛，⽣长繁殖快,代谢能⼒强，遗传稳定性差,容易发⽣变异第三章微⽣物细胞的结构与功能p13-731、简述真核⽣物和原核⽣物的主要区别：2、试理顺染⾊质、组蛋⽩、核⼩体、螺线管、超螺线环和染⾊体之间的关系。

答：核⼩体：当细胞处在分裂间期时，细胞内由DNA、组蛋⽩、其他蛋⽩和少量RNA 组成的⼀种线性复合构造，其基本单位是核⼩体；因可被碱性染料染⾊，故称染⾊质；染⾊质中的蛋⽩质有组蛋⽩和⾮组蛋⽩两类，富含碱性氨基酸的为组蛋⽩。

当细胞进⾏有丝分裂和减数分裂时，染⾊质经盘绕、折叠、浓缩后，变成在光学显微镜下可见的染⾊体；先折叠成外径约30nm、内径10nm、螺距11nm的中空螺线管；螺线管进⼀步折叠成超螺线环。

第四章微⽣物的营养p75-951、微⽣物⽣长需要哪五⼤类营养物质，各⾃的作⽤如何？答：（1）碳源（2）氮源（3）⽆机盐（4）⽣长因⼦（4）⽔分(water)(1)碳源，指在微⽣物⽣长过程中为微⽣物提供碳素来源的物质。

作⽤：经过化学变化后，合成微⽣物的细胞物质和代谢产物；作为微⽣物⽣命活动的能源物质。

(2)氮源，指为微⽣物提供氮素来源的物质。

微生物思考题及参考答案The document was prepared on January 2, 2021微生物思考题及参考答案1.用油镜观察时应注意哪些问题在载玻片和镜头之间加滴什么油起什么作用答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比有公式,同时与波长成正比.2.什么是物镜的同焦现象它在显微镜观察中有什么意义答：在一般情况下,当物像在一种物镜中已清晰聚焦后,转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时,物像将保持基本准焦的状态,这种现象称为物镜的同焦.利用这种同焦现象,可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦,从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片.3.影响显微镜分辨率的因素有哪些答：物镜的NA值物镜的数值孔径与照明光源的波长.4.美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答：会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的是透明无色,衰老的是淡蓝色,死亡的是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果.5.镜检时如何区分放线菌基内菌丝,气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体.6.在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片.2、如果是涂布液体,可以用毛细管或接种环滴一小滴,然后轻轻抹开,一圈足够. 3、如果是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去,接种环的尖蘸一点点即可. 4、为了节省时间,可以将干燥和热固定合并成一步.但是应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形. 5、染色时间视染色液种类而定.如结晶紫只需几十秒,亚甲基蓝则需一到两分钟. 6、冲洗时,水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上. 7、冲洗后干燥,可以用酒精灯加热以节省时间,同样的,应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形.7.进行细菌制片时为什么要进行加热固定在加热固定时应注意什么固定的目的有三个：1杀死微生物,固定细胞结构.2保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉.3改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色.固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次手指触摸玻片反面,不烫手为宜,固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩.8.为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察1.因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察.2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰.9.哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性其中最关键的环节是什么答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节.10.进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题答：菌龄太老,细胞壁通透性改变.着色不均,染色效果不好.阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌.11.革兰氏染色中那一步是关键为什么你是如何操作的革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色是脱色时间.如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌.脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s.12.革兰氏染色中,哪个步骤可以省略在什么情况下采用媒染目的是在所有的内形成了不溶于水的与碘的复合物. 脱色后使变为无色. 复染使革兰氏阴性菌染成红色. 所以鉴别细菌的革兰氏阴阳性只须媒染,复染的目的是为了看清革兰氏阴性菌.13.你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌曲霉:具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串的球形分生孢子.分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连.根霉:菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根.在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶端膨大成球形孢子囊.囊的基部有囊托,中间有球形或半球形囊轴.毛霉:菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝.菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗.各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托.青霉:菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙.基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生孢子梗经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体.孢子颜色：黑曲霉是黑色,青霉是青色,根霉是白菌丝黑孢子,毛霉则是淡黄色.以上为实验室观察1菌丝特征：青菌与曲霉菌丝与膈；毛霉与根霉则无；2菌丝的特化结构：曲霉有足细胞,其它霉菌无；根霉有假根与匍匐枝,其它霉菌无；3孢子头特征：青霉的孢子头为扫帚状；根霉与毛霉的孢子头为囊状；曲霉为菊花状孢子头.14.为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正目镜测微尺中每小格代表的实际长度是不固定的,它是随所使用目镜和物镜的放大率的不同而改变的,故在测量前必须先用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正,以得出在显微镜的特定放大倍率下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度.15.在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,其测定结果是否相同为什么答:相同;目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分的刻度,有把毫米刻成为50 等分或把10 毫米长度刻成100 等分.测量时,将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象.由于在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,物象的放大倍数与每小格目镜测微尺所代表的长度在变化比例上是同步的,故而测定结果相同.16.哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差,应如何避免操作时没有先盖盖玻片再滴加悬液,导致体积不准确.避免：先盖盖玻片再滴加悬液.细胞密度太高.避免：稀释溶液.溶液不均匀.避免：滴加溶液前混匀悬液.1、仪器误差：所用器材均应清洁干净,并且计数板计数区不应该有擦痕.2、计数室内可能有气泡.因为酵母细胞并没有染色,看起来是透明的,有气泡很容易被计入,使数值偏高；并且,气泡会影响菌悬液的随机分布.改进：若产生气泡,则用吸水纸吸出.3、菌体在计数板上分布不均,当用选取5格计数时,会造成很大误差.改进：应使菌液自然流入并混匀,进行观察时尽可能多数几个格子.4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低,导致稀释液浓度和原液不成正确比例,计算时产生误差.应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释.5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差.应多人观察,取记录平均数.6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了,使数值偏高.改进：谨遵一个规则,计上不计下,计左不计右,不可以重复计数.7、可能出现有出芽的酵母菌,将出芽的酵母菌按两个计数了,使数值偏高.改进：计数时,只有当芽体于母细胞一样大的时候,才能计为两个.17.培养基配好后,为什么必须立即灭菌如何检查灭菌后的培养基是否无菌为什么要倒置培养答：由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌,如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长系列而消耗养分和改变培养基的酸碱度所带来的不利影响.将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h,无菌生长即可证明灭菌后的培养基无菌.倒置培养的主要目的：1由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长；2防止空气中微生物的污染培养基及培养物：倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌.3倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境.如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况.而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失是很重要的.19.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题为什么答：一般而言,培养基的配置要注意如下几点原则：1营养成分的配比：碳源和氮源的比例C/N要适当；2适宜的酸碱度pH值：配制培养基时pH的调节；3渗透压：营养物质要有适合的浓度；4培养基不能反复高温灭菌.5 称不溶性固形物时,应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装；6一般情况下培养基用自来水配制.操作细节上则要注意：1称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖2调pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度3分装时注意不要污染棉塞、试管口,以免染菌.4及时灭菌,以免培养基及容器里的微生物生长繁殖消耗养分、改变酸碱度.1、当然是注意浓度配比不要搞错2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀4、不要忘了调节pH值一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质20.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物.答：1在使用高压蒸汽灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度.2压力未降至“0”便开盖取物的可能后果：压力锅内压力骤然降低,引起容器中的溶液喷出容器口导致污染或导致人员的烫伤.21.干热灭菌操作过程中应注意哪些问题为什么1、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通2、灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火3、灭菌时人不能离开4、灭菌结束后不能忘记关掉电源5、待温度降到70度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故22.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长在湿热条件下,有水蒸汽的作用：a高温水蒸汽导热比干空气要快；b高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；c高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞；d高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热.湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低；湿热的穿透力比干热大；湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2．26kJ千焦的热量.这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力.23.设计实验方案,比较干热灭菌和湿热灭菌的效果.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件和等量原则.一实验材料试管镊子酒精灯嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7053菌片纸片与菌片同大小同材料溴甲酚紫蛋白冻水培养基已灭菌等实验材料材料有余.二对照组取9支洁净试管,分为A1B1C1三组每3支一组,将A1组中放入菌片,B1组中放入纸片,C1组中什么也不加；不经灭菌,直接加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基等量.三恒为培养将上述所有试管按分组在56℃恒温条件下培养48小时.24.如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养请写出实验的主要步骤纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到.25.配制牛肉膏蛋白胨培养基,有哪些操作步骤那几步易出错,如何防止称取药品—加热溶化—分装—加棉塞—包扎—灭菌—搁置斜面易出错的步骤有：a称取药品称取时钥匙专用,瓶盖不要错盖,易吸水的药品要快速称取；b加热溶化加入药品后要用玻璃棒不停搅拌,以免糊底在琼脂熔化过程中,应控制火力,以免培养基因沸腾而溢出容器,同时,需不断搅拌,以防琼脂糊底烧焦.；c分装分装时培养基不能粘在三角瓶或试管口,以免接种时染菌；d搁置斜面斜面长度约试管长度一半为宜.26.平板菌落计数法的原理是什么它适用于那些微生物的计数平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞.统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数.但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞.因此平板菌落计数的结果往往偏低.现在常使用菌落形成单位.平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个微生物繁殖而形成的现象进行的,也就是一个菌落可代表一种微生物并不绝对.通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量.8、微量移液器的最小量程太大,在加样时,容易加多,使盖玻片鼓起,血球计数板所技术的体积变大,最终结果偏大.改进：用量程的小的微量移液器并少加一些.27.如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产生高温蛋白酶的菌株,你将如何完成写出实验方案产蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件一材料准备 1 土壤有机质特别是蛋白质含量丰富的土壤2 灭菌生理盐水%NaCl3 灭菌移液管4 添加酪素的B—4牛肉膏蛋白胨完全培养基经灭菌5 B—4斜面经灭菌6 其他材料：接种环酒精灯等二操作方法1在盛有10ml灭菌生理盐水的烧杯中添加1g土壤,配成悬浮液；2 稍静止后,用灭菌移液管移取部分上清液,将其制成10^4—10^6倍的稀释液；3 用灭菌移液管吸取各稀释液用稀释倒平板法或涂布平板法将其接入添加酪素的B—4平板上；4 在55—65℃下培养1—2天；5 挑取形成降解酪素透明圈的菌落透明圈直径D与菌落直径d之比较大者,转接入B—4斜面上培养；若无特定菌落形成,则需另取土样从开始重复试验6 将B—4斜面上的菌落再用平板纯培养,依次重复2—3次后即可得到纯培养镜检；7 纯培养细菌中蛋白酶的提取及活性鉴定摇瓶培养若提取蛋白酶及其活性正常,则纯培养成功,否则,重取土样重复以上实验.28.为什么熔化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板低于这个温度琼脂会凝固,温度过高,如果是做倾倒琼脂做菌落计数,会杀死一部分细菌,如果只是只是制备琼脂平板,那么温度太高就进行倾倒会导致琼脂凝固后偏软,水汽过多.29.要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键为什么1 无菌操作2 稀释良好,不会太浓或太稀.3 菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数.30.当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时,你认为问题出在哪里1.太浓2.没涂匀31.用倾注法和涂布法计数,其平板上长出的菌落有何不同为什么要培养较长时间48h后观察结果倾注法是在培养皿中接种好样品之后,倾注琼脂并培养；而涂布法则是在琼脂表面接种并使用L型棒涂布.因此,倾注法的菌落将出现在琼脂的各个部位,包括底层和中层,但涂布法培养后形成的菌落只出现在琼脂表面.32.你如何解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶答：①淀粉是大分子物质,进入细胞十分困难,甚至需要高耗能的胞吞作用.因而通过胞外酶的作用,将淀粉水解为葡萄糖后运入细胞,较方便高效.②试验中出现透明圈,说明培养基内淀粉被水解,可推测是细菌产生的胞外的淀粉酶起的作用.33.不利用碘液,你能否证明淀粉水解的存在答：由于淀粉水解生成葡萄糖,即多羟基醛,因此可利用醛的性质进行检验,如银镜试验,斐林试验等.呈阳性者,说明产生了葡萄糖,淀粉被水解；阴性者说明淀粉未被水解.34.假如某些微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果答微生物有氧代谢葡萄糖产气不产酸,因此发酵结果是小管中生气泡但是溶液不变黄.35.解释在细菌培养中吲哚检测的化学原理,为什么在这个试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸答：化学原理：有些细菌产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚和丙酮酸.吲哚与对二甲基氨基甲醛结合,形成红色的玫瑰吲哚.但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,因此吲哚试验可以作为一个生物化学检测的指标.因为丙酮酸是生物体呼吸作用的产物,无论是有氧还是无氧,都会产生丙酮酸,因而无法作为色氨酸酶活性的指示剂进行区分.同时吲哚能通过有明显颜色变化的化学反应观测到,而丙酮酸不能,所以试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸.36.为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性,而产气杆菌为阴性答：当细菌代谢糖产生酸时,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色,即甲基红反应.而大肠杆菌和产气肠杆菌在培养的早期均产生有机酸,但大肠杆菌在培养的后期仍能维持酸性PH4,而产气肠杆菌则转化有机酸为非酸性末端产物,如乙醇、丙酮酸等,使PH升至大约6.因此,大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性.37.用紫外线进行诱变时,为什么要打开皿盖为什么要在红光灯下操作紫外线不容易穿透玻璃,所以打开盖,自然光下容易光复活,红光下不会所以在红光下操作。