市人民医院检验科Rh血型检测试验标准操作程序

ABO、RH血型检测（试管法）标准操作规程【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。

【适用仪器范围】双目显微镜、普通离心机。

【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。

【应用范围】ABO、RH血型检测的手工操作。

【标本采集和处理】由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。

检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。

确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号，并按日期索引进行登记。

将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。

保证血浆于血球有效分离。

溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。

【检查项目】一、ABO血型（一）原理根据红细胞上有或无A抗原或（和）B抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O 型四种。

可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。

所谓正定型，是用已知抗-A和抗-B 分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B 抗原；所谓反定型，是用已知A红细胞B 红细胞来测定血清中有无相应的抗-A 或（和）抗-B。

（二）试剂和材料1．抗-A（B 型血）、抗-B（A 型血）。

2．5％A 、B 试剂红细胞盐水悬液。

3．受检者血浆。

4．受检者5％红细胞悬液。

试剂可在室温2～8℃下避光保存至有效期。

（三）操作步骤1．试管法(1)正向定型a．取试管2支，分别标上A、B字样。

b．向A管滴加抗A分型试剂1滴，向B管滴加抗B分型试剂1滴。

c．向A、B管各滴加5％的待检红细胞悬液各1滴。

d．混匀（天冷时试管架置370C水浴箱15分钟）后配平衡，在离心机内1000转/min离心1分钟。

将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以低倍镜检查。

血型鉴定操作规程血型鉴定是一项重要的实验技术，用于确定一个人的血型类型。

在医学和生物学中，血型鉴定对于输血、配型、疾病诊断和遗传学研究都具有重要的意义。

为了确保血型鉴定的准确性和可靠性，下面是一份血型鉴定操作规程。

实验准备：1.准备所需的实验器材，包括试剂盒、试管、离心管、离心机等。

2.保证实验室工作台的清洁和无菌状态。

3.检查试剂盒和试剂的有效期，确保使用的试剂没有过期。

4.按照实验操作流程规划各个步骤，确保整个实验的顺利进行。

实验操作流程：1.洗手并戴上实验手套，以避免交叉污染。

2.根据需要，准备待检血液样本。

血液样本可以来自采血针和采血管，也可以是已被提前采集的血液样本。

3.将待检样本和试剂同时取出并放在一个平稳的工作台上。

4.将待检血液样本分别滴入试管中，一般每个试管滴入样本约10μL。

5.使用试剂盒中的试剂，根据说明书的指导，将试剂滴入相应的试管中。

6.轻轻摇晃试管，使血液样本和试剂充分混合。

7.置于常温下反应一段时间，一般为15~30分钟。

8.准备离心管，将试管中的液体小心地转入离心管中。

9.将离心管放入离心机中，以适当的转速离心，分离血型表现物质。

10.离心结束后，使离心管保持水平，仔细观察血型表现物质的沉积情况。

11.根据沉积情况，确定待检样本的血型类型。

常见的血型有A型、B 型、AB型和O型，有时还会有RH阴性或阳性的判断。

12.将结果记录下来，并进行结果校对。

实验注意事项：1.操作过程中需佩戴手套，以避免污染和感染。

2.确保待检血液样本干净、无异物和杂质。

3.操作前要仔细阅读试剂盒的说明书，了解试剂的用途和使用方法。

4.严格按照试剂盒说明书的要求操作，避免试剂的交叉污染。

5.实验操作过程中要注意试剂的保存和保养，确保试剂的有效性。

6.避免强烈震荡试管和离心管，以避免溅出和破损。

7.注意对试剂和废弃物的正确处理，以保护环境和安全。

血型鉴定操作规程的目的在于确保操作的准确性和可靠性，从而得出准确的血型结果。

Rh血型分型试管法试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面Rh血型系统C、c、D、E、e抗原表达情况，为输血相容性检测、Rh系统新生儿溶血病的诊断与预防等提供参考依据。

(二)检验原理Rh血型系统单克隆IgM类血型抗体可以使具有相应抗原的红细胞在盐水介质中发生肉眼可见的凝集，利用单克隆IgM血型抗体可以鉴定出红细胞表面的Rh抗原。

(三)适用范围适用于受检者(受者、供者)红细胞表面C、c、D、E、e 抗原鉴定试验。

(四)设备性能参数参见血清学专用离心机使用说明书。

(五)器材与试剂1.器材离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

2.试剂生理盐水、市售单克隆IgM抗C、抗c、抗D、抗E、抗e及IgM+IgG抗D标准血清。

IgM抗D用于临床样本(受者)RhD血型的常规检测，不能与DIV细胞反应，不能检测出弱D。

IgM+IgG用于供者样本RhD血型的常规检测及确证试验，能与DIV细胞反应，检测出弱D抗原。

10系或16系谱细胞用于阴阳性对照。

(六)样本要求1.患者样本EDTA-K2；或EDTA-K3抗凝全血≥3ml，经B600-A型离心机在1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血、无凝块及明显乳糜。

2.供者标本枸橼酸盐抗凝，全血量≥3ml，经B600-A 型离心机在1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血、无凝块及明显乳糜。

(七)校准步骤参照KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机使用说明书中的校准要求执行。

(八)操作程序1.悬浮红细胞的配制取受检者适量红细胞，经生理盐水洗涤3次，取压积红细胞配成3％～5％的红细胞盐水悬液。

2.加样取4支洁净硬质试管，分别标记为受检者、阴性对照、阳性对照、自身对照，前3支试管内分别加入抗C(或抗c、或抗D、或抗E、或抗e)各1滴，第4支加自身血清(或血浆)2滴，在每支试管中再加配制好待用的3％～5％受检者红细胞悬液1滴，混匀。

血型鉴定实验步骤血型鉴定是一项常见的实验，用于确定一个人的血型类型。

通过这个实验，可以了解血液中存在的抗原和抗体，从而做出正确的血型鉴定。

下面将介绍血型鉴定的实验步骤。

实验所需材料：1. 血液样本：可以采用新鲜的全血或血清样本。

2. 血型试剂：包括抗A血清、抗B血清和抗Rh(D)血清。

3. 平板化玻片：用于糖胺聚糖凝集试验。

4. 微量移液器和移液管：用于加取试剂和样本。

5. 定量移液器和移液管：用于加取试剂和样本。

实验步骤：1. 用干净的平板化玻片，在玻片上标记样本来源（如A、B、C 等）。

2. 使用微量移液器，分别将要鉴定的血液样本滴在相应的标记区域上。

3. 加入相应的血型试剂。

将抗A血清滴在一个样本的标记区域上，将抗B血清滴在另一个样本的标记区域上。

4. 使用定量移液器，将抗Rh(D)血清分别滴在相应样本的标记区域上。

5. 使用棉签或棉花片，轻轻搅拌每个滴在玻片上的血液样本和试剂，使其充分混合。

6. 观察样本与试剂的反应。

根据出现的凝集情况，可以确定血型类型。

如果发生凝集，表示血液中有相应血型的抗原。

7. 结果的判断：- 若抗A血清与某个样本发生凝集，表明该样本为A型血。

- 若抗B血清与某个样本发生凝集，表明该样本为B型血。

- 若抗A血清和抗B血清与某个样本同时发生凝集，表明该样本为AB型血。

- 若抗Rh(D)血清与某个样本发生凝集，表明该样本为Rh(D)阳性（即Rh+）。

- 若抗Rh(D)血清与某个样本未发生凝集，表明该样本为Rh(D)阴性（即Rh-）。

8. 记录实验结果。

根据凝集反应的情况，可以确定血型类型，并记录在实验记录表中。

需要注意的是，在进行血型鉴定实验时，应严格遵循实验室操作规范和安全操作流程。

保持试剂和样本的洁净，避免交叉污染。

使用移液器时，应注意正确的使用方法，避免出现误差。

实验结束后，将使用过的实验器材进行妥善清洁和消毒处理。

血型鉴定实验是一项简单而重要的实验，可以为医学诊断和输血提供重要的参考依据。

rh血型操作规程RH血型操作规程一、背景介绍RH血型是血型系统中的一个重要组成部分，它是由D抗原的有无决定的。

人们通常将有D抗原的血型称为RH阳性血型，没有D抗原的血型称为RH阴性血型。

RH血型在输血和妊娠管理中起到了重要的作用，因此，在临床操作过程中必须严格遵守RH血型操作规程，确保安全和准确性。

二、操作规程1. 输血操作（1）献血者的血液抗凝后，经离心制备成全血和血小板浓缩物。

对于血小板输注，应选择和受血者血型相同的RH血型，以防止发生不良输血反应。

（2）在输血前，护士必须仔细核对受血者的血型信息，包括ABO血型和RH血型，确保与输血样本中的信息一致。

（3）如果受血者是RH阴性血型，应尽量选择RH阴性血型的供血者进行输血。

如果没有RH阴性血型的供血者，必须进行特殊处理，避免RH阴性受血者产生抗RH抗体。

（4）在输血过程中，护士应仔细观察受血者的反应，如出现发热、寒战、皮肤瘙痒等不适症状，应立即停止输血并报告给医生。

2. 妊娠管理操作（1）在孕妇第一次产前检查中，必须进行血型鉴定，包括ABO血型和RH血型。

如果孕妇是RH阴性血型，需要进一步检测是否有产生RH抗体。

（2）如果孕妇是RH阴性血型且未产生抗体，需要在孕妇20周左右注射RH免疫球蛋白。

该注射可以避免孕妇在分娩时产生抗RH抗体，保护胎儿的健康。

（3）对于孕妇已经产生抗RH抗体的情况，需要进行更加细致的监测和干预。

医生会根据不同的情况制定个体化的治疗方案，以保护胎儿的健康。

3. 实验室操作（1）实验室人员在操作前需要进行严格的消毒和无菌操作，以确保实验结果的准确性。

（2）实验室人员在进行血型鉴定时，必须使用高敏感性的试剂，以确保准确测定受血者的RH血型。

（3）实验室人员必须遵守操作规程，准确记录实验结果，并及时报告异常情况。

（4）实验室人员应定期进行技术培训和继续教育，提高操作的准确性和可靠性。

三、安全措施1. 输血过程中，护士应随时观察受血者的反应，如有不适症状，应立即停止输血并报告医生。

血型鉴定操作规程《血型鉴定操作规程》一、目的血型鉴定是一项重要的医学检验技术，用于确定个体的血型，并在输血、器官移植等临床应用中起到重要作用。

为了确保血型鉴定的准确性和可靠性，在进行血型鉴定操作时，必须按照规定的程序和要求进行操作。

二、操作规程1.样本采集：采集新鲜的全血样本，保持样本的完整性，并避免造成血样污染。

2.标本登记：在标本上进行详细的登记，包括病人的姓名、年龄、性别等信息，并核对标本的编号和病人信息的一致性。

3.检测准备：准备好所需的试剂、药品、设备和工具，确保检测环境的清洁和消毒，避免造成交叉感染。

4.试剂配制：根据所用试剂的说明书进行试剂的配制，遵守正确的比例和方法进行操作。

5.血型鉴定：按照标本的编号对照进行血型鉴定，确保标本不被混淆，避免造成错误的结果。

6.结果确认：对血型鉴定的结果进行仔细的确认和核对，确保结果的准确性和可靠性。

7.结果报告：将血型鉴定的结果进行清晰的记录和报告，确保结果的及时性和准确性。

8.标本保存：对已完成血型鉴定的标本进行合适的保存，避免标本的变质和丢失。

三、操作要求1.操作人员必须具备相关专业知识和技能，严格按照操作规程进行操作。

2.操作人员在进行操作前必须仔细阅读和理解所用试剂和设备的说明书，遵守使用方法和注意事项。

3.操作人员在进行操作时必须穿戴好防护用具，避免操作过程中发生事故和污染。

4.操作人员必须加强个人卫生管理，保持手部的清洁和消毒，避免交叉感染的发生。

5.操作环境必须保持干净整洁，避免污染的产生和传播。

以上就是《血型鉴定操作规程》的相关内容，希望大家在进行血型鉴定操作时，严格按照规程进行操作，确保结果的准确性和可靠性。

RH血型鉴定操作规程目的：1、为准确鉴定RH血型及了解基因型2. 要求：要求全科人员熟练掌握原理及其操作，对有疑问的结果能够做出解释及妥善解决。

3. 原理：该系统主要有五种抗血清，即抗D、抗C、抗c、抗E、抗e。

.用五种抗Rh分型血清来检查红细胞抗原，有18种表现型。

在临床输血中，一般只做D抗原的鉴定，凡被鉴红细胞和抗D血清凝集者为Rh.阳性，不凝集者为Rh阴性。

其它Rh抗原鉴定和D抗原一样只是加相应的抗血清既可。

其鉴定方法，由抗血清的性质而定。

如盐水抗体用盐水法，lgG抗体用聚凝胺，抗人球蛋白等方法。

4.试剂与材料4.1 抗D、抗C、抗c、抗E、抗e分型血清。

4.2 受检者血样。

4.3含有相应抗原2%~5%红细胞悬液（从谱细胞中选取）。

5.操作：5.1取清洁白瓷板一块,滴加lgM抗D血清一滴，再用竹签分别蘸取被检红细胞混匀;阴性对照蘸取已知RH阴性红细胞混匀。

将白瓷板不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，2~3分钟后观察结果，连续观察10分钟，以肉眼观察,阴性对照不凝集,被检者凝集者为阳性，不凝集者为阴性5.2 瓷板结果阴性者,再用试管法复查.( lgM抗D血清1滴+2%~5%红细胞悬液1滴,1000g离心15秒),凝集者为阳性,不凝集者为阴性,5.3 试管法阴性者进行确认实验Rh血型确认实验取3支试管，分别标记“1”、“2”、“3”，分别加入3批IgG 或（lgM+ IgG）抗D血清试剂各1滴，再各加入2%~5%受检者红细胞悬液一滴，1000g离心15秒,凝集者为阳性，不凝集者放置于37℃水浴箱水浴30分钟，取出三洗后用滤纸吸取加入抗球蛋白试剂2滴，以1000g离心15秒，肉眼观察结果，若均无凝集，可确认为Rh阴性，任何一管有凝集者可怀疑为Rh变异型。

另对此血清做抗筛实验，方法详见抗体筛选实验。

6.RH基因型检侧.6.1 取小试管五支，标记抗D、抗C、抗E、和抗c,按标记分别加上述五种抗血清各1滴，再分别加2%~5%受检者红细胞1滴，混匀。

SOP_10-2 Rh(D)血型鉴定标准操作程序一、目的：确保输血安全，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。

二、适用范围：血型鉴定。

三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：1. 原理：1.1 Rh血型系统：Rh血型是一个极为复杂的血型系统，其重要性仅次于ABO血型系统。

ISBT现已确定Rh血型系统中共有46个血型抗原。

其中主要的抗原D、C、c、E、e分别表示为RH1、RH2、RH3、RH4、RH5或004001、04002、004003、004004、004005。

其抗原中包括了五个抗原之间的复合体以及弱表达等等，但在临床中主要的问题大都出自这五个抗原:抗E、抗e、抗C、抗c、抗D。

用这五种抗血清检查红细胞抗原可以有18种表现型，在临床输血中一般只做D抗原的鉴定。

1.2 D抗原：含有D（正常D抗原）；弱D（weak D）；不完全D（partial D）；不完全弱D；增强性D（elevated D）；正常D抗原。

由于红细胞上的D抗原较少，弱D抗原不能与盐水抗体（IgM）凝集，只能通过与不完全抗体的结合用抗球蛋白试验检出Del。

一些非常弱的D型抗原，只能被吸收放散试验（如三氯乙烯和三氯甲烷放散法）检测出来。

1.3 Rh 抗体：Rh血型的免疫原性强度可能仅次于ABO血型，其中以D抗原最强，其次为E、c、C、e。

绝大部分Rh抗体为免疫抗体，但少部分可能为自然发生的抗体。

2 试剂：（1）抗D试剂，包括完全抗体性质的单克隆或多克隆抗体及改性IgG抗体等低蛋白试剂；（2）Rh对照试剂（通常可用自身血清或抗A、B管代替）；（3）Rh阳性和阴性5%红细胞悬液；（4）待检2~5%红细胞悬液。

3 方法：3.1 样本采集：真空抽血2ml至一次性抗凝管（EDTA－K2干粉）中，混匀后备用。

3.2 操作：3.2.1 玻片法：使用完全抗体性质的单克隆或多克隆抗体等低蛋白试剂。

不适合于输血前献血者和病人的血型鉴定，仅适合于临床体检时的RH血型鉴定。

ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。

(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。

2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。

(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。

(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。

(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。