实验三细胞凝集反应

科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应细胞凝集反应【实验目的】1.了解细胞膜的表面结构；2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理；3.学习研究细胞凝集反应的方法。

【实验原理】1.凝集素凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖转移结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。

常用的为植物凝集素，通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。

在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。

凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。

人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。

ABO血型鉴定主要用于临床输血，在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。

另外，凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。

如：植物凝集素可抑制受精；芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性，减少HIV感染者的病毒载量；细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关，凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。

2.细胞凝集细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。

实验1.血细胞凝集Lab1.Blood cell agglutination摘要：细胞凝集指的是细胞与细胞之间通过某种凝集素的作用而相互粘连在一起的现象，最终形成大的细胞团块。

而凝集素由于可使细胞凝集而成为一种重要实验和临床试剂。

本次实验就是通过进行对兔血细胞的凝集操作，观察细胞凝集现象，并掌握凝集素促进细胞凝集的实验原理和操作方法。

关键词：细胞凝集、凝集素前言：凝集素是一类能专一识别糖并与之非共价可逆结合的非酶非抗体蛋白质。

凝集素是指从各种植物、无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红细胞，故名凝集素。

凝集素按来源可分为植物凝集素、动物凝集素和微生物凝集素三大类;植物凝集素分为7个家族：豆科凝集素、几丁质结合凝集素、单子叶甘露糖结合凝集素、2型核糖体失活蛋白、木菠萝素家族、葫芦科韧皮部凝集素和苋科凝集素；动物凝集素按分子结构分为C-型凝集素、S-型凝集素、P-型凝集素、I-型凝集素等。

在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出的寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。

其反应机制如下图：凝集素在生化、医学等方面有广泛的应用：1.凝集素在实验室中经常被用来分离、纯化蛋白质植物凝集素的功能是结合细胞表面上的糖蛋白，动物凝集素的功能包括结合可溶性的细胞外或细胞内糖蛋白。

凝集素在实验室中经常用来分离、纯化糖蛋白。

这是由于植物凝集素能专一性地、非共价地可逆结合糖蛋白中不同类型的糖链结构，所以首先分别用凝集素亲和层析方法分离富集正常细胞和癌细胞的细胞裂解液中的糖蛋白，从细胞裂解物中高通量的分离出N-糖苷键型糖蛋白之后，再利用双向凝胶电泳技术对于被凝集素吸附的糖蛋白进行分离，最后利用质谱技术进行鉴定。

2.凝集素介导细胞与细胞、细胞与基质的粘附选凝素是一类Ca2+依赖的、能与特异糖基识别并结合的细胞粘附分子，主要介导白细胞与血管内皮细胞或血小板的识别和粘附。

细胞生物学实验报告一．实验名称：细胞凝集反应二．实验原理：细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被.目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。

凝集素(lectin)是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。

常用的为植物凝集素(Phytoagglutin， PNA）,通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A(Conconvalina,ConA）、麦胚素（Wheat germ agglutinin， WGA)、花生凝集素（Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin， SBA）等，凝集素是它们的总称。

凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们具有的某些“亲合”特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。

血型鉴别实验，也是凝集反应的一种。

三．实验用品：土豆块茎显微镜，粗天平，载玻片，滴管2支，离心管2支PBS缓冲液:称取NaCl7.2g，Na2HPO41。

48g，KH2PO40。

43g,加蒸馏水，定容至1000ml，调pH值到7.2.4。

2%的红细胞四．实验步骤：1.称取土豆去皮块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

2.以无菌方法抽取兔子静脉血液（加抗凝剂),加生理盐水3ml，在1000r/min，离心5min，重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。

3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分混匀。

4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片右孔内，充分混匀，做对照实验。

凝集反应实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过观察凝集反应的过程和结果，了解凝集反应的基本原理和特点，掌握凝集反应的实验方法和技巧。

二、实验原理。

凝集反应是指在特定条件下，抗原与抗体结合形成凝集物质的现象。

凝集反应的原理是抗原与抗体结合后形成免疫复合物，使得溶液中的颗粒物质凝聚成大颗粒，从而导致溶液浑浊或沉淀。

凝集反应是免疫学中常用的实验方法，也是许多免疫学检测方法的基础。

三、实验材料和方法。

1. 实验材料，抗原溶液、抗体溶液、生理盐水、试管、移液器、离心管等。

2. 实验方法：（1）取一定量的抗原溶液和抗体溶液分别加入不同的试管中；（2）将试管摇匀，使抗原和抗体充分混合；（3）观察试管中是否出现凝集物质，并记录下实验结果。

四、实验结果与分析。

经过实验观察，我们发现在抗原与抗体混合后，部分试管中出现了凝集物质，而另一部分试管中则未出现凝集物质。

这说明凝集反应的产生是由于抗原与抗体之间的特异性结合所致。

当抗原与抗体结合后，免疫复合物的形成导致了溶液中颗粒物质的凝聚，从而产生了凝集反应。

五、实验总结。

通过本次实验，我们对凝集反应的原理和特点有了更深入的了解。

凝集反应是一种重要的免疫学现象，它在许多免疫学检测方法中起着关键作用。

掌握凝集反应的实验方法和技巧，对于进一步开展免疫学研究具有重要意义。

六、实验注意事项。

1. 实验操作时要注意实验材料的保存和使用方法，避免污染和损坏；2. 实验过程中要严格按照实验方法进行操作，避免实验结果的偏差；3. 实验后要及时清洗和消毒实验器具，保持实验环境的整洁和卫生。

七、参考文献。

1. 张三，李四. 免疫学实验技术. 北京，科学出版社，2005.2. 王五，赵六. 免疫学实验指南. 上海，上海科学技术出版社，2008.以上就是本次凝集反应实验的实验报告，希望能对大家有所帮助。

一、实验目的1. 掌握凝集实验的基本原理和方法；2. 熟悉凝集实验的操作步骤；3. 通过实验，了解凝集反应在临床诊断中的应用。

二、实验原理凝集实验是一种基于抗原与抗体特异性结合的免疫学检测方法。

当抗原与相应抗体在适当条件下结合时，可形成肉眼可见的凝集现象。

凝集反应分为直接凝集反应和间接凝集反应两种。

直接凝集反应是指颗粒性抗原（如细菌、红细胞等）与相应抗体在体外直接结合而出现的凝集反应。

间接凝集反应是指将可溶性抗原预先吸附于一种与免疫无关的颗粒性载体表面，然后与相应的抗体结合，出现凝集现象。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：显微镜、玻片、试管、移液器、离心机、恒温水浴箱等；2. 试剂：抗原、抗体、生理盐水、0.85%NaCl溶液、抗凝剂、玻片洗涤液等。

四、实验步骤1. 直接凝集实验（1）取清洁玻片，用生理盐水滴加在玻片上；（2）用移液器取抗原，滴加在生理盐水滴中，混合均匀；（3）用移液器取抗体，滴加在抗原滴中，混合均匀；（4）观察凝集现象，记录结果。

2. 间接凝集实验（1）取清洁试管，加入适量的抗凝剂；（2）加入已知浓度的抗原，混匀；（3）用移液器取抗体，滴加在抗原溶液中，混匀；（4）加入与抗体结合的颗粒性载体，混匀；（5）观察凝集现象，记录结果。

五、实验结果与分析1. 直接凝集实验结果：观察到的凝集现象为红细胞或细菌在玻片上形成明显的团块。

2. 间接凝集实验结果：观察到的凝集现象为颗粒性载体在试管中形成明显的团块。

六、实验总结本次实验通过直接凝集和间接凝集实验，验证了凝集反应在免疫学检测中的应用。

实验结果表明，凝集反应可以有效地检测抗原与抗体之间的特异性结合。

在实际应用中，凝集实验可以用于病原微生物的鉴定、血型鉴定、血清学诊断等领域。

七、注意事项1. 实验过程中，注意操作规范，避免交叉污染；2. 实验试剂和仪器需保持清洁，避免污染；3. 观察凝集现象时，注意光线、角度等因素的影响；4. 实验结果记录准确，便于分析。

一、实验目的1. 了解细胞凝集反应的基本原理。

2. 掌握细胞凝集反应的实验操作方法。

3. 观察和分析细胞凝集现象。

二、实验原理细胞凝集反应是指细胞在特定条件下，由于细胞膜表面分子间的相互作用，导致细胞相互聚集的现象。

凝集反应在医学、生物学等领域具有重要的应用价值，如血型鉴定、病原体检测等。

本实验采用凝集素作为凝集剂，通过观察红细胞凝集现象，了解细胞凝集反应的基本原理。

三、实验材料与用品1. 试剂：红细胞悬液、PBS缓冲溶液、0.9%氯化钠溶液、不同浓度的凝集素溶液、蒸馏水。

2. 仪器：离心机、移液器、试管、显微镜等。

四、实验步骤1. 准备红细胞悬液：将一定量的红细胞加入适量的生理盐水中，混匀后离心，弃去上清液，加入适量PBS缓冲溶液重悬细胞。

2. 设置实验组：取3支试管，分别加入等量的红细胞悬液。

3. 加入凝集素：在第一支试管中加入一定量的低浓度凝集素溶液，第二支试管中加入等量的中浓度凝集素溶液，第三支试管中加入等量的高浓度凝集素溶液。

4. 观察细胞凝集现象：静置一段时间后，观察各试管中红细胞的凝集情况，记录结果。

5. 加入蒸馏水：取3支新的试管，分别加入等量的红细胞悬液。

6. 加入凝集素与抑制剂：在第一支试管中加入一定量的凝集素溶液和适量的抑制剂，第二支试管中加入等量的凝集素溶液和双倍量的抑制剂，第三支试管中加入等量的凝集素溶液和三倍量的抑制剂。

7. 观察细胞凝集现象：静置一段时间后，观察各试管中红细胞的凝集情况，记录结果。

五、实验结果与分析1. 实验组：随着凝集素浓度的增加，红细胞凝集现象逐渐明显。

低浓度凝集素溶液中红细胞凝集较少，中浓度凝集素溶液中红细胞凝集较多，高浓度凝集素溶液中红细胞几乎全部凝集。

2. 抑制剂组：在加入抑制剂后，红细胞凝集现象明显减弱。

当抑制剂浓度为凝集素浓度的1倍时，红细胞凝集现象减弱；当抑制剂浓度为凝集素浓度的2倍时，红细胞凝集现象进一步减弱；当抑制剂浓度为凝集素浓度的3倍时，红细胞几乎不发生凝集。

凝集试验实验报告凝集试验实验报告引言：凝集试验是一种常用的实验方法，用于检测血液凝集性的指标。

本次实验旨在通过凝集试验的操作和观察，了解血液凝集性的变化规律，并探讨其与人体健康状况的关系。

实验材料与方法：1. 实验材料：- 血液样本：采集自20名健康人士的静脉血样本。

- 凝集试验试剂：包括抗凝剂、红细胞凝集试剂等。

- 试验仪器：包括离心机、显微镜等。

2. 实验方法：- 步骤一：采集血液样本，并在离心机中离心10分钟，得到血浆。

- 步骤二：将血浆分成多个试管，并加入不同浓度的红细胞凝集试剂。

- 步骤三：观察试管中红细胞的凝集情况，记录下凝集程度。

- 步骤四：重复实验，得到多组数据，进行数据统计与分析。

实验结果与讨论：通过实验观察，我们得到了一系列关于血液凝集性的数据。

在红细胞凝集试剂浓度逐渐增加的情况下，我们观察到了血浆中红细胞的凝集现象。

随着试剂浓度的增加，红细胞凝集的程度也逐渐加强。

这表明，红细胞凝集性与试剂浓度呈正相关关系。

进一步分析数据，我们发现不同个体之间的血液凝集性存在差异。

有些人的血浆中红细胞凝集较为明显，而有些人则几乎没有凝集现象。

这可能与个体的生理状况、遗传因素等有关。

然而，本次实验的样本量较小，无法得出明确的结论。

未来的研究可以考虑扩大样本量，进一步探究血液凝集性与个体差异之间的关系。

此外，我们还观察到了血浆中红细胞凝集的时间变化规律。

在试剂加入后的最初几分钟，红细胞凝集的程度逐渐增加。

然而，随着时间的推移，凝集程度逐渐趋于稳定。

这可能是由于试剂与血浆中的某些成分发生反应，导致红细胞凝集的过程达到平衡。

这一发现为凝集试验的操作提供了一定的时间窗口，使实验操作更加灵活和方便。

结论：通过本次实验，我们了解了凝集试验的操作方法，并观察到了血液凝集性的变化规律。

血液凝集性与试剂浓度、个体差异以及时间等因素密切相关。

然而，本次实验仅为初步探索，还有许多问题有待进一步研究。

凝集试验作为一种常用的实验方法，在医学研究和临床诊断中具有重要的应用价值，未来的研究可以进一步深入探究血液凝集性与人体健康状况之间的关系，为疾病预防和治疗提供更多的参考依据。

姓名董朔晖系年级生命科学院2011级学号201100230164 科目细胞生物学实验实验题目细胞凝集反应日期2012.2.23实验一：细胞凝集反应一、实验目的1、了解细胞的表面结构。

2、掌握细胞凝集的原理。

3、掌握细胞凝集实验的操作方法。

4、掌握普通光学显微镜的使用方法。

二、实验材料1、实验材料家兔（或2%家兔红细胞悬液）、土豆块茎（或由土豆块茎制作的可溶性土豆凝集素粗提取液）、PBS缓冲溶液（磷酸缓冲溶液）、柠檬酸钠溶液、0.9%的氯化钠溶液（生理盐水）2、实验器材5ml注射器、酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管三、实验原理1、在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（糖萼）。

目前认为，细胞间的联系、细胞的生长和分化、肿瘤的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。

2、凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，即糖蛋白，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的作用，从而凝集细胞。

凝集素引起的细胞凝集，其细胞膜结构没有发生改变。

与血液凝固中发生的复杂生化反应完全不同。

3、竞争性抑制实验：凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞凝集。

四、实验步骤1、2%家兔红细胞悬液制备：以无菌方法抽取家兔耳缘静脉血液1ml （5ml注射器中先吸取3ml柠檬酸钠溶液），用0.9%的氯化钠溶液洗5次，3000r/s离心5min，最后按沉淀的红细胞体积用0.9%的氯化钠溶液配成2%的红细胞悬液。

2、土豆凝集素制备：称取去皮土豆块茎2g，切成薄片，加10mlPBS 缓冲液，浸泡2h，浸出粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

3、细胞凝集反应：双凹片土左侧滴土豆凝集素1滴，2%家兔红细胞悬液1滴；右侧滴PBS缓冲液1滴，2%家兔红细胞悬液1滴。

在双凹片上混匀，摇动。

4、低倍镜下观察。

五、实验结果1、实验结论2、实验照片①、肉眼观察实验组对照组加入土豆凝集素的红细胞5min 加入土豆凝集素的红细胞5min加入土豆凝集素的红细胞10min 加入土豆凝集素的红细胞10min ②、低倍镜观察（10×4）实验组对照组加入土豆凝集素的红细胞10min 加入土豆凝集素的红细胞10min六、实验反思1、在使用双凹片的过程中因操作不熟练，经常造成两个孔中的液体混合。

实验三ABO血型鉴定一、实验目的1、学习鉴别血型的方法2、观察红细胞凝集现象二、实验原理血型是指红细胞的血型，是根据存在于红细胞膜外表面的特异性抗原来确定的，这种抗原是由遗传基因决定的。

血清中的抗体可与红细胞膜上的不同抗原结合，产生凝集反应，最后发生红细胞的溶解。

ABO血型系统根据受试者红细胞上是否含有凝集原和凝集原的种类，将血型分为A, B, O及AB型。

ABO血型鉴定是将受试者红细胞分别加入到标准A型血清、标准B型血清中进行鉴定。

三、实验材料一次性采血针、消毒牙签、玻璃棒、标准抗A血清、标准抗B血清、75%酒精、酒精棉球、载玻片四、实验步骤1、将载玻片洗干净，擦干，不能留有水分，以防溶血。

2、在载玻片上滴上抗A血清、抗B血清。

旁边放置两个消毒牙签。

3、用酒精棉球消毒无名指，等酒精挥发后，用采血针采血，将血液分别滴入血清中，再用牙签混合，室温下静置10~15分钟，观察凝集现象。

五、试验结果1、只在抗A血清中有凝集反应，则血型为A型；2、只在抗B血清中有凝集反应，则血型为B型；3、在抗A及抗B血清中均有凝集反应，则血型为AB型；4、在抗A及抗B血清中均无凝集反应，则血型为O型。

3、通过活动，使学生养成博览群书的好习惯。

B比率分析法和比较分析法不能测算出各因素的影响程度。

√C采用约当产量比例法，分配原材料费用与分配加工费用所用的完工率都是一致的。

ＸC采用直接分配法分配辅助生产费用时，应考虑各辅助生产车间之间相互提供产品或劳务的情况。

错C产品的实际生产成本包括废品损失和停工损失。

√C成本报表是对外报告的会计报表。

×C成本分析的首要程序是发现问题、分析原因。

×C成本会计的对象是指成本核算。

×C成本计算的辅助方法一般应与基本方法结合使用而不单独使用。

√C成本计算方法中的最基本的方法是分步法。

XD当车间生产多种产品时，“废品损失”、“停工损失”的借方余额，月末均直接记入该产品的产品成本中。