电化学指纹图谱

S1 S2 S3 S4 S5 对照指纹图谱
1.000 0.997 0.995 0.995 0.997 0.998
0.997 1.000 0.998 0.997 0.996 0.999
0.995 0.998 1.000 0.998 0.991 0.999
0.995 0.997 0.998 1.000 0.990 0.999
♦ 液相色谱 ● 色谱柱：比较试验加以选择
流动相：至少用三种不同组成比较
流动相 1
流动相 2
流动相 3
适宜的柱温和检测波长
15 203
20
210
25
236
30
254
35
365
五、方法学验证
1. 稳定性试验
供试品溶液的稳定性
表3 川芎指纹图谱稳定性试验相似度计算结果（n=5）
对照指纹图谱 S1 S2 S3 S4 S5
红外光谱图
小蓟丁酮提取物的红外 指纹图谱
• 中国药典规定：小 蓟在开花时采。 • 根据1384cm-1处 吸收峰的有无，可 以鉴别其采集时间 是否正确。
质谱（ＭＳ）
• 按照带电粒子的质荷比（ｍ／ｚ）和其相 对丰度大小排列组成图谱。 • 中药特征提取物置质谱仪中进行轰击裂解 为不同的碎片，获得提取物中化学成分的 MS图，不同中药由于所含化学成分的种类 及组成比例的不同，所得质谱图中分子离 子峰和碎片离子峰亦不一致。
HPCE, CE/MS 光谱技术 UV IR
波谱技术 MS NMR X-射线衍射法 分子生物学技术
薄层色谱
●可在同板同时分析多达18个样品， ●展距局限在 10cm~20cm ，‘柱效’ 时效高 相对较低，对复杂组分 ●所用的是正相展开剂，其组成变 不提高分离度则难以提 化灵活，可适应多种成分的分离 取指纹特征的药材受到 限制。 ●离线操作，即可直观比较图谱， 又可扫描得到轮廓图和处理数据 ●开放系统，对环境温 度、相对湿度要求较高 ●占机时间短

与 经 典 的色 谱 法 相 比 ，对 药 材 的需 求 量较 少 ，预 处
［ 基金 项 目］ 国家科 技支撑计划 （０ １ Ａ Ｂ ０ ， 国许 氏基 金（ ０ １ １ ２ ｌＢ 阱 ０ ） 美 ２０ ３ ） ［ 通讯 作者 ］ 程 旺兴 ，ｅ：０５ ） １９ ３ ， － ａ ： ｅｇ ａｇｉｇ ｍ ｉ ｃｍ Ｔ ｌ（５ １ ５６ ２ ０ Ｅ ｍ ｉ ｅ ｎｗ ｎ ｘ ＠ｇ ａ ．ｏ ｌｈ ｎ ｌ
ｇｓ ｏ ｉ） 上 。。 ａｔ ｄｎ ｒ 。
恒 温 磁 力 搅 拌 器 （ 苏 金 坛 市 金 城 国 胜 实 验 仪 器 江
厂） １ ，２ ３型金 属 铂 电极 （ 津 市 兰标 科 技 发展 有 限 天
公 司 ）为工 作 电极 ，２ ７型 甘汞 电极 （ 津市 兰标科 １ 天 技 发 展有 限公 司 ） 为参 比 电极 。
天麻 （ ａｔ ｄａ ｈｚｍａ 又 名 赤 箭 、定 风 草 、 Ｇ ｓ ｏｉｅＲ ｉ ｒ ｏ ） 独 摇 芝 ，为 兰 科 （ ｒｈｄ ｃａ ） 植 物 天 麻 Ｇ ｓｏ ｉ Ｏ ｃ ｉａｅｅ ａｔ ｄａ ｒ
理 简单 ，成 本低 ，而 且 检测 的是 中药 材 中所 有 化 学 成分 对振 荡 反 应 的作 用 ，适 用 于 含有 能 作 为 Ｂｚ振 ． 荡 反应 底 物 的成 分 复 杂 的 中药 材 及 中药 制 剂 的鉴 别 与评 价 。
系 中 的 Ｈ２ Ｏ ， Ｍ Ｓ ４ Ｈ Ｃ Ｃ Ｓ ４ ｎ Ｏ ，Ｃ ３ Ｏ Ｈ３和 Ｋ ｒ ３这 ４ ＢＯ 种 试 剂 的体 积 与浓 度 ，只 改变 加 入 中药 的种 类 和质
海 振企 化学 试剂 有 限公 司 ） ，硫 酸 锰 （ 国药 集 团化 学 试 剂有 限公 司 ） ，溴 酸钾 （ 津 市永 大 化 学 试 剂 开发 天

代表性 均一性
10批以上中药
预处理
中药未 知检品
图谱测试、相似度评价 方法检验
评价标准
图
药效学试验
谱
相关性
评
价ห้องสมุดไป่ตู้
供试品溶液
选择测试条件 方法建立考察
中药指纹图谱
测定图谱参数
图谱分析
图谱信息
不同产地、采收期 和加工炮制的中药
一、样品收集
1. 最关键的步骤 真实性 代表性 2. 10批以上 3. 原药材 ：不同产地、不同采收季节等
共有峰数×2 重叠率=
指纹图谱峰数+供试品峰数
×100%
重叠率和相似率计算
供试品图谱中特征指纹峰面积 特征指纹峰相似率= 指纹图谱中特征指纹峰面积×100%
中药注射剂指纹图谱的评价
➢以指纹图谱相似度评价软件评价 中间体和注射剂指纹图谱的相似度应不低
于0.90。 ➢以色谱峰面积的比值评价
峰面积比值的要求： ➢保留时间小于或等于30分钟的共有峰：
指纹图谱中应包含的信息
1. 对于中药材和中药饮片：种的共性，用药 部位的共性，产地的个性，采收期、炮制 方法的个性信息。
2. 对于半成品和中药制剂：原药材（甚至辅 料）的信息；工艺信息等。
3. 药效信息：药效信息。
中药指纹图谱构建方法
TLC
色谱技术 HPLC, LC/MS
GC, GC/MS
HPCE, CE/MS 光谱技术 UV IR 波谱技术 MS NMR X-射线衍射法 分子生物学技术
三、对照品（参照物）溶液制备
1. 参照物的选择 ①道地药材/饮片 半成品 通常为主要成分 主要活性成分或指标成分
制剂
考察指纹图谱的稳定程度和重现性，有助于指纹 图谱确认。

ຫໍສະໝຸດ 电化学指纹图谱用于中药定量分析

实验表明，特征参数诱导时间、最大振幅均能作为 定量分析的参数，均与甘草的用量呈良好的线性关 系。
面临的问题？？？
药材生产供应、流通领域的混乱对指纹图谱
的研究是不利的，用多种来源的药材很难制 定稳定的指纹图谱。 从药材提取分离到分析检测全过程的标准化、 规范化程度不够，影响实验室之间的重现性。 除中药注射剂外，大部分中药制剂生产工艺 简单粗糙，杂质较多，即难以保证产品的稳 定，更无法提供高的质量。
不同粉末粒度的薄荷电化学指纹图谱(单位：mm)
(a)0.20~0.45 (b)0.15~0.20 (c)0.10~0.15 (d)0.075~0.10
电化学指纹图谱用于中药的鉴别
以上结果表明，不同中药作为底物的化
学振荡反应体系，可以获得各具特色的 中药电化学指纹图谱，可进行中药的鉴 别和检测。
电化学指纹图谱
常见的中药指纹图谱
高效液相色谱指纹图谱 气相色谱指纹图谱 薄层色谱指纹图谱 高速逆流色谱指纹图谱 毛细管电泳指纹图谱 红外光谱指纹图谱
色谱指纹图谱局限性
液相色谱仅适用于真溶液体系；气相色谱仅适用于 中药挥发性成分分析 定性和定量参数一般只有保留值和峰强度，色谱峰 形也很少变化，因而其特征直观性不强，需进行数 据处理后鉴别和评价中药； 色谱技术不能直接用于成药和固体天然药物指纹图 谱的测定，测定前必须对其成分进行提取、分离等 预处理，因而繁琐、操作流程长、试剂消耗量大， 分析费用高，还引入杂质，提取的部分已不能代表 中药的全部成分。 -------因此，色谱指纹图谱仅适用于中药注射液和口 服真溶液。
电化学指纹图谱
不加入中药时获得的纯B-Z振荡体系的E-t曲线， 因持续振荡时间超过4h，故只截取部分E-t曲线

第２ ９卷 第 ６期
２ １ 年 １ ０１ １月
佳 木 斯 大 学 学 报 （ 自 然 科 学 版 ）
Ｊｕ ａ ｏ Ｊ ｍｕｉ ｎｖｒｉ Ｎ ｔｒ ｃ ｎ ｅ ｄｔ ｎ ｏｒ ｌ ｆ ｉ ｓ Ｕ ｉ ｓｙ（ ａ ａ Ｓ ｉ ｃ ｉｏ ） ｎ ａ ｅ ｔ ｕｌ ｅ Ｅ ｉ
Ｖｏ ． ９ Ｎｏ ６ １２ ．
莉 ， 李守君
摘
要 ： 目的 ： 立一种 对草 药不 同入 药部 位进行 质 量评 价 的 电化 学指 纹 图谱 方 法． 建 方法 ： 用 采
Ｈ 一 ｎ —Ｃ Ｏ Ｈ 一ＢＯ－为振 荡体 系 ， Ｍｎ Ｈ Ｃ Ｃ ｒ３ 以待测 草药 为反 应底 物 ， 用 电化 学工作站 记 录化 应 学振 荡体 系 中的 电位 随 时 间的 变化 ， 获得 草药 电化 学指 纹 图谱 ， 用指 纹 图谱 的特征参数 进行 质 利
第 ６期
张艳秋 ， ： 等 七种 中草 药电化 学指纹 图谱研 究
８１ ９
３ ２ 底物量 的考 察 ．
由实验结 果可 知 ， 样 量为 ０ ８ ０ ０ ０ ０ ｇ 取 ． ０ ０± ． ０ ２
时， 图形 最佳 ． 以下 均 以此量 为草 药底物 的测定量 ．
针 对 每种 草药按 照实 验 方法 测 定 不 同质 量 的 草药电化学指纹图谱 ， 以实验结果 中的诱导时间对 底物浓度作图 ， 呈现负线性关 系， 相关系数值均在 ０９ ．９以上 ． 以藜 芦为例 ， 得诱 导 时 间 对底 物 浓度 所 的关系如图 １ 所示 ， 经线性回归分析的线性方程 Ｙ １４ ． Ｘ＋２ ６ ， ９９ ８ ６ ９ Ｒ＝０ ９ ７ ， 见 ， ．９ ２ 可 取样 量 在 ０３ ．ｇ一１３ ．ｇ范 围 内 线 性 关 系 良好 ． 加 底 物 的浓 增 度促进反应进行 ， 使反应速率加快 ， 诱导时间变小． 有报道称， 电化学指纹图谱中诱导时间是分析 中药 成分 或 电活 性成 分 的含 量 ，乃 至 评 价 中药 质量 首 选 的定 量指标 或评价 参数 ． 由此我们 可 以根据诱 导 时间的长短来确定底物有效成分含量的高低．

色谱柱的冲洗和预平衡：
第25页/共29页
正常使用前后色谱柱要强溶剂冲洗
• 参考图5-23，5-24 • “污物”在柱进口处积聚，柱压高等问题，用纯溶剂（甲醇、乙腈）正冲，
反冲。当柱子过“脏”时，正相柱可用甲醇（可加少量水）；反相柱可用异 丙醇加甲醇冲洗；96%二氯甲烷+4%甲醇+1%氢氧化铵20倍柱体积25cm 的柱子大约50ml
次预实验,然后按照一定速度(20%)降低强溶剂的比例。
第15页/共29页
确定方法的有效性
• 在精密度、方法可重复性及样品稳定性分析中由五次进样所得共有峰的峰面积和峰保留时间的相对标准偏 差来确定。
• 由此确定仪器和进样精密度如何，提取方法，仪器状态，色谱条件是否适用。并确保溶液在规定温度条件 下48小时内稳定。
查阅文献名称 • 中药指纹图谱在中药质量控制中的应用—王乐 • 高效液相色谱数字化定量指纹图谱评价维C银翘片的中药 组分物质均一
性 —邵艳玲 • 地黄基于HPLC指纹图谱的质量评价及种质资源利用研究—曹建军 • 人参药材HPLC指纹图谱和高端保健品多维指纹图谱的研究—苑若瑶 • 六味地黄浓缩丸HPLC指纹图谱研究—高新彪 • 黄芎抗栓胶囊指纹图谱的研究_冯艺戎 • 高效液相色谱法同时测定黄芎抗栓胶囊中5种大黄成分的含量_韩燕全 • 仙鹤草质量控制方法的研究_丁蓓蓓
第24页/共29页
用良好的流动相条件，包括PH、缓冲溶液 种类及浓度、添加剂，尽量减小硅胶基质 的“次级作用”。
流动相的配制方法：20mMol磷酸钠缓冲液：HCN（9：1）9体积的磷酸钠缓冲 液加1体积的HCN溶液混合。脱气方法应一致 缓冲溶液的配制方法：天平定量称量，定容到一定体积最准。如需控制PH值时应 使用酸度计，添加好的酸碱。

ＨＥＩ ＬＯＮＧＪＡＮＧ ＥＤＩ ＮＥ ＡＮＤ ＨＡＲＭ ＡＣＹ ｇ ２ １ Ｖｏ． ３Ｎｏ ２ Ｉ Ｍ ＣＩ Ｐ Ａｕ ． ０ ０， １３ ．
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
・２ ・ １
中药 大黄 电化 学指纹 图谱 研究
张秀 莉 佟德成 。李守 君。黄 金宝 张艳 秋。 ， ， ， ，
（． １ 大庆 市 第 四 医 院 ， 龙 江 大庆 １３ ０ ￣． 木 斯 大 学 药 学 院 ， 黑 ６ ００ ２ 佳 黑龙 江 省 生 物 药制 剂 重点 实验 室 ， 龙 江 佳 木斯 １４ ０ ） 黑 ５０ ７
摘要 ： 目的 ： 用 Ｂ 利 Ｚ化 学振 荡技 术 研 究 大黄 电化 学指 纹 图谱 。 法 ： Ｈ２Ｏ 一ＫＢ０３ 方 以 Ｓ ｒ 一Ｍｎ Ｏ 一Ｃ Ｃ Ｃ 。 化 学振 荡 Ｓ 。 Ｈ３ Ｏ Ｈ 为 反 应 体 系 ， 用 电化 学工 作 站 记 录振 荡 体 系 中的 电 位 （ 随 时 间 （） 变化 ． 获得 中药 大 黄 电化 学 指 纹 图谱 。 应 Ｅ） ｔ的 即 结果 ： 大黄 与 山 大黄 电 化 学 指 纹 图谱 的 诱 波 形 、 荡 波 形 及 其 特征 参 数 均 存 在 明 显 差 异 。 论 ： 用该 方 法 可 以 简 便 、 速 、 观 地 对 大黄 与 振 结 应 快 直
山 大黄 进 行 区别 鉴 定 。
关键词 ： 电化 学指 纹 图谱 ； 别 ； 黄 ； 大黄 鉴 大 山 中 图 分 类 号 ： ２ ４ 文献 标 识 码 ： Ｒ８ Ａ 文章 编 号 ： ０ ８ １ ４ ２ １ ） ２ ０ １ ０ １ ０ —０ ０ （ ０ Ｏ ０ —０ ２ — １ 大 黄 为 大 黄 同属 他 种 植 物 的 根 及根 茎 ， 要 来 源 于 大 黄 主 属 华 北 大 黄 Ｒｈｕ ａｚｎ ａｈｉ ｎ 、 套 大 黄 Ｒ ｅｍ ｏ ｅ ｍ ｔ ｎｅｂｃ ｉＭｕ ｔ河 ｒ ｈｕ ｈ － ｔｏ ｎ ｅＣ ａ ｅ ｓ ．Ｙ ｈ ｎ ｔ ．Ｔ．Ｋａ 、 边 大 黄 Ｒｈ ｕ ｍｏ ｉ ．Ｃ ｅ ｇ ｅ Ｃ ｏ藏 ｅｍ ｅ ｄ ｗａ 和 波 叶 大 黄 Ｒ ｅ ｍ ｕｄ ｌ ｕ Ｌ 。 品大 黄 具 有 较 强 的 ｌ ｌ ｈｕ ｎ ｕａ ｍ ． 正 ｔ ＞ 致 泻作 用 ， 山 大 黄具 有 收敛 止 血 、 热 消炎 的作 用 ， 下 功 而 清 泻 山 能 较 弱 ， 作 外 用 或 兽 药 ［。 年 大 黄 药 源供 不 应 求 ， 场 价 多 １近 ］ 市 格 高， 山大 黄 价 格 低 廉 ， 大黄 与 山 大 黄 的外 观 极 为 相 似 ， 且 市 场 上 常 见 以 山 大 黄 来 代 替 大 黄 出售 ， 此 ． 大 黄 与 山 大 黄 因 对 ｔ／ ｓ 进 行 鉴 别 甚 为 重 要 。 黄 及 山 大 黄 的 鉴 别 方 法 包 括 外 观 性 大 状 、 微 特 征 及薄 层 色 谱 法 、 外 光 谱 法 等 ［ ］许 多 现 代 仪 显 红 ２。 图２ 山大 黄 电化 学 指 纹 图谱 器 分 析 方 法 均 需 对 药 材 进 行 提 取 分 离 。 时 耗 试 剂 难 以普 遍 耗 表 １ 大 黄 与 山大 黄 电化 学 指 纹 图 谱 特 征 参数 比较 推 广¨ 。 化 学 指 纹 图 谱 不 需 要 复 杂 的 预 处 理 ， 简 便 快 捷 ］电 可 对 各 种 中药 进 行 鉴 定 和质 量 评 价 ， 中 药 指 纹 图谱 技 术 的 补 是 充 和 发 展 ［ ］电 化 学 指纹 图谱 所 具 有 的 “ 纹 ” 性 ， 来 越 ５。 指 特 越 受人们 的重视 ， 已用 于 中 药 分 析 鉴 别 领 域 ［。 文 应 用 电 化 ２ ３ 电化 学 指 纹 图 谱 的重 现 性 及 精 密 度 ７本 ］ ． 学 指 纹 图谱 可 以有 效 地 鉴别 大 黄 与 山 大黄 。 按 照 ２ １ 验 条 件 分 别 对 大 黄 和 山大 黄平 行 测 定 ２ ， ．实 次 电 １ 仪 器 、 剂 与 材 料 试 化 学 指 纹 图 谱诱 导 时 间 曲 线 及 振 荡 波 形 基 本 重 合 ， 化 学 指 电 Ｌ ０ ５ 化 学 工 作 站 （ 津 市 兰 力 科 化 学 电 子 高 科 技 纹 图 谱 的 各 种 信 息 指 标 基 本 相 同 ， ＭＡＴＬ Ｋ２ ０ 电 天 经 ＡＢ 计算 其 图谱 有 限 公 司 ） Ｂ ２ １ 型十 万 分 之 一 天平 （ 国 Ｓ ｒ ｒ ｓ ； 的 相 关 系数 和 夹 角 余 弦 均 在 ０ ９ 上 ， 果 表 明 获得 的 电 化 ；Ｐ １Ｄ 德 ａｔ ｉ ）ＨＫ ｏｕ ．以 结 ２ 超 级 恒 温 水 浴 （ 波 海 曙 天 恒 仪 器 厂 ） ２ ３ 铂 电 极 学 指纹 图谱 具 有 良好 重 现 性 。 Ａ 宁 ；１型 （ 上海 精 密 科 学 仪器 有 限公 司 ）２ ７ 双 液 接 甘 汞 电极 （ 海 ，１ 型 上 按 照２ １ 实 验 条 件 。 确 称 取 山 大 黄 粉 末 １ ００ ， 续 ．的 精 ． ０ｇ 连 精 密 科 学 仪 器 有 限 公 司 ） 硫 酸 ， 酸锰 ， 酮 ， 酸钾 等 实 验 测定５ ， ； 硫 丙 溴 次 电化 学指纹 图谱 特征参数诱 导时 间、 荡周 期、 振 振 所 用 试 剂 均 为 分 析纯 。 有 溶 液 均 以 二 次 蒸 馏 水 配 制 。 黄 幅 和最 高 电 位 精 密 度 均 ≤ ２ ６ （ 表 ２ 。 果 表 明 ， 所 大 ． 见 ）结 电化 学 与 山 大 黄 购 于 药材 市场 。 工 作站 及 电化 学 振 荡 反应 系统 精 密 度 良好 。 得 的 电 化学 指 获 ２ 方 法 与 结 果 纹 图谱 稳 定 ， 验 数 据 可 靠 。 实

摘 要 目的 ： 立 苍 术 的 电 化 学指 纹 图谱 ， 与 白术 进 行 比 建 并
较 。 方 法 ： Ｈ２ Ｏ４ Ｃ Ｃ 以 Ｓ 一 Ｈ３ ＯＣＨ３ Ｍｎ Ｏ４ ＫＢ Ｏ 一 ｓ 一 ｒ ３为 化 学
药提供 了依 据 。
１ 药 品 、 剂 与 仪 器 试
振 荡体 系、 中药 苍 术 为 振 荡底 物 ， 用 电 化 学 工 作 站 记 录 电 应
位 （ 随 时 间 （） 变 化 ， 制 化 学 振 荡 曲 线 。 结 果 ： 到 了 Ｅ） ｔ的 绘 得 苍 术 的 电化 学 指 纹 图谱。反 应 在 诱 导 期 活 化 能 为
７ ． ８ ｋ／ ｌ 振 荡 期 活 化 能 为 ７ ． ９ ｋ／ ｏ 。 浓 度 与 诱 导 ３ ２ Ｊ ｍｏ 、 Ｏ ６ Ｊｔ ｌ ｏ
杂 志 ，０ ０，０ ８ ６ ６ ２ ０ ２ （ ）：０ ．
［］ ２ 王学 瑞 ． 机 体 的 非 特 异 性 功 能 损 伤 ［ ］ 医 学 与 哲 学 ， 谈 Ｊ．
２ ０ ２ （ ） １—３ ０ ２， ３ １ ： ．
［ Ｇｉ Ｊ Ｒｓｍａ Ｆ Ｍａｔｃｌ ｎ ｔｅ ｎ ｏ ａｅ ｍｕｋ ｓｒｗ ３］ ｌ Ｃ ， ｉｓ ｎ Ｅ ． ｓ ｅｌ ｉ ｈ ｅ ｎ ｔ ｌ ｓ ｓ ｈｅ
进 行 鉴 别 的方 法 主 要 有 显 微 鉴 别 、 化 鉴 别 及 薄 层 理
将 草 药 烘 干 至 恒 重 ， 碎 ， 到 粒 径 小 于 粉 得
・
药 学 研 究
・
苍 术 电化 学 指 纹 图谱 实验 研 究
邹 桂 华 李 守君 沈 广 志 ， ，
（ ． 丹 江 医 学 院 药 学 院 ， 龙 江 牡 丹 江 １７ １ ； ． 木 斯 大 学 药 学 院 ， 龙 江 佳 木 斯 １４ ０ ） １牡 黑 ５ ０ ２ 佳 １ 黑 ５ ０ ７

荧光光谱分析法 （AFS）
AFS的基本原理是蒸汽状态的原子因吸收能量而跃迁至高能态，并在这个过程 中发射出具有固定波长的荧光。
中草药因大多含有发光性组分而具有特征的荧光光谱。因此可利用发光标记、 被测物本身发光性质、分子组装、能量转移原理等分离鉴定药物有效成分。如中药 材的荧光鉴定、中药注射液等的药物鉴别、以及荧光分析及其连用技术用于测定中 药有效成分。
中药指纹图谱构建及 质量评价技术
姓名：曹瑞致 学号：2015051655 专业：中药学
中药指纹图谱的构建 中药指纹图谱的活性标识 中药指纹图谱的评价技术
中药指纹图谱研究中的关 键问题
制定特征中药指纹是质量控制的有效途径，是保证中药安全有效的中药环节
中药指纹图谱制定的两个步骤
初 级 阶 段
中药材指纹图谱 提取物指纹图谱
。
高效薄层色谱法是指利用特殊材质的薄层板和展开技术来提高薄层色谱的灵敏 度和准确度，从而有效提高构建指纹图谱的效率。
薄层板
毛细管电泳（CE）
是色谱与电泳结合发展的产物。又称高效毛细管电泳（ high performance capillary electrophoresis HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电 场为驱动力的新型液相分离技术。高效毛细电泳法的工作原理是利用高压直流电场 推动中药样品在毛细管中运动，由于样品中各组分的淌度和分配行为的不同，导致 不同组分在毛细管中产生运动上的差异，从而实现分离的一种技术。 优点是分离效率高、快速、适用面宽，模式多样且易于变换，运行费用低，无环境 污染。特别适用于成分复杂的中药材和带电离子的分析。将其运用于中药的指纹图 谱的研究，已取得可观的成绩。但利用电泳机制在毛细管中进行分离使得该方法的 精确性和灵敏度较低，所以目前的使用并不是很广泛。

分 别 取 两 份 枣 花 蜜 各 ２ ０ｇ溶 解 于 １ ． ５ ０ｍＬ蒸 馏 水 中， 分别添加 １ 再 粉 和 ０４２ｇ蔗 糖 ， ｇ淀 ． ３ 配成 掺 杂
的蜂 蜜样 液 。
严 格控 制 实验 条件 ， 以上两 个 系 列 的样 品 保 使 持 在 相 同条件 下 进行 反应 。操作 方 法 如下 ： 启 非 开 线 性 化 学 指 纹 图谱 智 能分 析 仪 和 与 之 相 连 接 的 数 据 采集 计算 机 ， 定 反应 条 件 ， 设 待仪 器稳 定 后 ， 确 准
２ 实验 部 分
２１ 材料 与试 剂 ．
硫酸 、 硫酸锰 、 溴酸钠、 丙酮 、 葡萄糖 、 果糖等试剂
均 为分析纯 ； 槐花蜜 、 紫云英 蜜 、 茶花蜜 、 花蜜 、 姜 枣 生 蜜均 为在商店购买 的瓶装蜂蜜 ， 水为二次蒸馏水 。
２２ 仪 器与设 备 ＿
振 荡 体 系在 ３ ７℃恒 温水 浴 下反 应 ，启 动计 算 软 件 进 行绘 图 ，准确 计 时 ５ ｉ ，向反 应 体 系注 入 在 ｍｎ后 ３ ７℃恒温 好 的 ３ｍ Ｌ溴 酸钠 溶液 （． ｍ ｌ ）继 续 记 Ｏ８ ｏ Ｌ， ／
Ｋ ｅ ｗｏｒ ｓ： ｎ ｎｌ ａ ｈｅ ｓｒ ｎ ｅ ｐ ｉ ｔｓ ｅ ｔｕｍ；ｈ ｎ ｙ ｆｕ ｔｓ ； ｌ ｏ ｅ ｓｍｉａｉｙｔ ｅ ｒ ｙ ｄ ｏ ｉ ｒ ｃ ｍｉｔｙｆ ｇ ｒ ｒｎ ｐ ｃｒ ｎｅ ｉ ｏ ｅ ； ｒ ｃｏ ｅ ｇｕｃ ｓ ； ｉ ｌｒｔ ｈ ｏ ｙ
蜂 蜜 中糖 含量 的测 定 研 究 很 多 ， 文胜 【 人 用 高 盛 ｌ 】 等
反 应体 系 中组 分 发生 的作 用 不 同 ， 而 引起 诱 导 和 从
配制 ９个 模 拟蜂 蜜样 品 ： 取 九组 不 同 质量 的 称 葡萄糖 一果糖 ｆ ｛ 羊品编号及 葡 萄糖 一果 糖 的质量 均 列 出在 表 １中）溶 解 于 １ ， ０ｍＬ蒸 馏 水 中 ， 配成 九 组

=收稿日期>2010206218=基金项目>重庆发酵床零排放养猪关键技术研究与示范(09505);重庆畜牧科学院基本科研项目猪粪便快腐菌剂筛选的研究(09609)=作者简介>杨柳(19762),男,博士,从事兽医微生物研究工作,Em ai:lyangliuldz @163.co m ;付利芝,通讯作者,Em ai:l flzf u liz h i @文章编号:10052376X(2010)0920845203=综 述>ERIC 2PC R 及其指纹图谱技术的研究杨柳,张邑帆,郑华,李大军,杨金龙,杨睿,付利芝(重庆市畜牧科学院,重庆荣昌 402460)=摘要> 肠杆菌基因间重复共有序列(Enterobacterial repe titive i ntergen ic consensus ,ER I C )是主要存在于肠道细菌中的一类基因间重复序列,长度为127bp ,该序列在肠道细菌染色体上的分布和拷贝数有种间的特异性。

根据ER I C 序列建立的ER I C 2PCR 实际上是一种半随机性质的PCR,广泛应用于细菌分型、流行病学调查和分子微生态学研究。

本文简介了ER I C 2PCR 反应的特点及其应用的原理,详细阐述目前广泛应用的ER I C 2PCR 琼脂糖凝胶电泳(PCR 2PCR 2AGE )技术的不足,指出该方法所获电泳图谱中相同位置的D NA 条带可能包括不同的D NA 序列,指纹图谱分析时可能夸大模板DNA 的相似性。

强调ER I C 2PCR 变性梯度凝胶电泳(PCR 2PCR 2D GGE )技术是其应用的一个新方向,所得的指纹图谱能够更加敏感、准确、有效地展示底物序列的差异,其中的DNA 条带不需测序就可直接用于科研和生产实践中。

=关键词> ER IC ;PCR 2PCR 2AGE ;PCR 2PCR 2DG GE ;指纹图谱=中图分类号>R 23 =文献标识码>AER IC 2PCR and its fi n gerp r i n tingY ANG L i u ,Z HA NG Y i 2fan ,Z H E NG H ua ,LI Da 2j u n ,YANG Ji n 2long ,YANG Ru,i FU L i 2z h i(Chongqing Acade my o f Ani m a l S cience ,R on g chang Chongqing 402460,China )=Ab stra ct > Enterobac terial repe titive i ntergen ic consensus ,ER I C,is a k i nd of dispersed repetiti ve D NA sequence found in the geno m e of entero bacter i a .ER IC has 127bp and its d i str i butio n and copy nu m be rs are spec ies 2spec ific in enter 2obacter i a l chro m oso m e .ER I C 2PCR des i gned fro m the sequence of ER I C act ua lly is ha lf rando m PCR,and s u itable for the bacter ial c l assifi catio n ,ep i de m i olo gical i nvesti ga ti on and the structure of an m i c robial co mmun ity .In t h is pape r ,we re 2vie wed ER IC 2PCR feature and its app licati on ,and pointed out that the DN A bands w it h identica l positi ons i n fi nge rprint based o n t he agarose gel e l ectrophoresis (AGE)patte rns of ER I C 2PCR a m plified products can conta i n d iffe rent sequences ,which could possibly exagge ra te t he si m ilarities or d i versities a m o ng sa m ples usi ng d i versity i ndex .H o wever ,the ER I C 2PCR fi ngerpr i nt based on denaturi ng grad ient ge l electrophoresi s gel e lectro phoresis (DGGE)pa tterns can sentitively ,ex 2actl y and e ffecti ve l y sho w the difference of temp l e te D NA ;the DNA bands i n th i s fi ngerpr i nt do not need to be c l oned ,se 2quenced ,and can be directl y used in sc i entifi c resea rch and pro duc i ng prac tice .=K ey w or ds > ER IC ;PCR 2PCR 2AGE ;PCR 2PCR 2DGGE ;F i nge rpri n t肠杆菌基因间重复共有序列(enterobacter i a l repetitive i n 2tergen i c consensus,ER IC)首次由S HARPLES 等[1]于1990年在E.coli 中发现,命名为/基因间重复单位0(i ntergen ic repeat unit ,IRU )。

不同产地木通的电化学指纹图谱研究陈龙梗;李欢欢;石慧慧;刘亚伟;杨青山;程旺兴【摘要】目的:研究中药木通的电化学指纹图谱,考察反应温度、药材加入量等影响因素,并用电化学指纹图谱对不同产地中药木通进行鉴别.方法:采用B-Z震荡技术,将木通粉末加入以丙二酸为耗散物的Br03-+H++ Ce4+丙二酸振荡体系中,用电化学工作站记录数据,用Origin软件绘制电位(E)随时间(t)变化的曲线,计算数据,分析图谱.结果:考察了不同条件对B-Z振荡图谱的影响,获得了不同产地木通的电化学指纹图谱,并对其电化学指纹图谱进行了探讨.确定最佳实验条件为:温度310 K、转速400 r·min-1、药材加入量为0.200 0 g.结论:电化学指纹图谱简便、快速、直观,可方便地用于不同产地木通的区分和鉴别.%Objective:To identify Akebia by using electrochemical fingerprints.Methods:The B-Z chemical oscillating method was applied in the study,oscillating chemical reaction was studied in the system of BrO3-+ H + + Ce4+ +CH3COCH3.Akebia powder was added to the chemical oscillation system,electricity chemistry workstation record data,E-tcurve drawing with Origin software,data calculation,analysis of map.Results:The influence of different conditions on B-Z oscillation pattern was examined,the different regions'electrochemical fingerprints were obtained.The optimum conditions were as follows:310 K the temperature,400 r· min-1 the speed and adding 0.200 0 g of Akebia powder.Conclusion:The electrochemical fingerprints can be used for identifying the Akebia.The established method is fast,convenient and it has the advantage of convenience,fast and intuitive.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2016(018)009【总页数】4页(P1139-1142)【关键词】木通;电化学指纹图谱;B-Z振荡;鉴别【作者】陈龙梗;李欢欢;石慧慧;刘亚伟;杨青山;程旺兴【作者单位】安徽中医药大学药学院,安徽合肥230012;安徽中医药大学药学院,安徽合肥230012;安徽中医药大学药学院,安徽合肥230012;安徽中医药大学药学院,安徽合肥230012;安徽中医药大学药学院,安徽合肥230012;安徽中医药大学药学院,安徽合肥230012【正文语种】中文随着中药现代化研究的不断前进，人们对中药的研究也在不断地深入。

１ 实
验
１ １ 主要 实验仪 器 ．
Ｍ Ｚ一１ Ａ型 非 线 性 化 学 指 纹 图谱 分 析 仪 ；１ 复 合 甘 汞 电 ２７型
作 者 简 介 ： 琴 （９ ６～） 女 ， 士 研 究 生 ， 事 非线 性 化 学 指 纹 图 谱 研 究 。 向凤 １８ ， 硕 从 通 讯 作 者 ： 铭 张泰
１ 中药一般是包含许多化学物质 的复杂混合体系 ， 品质与种 极 和 ２ ３型 金 属 铂 电极 ． 其 植产地 的生态环境 、 收及 加工有着 密切 的关 系 ， 采 同种 药材所 含 １ ２ 实验试 剂和 药材 ． 主要成分差异也较大 ， 仅针对药材或中成药的某个 活性 成分或指 １０ ｏ Ｌ硫 酸溶 液 ；．８０ ｍ ｌＬ硫酸 锰溶液 ；％ （ ．０ｍ ｌ ／ ０ ０ ０ ｏ ／ ５ 体积
反应 。在 一定 条 件 下 ， 这 些 非 线性 化 学 反 应 可测 定 中药 、 然 利用 天 药物 、 品和农副产品等成分极其 复杂样 品 的指 纹 图谱 ， 食 即非线 性化学指纹 图谱。关于非线性 化学指纹图谱技术 的检测条件 、 方
１ ３ 实验 方法 ．
准确加入适量干燥至恒重 的中药粉末 （ ２ １０目） 于非 线性化 学体系 中反应器 中 ， 好带 注射孔 和 电极 的反应 器盖 。开启恒 盖
标 成 分进 行 定 性 、 定量 分 析 ， 不 能 有效 地 控 制 中药 材 的质 量 。 中 并 药指纹图谱技术也其具有 整体性 、 模糊 性 以及 可量化 的特 点 ，
分数 ） 丙酮溶液 ；．０ ｌＬ溴酸钠溶液 。试剂均 为分析纯 ， ０ ８０ｍｏ ／ 水 为二次蒸馏水。中药样 品均购 自ｊ百 姓大药房 。
温 系 统 调 节 反 应 器 内温 度 为 ３ ． ７ Ｃ℃ ，５ ｍｉ 速 搅 拌 ， 击 ８ ０ｒ ｎ恒 ／ 点 菜单采集数据 ，０ｍ ｎ后 用注射 器迅速 加入 ３ ０ Ｌ溴 酸钠溶 １ ｉ ．０ ｍ

不同产地黄芪的电化学指纹图谱研究作者：胡俊平李国凯任云来源：《江苏农业科学》2019年第12期摘要：在BrO3--Mn2+-H+-CH3COCH3振荡体系中加入黄芪为反应底物，通过电化学工作站测定黄芪的电化学指纹图谱，设计正交试验考察建立黄芪电化学指纹图谱的条件并考察黄芪加入量、药材粒度对黄芪电化学指纹图谱的影响。

结果表明，黄芪加入量0.5 g，粒度为80目时可以取得理想的电化学指纹图谱。

在此测定条件下，研究不同产地黄芪的电化学指纹图谱，通过分析图谱中的特征物理参数，达到鉴定黄芪真伪和对不同产地黄芪进行质量评价的目的。

关键词：电化学指纹图谱;黄芪;不同产地;质量评价;正交试验;真伪鉴定;质量评价;产地鉴别中图分类号： S567.23+9.01 ;文献标志码： A ;文章编号：1002-1302（2019）12-0224-04黄芪（Radix Astragali）为豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根，具有健脾补中、利水消肿、升阳举陷、利尿之功效，主要分布在山西、甘肃、黑龙江、吉林、辽宁、河北、内蒙等地。

黄芪的化学成分为黄芪皂苷、黄酮、多糖、单糖、生物碱、叶酸、多种氨基酸以及人体所需要的微量元素[6]。

本研究分析了黄芪在BrO3--Mn2+-H+-CH3COCH3体系中做振荡反应的电化学指纹图谱，其特征物理量为（1）诱导时间（t诱导）：从加入试剂到振荡发生的时间;（2）振荡寿命（t振荡）：振荡开始到振荡结束的时间;（3）最高电位（Emax）：振荡曲线的电位最高值;（4）平衡电位（E平衡）：振荡结束时所对应的电位。

同时，本研究探讨了振荡体系各物质浓度、温度、药材粒度、加入量等对电化学指纹图谱的影响，分析了不同产地黄芪电化学指纹图谱的特征，结果表明不同产地黄芪的电化学指纹图谱有明显区别，该方法可用于黄芪药材的产地鉴别[7]。

1 仪器与材料1.1 仪器WK-600A高速药物粉碎机（山东省青州市精誠机械有限公司）;DF-101S聚热式恒温加热磁力搅拌器（河南省巩义市予华仪器有限公司）;电化学工作站（瑞士万通204）;烧杯;容量瓶;玻璃棒;滴管。

不同产地连翘的电化学指纹图谱胡俊平;杨健;任云;刘妍;毕慧敏;游富英【摘要】在BrO3--Mn2+-H+-CH3 COCH3振荡体系中加入连翘为反应底物,通过电化学工作站测定柴胡的电化学指纹图谱.单因素试验确定柴胡加入量为1.2 g、温度为45℃、粒度为80目时,可以取得理想的电化学指纹图谱;在此测定条件下,研究不同产地柴胡的电化学指纹图谱,通过分析图谱中的特征物理参数,达到鉴定柴胡真伪和对不同产地柴胡进行质量评价的目的.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2017(045)024【总页数】3页(P173-175)【关键词】电化学指纹图谱;连翘;质量评价;单因素试验;特征物理参数【作者】胡俊平;杨健;任云;刘妍;毕慧敏;游富英【作者单位】邯郸学院化学化工与材料学院/邯郸学院化学化工省级本科实验教学示范中心,河北邯郸056005;邯郸学院化学化工与材料学院/邯郸学院化学化工省级本科实验教学示范中心,河北邯郸056005;邯郸学院化学化工与材料学院/邯郸学院化学化工省级本科实验教学示范中心,河北邯郸056005;邯郸学院化学化工与材料学院/邯郸学院化学化工省级本科实验教学示范中心,河北邯郸056005;邯郸学院化学化工与材料学院/邯郸学院化学化工省级本科实验教学示范中心,河北邯郸056005;邯郸学院化学化工与材料学院/邯郸学院化学化工省级本科实验教学示范中心,河北邯郸056005【正文语种】中文【中图分类】R284.1中草药的发展和研究在中国具有悠久的历史和深远的文化，是中华名族不可或缺的瑰宝，也是世界文化遗产的重要组成部分，更为全世界人们的健康作出了不菲的贡献。

众所周知，中药是由多种化学成分组成的混合物，只有多种成分相互作用才能达到治病的效果。

因此，很难通过测定药材某种成分达到评价中药专属性和有效性的目的[1]。

目前，中药常用的检测方法有气相色谱指纹图谱法、高效液相指纹图谱法、红外光谱法等[2-3]。

专利名称：一种电化学指纹图谱用于快速鉴别陈皮和广陈皮的方法
专利类型：发明专利
发明人：周鸿立,韩浩渺,高佳卉,曲小姝,张艺潼,王亚婷
申请号：CN202210315614.3
申请日：20220329
公开号：CN114659861A
公开日：
20220624
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明是一种电化学指纹图谱用于快速鉴别陈皮和广陈皮的方法，属于中药材鉴别领域。

通过层次分析对影响鉴别的因素进行筛选，根据重要程度选取温度、硫酸、溴酸钠三个因素进行实验；通过单因素试验选取最优的实验条件，最终以最优条件进行陈皮与广陈皮的鉴别。

在此条件下，不仅节约了时间和成本，而且陈皮与广陈皮有着明显的差别。

该技术为今后陈皮与广陈皮及其他相似中药材的鉴别和质量评价提供技术基础。

申请人：吉林化工学院
地址：132000 吉林省吉林市龙潭区承德街45号
国籍：CN
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Cortex Moutan is a traditional Chinese medicine from the root bark of Paeonia suffruticos Andr. It can be used for the treatment of antiinflammatory, sedative, lower blood pressure,antithrombosis, antiatherosclerosis and antiarrhythmia 1. As a result, a fast and convenient determination method is required in pharmaceutical analysis. Currently identification of Cortex Moutan has been mainly performed by the high-performance liquid chromatography 2-5 approach. High-performance liquid chromatography has high sensitivity and good selectivity, but it requires the complex sample pre-treatment.Compared to the HPLC method, using oscillation system for identification of traditional Chinese medicine has gained interests from several analysts work 6-9 because of its simplicity,high speed and good sensitivity 10-14.This paper presents a study we have conducted to identify Cortex moutan using oscillation system. Present study shows that addition of some amount of Cortex Moutan powder in oscillation system causes a change in the E-t curve. Such response suggests that some components in Cortex Moutan are reacting to some components in this system. The E-t curve is then correlated with different origin areas to identify the origin areas of Cortex moutan, called electrochemical finger-print. The study shows that this method is very fast andStudy on Electrochemical Fingerprints of Traditional ChineseMedicine Cortex Moutan from Different OriginsW ANG -X ING C HENG *, Y I G UAN , J IA C HEN and C HENG -W U F ANGSchool of Pharmacy, Anhui University of Traditional Chinese Medicine, Anhui Key Laboratory of Modern Traditional Chinese Medicine,45th Shihe Road, Hefei 230031, P .R. China*Corresponding author: Fax: +86 551 5169222; Tel: +86 551 5169230; E-mail: chengwangxing@Asian Journal of Chemistry; V ol. 24, No. 8 (2012), 3533-3536(Received : 28 July 2011;Accepted : 14 March 2012)AJC-11184convenient in identifying traditional Chinese medicine. In addition, it has advantages of good reproducibility, sensitivity and precision.All chemicals used in the study are of analytical reagent grade and from Sinopharm Chemical Co., Ltd. (Shanghai,China). Solutions of 0.2 M KBrO 3, 0.4 M HOOC-CH 2-COOH,3 M H 2SO 4, 0.005 M Ce(NH 4)4(SO 4)4 were made immediately before the experiment. Double distilled water was used in the entire experiment.Cortex Moutan used in the study are from Phoenix Mountain, Bozhou, Tongling, Qingyang (Anhui China) and were identified prior to the experiment.Oscillating experiments were performed in a glass container with a Model CJJ78-1 magnetic stirrer (Jiangsu,China) regulated by a Model HH-501 thermostat at 38 ± 0.05ºC (Jiangsu, China), changes in potential were followed by a type 213 platinum electrode (Shanghai, China), a model 217saturated calomel electrode (Shanghai, China) as reference electrode. Potentials (E) of the electrode as a function of time (t) were recorded by LK2005A electrochemical instrument (Tianjin, China) to record kinetic curves (E-t) of the oscillation reaction.。