粗蛋白测定仪的蒸馏操作及技术参数

饲料中粗蛋白测定方法1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。

加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数 6.25，计算出粗蛋白含量。

2、试剂2.1 硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98％，无氮。

2.2 混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB 665），6g硫酸钾（HG 3—920）或硫酸钠（HG 3—908），均为化学纯，磨碎混匀。

2.3 氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。

2.4 硼酸（GB 628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。

2.5 混合指示剂：甲基红（HG 3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。

2.6 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。

2.6.1 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。

8.3mL盐酸（GB 622，分析纯），注入 1 000mL蒸馏水中。

2.6.2 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。

1.67mL盐酸（GB 622，分析纯），注入1 000mL蒸馏水中。

2.7 蔗糖（HG 3—1001）：分析纯。

2.8 硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。

2.9 硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1 000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。

3、仪器设备3.1 实验室用样品粉碎机或研钵。

3.2 分样筛：孔径0.45mm（40目）。

3.3 分析天平：感量0.0001g。

3.4 消煮炉或电炉。

3.5 滴定管：酸式，10、25mL。

3.6 凯氏烧瓶：250mL。

3.7 凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。

3.8 锥形瓶：150、250mL。

3.9 容量瓶：100mL。

饲料中粗蛋白测定方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】饲料中粗蛋白测定方法1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。

加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。

2、试剂2.1硫酸（GB625）：化学纯，含量为98％，无氮。

2.2混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB665），6g硫酸钾（HG3—920）或硫酸钠（HG3—908），均为化学纯，磨碎混匀。

2.3氢氧化钠（GB629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。

2.4硼酸（GB628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。

2.5混合指示剂：甲基红（HG3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。

2.6盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。

2.6.1盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。

8.3mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。

2.6.2盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。

1.67mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。

2.7蔗糖（HG3—1001）：分析纯。

2.8硫酸铵（GB1396）：分析纯，干燥。

2.9硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。

3、仪器设备3.1实验室用样品粉碎机或研钵。

3.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。

3.3分析天平：感量0.0001g。

3.4消煮炉或电炉。

3.5滴定管：酸式，10、25mL。

3.6凯氏烧瓶：250mL。

3.7凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。

1、原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。

加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数，计算出粗蛋白含量。

2、试剂硫酸（GB 625）：化学纯，含量为98％，无氮。

混合催化剂：硫酸铜，5个结晶水（GB 665），6g硫酸钾（HG 3—920）或硫酸钠（HG 3—908），均为化学纯，磨碎混匀。

氢氧化钠（GB 629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。

硼酸（GB 628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。

混合指示剂：甲基红（HG 3—958）％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220）％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。

盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB 601制备。

2.6.1 盐酸标准溶液：c（HCl）=L。

盐酸（GB 622，分析纯），注入 1 000mL蒸馏水中。

盐酸标准溶液：c（HCl）=L。

盐酸（GB 622，分析纯），注入1 000mL蒸馏水中。

蔗糖（HG 3—1001）：分析纯。

硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。

硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1 000mL，加入％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。

3、仪器设备实验室用样品粉碎机或研钵。

分样筛：孔径（40目）。

分析天平：感量。

消煮炉或电炉。

滴定管：酸式，10、25mL。

凯氏烧瓶：250mL。

凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。

锥形瓶：150、250mL。

容量瓶：100mL。

消煮管：250mL。

定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动。

4、试样的选取和制备选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。

5 分析步骤试样的消煮称取试样～1g（含氮量5～80mg）准确至，放入凯氏烧瓶中，加入混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。

饲料中粗蛋白的测定方法原理：凯氏定氮法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。

加入强碱进行蒸馏逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。

测定方法：1、试样的消煮称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360-410℃）直呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。

2、半微量蒸馏法将试样消煮液冷却，加入20mL蒸馏水，转入100mL容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，作为试样分解液。

将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸吸收液和2滴混合指示剂锥形瓶内。

蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸。

准确移取试样分解液10～20mL注入蒸馏装置的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好人口玻璃塞，再加10mL氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在人口处加水密封，防止漏气。

蒸馏4min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1mi，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。

3、滴定用上述蒸馏法蒸馏后的吸收液立即用0.1mol/L或0.02mol/L盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。

4、分析结果的表述计算见下式：（V2-V1）·c×0.0140×6.25粗白质（%）= ×100V′M×V式中：V1——滴定试样时所需标准酸溶液体积，mLV2——滴定空白时所需标准酸溶液体积，mLC ——盐酸标准溶液浓度，mol/LM ——试样质量，gV ——试样分解液总体积，mLV′——试样分解液蒸馏用体积，mL0.0140——与1.00mL盐酸标准[c（HCl）=1.000 mol/L]相当的以克表示的氮的质量6.25——氮换算成蛋白质的平均系数。

实验三 饲料中粗蛋白的测定一、适用范围本标准适用于配合饲料，浓缩饲料和单一饲料。

二、原理凯氏法测定试样中的含N 量，即在催化剂作用下，用H 2SO 4破坏有机物，使含N 物转化成（NH4）2SO 4，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出N 含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出CP 含量。

三、试剂1、H 2SO 42、混合催化剂3、NaOH4、硼酸5、混合指示剂6、HCl 标准液7、蔗糖8、硫酸铵9、硼酸吸收液四、仪器设备1、粉碎机2、分样筛3、分析天平4、消煮炉5、滴定管6、凯式定N 仪7、锥形瓶 9、容量瓶 10、消煮管五、分析步骤1、试样的消煮，称取试样0.5g ，准确至0.0202g ，放入消煮管中加入6.4g 混合催化剂与试样混合均匀，再加入12ml H 2SO 4将消煮瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化、泡沫消失后，再加强火力（360-410℃）直至吴透明的蓝绿色，然后再继续加热至少2h 。

2、NH 3的蒸馏将装有硼酸吸收液和指示剂的锥形东半球，放在冷凝管末端，装好消煮管，打开碱并关，至消煮管中变为黑色，并闭碱开关，打开气天关，至锥形瓶内液体由粉红色变为橙黄色，到流出液体体积为150ml 时停止，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。

3、滴定蒸馏后的吸收液用HCl 标准溶液滴定，溶液由橙黄色变为粉红色为终点。

3、空白测定称取蔗糖0.5g 代替试样进行空白测定七、计算 CP=%100M25.60140.0C )V V (12⨯⨯⨯⨯-V 2：滴定试样时所需标准溶液体积mlV 1：滴定空白时，所需标准溶液体积mlC ：盐酸标准溶液浓度mol/lM ：试样质量 g0.0140：与1mol HCl 标准溶液相当的以g 表示的N 的质量。

6.25：N 换算成Br 的平均系数。

饲料粗蛋白的检测方法（凯氏半微量定氮法）1 原理凯氏法测定试样含氮量，即在催化剂存在下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵，加入强碱（NaOH）并蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，用标准盐酸溶液滴定测出含氮量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白质含量。

2 仪器设备2.1实验室用样品粉碎机或研钵2.2分样筛：孔径0.45mm（40目）2.3分析天平：感量0.0001g2.4消煮炉或电炉2.5滴定管：酸式25mL2.6凯氏烧瓶：100mL2.7凯氏蒸馏装置：半微量水蒸汽蒸馏式2.8锥形瓶：150mL2.9容量瓶：100mL3 试剂3.1硫酸：分析纯3.2硫酸铜：分析纯3.3硫酸鉀：分析纯3.4硒粉：分析纯3.5氢氧化钠：分析纯40g溶于100mL蒸馏水配成40%水溶液。

3.6硼酸：分析纯2g溶于100mL蒸馏水配成2%水溶液。

3.7混合指示剂：甲基红分析纯0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿分析纯0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存期三个月以内。

3.8 0.02N盐酸标准溶液：1.67mL盐酸分析纯溶于1000mL 蒸馏水中。

3.8.1 0.02N盐酸标准溶液的标定（碳酸钠法）精确称取0.04g于270—300°C灼烧至恒重的基准级无水碳酸钠，准确至蒸馏水(新做蒸馏水或蒸0.0001g，无损失地转入100 mL三角瓶中，加入无CO2馏水煮沸数分钟放凉后使用)50mL溶解，并加入混合指示剂10滴，用盐酸标准溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2分钟，冷却后继续滴定至溶液呈暗红色，同时做空白试验。

3.8.2盐酸标准溶液当量浓度的计算GN =(V1-V2)×0.05299式中：G——无水碳酸钠的重量，g；V1——盐酸标准溶液消耗的体积，mL；V2——空白试验所消耗盐酸标准溶液的体积，mL；0．05299——每毫克当量碳酸钠的克数；注：标定各浓度间的相对偏差不大于0.2%。

3.9蔗糖：分析纯3.10硫酸铵：分析纯，干燥。

蛋白质测定仪测定食品蛋白质含量的注意事项一、蛋白质测定仪/粗蛋白测定仪/氮磷钙测定仪注意事项：蛋白质含量的测定是评价食品质量的重要指标。

由于食品中含氮化合物以蛋白质占优势,所以测定食品中蛋白质含量时往往是先测定总氮量,然后乘以蛋白质换算系数即得到蛋白质含量。

在我国现行的国家标准中,蛋白质的测定采用蛋白质测定仪,它是由样品消化成按盐、蒸馏、用硼酸液吸收,再由标准酸液滴定来测定的.此法准确、简明、灵活,是法定的仲裁测定法,但它技巧性强,主、客观影响因素多,要想获得准确的测定结果,也是较困难的。

蛋白质测定仪对蛋白质含量进行测定的过程中，对称样较困难的半固体(如冰淇淋、豆腐乳)可置于已记重的纸片上称重(样品重~总重一纸片重),样品称好后,卷起置于凯氏烧瓶底部。

为减少系统误差,空白凯氏烧瓶同时投入相同规格的纸片一张。

不同的食品含氮量不同,为保证终点滴定消耗酸的体积数在有效范围(5一Zoml)内,称量应视样品含氮的高低而定。

一般含量在5%一20%的应精确称取1.。

一2.09,如蛋糕、奶粉,对含量在。

.1写一1.0%的应加大称样量,以5.0一10.馆为宜,如淀粉、葡萄糖;对高含量(蛋白质大于30%)的应减少称样量,一般精密称取0.2一L09为宜,如酪蛋白、大豆粉。

利用蛋白质测定仪的过程中，还须注意所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。

蒸汽发生瓶中水呈酸性,以防在碱性时水中游离氨被蒸出而使结果偏高。

总之，蛋白质测定仪测定蛋白质,其结果受多方面因素的影响,为使测定结果准确,在测定时应引起高度重视。

因托普云农蛋白质测定仪蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法，故被称为凯氏定氮仪，又名蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪、氮磷钙测定仪。

该仪器也是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证中的必备检验设备。

二、蛋白质测定仪/粗蛋白测定仪/氮磷钙测定仪工作原理：托普云农蛋白质测定仪（俗称定氮仪）以国际凯氏定氮法为依据，进行设计制造的，此仪器主机采用蒸气自动控制发生器，在液位稳压器的配合下，使蒸气在数十秒时间内平稳输出供蒸馏器使用。

粗蛋白质测定中注意事项陈彬一、试样的粉碎测定要求样品粉碎并全部过40目筛，目的在于使其具备均质性，便于溶样，更易于消化。

但也须掌握以下四点：（1）由于粉碎或过筛过程中，样品容易产生自动分级，如玉米，其硬质部分常聚集在上面，软质部分聚在下面。

所以粉碎过筛后要重新混合均匀，以减少测量误差；（2）粉碎完后，粉碎机中总会遗留少部分，这部分不能随便丢弃，否则将影响样品的均质性；（3）粉碎过程要快，以避免样品的成分变化；（4）对于全价料(即使是颗粒全价料)和浓缩料，无须再粉碎，当然这是基于混合机的良好混合均度的；如果拿去粉碎，会丢失部分粉末物质，且粉碎后产生分级，反而降低了样品的均质性。

二、试样的用量试样的用量可根据情况而定，标准法中规定为0．5～1g，这个用量对于浓缩料、鱼粉、豆粕等高蛋白的样品尚可，对于诸如稻谷、玉米等低蛋白的样品则相对较少，可适当增加到2～3g，否则，滴定时盐酸的消耗量只有1～2mL，会增加读数和测定的误差。

三、样品的消化1、要根据样品的用量来确定硫酸的用量:取0.5～1g样, 需12mL硫酸；如果取2～3g样，则需25mL硫酸；对于含盐量高的样品，如某些劣质鱼粉、肉骨粉之类，须相应增加硫酸用量2～5mL。

2、有的饲料检测书上有快速测定蛋白质的方法，如过氧化氢催化法，按照这些方法测定的蛋白质含量常常偏低0.3％～1.0％，如无特殊情况，特别是测定的结果作为饲料配方的数据时，不要用快速测定法。

消化时间对粗蛋白测定的影响消化时间(变澄清后)/h 0.5 1 2 3 4 5粗蛋白含量/% 42.2435 45.6686 45. 8747 45.9295 46.1413 46.2052结论：样品澄清后消化0.5h蛋白含量偏低,随着消化时间的增大,蛋白含量逐渐的增加,从2h开始,蛋白含量增加缓慢,2h的和5h的蛋白含量在允许的1%误差范围之内,可见样品消化时间最好控制在样品澄清后2h以上,对一般样品,3～4h的消化时间(不包括冷却时间)已经足够,过长的消化时间对蛋白含量的提高没有显著的影响,反而会造成时间和资源的浪费。

粗蛋白测定方法什么是粗蛋白， 粗蛋白跟蛋白质又有什么区别，如何测量饲料中粗蛋白的含量，粗蛋白的 含量高是不是一定代表着蛋白质的含量高。

我想，当你看到这个题目时，肯定会联想到这 一连串的问题中的其中几个。

那么接下来，我就来详细介绍下粗蛋白的概念、粗蛋白测量和其他关于饲料中粗蛋白含量的问题。

…粗蛋白概念：一 粗蛋白不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质。

包括真蛋白质和含氮物（氨化物）。

食物中粗蛋白含量以大豆最高 ，肉类次之。

粗蛋白英文为 crudeprotein 。

粗蛋白是食品、 饲料中一种蛋白质含量的度量。

由于一般蛋白质中含氮量约为16%， 故在概略分析中，常用凯氏 （Kjeldahl ） 法测出总氮量，再乘以系数 6.25 来求得。

实际上， 它是食品、饲料中含氮化合物的总称，既包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物，后者又可 能包括游离氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸盐和氨等。

此外，不同蛋白质的氨基酸组成 不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同，如小麦和多数谷物的换算系数 为 5.80 ，水稻 5.95 ，大豆 5.7 ，多数食用豆和坚果 5.3 ，牛奶 6.38 等。

粗蛋白只是一个粗 略的概念。

粗蛋白含量：面我介绍几种常见物质的粗蛋白含量，仅供大家参考。

粗蛋白含量： 13%-14% 粗蛋白含量：可达 40%以上 粗蛋白含量： 3.41%粗蛋白含量： 9.63 ％粗蛋白含量： 0.86%+ n$ l- Y: p6 J上文介绍了几种农产品或水果的粗蛋白含量情况，如果需要更多的资料，大家可自己查阅。

.....粗蛋白测定： ...方法一：最简便也是最快键的方法，就是用 蛋白质测定仪 来测量。

. g- y: \$ H- J;本标准参照采用ISO 5983—1979《动物饲料——氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。

， X1 O& n5 q: o- M! Q3 g1 主题内容与适用范围本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。