标准病理制片流程
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动物病理组织免疫组化制片操作规程1、取材选材部位以病灶与正常组织交界处的组织标本为好,取材要完整,要尽可能注意到整个器官的结构特点。
大小一般是1cm×1 cm×0.5 cm为宜。
在夹取组织时不要用力压、挤、揉等以免损坏组织。
2、固定以10%中性福尔马林固定液(固定液的量应为组织块的10-20倍)固定时间24-36小时。
组织长时间固定,固定液中的福尔马林含有的杂质会产生一种酸,影响核的染色,整个组织显得非常陈旧。
3、全自动脱水机:包括脱水、透明、浸蜡等步骤3.1、脱水组织经固定后,内含大量水分,须除尽水分才利于透明、浸蜡。
常用酒精为脱水剂,逐级提高酒精浓度,以防组织过度收缩、变脆或脱水不完全而影响制片效果。
脱水一般在室温下进行,由60%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精I、100%酒精II组成。
组织块在酒精中时间不宜过长,否则组织块容易变硬。
如切片后的蜡块中央呈灰白粗糙而不透亮,放置一段时间后蜡块中央出现一陷窝,此即表明组织脱水不够彻底,组织面暴露后水分蒸发,蜡块中央收缩形成陷窝,严重时难以切出完整切片。
注意定时更换新的脱水剂,一般在使用到1500个脱水盒(含组织块)后即可考虑更换脱水液。
3.2、透明在室温下,组织块采用二甲苯或TO透明剂中进行透明。
一般透明剂分为I、II两个试剂缸。
组织在二甲苯或TO透明剂中贮留时间必须严格掌握,时间稍长,则组织脆硬易碎;时间过短,石蜡不易渗透进去,使浸蜡不完全。
3.3、浸蜡恒温杯内温度应调至58-60℃为宜,使石蜡熔化完全。
石蜡分为I、II两个缸。
尽量控制组织块在石蜡中的浸泡时间,时间过长组织易碎;时间过短,石蜡未渗透进去,组织不能切片。
附:自动脱水机使用操作规程4、包埋将温箱中熔化好的石蜡倒进包埋框内,迅速用热镊子将组织放入包埋模具内,将要切的面朝下并摆正位置,多块的小的组织应集中放在一起,处于一个水平面上,管状组织如血管、气管、肠道等须立起来包埋,然后压上塑料盒,再注入少量的石蜡液,将其移放室温下一定时间后,再转移至冰冻台上冰冻固定,待其蜡块完全凝结后,取出蜡块,修切去抱抱盒周边浓度余蜡。
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------组织病理切片的制作流程组织病理切片的制作流程 1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1) 材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2) 组织块的大小:所取组织块较理想的体积为 2. 0cm 2. 0cm 0. 3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取 0. 1~0. 2cm 即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取 0. 3 ~0. 5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3) 勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
1/ 17夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4) 规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5) 选好组织块的切面: 根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6) 保持材料的清洁: 组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7) 保持组织的原有形态: 新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
病理科主要工作流程标本接收流程图负责人:标本处理流程图组织病理检查与快速病理诊断工作流程组织病理检查包括病灶局部穿刺、咬取、切取活检和手术切除标本,通过活检为临床提供定性诊断。
活检组织从患者病灶处取下后,到获得最后病理诊断结果过程中,主要工作流程如下:病灶处取下组织标本↓临床医师详细填写病理诊断申请单(包括病史、体征、术中所见、其它辅助检查结果、申请要求等)↓临床支持中心送达病理科↓病理标本的接收与确认(送检人与接收人核对签字备案)↓病理医师取下检测组织块(取材医生与技术人员核对签字备案)↓组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋↓石蜡组织切片、染色(病理医生与技术人员核对签字备案)↓病理医师阅片,分析病变特征,确定诊断结果↓采集病理改变特征性图象,描述病变特征,填写病理诊断报告↓上级病理医师审核病理报告后签发↓(病理收发人员与临床人员核对签字备案)免疫组织化学(免疫组化)检查流程病理诊断医师详细填写免疫组化工作单(包括病理号、组织块号码、检查项目、检查要求等)↓免疫组化工作单的接收与确认(送检人与接收人核对签字备案)↓技术人员准备组织块(再次核对检查项目,实验者填写工作记录单)↓组织切片、染色(病理医生与技术人员核对签字备案)↓病理医师阅片,记录免疫组化实验质量,如有问题填写改进意见,交免疫组化实验室↓免疫组化实验技术人员与诊断医生讨论,提出改进措施↓↓(免疫组化实验人员与诊断医生核对签字备案)(免疫组化检测的主要目的有两个方面:①确定肿瘤的组织发生和肿瘤分型:主要用于一些疑难疾病的确认,如胃肠道平滑肌瘤与间质瘤、神经鞘膜细胞瘤、间皮瘤的鉴别,恶性淋巴瘤的组织学分型。
②肿瘤预后评估与治疗方案相关免疫组化检测:免疫组化检查可用于疾病的预后评估、治疗方案的选择、可能出现的肿瘤耐药基因,如P53、Ki-67检测评价恶性肿瘤的预后,PR、ER、Her-2、VEGF检测选择治疗方案,gp100、GST-π检查是否表达肿瘤耐药基因。
病理制片技术——常用特殊染色一、六胺银染色1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。
2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h,染真菌时间要相对短一些,一般情况下肉眼看到染液变色,切片呈棕色时从温箱取出染色缸,倒掉染液,自来水冲洗1min,用0.25%氯化金调色1 min,水洗后,用3%硫代硫酸钠染5min,水洗,用苏木精染液浅染,水洗、分化、冲水返蓝,伊红染10 s,最后经脱水、透明、封固。
3.图示结果:基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色,核呈蓝色。
4.注葸事项(1)掌握染色温度和时间,如60℃染1 h,80℃染30~40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短,染色时间过长,切片染色过深,可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1.第一步准备工作:配制黏卡染液,将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内,加入5 0%L醇100 rnl混合摇匀,再加入氯化铝0.5g,水浴加温逐渐煮沸并搅动液体,使其充分溶解(注意染液容易外溅),数分钟后,染液由红色变成透明深紫红色,冷却后将液体倒入量筒,再加入50%乙醇至原量,过滤,放人冰箱备用。
2.第二步染色方法:染液使用时原液与蒸馏水比例为1:4稀释.切片厚5 um,脱蜡至水,经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上,染液可以重复使用多次,但要适当延长染色时间.切片水洗后,脱水、透明、封固。
3.图示结果:黏液为红色,胞核为蓝色.4.注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液,4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大,消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1.第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液:盐基性品红溶于乙醇内。
组织病理切片的制作流程1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
病理诊断报告发放流程病理诊断报告是临床诊断和治疗的重要依据,其准确性和及时性对于患者的治疗方案制定和预后评估至关重要。
为了确保病理诊断报告能够准确、及时地发放到临床医生和患者手中,我们制定了一套严格的发放流程。
一、标本接收与登记当临床科室采集的病理标本送达病理科时,接收人员会首先对标本进行仔细的核对和检查。
包括患者的基本信息(如姓名、性别、年龄、住院号/门诊号等)、标本的来源(手术、活检、穿刺等)、标本的数量和质量等。
确认无误后,接收人员会在病理标本登记本上详细记录标本的相关信息,并为其分配一个唯一的病理编号。
二、标本处理与制片接收后的标本会被立即送往病理技术室进行处理。
技术人员会根据标本的类型和要求,选择合适的处理方法,如固定、脱水、包埋、切片等。
经过一系列的处理步骤后,制作出高质量的病理切片,以供病理医生进行诊断。
三、病理诊断病理医生在显微镜下仔细观察病理切片,结合临床病史、症状、体征等信息,对病变进行诊断。
诊断过程中,病理医生可能会需要查阅相关的文献资料、与其他医生进行讨论或进行特殊的染色和免疫组化等辅助检查,以确保诊断的准确性。
四、报告书写病理医生根据诊断结果,按照规定的格式和内容书写病理诊断报告。
报告中通常包括患者的基本信息、标本的来源和类型、镜下所见、病理诊断意见、诊断依据以及必要的建议等。
报告的书写要清晰、准确、规范,避免使用模糊或含糊不清的词汇。
五、报告审核完成书写的病理诊断报告需要经过上级医生的审核。
审核医生会对报告的内容进行仔细的检查,包括诊断的准确性、完整性、逻辑性以及语言表达的规范性等。
如有问题,审核医生会与报告医生进行沟通和修改,确保报告的质量。
六、报告打印与签名审核通过后的病理诊断报告由专门的打印人员进行打印。
打印完成后,报告医生和审核医生会在报告上分别签名,并注明报告的日期。
七、报告发放病理诊断报告的发放通常有以下几种方式:1、直接送达临床科室:由病理科的工作人员将报告直接送达相关的临床科室,并与临床医生进行交接和沟通。
组织病理切片的制作流程1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
病理技术操作规范篇一:临床技术操作规范,病理学分册篇二:病理技术规范病理技术工作规范1. 标本的接收、清点制度:1.1 巨检结束后病理医师应向技术组当面交付组织块,并点清块数,记录签收。
有要求特殊处理的标本(如脱钙、糖原染色等)应当面向技术组说明,以便加以特殊处理。
1.2 组织包埋完成后必须进行清点蜡块数量,以防组织块在脱水、包埋过程中遗失。
1.3 切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点。
1.4 医师在诊断完成后交付档案室时必须当面清点,并作记录。
2. 制片过程各步骤应注意的事项:2.1 组织处理此过程包括固定、脱水、透明、浸蜡直至包埋,是制作优质切片的关键过程,一旦组织处理有欠缺,往往导致无法挽回的后果。
2.1.1 制片过程按操作流程进行标本处理2.1.2 有条件的单位应将大小标本分开固定脱水。
2.1.3 取材后组织应补充固定,固定时间:大标本固定时间不得少于6小时;小标本不得少于3 小时。
固定液必须及时更换,固定后必须流水冲洗;2.1.4 固定、脱水温度不得高于37℃。
2.1.5 包埋用石蜡必须过滤。
2.1.6 试剂必须及时更换。
(详见试剂的配制及更换制度)2.2 切片切片是技能含量很高的步骤,同一蜡块,用同一台切片机,同一把刀,不同的操会切出不同质量的片子。
2.2.1 切片刀必须锋利,切片厚度3~5微米。
切片完整,无污染,无皱褶。
2.2.2 组织片贴附应在除去标签位置后玻片的中间。
2.2.3 胃镜、纤支镜、穿刺等小活检组织切片须作非连续性切片,数量不得少于8张。
2.3 染色封片注意事项2.3.1 烤片温度应在60~62℃左右,不得高于65℃,时间不能少于20分钟。
2.3.2 剂染料必须及时更换。
2.3.3 切片封固前必须经酒精充分脱水,二甲苯透明,湿封。
不得用温箱烤干或电吹风吹干后干燥封片。
2.3.4 盖玻片使用前必须清洗。
(真空包装除外)2.2.5 封片时不得有气泡,不得有树胶外溢。
2.4 其他2.4.1 标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚、整齐,且不易褪色,有条件者尽量采用打印。