EDTA依赖性假性血小板减少症2例

EDTA引起假性血小板减少的分析【摘要】目的探讨用EDTA作为抗凝剂致假性血小板减少的原因及鉴别诊断要点，防止发生误报漏报。

方法选择2012年5月至2013年3月在我院住院的2例患者，用EDTAK2和肝素锂作为抗凝剂的抗凝血，仪器检测血常规。

同时制作血涂片各一张，通过人工镜检对照。

结果2例患者用TDTAK2抗凝管采血，血小板分别为23×109/L和9×109/L。

而肝素锂抗凝管血小板分别为145×109/L 和241×109/L，血涂片经瑞氏染色后镜检发现血小板均匀分布肝素锂抗凝血涂片中，无血小板凝集现象。

而EDTAK2抗凝血涂片中发现涂片尾部和两侧聚集的血小板数量不等，大小不一。

结论EDTA抗凝剂可引起血小板聚集，造成血小板计数假性减少。

对于应用EDTAK2致血小板减少时，应进一步进行人工计数和血涂片复查，或改用肝素抗凝管复查血小板，以避免误诊。

【关键词】假性血小板减少；EDTA；肝素锂目前，全自动血液分析仪在临检工作中广泛应用，乙二胺四乙酸（EDTA）是国际血液学标准化委员会推荐对血细胞影响较小的血液抗凝剂，用于血常规抗凝。

它的原理是能与血液中的钙离子结合成螯合物，而使钙离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。

但在某些时候又能促使或诱导血小板聚集，导致血小板计数假性降低[1]。

现将我院2例因EDTA抗凝致血小板减少的分析报告如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选择2012年5月至2013年3月在我院住院患者2例，1例食道癌，一例脑瘤。

患者无紫癜和出血倾向。

1.2 仪器和试剂BeckmanCoulter LH750血液分析仪及其配套的稀释液，溶血素，清洗液。

Olympus显微镜，BD公司EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管。

珠海贝索公司生产的瑞氏染液。

1.3 仪器法患者分别用EDTAK2抗凝管和肝素锂抗凝管采静脉血，用BeckmanCoulter LH750血液分析仪测定血小板3次，结果取均值。

EDTA依赖性假性血小板减少症实验室分析【关键词】EDTA-K2 假性血小板减少；血小板计数；血小板聚集EDTA盐(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂是国际血液标准化委员会认定并得到广泛使用，目前血小板计数实验室普遍采用的是全自动血细胞分析仪[1]，操作方便,重复性好,准确度高等优点已被普及应用，通常情况下使用EDTA二钾作为抗凝剂，对血细胞和血小板计数的影响较小，但临床发现EDTA盐有时会引起少数患者的血小板聚集导致血细胞分析仪在血小板计数出现假性偏低的现象，检测时需要实验室结合临床、排除干扰因素、选择科学可行的检测方法，才能正确报告血小板计数结果。

以防差错事故的发生，以免给临床医生带来困扰，防止医疗纠纷。

1.资料和方法1.1临床资料：患者，女18岁主诉发热、头痛、鼻塞、咳嗽、咽干咽痛等上呼吸道症状。

查体：体温38.2度、咽部充血、扁桃体无肿大，乡镇卫生院拟定为上感进行系列检查，实验室检查:白细胞10.8x109/L,红细胞3.47x1012、血红蛋白115 g／L、血小板计数为27x109/L(EDTA抗凝全血)既往健康、医生建议来上级医院院复查。

我院再次实验室检查：白细胞10.5x109/L、红细胞 3.54x1012、血红蛋白117 g／L、血小板21x109、凝血酶原时间:12.8s、活化部分凝血活酶时间:25.4s、凝血酶时间：12.5s、纤维蛋白原:2.48s、患者平日经期血量正常，无皮肤黏膜出血倾向，四肢未见出血点瘀斑。

怀疑为EDTA依赖性假性血小板减少症。

1.2方法1.2.1仪器与材料：采用希森美康XS500i全自动血液分析仪进行分析，试剂(溶血剂、稀释液、清洗液)为仪器配套试剂。

EDTA-K2抗凝剂和枸橼酸钠抗凝剂。

仪器采用专用校准品进行校准,每日室内质控均在控，参加卫生部室间质评亦在控。

1．8 mg／ml的EDTA-K2真空采血管、109 mmol／L的枸橼酸钠真空采血管均有河北超然医疗器械有限公司提供。

EDTA依赖假性血小板减少症临床表现、发生机制、怀疑情况及处理措施EDTA依赖假性血小板减少症乙二胺四乙酸是国际血液学标准化委员会推荐进行全血细胞计数时首选的抗凝剂。

EDTA具有对血液样本中的细胞形态和计数影响非常小等优点，目前在临床广泛使用。

但在少数情况下，EDTA可以引起血小板聚集，在血细胞分析仪上进行检测时，造成血小板计数的假性减低，这种现象被称为EDTA依赖性假性血小板减少。

疾病发生率约为0.09%—0.21%。

EDTA依赖假性血小板减少症的发生机制目前还不明确，普遍认为可能与EDTA诱导血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物中隐藏抗原的暴露或对其进行修饰，导致自身抗体的产生有关。

可以确定发生EDTA依赖假性血小板减少症的原因之一是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下，出现的免疫介导的冷抗血小板自身抗体。

EDTA依赖假性血小板减少怀疑情况1、血小板计数<100 X 109 /L。

2、室温下EDTA抗凝的标本发生血小板减少，由其他抗凝剂抗凝的标本或是将标本保存在37摄氏度，能大大削减血小板减少程度。

3、随标本采集到检测时间的延长，血小板计数越来越低。

4、血涂片显示或血球仪提示有血小板聚集。

5、缺乏血小板减少的临床症状和表现，如出血。

处理措施1、仪器法。

重新采样，用肝素抗凝管或枸橼酸盐抗凝管等非EDTA-K2分别抽取静脉血2ml，充分混匀，在10min内完成测定。

2.手工计数法。

采新鲜指血20ul，稀释后由专业检验人员计数两次并取均值。

3、无任何抗凝剂抽血立即上机，血小板结果也是可以供参考。

4、瑞氏染色涂片镜检看血小板的聚集情况再估算其数量。

5、预稀释仪器法:采新鲜指血20ul，加入稀释液120ul，进行1:7稀释后，在1h内用预稀释法进行测定。

6、对这类患者采血之前抗凝剂中添加阿米卡星纠正。

警惕“EDTA依赖性假性血小板减少症”EDTA即乙二胺四乙酸，是常用血常规检测的抗凝剂已被ICSH 认定,并得到了广泛应用。

我们平时在病房进行全血细胞分析（血常规）检验时，使用的是紫帽真空管。

这种真空管中就装有EDTA盐抗凝剂。

在因不同理由需要检测血常规的人群中，有极少数人，当其抽出的血液放入紫帽真空管中与EDTA接触，大约十几秒后他的血小板就会发生聚集。

当把这管标本放在全自动血液分析仪上检测，就可能出现假性血小板减少，随着这一标本存放时间的延长，所检测出的血小板计数可能会更低。

另外，由于聚集的血小板在体积上与白细胞相近，还可能会被血液分析仪，误当成白细胞计数，造成白细胞计数的假性增高。

这种现象我们称之为EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA- dependent pseudo thrombocytopenia，PTCP）。

如果这种现象没有被及早识别，可能会给临床工作带来很大的困扰，如延误手术，增加不必要的辅助检查，增加患者的身心痛苦与经济负担等等。

令人欣慰的是，近年来，检验科已经“破获”多起EDTA依赖性假性血小板减少症。

那么，如何识别呢？在临床工作中，凡遇到没有出血表现、但血小板计数却明显减少的患者，均可列入可疑对象进行鉴别。

可使用如下方法：1、同时用紫帽真空管与蓝帽真空管（内含有枸橼酸钠抗凝剂，平时用于检测凝血功能）采血复查，可以发现两根采血管的血小板计数的差别，蓝帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数在正常范围内，而紫帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数低于正常。

2、用手工法重新进行血小板计数或把血涂片进行瑞氏染色后，直接在显微镜下观察血小板分布情况及其是否有血小板凝集现象进行鉴别。

EDTA-K2造成假性血小板减少，分析其原因有以下两点：1、EDTA-K2可使血液发生免疫介导，产生冷抗血小板抗体，使血小板互相发生凝集现象，这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体还能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同时这种与血小板结合后的自身抗Fc端又可与淋巴细胞或单核细胞膜上Fc 受体结合，出现卫星现象。

EDTA-K2依赖性血小板假性减少结果分析及处理发表时间：2015-04-09T16:46:57.227Z 来源：《医药前沿》2014年第33期供稿作者：李孟兰[导读] 血小板计数是临床最基本、最常用的检测指标之一，其检测结果准确与否直接影响患者的诊断与治疗。

李孟兰（东南大学医学院附属南京同仁医院检验科 211102）【摘要】目的探讨EDTA-K2依赖性血小板假性减少症（EDTA-PTCP）患者血细胞分析中血小板计数结果的准确分析及处理手段。

方法收集21例EDTA-PTCP患者EDTA-K2抗凝静脉血及枸橼酸盐抗凝静脉血各2ml，充分混匀后15min、30min、60min、90min、120min 后，采用全自动血细胞分析仪法进行血小板数量检测，并制备血涂片进行瑞氏染色，显微镜下观察血小板形态及分布情况。

结果EDTA-PTCP患者EDTA-K2抗凝静脉血血小板计数明显低于正常值，并随检测时间延长血小板数量逐渐降低，差异有统计学意义（p<0.05）；与EDTA-K2抗凝静脉血结果比较，枸橼酸盐抗凝静脉血血小板计数明显增高，差异有统计学意义（p<0.05），随检测时间延长血小板计数比较差异无统计学意义（p>0.05）。

显微镜下观察显示EDTA-K2抗凝静脉血血涂片中血小板成多少不等的聚集团块，并随时间延长聚集的血小板个数明显增多；枸橼酸盐抗凝静脉血血涂片中血小板大小、形态规则，成单个、散在分布。

结论针对EDTA-PTCP患者，用枸橼酸盐抗凝静脉血代替EDTA-K2抗凝静脉血用于血小板检测，可纠正由EDTA-K2作为抗凝剂引起的血小板假性减少，避免临床误诊、误治。

【关键词】EDTA-K2 枸橼酸盐血小板【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）33-0091-02血小板计数是临床最基本、最常用的检测指标之一，其检测结果准确与否直接影响患者的诊断与治疗。

EDTA依赖性血小板减少症是由于用EDTA盐作为抗凝剂的抗凝血在全自动血细胞计数仪上检测时,发生假性血小板计数减少的现象。

这种假性低血小板计数会导致临床无故增加其他不必要的辅助检查,甚至引起临床误诊误治。

临床上假性血小板减少的发生率约为0.09%~0.21%,其主要原因是由于EDTA盐作为抗凝剂诱导抗凝血中血小板互相聚集、堆积和发生卫星现象,致使全自动血细胞计数仪不能确认血小板而使血小板计数偏低。

假性血小板减少无任何病理、生理意义,也与特殊药物使用无关。

故对临床上无任何出血症状与体征、出血和凝血时间正常而血小板计数明显减少者,建议改用肝素化血或手工计数血小板,以免因EDTA所致的假性血小板减少而贻误手术时机,或作一些不必要的针对血小板减少症的治疗。

体检时意外发现单纯血小板减少,无明显出血和不适，鉴别诊断考虑的常见原因为:（1）血小板生成障碍：再生障碍性贫血、白血病、巨幼细胞性贫血、骨髓纤维化、放射线损伤等；（2）血小板破坏过多或消耗过多：免疫性或原发性血小板减少性紫癜、系统性红斑狼疮、恶性淋巴瘤、药物过敏引起的血小板减少、弥散性血管内凝血等；（3）血小板分布异常：脾功能亢进。

故进行骨髓穿刺和活检等形态学检查，明确是否患白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)、巨幼细胞性贫血、遗传性血小板减少症等；同时应进行自身免疫性疾病筛选检查，以除外其他自身免疫性疾病；行腹部B超或CT检查明确有无脾大,脾功能亢进。

EDTA-K2抗凝剂致假性血小板减少2例报道发表时间：2012-04-01T09:21:38.763Z 来源：《中外健康文摘》2012年第5期供稿作者：胡云霞[导读] 血细胞分析仪的结果仅仅是初筛，不能完全代替显微镜检查。

胡云霞（平凉市第二人民医院检验科甘肃平凉 744000)【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）5-0165-02【关键词】 EDTA-K2抗凝剂血小板计数假性血小板减少全自动血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点，目前已广泛应用于各医院检验科进行临床血常规分析。

随着全自动血细胞分析仪的推广和普及，EDTA-K2也作为较理想的血常规的抗凝剂被广泛应用，乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）是国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐使用的对血细胞影响较小的血液抗凝剂。

最近我科在血常规检验中发现2例由EDTA-K2抗凝剂引起的血小板假性减少病例，现进行报道。

1 资料与方法1.1 仪器：日本Sysmex公司生产的XT-2000i和Kx-21全自动血细胞分析仪（两台仪器已进行了比对试验）；与仪器配套的试剂及质控品；奥林巴斯显微镜；改良牛鲍氏计数板。

1.2 材料EDTA-K2真空静脉采血管，枸橼酸钠（109mmol⁄L）真空静脉采血管，草酸铵稀释液，瑞-姬氏混合染液。

1.3 临床资料病例1，患者，男，66岁，2011年10月12日入住我院泌尿外科，择期手术治疗前列腺增生。

入院后进行手术前各项检查：①无肝、脾、淋巴结肿大，全身无出血点及瘀斑；血压正常；心电图正常；B超示前列腺5×3×5mm，实质回声均匀，中央沟不清，前列腺增生；②实验室检查：凝血功能检查（PT、APTT、TT、Fbg）正常；肝肾功能、血脂、血糖、尿常规、便常规及潜血的检查均正常；乙型肝炎表面抗原（HBsAg），丙型肝炎抗体（HCV），梅毒检测（RPR），艾滋病毒检测（HIV）均为阴性。

临床EDTA抗凝剂依赖假性血小板减少症处理方法
01什么是EDTA抗凝剂依赖假性血小板减少症
EDTA抗凝剂依赖假性血小板减少症是一种发生于体外、EDTA诱导的血小板非稳固性聚集、临床上表现为无出血现象的假性血小板减少症。

02体外EDTA依赖假性血小板减少症产生原因
EDTA依赖假性血小板减少症的发生机制主要是某些患者血液中存在冷抗血小板抗体或抗血小板表面膜糖蛋白IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)异二聚体中的隐蔽抗原，在EDTA抗凝剂采血后，静息状态下的血小板被活化，活化后的血小板表面的隐蔽抗原表位构象发生改变，诱导血小板在体外的互相聚集，致使全自动血细胞计数仪不能正确识别血小板而造成的血小板假性减少现象。

03解决方案
针对以上因素，临床上通常有以下几种简便高效的处理方法：
首先EDTA抗凝样本推片镜检，发现涂片中有大量血小板聚集，可确认EDTA抗凝剂依赖的血小板假性减少。

确定EDTA抗凝剂依赖的血小板假性减少,可把EDTA抗凝血放置37℃水浴30分钟，重新检测后血小板计数正常，则考虑冷抗体引起的血小板假性减少。

更换枸椽酸钠抗凝管采血，血小板计数明显高于EDTA抗凝血，涂片无血小板聚集，可使血小板计数减少得以纠正。

避免患者重新采血的痛苦，提高检验效率的同时并节省了更多的医疗资源。

EDTA依赖性假性血小板减少症的鉴别预防及其解决办法
edta依赖性假性血小板减少症的鉴别-预防及其解决办法
edta依赖性假性血小板减少症的鉴别\\预防及其解决办法
【全文】通过对乙二胺四乙酸(edta)依赖性血小板假性增加症(edta-ptcp)个例分析。

综述利用血小板直方图；送检，血小板进行性增加；edta-k2抗凝血涂片瑞士染色镜检血
小板与否涌入；手工计数血小板时观测有没有HGPRT以及某些仪器通过测量血小板聚集体
去推论、辨别edta-ptcp的存有。

对未知edta-ptcp人群，通过即为改采即测或37℃保温运输标本、转用柠檬酸盐和肝素抗炎凝来防治和防止edta-ptcp现象的出现。

【关键词】edta依赖性血小板假性减少症，涂片，镜检，聚集，聚集体
自从1993年国际血液学标准化委员会(icsh)所推荐edta盐就是做为血液分析的抗凝剂，虽然在确保红细胞、血小板形态的完整性方面强于其他抗凝剂，但也可以导致因edta 盐诱导血小板涌入而引致血液分析仪计数血小板发生假性相对较低现象，即edta盐依赖
性血小板假性增加症(edtaptcp)，虽然发生率仅为0.09％-0．21％[1,2,3,]，但必须引发足够多注重，以防止脑膜炎、误治、医患纠纷的出现，建议具体操作人员必须存有能力辨
别edta-ptcp现象，并采取有效措施防治、防止edta-ptcp的报告单流向临床。

edta依赖性血小板假性减少症(edta-ptcp)发生机理
edta依赖性血小板假性增加症(edta-ptcp)出现机制尚不十分确切，通常存有二种观点:1、可能将与某些患者体内存有抗炎血小板膜糖蛋白(例如糖蛋白b和糖蛋白a)的edta
依赖性抗体或温度依赖性抗炎。