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实验十三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测（GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测）方法一快速卡法一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速检验法及熟悉检验结果评定。
二、实验原理：胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂：1、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片；2、pH 7.5 磷酸盐缓冲液：分别称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4•12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤：1、整体测定法（1）选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上.(2) 取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
（3）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
2、表面测定法（粗筛法）（1）擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
（2）取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
（3）放置10 min以上进行预反应，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。
预反应10 min，预反应后的药片表面必须保持湿润。
（4）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判断：1、结果判断结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标
准
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准主要有以下几种：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法利用高效液相色谱仪对蔬菜样品中的农
药进行分离和定量分析。
原理是将样品中的农药化合物通过柱子分离，并通过检测器进行检测，最后根据峰面积或峰高来定量分析。
检验标准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
2. 气相色谱法（GC）：该方法利用气相色谱仪对蔬菜样品中的农药进行分离
和定量分析。
原理是将样品中的农药化合物通过柱子分离，并通过检测器进行检测，最后根据峰面积或峰高来定量分析。
检验标准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
3. 免疫分析法：该方法利用特定的抗体与农药残留结合，通过免疫反应来检测
和定量分析蔬菜样品中的农药残留。
原理是将样品中的农药残留与特定抗体结合，形成抗原-抗体复合物，然后通过染色或荧光等标记物来检测和定量分析。
检验标
准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
4. 质谱法：该方法利用质谱仪对蔬菜样品中的农药进行分析和定量。
原理是将
样品中的农药化合物通过质谱仪进行分析，根据质谱图谱来鉴定和定量分析。
检验标准通常是根据国家相关法规或标准设定的农药残留限量。
蔬菜农药残留的检验标准通常根据国家相关法规或标准来设定。
不同国家和地
区的标准可能有所不同，但一般都会设定农药残留的最大限量，以确保蔬菜的安全性。
这些标准通常会根据农药的毒性、使用频率、蔬菜种类等因素来设定。
蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测（KJ201710）1范围本方法规定了蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法。
本方法适用于油菜、菠菜、芹菜、韭菜等蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速测定。
酶抑制（率）法（分光光度法）2原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。
3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1丙酮（CH3COCH3）。
3.1.2磷酸氢二钾（K2HPO4）。
3.1.3磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.45,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（C14H8N2O8S2）。
3.1.5碳酸氢钠（NaHCO3）。
3.1.6碘化乙酰硫代胆碱（ C7H16INOS）。
3.1.7pH8.0缓冲溶液：分别称取11.9 g无水磷酸氢二钾及3.2 g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL水中，混匀。
3.1.8显色剂：分别取160 mg 5,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和15.6 mg碳酸氢钠，用20 mL缓冲溶液溶解，4 ℃冰箱中保存。
3.1.9底物：取125 mg碘化乙酰硫代胆碱，加15 mL蒸馏水溶解，摇匀后置于4 ℃冰箱中保存备用。
保存期不超过两周。
3.1.10乙酰胆碱酯酶：4 ℃冰箱中保存备用。
3.2 参考物质—1—3种有机磷和2种氨基甲酸酯类农药参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥98%。
表1 有机磷和氨基甲酸酯类参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量3.3 标准溶液的配制3.3.1克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准储备液（1000 μg/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着工业的发展和农业的现代化，化学农药的广泛应用成为农业生产中的常见现象。
因此，农产品中农药残留已成为一个普遍的问题。
为了确保消费者的健康和安全，需要对
农产品中的农药残留进行检测。
其中，有机磷类及氨基甲酸酯类农药是最常见的农药残留
物之一。
本文将介绍如何快速检测蔬菜中的有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量。
有机磷类农药是一类广泛使用的农药，它的主要成分是磷酸酯化合物。
这种农药可以
杀死害虫、杂草和真菌，从而保护作物的生长。
但是，它往往会对环境和人体产生有害影响，因此需要对其进行检测。
在蔬菜中，有机磷类农药的常见成分包括马拉硫磷、甲胺磷、乐果等。
针对这些残留物的检测方法主要有色谱法、荧光法和电化学法等。
其中，色谱法
是最常见的检测方法之一。
该方法可以快速和准确地检测出有机磷类农药在蔬菜中的残留量。
除了现有的检测方法之外，近年来还出现了一种新型的检测技术——基于光纤传感器
的检测技术。
这种技术利用光纤的传导性能和敏感度来检测蔬菜中的农药残留。
与传统的
检测方法相比，基于光纤传感器的检测技术具有响应快、准确、灵敏度高等特点，可以快
速地检测出蔬菜中的农药残留，同时可节省检测成本和时间。
总之，在蔬菜中确定有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测对保障农产品质
量和消费者的健康至关重要。
通过创新技术和不断的研究，我们可以期望未来的检测方法
会更加成熟、高效和安全。
农药残留快速检测方法与标准（国家标准）中华人民共和国国家标准蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测Rapid determination for organophosphatecarbamate pesticide residues in vegetables2003-08-11发布 2004-01-01实施1 范围本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。
速测卡法（纸片法）2 原理胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
3 试剂3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片（速测卡）。
3.2 pH7.5缓冲溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4·12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2 PO4 ]，用500mL 蒸馏水溶解。
4 仪器4.1 常量天平4.2 有条件时配备37℃±2℃恒温装置。
5 分析步骤5.1 整体测定法5.1.1 选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上。
5.1.2 取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
5.1.3 将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。
5.1.4 每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。
5.2 表面测定法（粗筛法）5.2.1 擦去蔬菜表面泥土，滴2滴～3滴缓冲溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
5.2.2 取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
果蔬农药残留怎么检测和去除果蔬等农作物生产过程中常常发生病虫草害危害，因此，需要用农药进行防治。
目前世界上约有1000多种人工合成的农药，被用作杀虫剂、除草剂、杀菌剂、除螨剂、生长调节剂等。
而我国生产使用的农药中，主要分为有机磷类、有机氯类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类等。
农药使用是把“双刃剑”，在促进农业增产的同时，如果使用不当导致农药残留超标，就可能会严重危害到人民群众的健康。
我国食品安全国家标准GB 2763-2021《食品中农药最大残留限量》就对对果蔬等农产品的农药残留限值作出了明确规定。
农药残留是怎么超标的呢？原因比较多，有农药本身的性质、环境因素、农药的使用方法等。
（1）对使用无公害农药的认识还不够。
影响果蔬质量的农药主要为杀虫剂类农药，在此类农药中又以有机磷类杀虫剂为主，即三个70%：使用农药中70%的为杀虫剂；杀虫剂中70%的为有机磷类杀虫剂；有机磷类杀虫剂中70%的为髙毒、剧毒、高残留农药。
部分农户认为使药后马上见效的农药就是好农药，而低度的、无公害的生物农药价格高、效果慢，是浪费了人力和物力，这样对果蔬的质量也产生了一定的影响。
（2）不合理使用农药，如违规使用禁限用农药、超范围使用、施药量过多、使用频率过高。
（3）土壤中部分农药的残留期比较长，由于长期不规范使用导致农药在土壤等环境中蓄积，进而使得其在果蔬中的再残留。
（4）使用了隐性非法加入其他禁限用农药的农资，导致一些果蔬中农药残留超标或超范围存在。
（5）未在最佳时机用药，导致害虫大量繁殖，增大用药量，或未轮换使用农药，造成其害虫对该类农药形成抗药性，为达到防治效果，增加用药量，致使果蔬达到上市成熟度时，施用的农药不能代谢降解至标准最大允许限下。
要为人民群众的菜篮子把好关，防止农药残留超标的农产品流入市场，及时高效的检测就是绕不开的环节。
自二十世纪九十年代以来，现代化学分析技术日新月异，许多新技术已进入实用阶段，如毛细管电脉仪技术(CZE)，色质联用技术(GC-MS、HPLC-MS)、超临界流体色谱技术(SFC)，直接光谱分析技术等。
谈谈蔬菜农药残留的快速检测方法摘要：农产品质量安全是一件涉及千家万户、关系国计民生的大事。
人们对农产品农药残留问题已越来越重视，各级政府对农产品生产与流通领域中的监管措施也在不断的强化与加大。
快速、准确的检测农产品农药残留，有利于防止农药残留，不断强化对上市蔬菜、水果等农产品质量的检测力度，并通过引进农药残留速测技术，利用农药残留快速检测仪，对各个乡镇的蔬菜生产大户、蔬菜水果批发市场等蔬菜生产基地的蔬菜农药残留情况定期开展抽样检测。
本文就从蔬菜农药残留的快速检测方法展开分析探讨，以供相关人士的参考。
关键词：蔬菜；农药残留；快速检测；方法引言：随着栽培技术的不断进步，蔬菜的生长期已越来越短，而随着环境污染的加剧，蔬菜的病虫害也越来越重，绝大部分蔬菜需要连续多次放药后才能成熟上市。
农药污染较重的有叶类蔬菜，其中韭菜、油菜受到的污染比例最大。
茄果类蔬菜如青椒、番茄等，嫩荚类蔬菜如豆角等，鳞茎类蔬菜如葱、蒜、洋葱等，农药的污染相对较小，但有的比较大。
1、农药简述农药广义的定义是指用于预防、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草和其他有害生物以及有目的地调节、控制、影响植物和有害生物代谢、生长、发育、繁殖过程的化学合成或者来源于生物、其他天然产物及应用生物技术产生的一种物质或者几种物质的混合物及其制剂。
狭义上是指在农业生产中，为保障、促进植物和农作物的成长，所施用的杀虫、杀菌、杀灭有害动物（或杂草）的一类药物统称。
特指在农业上用于防治病虫以及调节植物生长、除草等药剂。
根据原料来源可分为有机农药、无机农药、植物性农药、微生物农药。
此外，还有昆虫激素。
根据加工剂型可分为粉剂、可湿性粉剂、可溶性粉剂、乳剂、乳油、浓乳剂、乳膏、糊剂、胶体剂、熏烟剂、熏蒸剂、烟雾剂、油剂、颗粒剂和微粒剂等。
大多数是液体或固体，少数是气体。
农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。
但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当，导致农产品农药残留严重超标，严重危害到广大人民群众的健康。
蔬菜农药残留快速检测河南省安阳市455000摘要：蔬菜是人民日常生活中不可或缺的食品，随着人民生活水平日益提高，蔬菜消费量已超过口粮成为第一大消费食物，蔬菜质量安全水平成为全社会关注的焦点。
然而，作为现代农业主要安全隐患之一的农药残留问题，决定着蔬菜等农产品质量安全水平，更影响着现代蔬菜产业健康持续发展。
关键词：蔬菜；农药残留；快速检测引言该年来，蔬菜中农药残留问题已成为人们生活中的一个中心问题，引起了各国政府、公众和媒体的高度关注。
我国最常见的农药检测方法主要是气相色谱、液相色谱、气相色谱-质谱联用以及液相色谱-质谱联用等检测手段。
这些检测方法均需使用高端设备，且仪器设备操作人员必须为专业的检验人员，需要经授权持证上岗。
同时，仪器设备的后期维护和保养成本也较高。
速测卡法能在较短的时间内快速、准确地检测蔬菜中的农药残留含量。
1快速检测方法及原理方法:GB/ T5009. 199-2003酶发酵率。
在某些情况下有机磷和氨物质可以降低与农药浓度有关的加仑的正常功能。
通常，酶会释放神经递质物质(乙酰胆碱)，其水溶性证明和染料反应产生黄色物质。
透过使用光度测定计测量一段时间内的吸收量来计算抑制率。
采用抑制率可以确定样品中是否含有磷或氨物质。
2蔬菜样品中农药残留检测标准中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、中华人民共和国农业部和国家食品药品监督管理总局3个部门联合发布的《食品安全国家标准水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》（GB23200.8—2016）、《食品安全国家标准蔬菜中非草隆等15种取代脲类除草剂残留量的测定液相色谱法》（GB23200.18—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中噻菌灵残留量的测定液相色谱法》（GB23200.17—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定液相色谱法》（GB23200.19—2016）、《食品安全国家标准水果和蔬菜中唑螨酯残留量的测定液相色谱法》（GB23200.29—2016）等。
蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检验标准1、目前农药在蔬菜中残留的问题1.1、农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。
但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当，导致农产品农药残留严重超标，严重危害到广大人民群众的健康。
1.2、在我国农药中，70%为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中，70%为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
2、农药中毒事件常有报道，究其原因2.1、农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药，或施用不允许在蔬菜上使用剧毒、高毒类农药；2.2、现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行，无法对廉价的蔬菜进行随时随地或快速检测而形成的监管不到位。
3、农药分类：3.1、矿物源农药3.1.1、有效成分起源于矿产无机物和石油的农药。
3.1.2、代表有硫酸铜、硫磺、石硫合剂、磷化铝、磷化锌和石油乳剂等。
3.2、生物源农药3.2.1、包括植物源农药和动物源农药及微生物源农药。
3.2.2、植物类别有植物毒素、植物内源激素、植物源昆虫激素、拒食剂、引诱剂、驱避剂、绝育剂、增效剂、植物防卫素、易株克生物质等。
3.2.3、动物资源开发的农药包括动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌等。
3.3、按作用方式分类3.3.1、胃毒素农药（敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）3.3.2、触杀性农药（对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）3.3.3、内吸性农药（乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷）3.3.4、熏蒸性农药（溴甲烷、磷化铝、敌敌畏）3.3.5、特异性农药（乙烯利、毒霉素、灭幼脲）4、目前所使用的农药按其化学结构大致可以分为以下几类：有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、杂环类化合物、其他（苯氧羧酸类、脲类化合物）等。
A、有机磷类敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、优杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫酸、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、异柳磷等。
B、有机氯类α -666、β -666、γ-666、δ-666、op -DDE、pp’-DDE、op’-DDD、pp’-DDT、op’-DDT、异菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯杀螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、粉锈宁、甲氯菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。
C、氨基甲酸酯类涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、3-羟基呋喃丹、涕灭威、呋喃丹、甲萘威、叶蝉散、仲丁威、速灭威等。
d、拟除虫菌酯类联苯菊酯、二氧苯醚菊酯、功夫菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、氟氰菊酯、氟氯氰菊酯，戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、呋喃菊酯、苄呋菊酯、右旋丙烯菊等。
5、最大残留限量标准最大残留限量（Maximum Residue Limit，MRL）在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。
目的：控制食品中过量农药残留以保障食用者安全，对超标的产品采取措施，即禁止食用。
执行和指导合理用药，农产品监测超标时，表明未按规定用药。
减少国际贸易纠纷，各国均制订本国的MRL。
《食品中农药最大残留限量》标准A、GB2763-2014，规定了387种农药最高残留限量。
国家标准作为一项加强农药管理的措施。
B、其中，针对蔬菜、水果、茶叶等鲜食农产品农药残留超标多发、易发问题，新标准重点增了蔬菜、水果等鲜食农产品的限量标准。
水果农药残留限量增加473项，蔬菜（包括食用菌）农药最大残留限量增加431项。
6、高毒农药禁限用管理措施6.1、农业部、工业和信息化部、环境保护部、国家工商行政管理总局和国家质量监督检验检疫总局与2011年6月15日发布第1586号公告，决定对高毒农药采取进一步禁限用管理措施。
6.2、停止受理苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷、杀扑磷、甲拌磷、甲基异柳磷、克百威、灭多威、灭线磷、涕灭威、磷化铝、氧乐果、水胺硫磷、溴甲烷、硫丹等22种农药新增田间试验申请、登记申请及生产许可证申请；停止批准含有上述农药的新增登记证和农药生产许可证（生产批准文件）。
6.3、撤销氧乐果、水胺硫磷早柑橘树，灭多威在柑橘树、苹果树、茶树、十字花科蔬菜，硫线磷在柑橘树、黄瓜，硫丹在苹果树、茶树，溴甲烷在草莓、黄瓜上的登记。
6.4、本公告发布前已生产产品的标签可以不再更改，但不得继续在已撤销登记的作物上使用。
6.5、自2011年10月31日起，撤销（撤回）苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷等10种农药的登记证、生产许可证（生产批准文件），停止生产。
6.6、自2013年10月31日起，停止销售和使用。
根据以上情况，制定出有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法，加强对农药残留的快速检测一成为十分必要的监管措施。
7、农药残留主要检测方法有两种：7.1、色谱检测法：色谱检测法用作农残定量分析，可为农药残留执法提供依据。
色谱法（包括气相色谱、液相色谱、气质联用等）。
优点：灵敏度高、准确、定性定量；缺点：成本高、操作复杂、时间较长。
7.2、速测仪法：速测仪法只能作为农残定性分析，易于在基层推广等特点，是目前我国控制高毒农药残留的一种有效方法，也是目前国内和我省应用最广泛的农药残留快速检测方法。
A、速测仪法的主要优点：1、该方法具有快速方便、前处理简便、成本较低等优点，适用于现场定性测定，特别适合在蔬菜生产基地、批发市场及农产品检测部门开展快速检测工作。
2、该方法可对有农药残留的蔬菜进行粗筛，将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外，避免因农药残留发生中毒事件。
B、速测仪法的主要缺点：1、酶试剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好，实际应用中的确认率大约为60%~70%左右；2、存在检测盲区，只能检测有机磷和氨基甲酸酯两类农药，不能检测有机氯类、菊酯和其它类别的剧毒农药；3、不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等14种容易出现假阳性的农产品。
8、速测仪的检测方法有两种：1、速测卡法（纸片法）2、酶抑制率法（分光光度法）9、两种快速检测方法的技术原理9.1、根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，导致昆虫中毒致死的原理而设计。
9.2、如果蔬菜中不含有机磷和氨基甲酸酯类农药，乙酰胆碱酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色。
9.3、如果蔬菜中含有可以抑制乙酰胆碱的活性的有机磷和氨基甲酸酯类农药，这种酶就不能被水解，从而无显色反应。
9.4、在溶液中加入乙酰胆碱酶和显色剂，用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。
10、速测卡法（纸片法）1、试剂1.1、固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片（速测卡）。
1.2、pH7.5缓冲液溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾用500mL蒸馏水溶解。
2、仪器2.1、常量天平有条件配备37℃±2℃恒温装置。
3、分析步骤3.1、整体测定法3.1.1、选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见放碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，震摇50次，静置2min以上。
3.1.2、取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min，预反应后的药片表面必须保持湿润。
3.1.3、讲速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置3min，使红色药片与白色药片叠合反应。
3.1.4、每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。
3.2、表面测定法（粗筛法）3.2.1、擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
3.2.2、取一片速测卡，讲蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
3.2.3、放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。
预反应后的药片表面必须保持湿润。
3.2.4、将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片叠合反应。
3.2.5、每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。
结果判定：1、结果以酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制（为阳性）、未抑制（为阴性）表示。
2、与空白对照卡比较，白色药片不变色或略浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。
3、对阳性结果的样品，可用其他分析方法进一步确定具体农药品种和含量。
速测卡法（纸片法）注意事项1、有些蔬菜如生姜、葱、蒜、辣椒和番茄等汁液中含有破坏酶活性或者使蓝色产物褪色的物质，处理这类蔬菜时，不要让其汁液太多释放出来，不要剪得太碎，浸提时间不易过长，必要时可采用整枝蔬菜浸提或采用表面测定法进行测定。
对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可以采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。
2、试纸上的提取液不可太多而溢出试纸，亦不可太少而使反应不完全。
3、最好将每一批样品处理好后一起加样，一面时间过长蒸干。
4、当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用（体温）手指捏3分钟时可以变蓝，即可往下操作。
注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。
5、空白对照卡不变色的原因：一是药片表面缓冲溶液加的少，预反应后的药片表面不够湿润，二是温度太低。
6、如有条件，将农药速测卡放在10℃以下保存效果会更好，每小包产品开封后最好在三天内用完，如用不完，可放入将有变色硅胶吸潮剂的瓶中密封保存，如发现农药测速卡的红色药片由鲜红橙色变为暗淡的褐红色，说明纸片已吸潮失效。
PR-3便携式农药残毒快速检测仪操作步骤：1、接通电源，右侧开关拨至“开”，打开上盖按“START”键预热；2、当预热达到设置反应温度TEMP时，听到“哗”一声，屏幕显示“TEMP1”，预热结束，等待倒计时；3、去试纸外模，插入试纸（白片在下端），在白片上分别加1-2滴提取液；4、再次按’“START”键，单片电脑开始“TEMP1”倒计时；5、当听到连续“哗、哗、哗”声，屏幕显示“CLOS”，提示合上前盖，进入“TEMP2”倒计时；6、当听到六声“哗。
哗、哗”音，本次操作结束，打开上盖观察试纸颜色变化；7、试纸显示蓝色为阴性，浅蓝色为弱阳性，白色为阳性；8、测试完毕，向上取下试纸进行下一次的检测。
酶抑制率法（分光光度法）1、试剂1.1、pH8.0缓冲溶液：分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。
1.2、显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20m 了缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。
