常用抗凝剂的配制及用法

常用抗凝剂的配制及用法 Prepared on 22 November 2020在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。

对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。

（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。

但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。

一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。

也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。

在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg ／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。

肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。

市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。

二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。

此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。

（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。

根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。

如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。

（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。

用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。

抗凝剂配置流程一、普通肝素配置方法肝素规格：2ml/支，100mg/支，12500iu/支1毫升=5mg配制方法：NS18ml+肝素2ml（1支）计算方法为：加入NS中肝素的总mg÷（NS+加入肝素的总ml）=每毫升盐水所含肝素量二、低分子肝素的配置方法低分子肝素目前多是预充式注射器，或粉剂，规格不同，医嘱给药量也不同，为保证给药量的准确性，低分子肝素应盐水稀释后在给患者推注。

1、低分子肝素规格如为5000iu/支，应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法：NS4ml+低分子肝素一支（1ml），则每毫升为1000iu。

计算方法：低分子肝素总单位剂量÷（NS量+低分子肝素总毫升量）=每毫升所含低分子量。

2、低分子肝素为粉剂每支5000iu时，应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法：用生理盐水5ml稀释后，则配置后的肝素为每毫升1000iu/ml总部建议：配置低分子时最好使用10ml注射器进行稀释药液，配置完成后每2ml含有低分子肝素1000iu。

（原因是如使用5ml注射器配置，透析用穿刺针管腔容积为2.5ml，如果患者应用1-3千单位的低分子肝素量，在推注1-3ml后，药液只能停留在穿刺针管腔内，未做到提前全身肝素化要求）。

附件：2019版sop对药物配置的要求：（1）治疗过程中所需的肝素溶液、低分子肝素制剂、红细胞生成刺激剂、铁剂等药品的配置，必须在透析准备室针对每位患者进行配置。

（2）配置后的药品直接送至每位患者的透析单元，标识清楚，一人一用。

已经进入透析治疗区的药品不可返回进入透析准备室。

（3）配置后未用的药品不能用于其他患者。

抗凝剂剂量选择和使用方案一、普通肝素抗凝1．血液透析、血液滤过或血液透析滤过一般首剂量0.3～0.5mg/kg，追加剂量5～10mg/h，间歇性静脉注射或持续性透析器/滤器前静脉输注（常用）；血液透析结束前30～60min 停止追加。

1. 目的为保证血液标本可靠，确保检测结果准确度。

2. 标本种类全血或末梢血。

3. 适用范围操作区抗凝剂的选用。

4. 试剂与器材4.1 枸橼酸钠（109mmol/L）：枸橼酸钠与血液中的钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。

4.2 乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）：抗凝机制与枸橼酸钠相似，一般 1.5mg～2.2mg可阻止1mL血液凝固。

4.3 肝素：是一种含有硫酸基团的粘多糖，相对分子量为15000，具有多方面的抗凝作用，其与抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）结合，促进其对凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅹ和凝血酶的活性的抑制，阻止血小板聚集，从而达到抗凝的作用。

5．抗凝原理5.1 枸橼酸钠（109mmol/L）枸橼酸钠与血液的比例多采用1:9（V/V），用于凝血象和红细胞沉降率测定（魏氏法血沉测定时为1:4）。

5.2 乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）EDTA-K2特别适用于全血细胞分析仪及红细胞比积测定，室温下6小时红细胞体积不改变。

但由于其影响血小板聚集及凝血因子检测，故不适合做凝血象和血小板功能检查。

5.3 肝素通常用肝素粉剂（100～125U/mg）配成1g/L肝素水溶液（即肝素1mg /mL），吸0.5mL于试管中，在37～50℃烘干后可抗凝5mL血液。

适用于红细胞比容测定，不适合凝血象和血液学一般检查。

6. 标本要求6.1 血液与抗凝剂比例适当，采集后要充分摇匀。

6.2 标本采集后应立即送检。

7. 注意事项7.1 血液与抗凝剂比例适当，采集后要充分摇匀。

7.2 标本采集后应立即送检。

7.3 选用抗凝剂必须适当。

参考文献1.中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程（第3版）.南京：东南大学出版社，2006.2.江苏省卫生厅.医院检验科建设管理规范（第2版）.南京：东南大学出版社，2013.3.刘成玉,罗春丽.临床检验基础（第5版）[M].人民卫生出版社，2012.。

常用抗凝剂的配制及用法在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。

对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。

（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml 血液计)。

但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。

一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。

也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。

在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。

肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。

市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。

（3）注意事项做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。

此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。

（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。

根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。

如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。

（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。

常用抗凝剂的配制及用法专业相关2010-08-08 14:48:34 阅读458 评论0 字号：大中小订阅在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。

对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。

注意事项：做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。

但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。

一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。

也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。

在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。

肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。

市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。

二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。

此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。

（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。

根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。

如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。

抗凝剂种类很多，性质各异，必须根据检验止的适当选择，才能获得预期的结果。

现将实验常用抗凝剂及其使用方法简述如下：1、乙二胺四乙酸（EDTA）盐EDTA有二钠、二钾和三钾盐。

均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液凝固。

EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。

EDTA 盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（Internationalcommittee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。

2H2O1.5-2.2MG （4.45±0.85μmol）/ml血液。

EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小，但二钠溶解度明显低于二钾，有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血细胞计数。

表1-1是几种抗凝剂对白细胞计数的影响，EDTA影响小板聚集，不适合于作凝血象检查和血小板功能试验。

2.枸椽酸钠（trisodium citrate）枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。

枸椽钠对凝血因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定。

因毒性小，是输积压保养中的成分之一。

由于枸椽酸钠溶液是按体积肥比例加入血液内达到抗凝目的的，而抗凝剂主要是作用于积压浆成分，通常所谓的1：9比例抗凝的概念是提1份体积的抗凝剂作用9份红细胞比积正常血液内的血浆成分而言。

所以台果对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝剂时，就会发生抗凝剂足或相对过多，这将明显地影响凝象检查结果。

为了避免这种现象，有文献报道应根据抗凝剂用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人红细胞比积%）这一公式，来计算抗凝剂的用量。

3．草酸钠（sodium oxalate）草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。

临床检验基础考点常用抗凝剂和使用方法常用抗凝剂和使用方法：
（1）乙二胺四乙酸（EDTA）盐：常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。

EDTA盐对血细胞形态、血小板计数影响很小，适用于血液学检查，尤其是血小板计数。

根据国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用EDTA-K2•2H2O，量为1.5～2.2 mg/ml血液。

不适于凝血检查、血小板功能试验。

（2）草酸盐：常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。

草酸盐不适于凝血检查。

双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积，可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查。

双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集、影响白细胞形态，不适于血小板计数、白细胞分类计数。

（3）肝素：加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。

肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。

但肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。

（4）枸橼酸盐：常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。

枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4。

适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。

抗凝剂配方的配方有什么？抗凝血剂无法凝固的血液。

人体的血液跟人体分开会发生凝固，这是正常的现象，逐渐出现血清，因试验要求血液不能凝固，否则凝固的血液无法进行试验，这个时候血液一定不能凝固起来，这个时候需要抗凝剂来使血液不出现凝固的现象，抗凝剂配方的配方有什么？下面我们来看看。

★一.备料动物，注射器，枸橼酸钠等★二.步骤1.制作抗凝剂抗凝剂有很多种，如肝素、枸橼酸钠、柠檬酸钠、EDTA等，每种都有其适合的应用。

一般来讲，实验室常用的、配方简单的就是枸橼酸钠（3%-5%）。

与血液比例1:4，也就是2ml抗凝剂+8ml 血液.2.保定动物采血对象以鸡为例，用10ml细针头注射器采集新鲜的鸡抗凝血，采血部位翼根静脉。

左手抓住鸡的两翼，使其侧卧，身体朝向内侧，翅膀朝向外侧，完成保定。

3.采血右手取酒精棉，沿鸡的腋窝处向翅膀外侧擦拭，会出现一条明显的静脉，此为翼根静脉。

左手压住近心端，右手持已吸入2ml抗凝剂的10ml注射器沿此静脉平行刺入，松开左手，即可采集8ml血液。

4.止血采血完毕后，小心抽出注射器，用干燥的脱脂棉按压采血部位使其快速止血。

5.充分混匀抗凝剂要与血液充分混匀才能发挥抗凝作用，混合不匀经常出现血块，影响下一步使用。

混匀后，拔去注射器针头后方可将抗凝血推入其他试验容器中。

6.真空采血管有条件的实验室可以直接购买真空采血管，这种采血管内就含有抗凝剂，而且是负压，相连的针头成功刺入血管后，血液自动流入管内，无需注射器，方便快捷。

★三.注意事项抗凝剂配置后最好过滤除菌，存放时间不宜过长；抗凝剂与血液要充分混匀，避免出现血凝块！。

常用抗凝剂阻止血液凝固的原理抗凝----应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。

抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。

一、枸橼酸钠【原理】枸橼酸钠（柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐。

它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。

【应用范围】血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。

【用量】凝血象: 109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9；血沉: 106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。

二、乙二胺四乙酸盐【原理】乙二胺四乙酸（EDTA）盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物，从而阻止血凝。

【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。

不适于凝血象及血小板功能检查。

【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。

血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2•2H2O 1.5～2.2mg/ml血液。

三、肝素【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。

【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。

【用量】通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。

取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。

四、草酸盐草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。

血液采集中用何种抗凝剂1、乙二胺四乙酸（EDTA）EDTA有二钠、二钾和三钾盐。

均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液Na2C10H14O8N2+CA2+CAC10H12O8N2+2NA++2H+ EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。

EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（International committee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。