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常用抗凝剂的配制及用法 Prepared on 22 November 2020在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg ／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
抗凝剂配置流程一、普通肝素配置方法肝素规格：2ml/支，100mg/支，12500iu/支1毫升=5mg配制方法：NS18ml+肝素2ml（1支）计算方法为：加入NS中肝素的总mg÷（NS+加入肝素的总ml）=每毫升盐水所含肝素量二、低分子肝素的配置方法低分子肝素目前多是预充式注射器，或粉剂，规格不同，医嘱给药量也不同，为保证给药量的准确性，低分子肝素应盐水稀释后在给患者推注。
1、低分子肝素规格如为5000iu/支，应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法：NS4ml+低分子肝素一支（1ml），则每毫升为1000iu。
计算方法：低分子肝素总单位剂量÷（NS量+低分子肝素总毫升量）=每毫升所含低分子量。
2、低分子肝素为粉剂每支5000iu时，应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法：用生理盐水5ml稀释后，则配置后的肝素为每毫升1000iu/ml总部建议：配置低分子时最好使用10ml注射器进行稀释药液，配置完成后每2ml含有低分子肝素1000iu。
（原因是如使用5ml注射器配置，透析用穿刺针管腔容积为2.5ml，如果患者应用1-3千单位的低分子肝素量，在推注1-3ml后，药液只能停留在穿刺针管腔内，未做到提前全身肝素化要求）。
附件：2019版sop对药物配置的要求：（1）治疗过程中所需的肝素溶液、低分子肝素制剂、红细胞生成刺激剂、铁剂等药品的配置，必须在透析准备室针对每位患者进行配置。
（2）配置后的药品直接送至每位患者的透析单元，标识清楚，一人一用。
已经进入透析治疗区的药品不可返回进入透析准备室。
（3）配置后未用的药品不能用于其他患者。
抗凝剂剂量选择和使用方案一、普通肝素抗凝1．血液透析、血液滤过或血液透析滤过一般首剂量0.3～0.5mg/kg，追加剂量5～10mg/h，间歇性静脉注射或持续性透析器/滤器前静脉输注（常用）；血液透析结束前30～60min 停止追加。
常用抗凝剂的配制及用法在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml 血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
（3）注意事项做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
常用抗凝剂的配制及用法专业相关2010-08-08 14:48:34 阅读458 评论0 字号：大中小订阅在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
注意事项：做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
实验室常用血液抗凝剂的特点及应用在实验室检验中，有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的。
而抗凝剂种类较多，实际应用中要根据不同的需要进行选择，才能获得理想的效果。
实验室中常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）、枸橼酸盐、草酸盐等4种，现将它们的特点及应用分别叙述如下：一、肝素抗凝是用于血液化学成分检测的首选抗凝剂。
肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖，是分散相物质平均分子质量为15000。
其抗凝原理主要是通过与抗凝血酶Ⅲ结合引起抗凝血酶Ⅲ构型发生变化，加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。
此外，肝素还能借助血浆辅助因子（肝素辅助因子Ⅱ）来抑制凝血酶。
常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵，钠、钾盐会增加血液中的钠、钾含量，铵盐会增加尿素氮的含量。
通常用肝素抗凝的剂量为10.0～12.5 IU/ml血液。
肝素对血液成分干扰较少，不影响红细胞体积，不引起溶血，适用于做红细胞渗透性试验、血气、血浆渗透量、红细胞压积及普通生化测定。
但肝素具有抗凝血酶作用，不适合做血凝试验。
另外，肝素过量可引起白细胞聚集和血小板减少，所以不适合做白细胞分类和血小板计数，更不能用于止血检验。
此外，肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为Wright染色后出现深蓝色背景，影响显微镜减产。
肝素抗凝血应于短时间内使用，否则放置过久血液又可凝固。
二、乙二胺四乙酸盐(EDTA盐)EDTA能与血液中Ca2+结合成螯合物，凝血过程被阻断，血液不能发生凝固。
EDTA盐有钾、钠、锂盐，国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2，其溶解度最高，抗凝速度最快。
EDTA盐通常配成质量分数是15%的水溶液，每ml 血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。
EDTA盐可在100℃下干燥，抗凝作用不变。
此抗凝剂不影响白细胞计数及大小，对红细胞形态影响最小，并且可以抑制血小板的聚集，适用于一般血液学检测。
常用的抗凝剂肝素、草酸盐合剂、枸橼酸钠和草本钾的配制方法肝素（Heparin）肝素的抗凝血作用很强，常用来作为全身抗凝剂，特别是在进行微循环方面动物实验时的肝素应用更有重要意义。
纯的肝素10mg能抗凝100ml血液（按1mg等于100个国际单位，10个国际单位能抗凝1ml 血液计）。
如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。
用于试管内抗凝时，一般可配成1%肝素生理盐水溶液，取0.1m l加入试管内，加热80℃烘干，每管能使5～10ml血液不凝固。
作全身抗凝时，一般剂量为：大鼠2.5～3mg·(200～300g体重)-1，兔或猫10mg·kg-1，狗5～10mg·kg-1。
如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。
草酸盐合剂配方：草酸铵 1.2g草酸钾 0.8g福尔马林 1.0ml蒸馏水加至 100ml配成2%溶液，每1ml血加草酸盐2mg（相当于草酸铵1.2m g，草酸钾0.8mg）。
用前根据取血量将计算好的量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0.5ml于试管中，烘干后每管可使5ml血不凝固。
此抗凝剂量适于作红细胞比容测定。
能使血凝过程中所必须的钙离子沉淀达到抗凝的目的。
枸橼酸钠常配成3%～8%水溶液，也可直接用粉剂。
枸橼酸钠可使钙失去活性，故能防止血凝。
但其抗凝作用较差，其碱性较强,不适作化学检验之用。
一般用1：9（即1份溶液，9份血）用于红细胞沉降和动物急性血压实验（用于连接血压计时的抗凝）。
不同动物，其浓度也不同：狗为6%，猫为2%+硫酸钠25%，兔为5%。
草酸钾每1ml血需加1-2mg草酸钾。
如配制10%水溶液，每管加0.1ml则可使5-10ml血液不凝固。
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血液各类抗凝剂选择
抗凝是用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，
以阻止血液凝固。
能够阻止血液凝固的物质，称为抗凝剂或抗凝物质。
常用抗凝剂和使用方法如下。
1.乙二胺四乙酸（EDTA）盐常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离
子结合成螯合物，使ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。
根据国际血
液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用量为EDTA-K.2H2O 1.
5～2.2mg/ml血液。
不适于凝血检查、血小板功能试验。
2.草酸盐常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根
离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止
血液凝固。
2mg草酸盐可抗凝lml血液。
但不适于凝血检查。
而且，草
酸盐浓度过高还会导致溶血、改变血液pH，干扰血浆钾、钠、氯和某
些酶活性的测定。
双草酸盐抗凝剂：适用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等检查，不适于血小板计数、白细胞分类计数。
3.肝素是加强抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止
凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。
肝素
是红细胞透渗脆性试验的理想抗凝剂。
但不适于CBC、细胞形态学检查。
每毫升血液肝素用量为（15±2.5）U，多为肝素钠盐或钾盐。
4.枸橼酸盐常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。
枸橼酸盐抗凝剂的抗凝力不如上述抗凝剂。
枸橼酸钠
与血液的抗凝比例为l：9或1：4.适用于红细胞沉降率、凝血检查，是
输血保养液的成分。
在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5m l于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。
常用抗凝剂的配置、用法和选择
常用抗凝剂大致分为三类，一类为化学药品。
其作用为消除钙离子作用。
使血液中的钙转变成可溶性的，但不离子化的络合物，药物如枸橼酸钠，草盐酸和二乙胺四乙酸二钠等。
另一类为生物制剂，如肝素，其作用是阻止凝血酶的生成，从而抗凝。
第三类为离子交换剂，系采用物理性方法防治血液凝固。
1.枸橼酸钠（Sodium citrate）：溶于水，不溶于醇。
可直接用本品粉末，每ml血液加3~5mg，用于红细胞沉降率测定。
按30mg/ml的枸橼酸钠溶液1份，血液9份比例混合剂可使血液不凝固。
因本贫碱性较强，可用枸橼酸调节pH接近7.0，所含成份为枸橼酸钠56mg/ml，枸橼酸5mg/ml和葡萄糖29mg/ml，成为复方枸橼酸钠抗凝剂，常用于各种动物连接血压计时的抗凝。
现用的枸橼酸钠有两种：（1）枸橼酸三钠（Trisodium citrare）：有两种结晶水含量不同的成品,一种是2Na3C6H5O7·11H2O,其与血浆成等渗浓度为 3.8%;另一种是Na3C6H5O9·2H2O与血浆成等渗浓度为3.2%（2.5%~4.0%），均为碱性，枸橼酸或其盐与钙作用生成可溶性络合物，当制成2.5%溶液时，Ph为7.5。
最低的抗凝浓度为0.2%，一般在血液中的最终浓度应为0.4%~0.6%，是长久以来国际上最通用的抗凝剂。
（2）枸橼酸二钠（Disodium citrare）:因其中含有大量的枸橼酸离子，属于酸性的枸橼酸。
3.5%溶液的pH为4.5，其优点是：简化了配置保存液的处方及其配制手续；防止高压消毒时葡萄糖的焦化现象，但大量输血时，枸橼酸钠可能产生毒性反应。
2.草酸钾（Potassium oxalate）和草酸钠（Sodium oxalate）:草酸溶于水，微溶于醇，具有溶解度大，抗凝作用强的特点。
体外抗凝时1ml 血液用草酸钾1~2ml,微量检验用血较少时，可配成20mg/ml溶液。
也可根据需要，用100mg/ml草酸钾溶液放入试管中摇动，使其分散浸湿管壁周围，置60℃烘箱内烤干。
草酸钾溶液0.1ml（相当于固体10mg）可阻抗5ml血液凝固。
烘烤温度若超过80℃，可使草酸钾分解成碳酸钾而失去抗凝作用。
由于本品抗凝系于血液内的钙离子结合形成不溶性草酸钙而阻止血凝，故含钾、钙的血样不能用其作抗凝剂。
此外，草酸钾对乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及淀粉酶也有抑制作用。
草酸钠抗凝作用于草酸钾相似常用于凝血因子的测定；不适用于含钠、钙的血样检查。
3.二乙胺四乙酸二钠
（Disodium ethylenediaminetera-acetate,EDTA-2Na）
溶于水，微溶于醇。
本品与钙结合比枸橼酸钠强10倍，是一种强力抗凝剂。
其水溶液的Ph约为 5.3。
体外抗凝用其1%的溶液。
取EDTA-2Na 1g、氯化钠0.7g，加蒸馏水至100ml，过滤后即成。
4.三羟戊二酸钠（Sodium trihyroxy glutarate , C5H7O7 Na2 ）本品可代替枸橼酸钠，抗凝力弱。
7%溶液的Ph为4.3，抗凝力相当于2~3.5%枸橼酸盐溶液。
本品不良反应较少，对红细胞基质能起加强作用。
5.肝素（Heparin）:是一种酸性粘多糖，常用其钠、钾、锂盐，易溶于水，不溶于多种有机溶媒。
可接受110℃高压消毒30分钟；安培装溶液常置冰箱中保存。
肝素作用是阻止凝血酶的形成，其作用很强，是常用的全身抗凝剂。
纯肝素10mg能抗凝65~125ml血液（按市售的肝素钠溶液1mg等于125i μ计算，则10~20 iμ可抗凝1ml血液）。
由于肝素制剂纯度及其保存时间长短不同，因而其抗凝效果不一。
一般可配成10mg/ml肝素生理盐水溶液，用时取0.1ml于试管内，100℃下烘干，每管能抗凝5~10ml血液。
也可用注射器吸取配好的肝素浸湿管壁，直接抽血于注射器内而使血液不凝。
还可用其他溶液分装于用过的洗净的小玻璃瓶内，再37~56℃温度下蒸发水份后成粉使用。
动物实验做全身抗凝时，一般剂量为：大鼠2.5~3mg/200~300g体重，兔或猫10mg/kg。
如纯度不高，又是过期者，应用时计量可增加2~3倍。
6.离子交换剂：除去血液中的钙离子，产生抗凝。
因该血液内不含抗凝物质，故无中度危险；但不能用于血液保存。
多用于白细胞和血小板分离。
常用的离子交换剂有：
（1）苯核磺酸（Dowex-50，苯乙烯）：属于磺化芳香族碳氢多聚物。
每200~400ml血液使用25~30mg。
（2）羧酸型（Amberlite ICR-50,丙烯酸）：每200~400ml血液使用25~30mg。
（3）苯核磺酸（Permitite Q）：属于磺化碳氢化合物。
每200~400ml血液使用25~30mg。
参考文献：陈奇《中药药理研究方法学》人民卫生出版社。
