紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量

维生素的测定方法
维生素的测定方法包括生物学方法、化学方法和仪器方法等。

1. 生物学方法：生物学方法是通过生物试验，如细胞培养、动物实验等来测定维生素的活性。

例如，利用酵母菌培养来测定维生素B2（核黄素）的含量，利用小鼠实验来测定维生素D的活性。

2. 化学方法：化学方法是通过化学反应来测定维生素的含量。

常用的化学方法包括滴定法、分光光度法和高效液相色谱法等。

例如，利用碘量法测定维生素C （抗坏血酸）的含量，利用氧化还原反应测定维生素A（视黄醇）的含量。

3. 仪器方法：仪器方法是通过利用特定仪器进行测定。

例如，利用高效液相色谱仪（HPLC）测定多种维生素的含量，利用气相色谱仪（GC）测定维生素E（α-生育酚）的含量。

需要注意的是，不同的维生素具有不同的化学性质和测定原理，因此选择适当的测定方法需要结合维生素的特性和要求进行决定。

同时，测定方法的准确性、灵敏度和重复性等因素也需要考虑。

维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较目前研究维生素C测定方法的有很多，如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果。

目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流，但近年来色谱法，特别是HPLC 法上升趋势尤为明显。

一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。

本方法的最小检出限为0.022 g/ml。

2．适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC，GB／T6195—1986）1、原理：还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。

还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。

在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。

本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。

2、优点简便、快速、比较准确等，适用于许多不同类型样品的分析。

3、缺点2，6一二氯靛酚法虽然简便，但是药品价格昂贵。

而且不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。

如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。

三、分光光度法1、原理：维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。

脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎，脎在500nm波长有最大吸收。

实验一分光光度法同时测定维生素C和维生素E一、实验目的学习在紫外光谱区同时测定双组分体系——维生素C和维生素E。

二、实验原理维生素C（抗坏血酸）和维生素E（α-生育酚）在食品中能起抗氧化作用，即他们在一定时间内能防止油脂变性。

两者结合在一起比单独使用的效果更佳，因为它们在抗氧化剂性能方面是“协同的”。

因此，它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。

维生素C是水溶性的，维生素E是脂溶性的，但是他们都溶于无水乙醇，因此能在同一溶液中，用与可见分光光度法测定双组分相同的原理，在紫外区测定它们。

三、仪器与试剂1、仪器紫外-可见分光光度计、石英吸收池一对、25mL容量瓶7只、5mL吸量管两只。

2、试剂维生素C：称0.132g抗坏血酸，溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定容于1000mL （7.50×10-4mol/L）；维生素E：称0.488g α-生育酚，溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定容于1000mL1.13×10-3mol/L）；无水乙醇四、实验内容与操作步骤1、配制溶液（1）配制维生素C系列标准溶液：分别取抗坏血酸贮备液2.00 、3.00 、4.00mL 于3只25mL容量瓶中，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。

（2）配制维生素E系列标准溶液：分别取α-生育酚贮备液2.00 、3.00 、4.00mL于3只25mL容量瓶中，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。

（3）试样的制备：取未知液5.00 mL 于25mL容量瓶中，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。

2、绘制吸收曲线以无水乙醇为参比，在波长320~220nm范围内测绘抗坏血酸和α-生育酚的吸收光谱，并确定抗坏血酸和α-生育酚的最大吸收波长，分别为λ1、λ2。

3、绘制标准曲线以无水乙醇为参比，在波长λ1、λ2处分别测定维生素C的3个标准溶液的吸光度；以无水乙醇为参比，在波长λ1、λ2处分别测定维生素E的3个标准溶液的吸光度。

4、未知液的测定以无水乙醇为参比，在波长λ1、λ2处分别测定未知液的吸光度。

紫外分光光度法测定维生素C片的含量班级：姓名：学号：前言：原理：分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些集团吸收了紫外可见辐射光后发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。

它说带状光谱，反应了分子中某些基团的信息。

可以用标准光图谱再结合其他手段进行定性分析，吸收曲线的形状是物质定性的主要依据，在定量分析中，可提供测定波长，一般以灵敏度较大的最大吸收波长为测定波长。

物质对紫外可见光吸收符合Lambert-Beer定律A=εcl。

仪器构造：光源、单色器、样品池、检测器、显示屏。

仪器特点：1、320*240位点阵高质量大屏幕液晶显示器，显示清晰，信息完备，充分考虑人性化设计2、强大的数据处理功能，使实验结果能得到充分的应用，使用户编辑更为简单快捷3、主要元件采用进口配置，使精度更高、速度更快、可靠性更强、兼容性更广、自动化程度更高4、丰富的应用功能，使用户随心所欲，应用更灵活、开放，使分光光度计的应用领域得到了极大的拓展5、高自动化程度，使维护方便、操作简便、效率更高维生素c的化学结构为理化性质外观：无色晶体沸点：无熔点：190～192℃酸性：维生素C分子结构中的烯二醇基，尤其是C3位OH由于受共轭效应的影响，酸性较强（pK =4.17)；C2位OH由于形成分子内氢键，酸性极弱（pK =11.75）。

故维生素C一般表现为一元酸，可与碳酸氢钠作用生成钠盐。

紫外线吸收最大值：245nm荧光光谱：激发波长：无荧光波长：无药理作用维生素C为抗体及胶原形成，组织修补（包括某些氧化还原作用），苯丙氨酸、酪氨酸、叶酸的代谢，铁、碳水化合物的利用，脂肪、蛋白质的合成，维持免疫功能，羟化与羟色胺，保持血管的完整，促进非血红素铁吸收等所必需，同时维生素C还具备有抗氧化，抗自由基，抑制酪氨酸酶的形成，从而达到美白，淡斑的功效。

文献报道测定方法方法名称维生素C测定—氧化还原滴定法应用范围该方法采用滴定法测定维生素C的含量。

该方法适用于维生素C。

题 目：紫外分光光度法测定水果中维生素C 的含量的含量摘 要：目前研究维生素研究维生C 的测定方法的报道较多，如滴定法、光度分度法、高效液相色谱法等，特别是紫外分光度测定法。

本论文利用维生素C 具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性, , 建立了紫外分光光度快速测定水果维生素C 含量的新方法。

维生素C 浓度在1.001.00—12.0µg/mL 范围内与吸收值呈良—12.0µg/mL 范围内与吸收值呈良好的线性关系；检出限为0.014µg/ mL；加标回收率在97.9% —99.0% 之间。

该法操作简单法操作简单,,结果准确结果准确,,应用于维生素C 含量的测定含量的测定, ,结果令人满意。

关键词：维生素C ，紫外分光度测定法，水果前言维生素C 是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。

维生素C 有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。

维生素C 能保能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，还有解毒作用等。

其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富，品中含量尤为丰富，对饮食健康、对饮食健康、对饮食健康、医疗保健都具有十分重要意义。

医疗保健都具有十分重要意义。

医疗保健都具有十分重要意义。

近年来测定维近年来测定维生素C 的方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。

的方法主要有滴定法、光度法、高效液相色谱法等。

1 维生素维生素C 的性质及测定方法的性质及测定方法1.1 维生素维生素C 概述概述维生素C 又叫抗坏血酸（又叫抗坏血酸（Ascorbicid Ascorbicid Ascorbicid），广泛存在于植物组织中，新鲜的水），广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜中含量较多，蔬菜中含量较多，是一种水可溶性小分子生物活性物质，是一种水可溶性小分子生物活性物质，是一种水可溶性小分子生物活性物质，也是人体需要量最也是人体需要量最大的一种维生素。

紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量【摘要】本实验利用紫外分光光度法测定由维生素C和维生素E组成的混合物中各组分的浓度。

在这两种组分组成的混合物中，彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，根据相互间光谱的重叠的程度采用相对的方法进行定量测定。

【关键词】紫外分光光度法；维生素C；维生素E；浓度1、引言维生素C（抗坏血酸）和维生素E(α-生育酚)在食品中能起抗氧化剂作用，即它们在一定时间内防止油脂变性。

两者结合在一起比单独使用的效果更佳，因为它们在抗氧化性能方面是“协同的”。

因此，它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。

维生素C是水溶性的，维生素E是酯溶性的，它们都能溶于无水乙醇，因此能在同一溶液中，能够利用紫外可见分光光度法测定双组分相同的原理，在紫外光区测定它们。

2、实验原理根据朗伯—比尔定律，用紫外—可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分。

由两种组分组成的混合物中，若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，可根据相互间光谱重叠的程度，采用相对的方法来进行定量测定。

例如，当两组分吸收峰部分重叠时，选择适当的波长，仍可按测定单一组分的方法处理；但当两组分吸收峰大部分重叠时，则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定。

混合组分中在λ1处的吸收等于组分A和组分B分别在λ1处的吸光度之和，即：同理，混合组分在λ2处吸光度之和应为：若先用A、B组分的标样，分别测的A、B两组分在和处的摩尔吸收系数、、、；当测的未知试样在λ1和λ1处的吸光度和后，解下列二元一次方程组：即可求得A、B两组分各自的浓度和。

一般来说，为了提高检测的灵敏度，λ1和λ2宜分别选择在A、B两组分最大吸收峰处或其附近。

3、紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量3.1、仪器试剂仪器：紫外-可见分光光度计（天津港东UV-4501S），石英吸收池一对试剂：维生素C（抗坏血酸），维生素E(α-生育酚)，无水乙醇3.2、实验步骤3.2.1、检查仪器开机预热20min，并调试至正常工作状态。

紫外分光光度法测定橙汁中维生素C的含量陈玉锋;庄志萍【摘要】[目的]为市售饮料中维生素C(Vc)的科学测定提供参考.[方法]利用Cu2+催化溶解氧氧化Vc,建立紫外分光光度法测定橙汁中还原型Vc的方法,并对测定条件进行优化.[结果]采用磷酸和醋酸混酸溶液(3∶7,V∶V)作稳定剂,Cu2+为催化剂,70 ℃恒温水浴中,测定市售橙汁饮品中Vc的含量,标准曲线方程为y=0.0714x+0.135 0,线性相关系数为0.999 5.该方法精密度RSD(n=5)为0.35%,加标回收率为98.5%.[结论]建立了紫外分光光度法测定橙汁中Vc的方法,该方法简单、快速,结果令人满意.%[Objective] Tth aim was to provide refereneces for the scientific determination of Vitamin C (Vc) in sold beverage. [Method]With Cu2+ as catalyst to oxidize Vc, the method to determine reduced Vc in orange juice by UV spectrophotometry was constructed, and then the determination conditions were optimized. [ Result] With the mixed solution of phosphoric acid and acetic acid (3∶7, V∶ V) as the stabiliz er, Cu2+ as catalyst and in the 70 ℃ water-circulator bath, Vc content in the sold orange juice was determined, the standard curve equation was y = 0.071 4x + 0.135 0, the linear correlation coefficient was 0.999 5, the precision RSD( n = 5 ) was 0.35％ and recovery rate was 98.5％.[ Conclusion] The method to determine Vc in orange juice by UV spectrophotometry was constructed, which was simple and fiast and whose results were very satisfying.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)001【总页数】3页(P236-237,240)【关键词】维生素C;紫外分光光度法;橙汁【作者】陈玉锋;庄志萍【作者单位】牡丹江师范学院化学化工学院,黑龙江牡丹江,157012;牡丹江师范学院化学化工学院,黑龙江牡丹江,157012【正文语种】中文【中图分类】S123目前维生素C(Vc)的测定方法有荧光分析法、碘量法、2，4－二硝基苯肼法、高效液相色谱法、铁(Ⅱ)－邻菲罗啉－BPR体系分光光度法、电位滴定法［1－6］。