血清胱抑素C测定的临床应用进展
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胱抑素C的临床应用及研究进展2楚雄彝族自治州人民医院 675000摘要:血清胱抑素C(cystatin C,CysC)因其具有稳定的内源性标志物特性,越来越受到研究人员和临床关注。
除了已成熟应用于肾脏功能损害评估外,研究发现其在心血管病、糖尿病、甲状腺疾病以及Alzheimer病等多种疾病的诊断、疗效监测及预后评估中,同样具有较好应用前景。
本文就CysC与上述疾病的临床应用及研究进展综述如下。
关键词:胱抑素C;临床应用;研究进展1CysC的生物学特征CysC由有核细胞恒速合成,它在人体组织和体液中广泛分布,是一种由人有核细胞产生的低分子的非糖基化蛋白。
CysC对包括组织蛋白酶家族在内的半胱氨酸肽酶具有主要的保护作用,在参与多种生理和病理生理过程,如抗原的加工和呈递,以及炎症和癌变过程[1]。
在调节细胞外蛋白分解中过程中,血清CysC浓度的异常可能提示有病理学意义。
CysC作为反映早期肾功能不全的敏感指标已得到普遍应用,近年来,在糖尿病肾病早期,高血压肾病,心血管疾病和甲状腺疾病等疾病中作为相关标记物不断得到深入研究。
2 CysC与肾脏疾病肾脏功能对机体内环境平衡十分重要,如肾功能损伤会对机体产生严重影响。
临床早期肾功能损害若能够及时进行治疗,可逆转发生细胞外基质增生、肾小球基底膜增厚等病理变化从而避免损伤肾小球血管。
如未能及早治疗会发展为终末期肾脏疾病。
CysC是肾功能辅助诊断理想的生物标志物,它恒速产生,自由过滤,并最终分解代谢。
患者肾功能损伤后CysC在血液中的含量会随肾小球滤过功能变化而变化。
在发展成肾衰竭时,血清CysC含量可高于正常水平的10倍。
最新研究表明,CysC不仅可以评估肾小球滤过率(GFR,glomerular filtrationrate),还可以预测肾损伤。
Herget-Rosenthal等人研究发现,血清 CysC作为一种有用的急性肾损伤检测标志物优于肌酐和肾小球滤过率来评估肾功能的有效性[1]。
胱抑素C(CysC)在临床中的应用近年来,胱抑素C (CysC)在临床中得到了广泛的应用,研究认为它是评价肾功能肾小球滤过率(GFR)的敏感指标,对早期诊断各种急慢性肾脏病患者具有重要价值,临床研究也证实了CysC在其他一系列生理病理过程发挥着作用,并有重要的临床意义,它与多种疾病的发生、发展有密切关系。
我院于2011年9月开展了CysC检测分析,本人参考了相关文献资料,结合我院实际,现将CysC在临床方面的应用做如下报告:1、CysC在肾脏疾病中的应用CysC是近年来报道的反映肾小球滤过率(GFR)的内源性新指标。
与Scr和Ccr相比,CysC由于极少受肾外因素( 年龄、性别、身高、肌肉量、膳食结构、机体疾病状况、药物等) 以及肾小管分泌作用的影响,因此 CysC可以更为准确、可靠的反映GFR,对早期诊断各种急慢性肾脏病患者具有重要价值。
研究显示CysC是一个有前景的监测肾功能的指标,它是反映早期GFR 变化理想、可靠的内源性标志物[1-2] .2、CysC在在糖尿病中的应用糖尿病患者极易诱发糖尿病病肾病是,很多报道认为这此患者在尚未发牛肾小球损伤前已有肾小管损伤,肾小管间质损伤对肾实质病变过程及预后起决定性作用。
据何淑霞[3]对346例糖尿病患者和健康体检人员200例作为对照组进行的CysC等项目进行比较说明:血清CysC在糖尿病肾病中较对照组明显增高;刘洪正等[4] 的研究亦表明:多项指标都能反映肾脏旱期损坏,但敏感性以CysC最好。
研究说明:CysC是早期显示肾损伤变化的可靠检测指标,可以作为对糖尿病早期进行肾功能评价的指标。
3. CysC与心血管疾病3.1 CysC与急性心肌梗死及冠心病据董巧玲和刘俊[5] 结果显示,急性心肌梗死患者早期血清CysC水平低于不稳定型心绞痛患者和对照者,而急性心肌梗死1周后血清CysC水平接近正常,甚至有所增高,认为急性心肌梗死早期CvsC明显下降。
另据郭利平[6]的相关研究表明:CysC是半胱氨酸蛋白酶的抑制剂,在体内能较强抑制半胧氨酸蛋白酶和组织蛋白酶。
致力于打造高品质文档胱抑素C在临床中的运用研究胱抑素C(CystainC,CysC)的生物特性2胱抑素C与肾小球滤过功能3胱抑素C的影响因素 4 CysC 在儿童期正常值有很多学者对不同年龄阶段儿童的血清CysC水平进行测定,得出的结论是CysC不通过胎盘,因此婴儿血液中的浓度不受母体水平影响[13]也不受肾前性因素及脱水状态的影响[14],CysC在早产儿血清中的浓度高于足月儿,并且CysC浓度与胎龄、体重、血红蛋白、性别、胆红素水平无关。
整个儿童时期出生时浓度最高,随后的几个月浓度逐渐下降。
国外多位学者测定的不同年龄的参考值如表,测定方法运用免疫比浊法。
血清胱抑素C参考值范围5基于CysC的肾小球滤过率公式的临床应用CysC的检测目前可在自动生化分析仪上进行,适合于临床常规应用。
CysC的测定在反映肾小球滤过率方面有很多优势,对各种慢性肾病的早期诊断有重要作用。
但基于CysC 的肾小球滤过率计算公式的应用尚未成熟。
CysC要做为一种理想的GFR标记物替代肌酐还需进一步的论证和临床应用研究。
6问题与展望综上所述,由于CysC特定的生物特性及功能,使其成为比较理想的肾小球滤过率的标志物。
但在临床实际应用中,还存在一些问题:首先是测量方法有待完善以进一步提高其准确性和精确性,第二是如何排除一些影响因素的干扰,第三CysC的价值还需要一些大规模、多中心和前瞻性的试验提供足够的数据支持。
相信随着对CysC研究的深入和其本身测量方法的改进,CysC必将显示出越来越重要的临床价值,为我们更好的了解肾脏病的发病机制和早期诊断提供很好的帮助。
[2]SAITOHE,SABATINILM,EDDYRL,et,al,The human cystatin C gene (CST3) is a member of the cystatin gene family which is localized on chromosome 20[J].Scand J Clin Lab Invest,1989,162,(3):1324-1331 [4]MUSSAP M.Biochemistry and clinical role of human cystatin C[J].Crit Rev Clin Lab Sci,20XX,41(5-6):467-550 [6]Kyhse-Andersen J,Schmidt C Nordin Get al.Serum cystatin C,determined by a rapid automated particle-enhanced turbidimetric method,is a better marker than serum creatinine for glomerular filtration rate[J].Clim Chem 1994;40(10):1921-1926[7]PUCCI L,TRISCORNIA S,LUCCHESI D,et al.Cystatin C and estimates of renal function:searching for a batter measure of kidney function in diabetic patients [J].Clin Chem,20XX,53(3):480-488 [9]Bokenkamp A,vanwijk JA,Lentze MJ,et al.Effect of coreicosteroid therapy on serum cystatin C and beta 2-microglobulin concetrations.Clin Chem.20XX,48(7):1123-1126 [11]Wiesli P, Schwegler B,Spinas。
胱抑素C临床检验及在肾脏疾病应用中的研究进展【摘要】胱抑素 C 也被称为y-微量蛋白y -后球蛋白,由人体核细胞产生,肾小球滤过而被清除,正常生理状态下血清胱抑素 C 水平恒定。
胱抑素 C 的临床检测实现了自动化、标准化、检验结果的可比性,所以目前它是一个最好、最有效反映肾小球滤过功能的标志物。
本文对胱抑素 C 临床检验及在肾脏疾病中的研究进展进行综述。
【关键词】胱抑素;临床检验;肾脏疾病;胱抑素 C(cystatinC,CysC)是一种非糖化蛋白,由个氨基酸组成,相对分子量 130kd,产生于人体所有有核细胞,不受年龄、性别、饮食、肌肉量和运动的影响,生成量非常稳定,仅在使用大剂量糖皮质激素或甲状腺功能异常时影响 CysC的产生。
CysC可以自由通过肾小球滤过膜的机械屏障与电荷屏障,并几乎全部在近曲小管重吸收,不被肾小管分泌。
Cys C 的临床检测实现了自动化、标准化、检验结果的可比性,是目前最好、最有效反映肾小球滤过功能的一个标志物,评价肾小球滤过率(GFR)敏感性和特异性可达到 89%~97%。
1 CysC在临床检验中研究进展1.1 检验方法及参考品研究进展检测CysC的方法可概括为均相法和非均相法。
因非均相法具有耗时长、线性范围窄、难以自动化等缺点,而被均相法替代。
目前,检测 CysC的均相法主要包括颗粒增强透射免疫比浊法 (particle—enhanced PETIA)、颗粒增强散射比浊法 (particle—enhancedBe—pholemetryimmunoassay,PENIA)。
PETIA法可实现自动化、高通量、检测周期短等优点而更被广泛应用,以Roch和丹麦 DAKO公司为代表;以 Siemens公司为代表 PENIA法因其准确度高、线性范围宽、不精密度低等特点而常被作为比对方法进行性能评价。
自2010年 CysC参考品 ERM—DA471上市后,使得CysC检测结果在不同检测方法间的一致性得到提高。
浅谈血清胱抑素C的临床应用进展发表时间:2017-05-17T09:10:10.053Z 来源:《医师在线》2017年3月下第6期作者:孙平陈涛通讯作者[导读] 所以CysC可以用来监测围产期妇女GFR的情况。
最近的研究结果显示CysC与血清尿酸盐和肌酐相比,对先兆子痫有较好的诊断准确性。
(1甘肃省白龙江林业管理局中心医院;甘肃陇南746010;2甘肃省康复中心医院;甘肃兰州730000)摘要:血清胱抑素C(CysC)可在体内以恒定速度产生,并存在于各种体液之中,尤以脑脊液和精浆中含量为高,尿液中最低,不受年龄、性别、体重、炎症等因素影响,胱抑素C与肾小球滤过率的线性关系优于尿素、肌酐和内生肌酐清除率,在各种疾病造成肾脏早期损害的诊断、治疗及预防方面的应用越来越广,并且在其他疾病的诊断、治疗和预防上也不断的得到应用。
关键词:胱抑素C;生物学特性;临床应用1、Cys C与(其他)肾功能检测项目组合(Scr,Urea,UA和/或Cys C),可显著提高检测的灵敏度和特异性。
适用于:①对肾脏疾病的肾功能评价:Cys C的生物学特性使它成为基本满足理想内源性GFR标志物要求的内源性物质。
大量研究证实Cys C是优于血肌酐(Scr)的内源性标记物。
儿科患者不易接受外源性GFR标志物,而肌酐清除率测定受体表面积、肌肉量等多种因素的影响;血肌酐值与肌肉量成正比,对于机体肌肉含量较少的儿童来说,肌酐很难准确的监测GFR轻微的变化;儿童出生数月Cys C水平与成人相当,Cys C是评价是儿童更为理想的GFR标志物。
②在肾移植中的应用: Cys C可作为肾移植术后测定肾功能的内源性物质,其在发现早期肾功能损害方面具有更高的灵敏度和特异性,可作为衡量急、慢性排斥及免疫抑制药物肾毒性的观察指标之一[1]。
在对30例肾移植患者研究发现,发生急性排斥反应的患者胱抑素C与肌酐基本同步升高,但胱抑素C升高的幅度要比肌酐大。
在情况稳定的肾移植患者中,血清胱抑素C与肾小球菊粉清除率的相关性比肌酐与肾小球菊粉清除率的相关性大。
血清胱抑素C的检测研究及临床应用进展
徐风芹
【期刊名称】《医学综述》
【年(卷),期】2013(019)016
【摘要】血清胱抑素C(Cys C)是一种反映肾小球滤过率变化的理想的内源性标志物.与血清肌酐和内生肌酐清除率相比,它是一个更为准确、可靠地反映肾小球滤过功能的指标,对早期发现各种慢性肾脏病患者肾小球滤过功能的损害具有重要价值.颗粒增强透射免疫比浊法测定血清Cys C是一种准确、灵敏、稳定、简便的方法,可根据病情或治疗监测需要及时进行检测,适宜在临床推广,并具有较广阔的应用前景.
【总页数】3页(P2907-2909)
【作者】徐风芹
【作者单位】海洋石油总医院检验科,天津,300452
【正文语种】中文
【中图分类】R692
【相关文献】
1.血清胱抑素C测定的临床应用进展 [J], 李梅
2.血清胱抑素C检测在糖尿病肾病诊断中的临床应用进展 [J], 秦雪
3.血清胱抑素C与肾功能损害的关系及血清胱抑素C对早期高血压肾损害患者的临床观察分析 [J], 李政波;王雪
4.血清胱抑素C与肾功能损害的关系及血清胱抑素C对早期高血压肾损害患者的
临床观察分析 [J], 李政波;王雪
5.急性脑梗死患者中血清胱抑素C及凝血功能检验的应用分析 [J], 张玉婷
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胱抑素C的临床应用研究与进展胱抑素C(CysC)是近年研究发现的一种特异性高、准确性好,较肌酐清除率(CCr)更为敏感的评价肾小球滤过率(GFR)的新指标。
CysC能自由通过肾小球滤过膜,在近曲小管几乎全部被重吸收,在血液中的浓度较为恒定,是反映GFR的灵敏指标。
随着分子生物学技术的发展,CysC的检测技术不断提高,为临床的研究和应用提供了支持,现已成为国内外研究热点。
目前CysC临床检测使用颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA)或颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA),全自动化,操作简单速度快,具有较好的灵敏度和准确性。
在儿科疾病、心血管疾病、肿瘤化疗及肾移植等方面的应用具有很高的临床价值。
肾脏的主要功能是排泄代谢废物及调节水、电解质、酸碱平衡,以维护机体内环境的稳定。
GFR是评价肾功能的重要指标。
20世纪80年代中期瑞典的Simonsen等[1]通过一系列研究发现CysC是一种特异性高、准确性好、较CCr更为敏感的反映GFR的新指标。
由于CysC分子量小,携带正电荷,能够自由通过肾小球滤过膜,并在近曲小管几乎被完全重吸收,重吸收后被完全分解代谢,同时肾小管也不分泌,在组织中产生的速率恒定[2],而且在炎性反应状态下其产生率不会改变,不受其他因素如年龄、性别、饮食、炎症、感染、血脂、肝脏疾病等干扰。
肾脏是清除循环中CysC的唯一器官,血中浓度由肾小球滤过决定,因此,CysC被临床作为理想反映GFR变化的内源性标志物而日渐受到重视。
随着CysC商品化试剂盒的出现,该项目已逐渐广泛应用于临床。
1 CysC的结构和生物学特性CysC是相对分子质量为13×103,由122个氨基酸组成的低分子量非糖基碱性蛋白质,等电点为9.3。
所有的有核细胞均可产生,生成速度稳定,不受炎症、胆红素、溶血、三酰甘油的影响,且与性别、年龄、肌肉量无关[3]。
它主要分布于细胞外液,如精液、脑脊液、血液、尿液、胸水、唾液等。
胱抑素C检测的临床应用进展【摘要】血清胱抑素C(CysC)是一种低相对分子量蛋白质,因其与肾脏疾病关联的特异性及敏感性均较高,临床上逐步用以代替血清肌酐、肌酐清除率,它是一种反映肾小球滤过率变化的理想的内源性标志物,能更为准确、可靠地反映肾小球滤过功能的新指标,CysC不仅在肾脏疾病方面而且在糖尿病、肝硬化、肿瘤、心脑血管、肾移植等其他疾病领域也具有一定的应用价值,具有很广阔的前景。
【关键词】胱抑素C;肾小球滤过率;临床应用肾脏的主要功能是调节酸碱、水、电解质平衡、排泄代谢废物、维持机体内环境稳定的主要器官。
肾小球滤过率是评价肾功能的主要指标,主要有内源性指标和外源性指标[1]。
外源性指标中的放射性核物质具有一定的放射性及菊粉清除率实验在检测的过程中受到体表面积、性别、年龄等因素的影响,且缺乏即时性,因此存在一定的局限性,而内源性指标尿素、肌酐及低相对分子量蛋白质在血液中的水平并不稳定,且会受到非肾性或肾性的相关因素干扰[2-3]。
近年来随着研究的不断深入,众多研究者发现血清胱抑素C(CysC)是一种理想的反映肾小球滤过率变化的内源性标志物,其能自由通过肾小球滤过膜,在人体近曲小管被完全重吸收幷完全分解代谢,不再回到血液循环中,肾小管不分泌CysC,且在人体炎症反应的状态下,其生成速度和在血液中的浓度稳定,肾脏是CysC清除的唯一器官,血液中CysC的浓度主要由肾小球决定[4-5]。
CysC与肾小球滤过率呈良好的线性关系且优于血清肌酐和尿素,因此CysC是反映早期肾小球滤过率变化更理想的内源性标志物[6]。
CysC与肾脏疾病关联的特异性和敏感性均较高,临床逐步用以替代血清肌酐监测的内源性指标。
通过研究发现,CysC的应用不仅在肾脏疾病方面,而且在糖尿病,肝硬化、肿瘤、心脏等其他疾病领域也具有一定的应用价值,本文就CysC的生物活性、检测方法和临床应用进行综述。
1CysC的生物学特性胱抑素C又称半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,是由122个氨基酸残基组成的微球蛋白,相对分子量13.3KD,等电点为9.3,由于胱抑素C的相对分子量较低,且等电点高,因而CysC能自由通过肾小球滤过膜,且在近曲小管内被完全分解代谢,其广泛存在于人体各种组织的有核细胞和体液中,以恒定速率产生,不受胆红素、甘油三脂、炎性反应、溶血等因素的影响,且与人体的肌肉量、年龄、性别等无关联。
浅谈血清胱抑素C检测方法的研究进展摘要:胱抑素C.是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白,广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质,分子量为13.3KD,由122个氨基酸残基组成,可由机体所有有核细胞产生,产生率恒定。
胱抑素C与肾小球滤过率的线性关系优于尿素、肌酐和内生肌酐清除率,在各种疾病造成肾脏早期损害的诊断、治疗及预防方面的应用越来越广,并且在其他疾病的诊断、治疗和预防上也不断的得到应用。
循环中的胱抑素 c仅经肾小球滤过而被清除,是一种反映肾小球滤过率变化的内源性标志物,并在近曲小管重吸收,但重吸收后被完全代谢分解,不返回血液,因此,其血中浓度由肾小球滤过决定,而不依赖任何外来因素,如性别、年龄、饮食的影响,是一种反映肾小球滤过率变化的理想同源性标志物。
因此,其血清浓度主要由GFR决定,Cys C理所当然的成为反映肾小球滤过情况的重要指标[1]。
现将其检测方法综述如下。
关键词:胱抑素C;方法学;进展胱抑素C的测定方法:胱抑素C主要临床应用是作为肾小球滤过率标志物,其测定方法很多,包括单向免疫扩散法、酶联免疫测定法、荧光免疫法、时间分辨荧光免疫法、放射免疫法、胶乳颗粒法、胶乳增强免疫比浊法等。
目前临床多选择胶乳增强免疫比浊法作为常规检测胱抑素C的测定方法[2]。
1酶联免疫测定法(ELISA):使抗原或抗体吸附在某种固相支持物表面,并保持其免疫活性,酶标抗体或抗原在液相中催化底物显色,根据颜色反应的深浅来进行胱抑素C含量的定量分析。
本法为手工操作,不需要昂贵的仪器,试剂成本低,临床应用较广,但不适合急诊样本的检测。
2胶乳增强透射免疫比浊法(PETIA):在胶体溶液中,抗原胱抑素C与其抗体特异性结合,生成不溶性抗原一抗体复合物粒子,使反应溶液浊度增加,在特定波长下检测吸光度改变,与标准品比较可计算出胱抑素C的浓度。
本法可以利用生化分析仪进行比浊测定,整个分析过程只需要几分钟。
血清胱抑素C检验在肾脏疾病患者中的临床应用分析发布时间:2022-10-28T09:16:14.470Z 来源:《医师在线》2022年18期作者:潘菲唐学敏[导读] 目的本文主要探析针对肾脏疾病患者进行血清胱抑素C检验的临床价值及应用意义。
潘菲唐学敏湖州市吴兴区月河飞英街道社区卫生服务中心浙江湖州313000杨家埠卫生院浙江湖州313000【摘要】目的本文主要探析针对肾脏疾病患者进行血清胱抑素C检验的临床价值及应用意义。
方法:在2020年2月—2022年2月期间,挑选于本院肾脏内科接受治疗的100例患者作为本次实验工作的研究主体即研究组,并将另外100例入院检查的健康患者作为另一组实验对象即参照组,并对两组患者均进行血清各项检验,后对比两组患者的检测结果。
结果:研究组患者的肌酐清除率、血清肌酐、尿素和内生肌酐各项数值均高于参照组P<0.05。
结论:在肾脏疾病的检查过程中,进行血清胱抑素C检验,可对患者的肾脏功能水平进行准确的判断,对患者的肾脏后期治疗起到了重要的辅助作用,且可替代其他常规肾脏检查,提高了检查效率,使检查更加便捷,值得推广。
【关键词】血清胱抑素C检验;肾脏疾病;临床应用肾病疾病在临床的治疗中比较常见,其病因较为复杂,是由各种肾脏相关疾病所致,据研究表明多为免疫力下降及肾脏感染,如不及时治疗可使患者加重病情【1】。
因此应重视肾脏疾病早期的检查,可有效分析患者的肾脏情况,并做出相应的治疗对策。
1 资料与方法1.1一般资料在2020年2月—2022年2月期间,挑选于本院肾脏内科接受治疗的100例患者作为本次实验工作的研究主体即研究组,并将另外100例入院检查的健康患者作为另一组实验对象即参照组。
以上患者均无高血压、心脏病、肿瘤疾病,无精神意识,行动障碍者。
组间其差异较小(P>0.05),可以进行组间对比。
3讨论肾脏是人体的重要器官之一,此类疾病可使患者的代谢功能逐渐下降,同时可引发其他一系列并发症,危害患者的健康,针对肾脏疾病的早期诊断尤为关键【4】。
血清胱抑素C测定的临床应用【摘要】目的:探讨血清胱抑素C(Cys c C)在高血压、糖尿病、肾移植患者中早期肾损害的的诊断价值。
方法:胶乳增加免疫比浊法测定9例肾移植患者,20例高血压患者,30例糖尿病患者的胱抑素C,采用苦味酸法测定血清肌酐(SCr),并进行相关分析。
结果:高血压、糖尿病、肾移植组的血清胱抑素C水平高于正常对照组,其异常检出率高于血清尿素氮、肌酐。
结论:Cys C是反映早期肾功能损害的一项敏感而可靠的指标。
【关键词】胱抑素C;高血压;糖尿病;肾移植;肾功能损害血清胱抑素C(Cys C)是一种低分子量蛋白质,Grubb于1985年首先报道其血清Cys C水平与肾小球滤过率(GFR)密切相关,可作为肾小球滤过功能的指标[1],近年来,随着Cys C商品化试剂盒的出现,该项目已逐渐推广应用于临床,笔者通过对本院高血压、糖尿病及肾移植患者Cys C、BUN、Cr的临床观察和分析,探讨Cys C 在早期肾损害评价的的临床意义。
1 对象与方法1.1 对象对照组:20例,为我院健康体检者,年龄43岁~72岁;明确诊断的患者59例,其中高血压病组20例,年龄47岁~75岁,糖尿病组30例,年龄38岁~78岁,肾移植组9例(均为肾移植术后一年内的患者),年龄29岁~65岁,所选病例的内生肌酐清除率均>40 ml/min。
1.2 方法仪器使用东芝TBA120FR全自动生化分析仪,Cys C采用胶乳增强免疫比浊法测定,试剂、质控品及校准品均由浙江康特生物科技有限公司提供,血清肌酐及尿素氮试剂均由上海科华生物技术有限公司提供,按说明书操作。
1.3 统计学处理采用SPSS 12.0作各项数据统计处理,计量资料结果用±s 表示,比较采用t检验。
2 结果各疾病组血清测定结果,见表1。
表1 各疾病组血清测定结果(略)注:*与正常对照组比较P<0.05,**与正常对照组比较P<0.01。