细菌培养标本的采集运送与处理
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微生物检验标本采集和运送原则微生物检验标本采集和运送原则正确的标本采集和及时送检是保证细菌学检验质量的关键!其目的是要捕捉到与感染相关的病原菌并保持其活性,同时尽可能的减少其它与感染无关细菌的干扰。
下面是店铺为大家带来的关于微生物检验标本采集和运送原则的知识,欢迎阅读。
采样时机抗生素使用前(停用抗生素3至5天或下次用药前)采样采样方法采集无菌部位的标本应严格无菌操作,非无菌部位尽量减少正常菌群的污染,采样量足。
采样容器专用的无菌,防渗漏,有盖,无酸、碱、防腐剂及消毒剂污染。
送检尽快送检,一般不超过2小时。
若不能及时送检可于4-8℃保存,但对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。
当标本量小于1ml时应于15~30分钟内送检,防止挥发和干燥。
微生物检查的标本采集和运送原则1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。
2.尽量在抗菌药物使用前,或停药3至5天后采集标本,如不能停用抗菌药物,应于下次抗菌药物应用前采集。
应在感染的急性期或伤口局部治疗前采集标本。
3.选择正确的解剖部位,并以适当的技术、方法与容器收集足量的标本。
4.采样时应严格执行无菌操作,将污染可能降至最低。
5.收集真正感染的病灶处的标本,且避免邻近区域常居菌群的污染。
6.采用专用无菌容器收集标本。
容器须灭菌处理,防止渗漏,但不得使用消毒剂。
标本中不可添加防腐剂。
7.采样后应立即送检,最好在2h内。
如不能及时送检,应将标本置于适当的储存环境待送,但不超过24小时。
对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。
当标本量小于1ml时应于15~30分钟内送检,防止挥发和干燥。
8.尽量不要以一般棉花拭子收集标本,应使用专用的纤维拭子。
9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息,在检验申请单上填写足够的有关临床资料。
(要标明病区、病人姓名、感染状况、近期抗菌药物使用情况、标本来源、检验目的、采集部位、采集及送检时间等)10.同一天同一检测目的、相同标本(血液标本除外)一般只需送检一次(份)。
临床微生物学标本采取和处理的规范化要求正确的采取、处理与运送用于细菌培养的标本是临床细菌检验成功的关键.标本采取与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的基础;而标本采取与处理不当将严重影响检验结果,给临床以误导,延误对患者的正确治疗。
为此,我们提出初步的参考意见,并希望在实践中不断完善。
一、血液细菌培养标本的采集和处理临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者,需做血液细菌培养以明确病原。
1.采集方法:静脉采血,以无菌操作方法抽取血液后,直接注入血培养瓶中,轻轻颠倒混匀,以防血液凝固.如果同时作需氧和厌氧培养,应先将标本接种到厌氧瓶中,再注入需氧瓶,严格防止将空气注入厌氧瓶中。
2。
采血时间以及血培养份数:在患者发热期间越早越好,最好在抗菌治疗前,用药前24小时内采集2~3次血液标本,可使细菌检出率高达99%.对间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0。
5~1小时采血,亦可在寒战或发热后1小时采集血液标本。
特殊感染患者采血培养时应遵循以下原则:(1)可疑急性发热性菌血症、败血症患者:应在使用抗菌药物之前,在24小时内从不同部位采集2~3份血液标本培养.(2)可疑细菌性心内膜炎患者、感染性心内膜炎患者:在1~2小时内采集3份血标本培养,如果24小时后阴性,再采集两份血标本培养。
(3)不明原因发热患者:先采集2~3份血标本,抽血间隔60 min,24~36小时后体温升高之前,再采集2份血标本进行培养。
因为1次血培养不足以说明问题,可能会遗漏阳性结果。
(4)可疑菌血症但血培养持续阴性时;应改变血培养方法,以获得罕见或苛养的微生物。
(5)在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎,需马上做抗菌治疗;或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要紧急手术的患者,应立即从两臂分别取2份标本.3。
采血部位:采血部位通常为肘静脉。
疑为亚急性心内膜炎的患者,以肘动脉或股动脉采血为宜。
疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者,在病灶或髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓。
临床细菌检验标本的采集、运送、保存和处理正确的标本采集、运送、保存和处理对于保证临床细菌室的工作质量非常重要,应予高度重视。
实验室有责任将标本选择(包括时间和解剖部位)、收集、保管、运送、接受和安全等关键性信息,用户里手册的形式提供给各临床部门参考。
一、标本管理的安全警示1.所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作,防止污染的原则下认真进行。
2.已采集原始标本都应置于防漏、密封的无菌容器中运送。
3.带针头的注射器运送标本时用无菌试管或防护装置套住注射针,再置于防漏塑料袋中运送至检验科。
4.采集足够量标本,材料不足可能导致假阴性。
5.每份标本都应标记患者姓名、送检号码、标本来源、具体部位、日期、时间及相关临床信息。
6.常规性细菌学检验的标本,采集后不能超过1小时送至检验科,4℃保存也不能超过24小时,怀疑厌氧菌感染的标本应在半小时内送至检验科(不能及时运送组织标本必须在厌氧环境中25℃不超过24小时)。
7.脑脊髓液、生殖道、眼睛、内耳标本应立即送检,绝不可冷藏。
二、标本的处理和要求1.血液和骨髓:1)急性脑膜炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎、肾盂肾炎发热患者,应在抗生素治疗或更换前,从不同部位采集血液标本,做2次血液培养,分别接种于各种培养瓶中立即送检置于孵箱内培养2)疑似心内膜炎患者:急性病例在抗生素治疗或更换前1—2小时,从不同部位采集血液标本,做3次血液培养3)亚急性病例:第一天24小时内,相隔1小时连续采集3次血液做培养,若24—48小时全部阴性,再采集2—3次血液做培养4)若已经抗生素治疗患者,连续3天,每天取2次血液做培养5)严格无菌技术采集血液血培养瓶后立即送检,切不可放冰箱暂存。
2.脑脊液:脑脊液采集后,置于无菌试管中,15分钟内送检,绝不可冷藏。
每种检验最小需要量:细菌培养≥1ml,真菌≥2ml,抗酸杆菌≥2ml.3.尿液:1)中段尿采集:清洁外阴及尿道口周围,自然排尿,让尿流不间断,截留中段尿,,置于无菌尿杯中立即送检。
微生物标本采集、送检及处理原则一、标本采集的一般原则:1、病程早期、急性期或症状典型时,使用抗生素前;2、无菌采集应无污染,严格进行无菌操作;3、根据目的菌的特性用不同的方法采集适量标本,采集量不应过少;4、注意在不同病程采集不同部位标本;5、采集标本时要防止传播和自身感染;二、标本的处理:1、标本保存在4℃环境中,在2h之内送检;脑脊液则要在25 ℃保存,用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h;对环境敏感的细菌应保温并立即送检;2、标本中可能含有致病菌,必须注意安全防护;切勿污染环境;对于烈性传染病标本运送时更要由专人运送,严格按规定包装;3、厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送,有时可直接用抽取标本的注射器运送;Ⅰ血液及骨髓标本:血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法;如从患者血液中检出细菌,一般应视为病原菌;常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、链球菌A、B群、肺炎链球菌等、肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等;1、采血时间及次数2、抽血部位及抽血量3、报告方式:培养5d无菌生长者报告“培养5d无菌生长”;查见细菌报告菌名和药敏结果;4、菌血症、败血症的诊断标准:1两次培养均出现同一种细菌可排除污染;2发病星期后血中抗体滴度上升;Ⅱ脑脊液标本:脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值;正常人的脑脊液是无菌的,检出细菌提示有细菌性急性化脓性、结核性等脑膜炎;常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌A、B群和肺炎链球菌、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等;1、涂片检查:1 一般细菌涂片检查:例如:革兰阴性、凹面相对的球菌,可能是脑膜炎奈瑟菌;链状排列的革兰阳性球菌;长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌,可能是流感嗜血杆菌;2结核分枝杆菌涂片检查3新生隐球菌涂片检查2、分离培养3、报告方式:培养48小时,仍无菌生长者报告“培养2天无细菌生长”;查见细菌报告细菌,报告菌名和药敏结果;Ⅲ呼吸系统标本:一痰标本下呼吸道的痰液是无细菌的,而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌如草绿色链球菌;若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌,提示有上呼吸道感染;常见的病原菌主要有肺炎链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌;1、标本的采集时间2、标本采集方法:1 自然咳痰法 2 气管镜下采集法 3 气管穿刺法 4 结核分枝杆菌标本收集法:收集24h痰液以提高阳性检出率;3、涂片检查:1一般细菌涂片2结核分枝杆菌涂片3放线菌及诺卡菌涂片4、培养:1培养标本的选择:应选择粘液痰作涂片;2痰标本培养前处理:用无菌盐水将痰洗涤3次,加入等量的1%胰酶溶液,37oC水浴90min,使痰液均质化后备用;3分离培养5、报告方式:痰标本培养24小时后仅有草绿色链球菌生长而无致病菌生长,报告“正常菌群”;查出的致病菌,报告菌名和药敏结果,同时报告细菌的量化指标;二咽拭标本正常咽拭有多种上呼吸道的正常菌群如草绿色链球菌;若从患者标本中查出致病菌提示上呼吸道有细菌感染如急、慢性扁桃体炎,咽炎,喉炎等常见的病原菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、微球菌和棒状杆菌等;1、涂片检查先培养后涂片;2、分离培养3、报告方式:同痰标本检查;Ⅳ穿刺液标本穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等;正常穿刺液是无菌的,若从患者穿刺液中查见致病菌或条件致病菌提示该部位有细菌感染;胸腔感染的病原菌以结核分枝杆菌多见;腹腔感染的病原菌以肠道细菌如大肠挨希菌、粪肠球菌,以及结核分枝杆菌多见;心包炎和关节腔液以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌多见;1、涂片检查先接种后涂片2、分离培养:1普通培养 2厌氧培养 3结核菌培养3、报告方式:培养24h无细菌生长,报告“培养24h无细菌生长”;查见细菌,报告菌名和药敏结果;Ⅴ泌尿、生殖道标本一尿液标本中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要价值;细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌;有致病菌或条件致病菌生长,菌落计数>105/ml,提示感染膀胱炎,肾盂肾炎、肾或膀胱结核等;常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等;1、中段尿标本采集法2、涂片检查:1一般细菌及淋病奈瑟菌2念珠菌3结核分枝杆菌3、一般细菌培养:如培养2d无细菌生长,即可弃去;1倾注平板法2平板接种环法3标准接种环法:若定量接种环含量为.001ml,则整个平板菌落数超过100个,可报告“菌落数>105/ml”;4、特殊培养:1淋病奈瑟菌培养2厌氧菌培养3结核分枝杆菌培养5、报告方式:培养24h细菌生长,报告“24h无细菌生长”;查见细菌,报告菌名及其菌落计数菌落数/ml和药敏结果;二生殖道标本正常的内生殖器是无菌的,而外生殖器包括男性尿道口和女性阴道有多种细菌寄生;查见病原菌提示有细菌感染;常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃细菌、变形杆菌等;1、涂片检查:革兰染色镜检2、分离培养:1普通培养2淋病奈瑟菌培养3阴道加特纳菌培养4报告方式:如查见淋病奈瑟菌、阴道加特纳菌等病原菌,报告菌名和药敏结果;Ⅵ粪便标本正常情况下肠道中有多种细菌;引起感染性腹泻的病原微生物有:1细菌性:产毒素型腹泻、侵袭型腹泻、食物中毒、慢性腹泻;2真菌性;3病毒性;1、标本采集:1自然排便采集;2直肠试子;2、涂片检查:粪便标本因各种正常菌群含量甚多,仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌;因此,粪便标本一般不作涂片检查;3、培养:1沙门-志贺菌培养2致病性大肠埃细菌培养3霍乱弧菌培养4副溶血弧菌培养5小肠结肠炎耶尔森菌培养6真菌培养7菌群失调的细菌学检验4、报告方式:Ⅶ脓液及创伤感染分泌物标本化脓性感染可由单种或多种细菌引起;常见病原菌主要有金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌和结核分枝杆菌、诺卡菌,以及梭杆菌和拟杆菌等;1、标本采集:1开放性脓肿和脓性分泌物;2大面积烧伤的创面分泌物;3封闭性脓肿2、涂片检查:根据形态和染色特点,可报告“查见革兰×性细菌,形似××菌”或报告“未查见细菌”;3、培养:1普通培养2厌氧菌培养3嗜血杆菌及奈瑟菌培养4结核分枝杆菌培养5真菌培养4、报告方式:查见致病菌,报告菌名和药敏结果;。
正确的采取、处理与运送细菌培养的标本正确的采取、处理与运送细菌培养的标本是临床细菌检验成功的关键。
标本采取与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的基础;而标本采取与处理不符合要求,则细菌培养的结果毫无意义。
如标本采取或处理失当,造成污染,甚至使检验结果给临床以误导,延误对患者的正确治疗造成严重后果。
因此,著名的临床微生物检验专著Manual of Clinical Microbiology的主编Patrick R Murray在书中提出“正确的微生物学检验始自正确的标本采取。
临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。
”如今,全面的检验保证系统更加重视分析前与分析后的因素对检验质量的影响,微生物检验分析前质量控制的重要内容之一,即是对标本采取与处理的质量保证。
为推行检验方法的标准化,我国借鉴国外部分经验已成立中国临床实验室标准化委员会(CCCLS),临床实验室的认证工作开始准备。
微生物检验的标准化首先应从标本采取与处理的规范化开始。
一、血液细菌培养标本的采集和处理临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者,需做血液细菌培养以明确病原。
及时、准确地从患者血液中分离出病原菌,才能正确实施有效的抗菌治疗,从而有助于治愈率的提高和医疗费用的降低。
1、采血时机:在患者发热期间越早越好,最好在抗菌治疗前,以正在发冷发热前半个小时为宜。
2、采血次数及间隔:在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎,需马上做抗菌治疗:或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要紧急手术的患者,应立即从两臂分别取2份标本。
对感染性心内膜炎患者,在24h内取血3次,每次间隔不少于30min;必要时次日再做血培养两次。
对发热原因不明者两次抽血间隔60min;必要时于24~48h后再抽血2次。
因为1次血培养不足以说明问题,且会遗漏阳性结果。
国外有人统计1次血培养可检出菌血症的80%,2次检出90%,3次检出99%。
国内统计17家医院1次血培养阳性率10.8%,18家医院2次以上血培养阳性率14.8%。
图文细菌培养标本的采集运送与处理细菌培养标本的采集、运送和处理是临床微生物学工作中至关重要的环节之一。
正确的操作能够保障标本的质量,减少误诊率,提高诊断准确性。
本文将介绍细菌培养标本的采集、运送和处理注意事项,为临床人员提供一些指导性意见。
采集标本的注意事项采集时间标本采集应在患者服用抗生素前或停药时间超过7天后进行。
因为在抗生素作用下,细菌数量减少,可能导致假阴性结果。
而停药时间不足7天,则可能出现抗生素抑制菌体繁殖的影响,导致假阴性结果。
采集部位细菌培养标本的采集要点是要选择适当的部位,从病变部位采集标本,以尽可能多地含有病原体。
采集前要先进行消毒处理,避免检测结果的偏差。
常见的采样部位有:•血液:静脉血、动脉血•尿液:中段尿、早晨第一次排尿•痰液:清晨空腹,深喉刺激后咳出的痰液•脑脊液:用腰穿法获取•分泌物:如脓性分泌物,要清洁创面后进行采集采集器具采集器具应为无菌的容器和器械,避免造成二次污染。
选择采集器具时,应以病变部位大小、特点及病因为基础选择适当的采集方法和器械。
标本采集量标本采集量的大小会影响到检验结果的准确性。
采集过程中,应尽量采集足够量的标本,以避免过多或过少对检测结果的影响。
一般来说,采集量不得少于2mL。
标本的运送和保存标本运送标本运送应保证其质量,在保持标本稳定性的同时,避免造成地区性污染。
运输时应按照相关规定要求,采取避光、避热、避冻等措施。
运送过程中,标本应保持无菌状态,防止被粉尘、脏物等污染。
标本保存在采集后未能及时运送的标本,应保存在4℃~8℃冰箱内,以避免培养所需的营养物质的耗损,影响后续检测结果。
冰箱应定期整理清洗,并进行温度调整,以避免异常温度对标本品质的影响。
标本处理标本处理前的准备工作在进行标本处理之前,需要对关键环节进行准备,如检查及清理工作区、准备必要器械和环境、做好相应的操作准备。
标本的处理方法标本处理一般包括离心、涂片、加药涂布和灭菌。
标本处理应按照相关规定进行,避免外界因素干扰或影响检测结果。
微生物检验标本的正确采集、运送及处理,与细菌的培养、鉴定结果有十分密切的关系,医生、护士、检验人员均应重视微生物标本的正确采集的有关问题,并有责任向患者及家属进行正确采集标本的宣传和指导。
(一)微生物检验标本采集、运送、验收
1、标本的采集
不同的标本在采集时会在技术、方法和量方面的内容有所不同,但是最基本需要遵循的是以下几项:
(1)申请单必须标记清楚姓名、性别、年龄、病原号、标本来源(具体写明)、检查项目(目的要明确)等,以便试验室能够合理选择培养环境和培养基。
(2)尽量在抗生素应用前采集标本、以提**性检出率和避免漏检。
(3)标本采集应严格执行无菌操作。
(4)采集标本的容器必须经灭菌处理,不可用消毒剂。
2、标本运送
(1)标本采集后应尽快运送到细菌室。
(2)标本采集后在室温下超过2小时未送到细菌室的,可视为不合格标本。
3、标本验收
(1)实验室只接受和处理合格标本。
(2)实验室对不合格标本退回必须说明原因、并及时与临床联系。
4、注意事项
(1)微生物检验样本必须要求采集转运,否则将影响检查结果,并给评价其意义带来麻烦甚至误导。
(2)微生物样本极易被污染,污染的样本杂菌大量繁殖抑制病原菌生长,条件致病菌也是致病菌,如污染条件致病菌将误导临床,造成对患者的损害以及经济和时间的浪费。
(3)某些标本离体极易死亡,应在床边采取和接种或立即保温送至实验室检验。
室温放置或延迟送检,可使检出的阳性率降低;不能使用冷藏的样本检验。
(4)厌氧菌样本采取必须隔绝空气,混入空气的样本影响检验结果,不能使用。