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新生儿溶血病相关实验室检测的结果分析【摘要】目的对疑为新生儿溶血病患者，采集血样，进行直接抗人球蛋白试验、红细胞抗体释放试验、血清中游离抗体试验。
探讨abo血型不合引起新生儿溶血病的血型分布规律，为临床提供abo hdn的诊断依据。
方法应用微柱凝胶法2010年8月至2012年10月可疑为新生儿溶血病患者血样进行溶血三项试验，同时鉴定患儿及其母亲血型，参考患儿父亲血型，对检验结果进行分析。
结果放散试验结果总阳性率 23.52 %，其中abo血型系统中a型 72 例，阳性率41.66%。
b型98例，阳性率1020%。
ab型 8 例，阳性率0 %。
rh血型系统母亲为rh阴性，患儿为rh阳性者未检出阳性患儿。
结论直接抗人球蛋白试验阳性率低于其他文献报道，a型和b型红细胞抗体释放试验阳性率有不大的差异。
结合其他实验室检查，为临床提供早期诊断依据。
【关键词】新生儿溶血病；血型；诊断1 资料与方法1.1 一般资料 2010年8月至2012年10月可疑为新生儿溶血病，出现高胆红素血症的患儿，采集血样后进行直接抗人球蛋白，游离试验，释放试验溶血三项试验，同时检测血清中的不规则抗体。
其中男98人次，女 112 人次，出生后 20 min～10 d内的患儿。
1.2 试剂与仪器微柱凝胶卡长春博讯生物技术有限公司， abo血型试剂够自上海生物医药有限公司，标准abo红细胞悬液购自长春博德生物技术有限公司，baso专用离心机及孵育器。
1.3 方法试管法abo血型正定型，微柱凝胶法进行直接抗人球蛋白试验、红细胞抗体释放试验、血清中游离抗体试验。
1.4 结果判断①母婴abo血型不合。
②溶血试验三项同时阳性判为阳性。
③释放试验阳性判为阳性。
④直接抗人球蛋白阳性，游离抗体试验一或两项阳性，应结合患者实际情况分析。
2 结果3 讨论放散试验结果总阳性率 23.52 %，其中abo血型系统中a型 72 例，阳性率41.66%。
b型98例，阳性率1020%。
新生儿溶血病三项检测方法及临床应用价值评析目的：分析探讨应用微柱凝胶抗人球蛋白卡式法（MGT）以及试管抗人球蛋白法（TAT）实施新生儿溶血病三项检验的临床应用对比。
方法：选择我院2013年11月至2014年10月之间收治的疑似新生儿溶血病的118例血液标本，应用微柱凝胶抗人球蛋白卡式法以及试管抗人球蛋白法进行直抗试验、游离抗体试验以及抗体放散试验，对试验结果进行分析对比。
结果：用两种方法进行直抗试验得到的阳性结果差异不具有统计学意义，但是游离抗体和抗体放散试验结果差异显著，且两种方法凝集强度的差异结果具有统计学意义（P＜0.05）。
结论：新生儿溶血病三项检测方法中，微柱凝胶抗人球蛋白卡式法（MGT）具有方便、快捷、敏感性强、结果易于判定等优点，总体而言优于试管抗人球蛋白法（TAT）。
标签：微柱凝胶抗人球蛋白卡式法；试管抗人球蛋白法；新生儿溶血病；溶血三项检测新生儿溶血病的发病原因是由于母婴血型不合，胎儿的红细胞进入到母亲的血液中，母亲产生的抗胎儿红细胞免疫性抗体会通过胎盘进入到胎儿体内，从而引发溶血[1]，是新生儿黄疸的重要原因之一，严重的情况下可能会导致高胆红素血症，甚至会造成残疾或死亡。
对新生儿溶血病的主要诊断指标为溶血三项检测：直抗试验、游离抗体试验与抗体释放试验，快速准确选择合理的检验方法对于疾病的诊断非常重要[2]。
本文主要探讨微柱凝胶抗人球蛋白卡式法和试管抗人球蛋白法的应用及临床价值，现将结果总结如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选择我院2013年11月至2014年10月之间收治的疑似新生儿溶血病的118例血液标本作为试验对象，其中有男患儿71例、女患儿47例；出生时间为1～9天之间，平均（3.4±1.5）天。
在出生之后皮肤黄染，检查血清胆红素显著超出正常值、血红蛋白值较低。
1.2 方法仪器：37℃孵育器、多功能离心机、微柱凝胶抗人球蛋白卡及相关试剂、试管抗人球蛋白试剂及相关器材等；方法：微柱凝胶抗人球蛋白卡式法（MGT）严格按照说明书中的规程进行操作，使用酸放散，通过等渗生理盐水对EDTA-K2抗凝的红细胞进行洗涤，反复进行六次，取压积红细胞加酸放散液混合均匀，离心之后吸出上层清液加中和液离心后吸取上清液用于检验；试管抗人球蛋白法（TAT）同样严格根据操作规范实施，进行溶血三项检测，并设置阴性与阳性对照。
新生儿溶血病在临床上比较常见，其是指母亲与新生儿由于血型的不合所引起的一种免疫性溶血反应。
在新生儿溶血病中比较常见的一种类型就是ABO-HDN，当母亲为O型血，而新生儿为A型或者B型血时，极易发生ABO-HDN。
有研究人员发现，超过一半的ABO型溶血病都发生在第一胎，这是由于母体在首次妊娠前就已经受到了多种因素的刺激，其体内已经产生了大量的抗A、抗B等IgG 之类的抗体[1]。
新生儿溶血病并不会对母体造成任何形式的影响，但是其会对导致新生儿出现贫血、心力衰竭等，严重的甚至会导致新生儿死亡，临床上加强对其的检测极其重要。
本次选取了160例2017年12月至2018年11月本市各医院的新生儿溶血病患者以及其母亲的血液标本，对其中的158份采用了传统的试管法进行检测，对另外的158份进行凝胶技术检测。
具体如下：1资料与方法1.1一般资料选取160例2017年12月至2018年11月本市各医院的新生儿溶血病患者以及其母亲的血液标本各1份，共320份。
本组患儿中男74例，女86例，年龄1~60d，平均年龄（33.11±5.69）d。
本组160例母亲均为O型血，但是88例新生儿为A型血，72例为B型血。
本次研究符合本院伦理学要求，患者及家属均知情，且自愿参与本次研究。
两组一般资料对比无明显差异（P＞0.05），有可比性。
1.2方法取抗人球蛋白试剂、A试剂、B试剂和O试剂红细胞，其均由本市血液中心提供。
对新生儿与母亲血型进行检测，将ABO-HDN患者的血液标本分成2份，分别将其标记为凝胶技术组和传统试管组，各包括新生儿的血液标本158份。
将传统试管组标本采用传统的试管法进行检测。
将凝胶技术组标本采用凝胶技术检测。
改良Coombs试验，将传统试管组患儿血液标本用生理盐水进行洗涤3次，将其配制成浓度为5%的红细胞悬液，并加入抗人球蛋白血清，将其混合。
将凝胶技术组标本配制成浓度为0.8%的红细胞悬液，并取其中的50μL，将其加入到抗IgG卡的其中一个小孔内，采用凝胶检测专用离心机离心7～8min，对其结果进行观察。
关于检测新生儿ABO溶血病的两种方法比较【摘要】目的探讨新生儿ABO溶血病检测方法的准确性和实用性。
方法用微柱凝胶法（MGT）检测新生儿ABO溶血病同时用抗人球蛋白试管法（TAT）作对照。
结果 121例作直接Coomb，s试验对照：MGT法阳性有31例，TAT法阳性为18例；游离抗体试验：MGT法阳性61例，TAT法阳性为55例；抗体释放试验共有126例作对照：MGT法阳性为74例，抗人球蛋白试管法阳性为59例。
结论 MGT法比传统的TAT法检测新生儿ABO溶血病阳性检出率高，结果判断直观可靠，具有更好的敏感性和特异性。
【关键词】微柱凝胶法抗人球蛋白试管法新生儿ABO溶血病微柱凝胶法因其标本用量少、方便快捷，操作规范，灵敏度高，结果判读方便可靠，能检测出抗人球蛋白试验所不能检出的有意义血样本，易于保存和复查，现已普遍应用于新生儿溶血三项检查[1]。
我院自2009年4月-2010年2月用微柱凝胶法开展新生儿ABO溶血三项检测以来，共进行了126例新生儿ABO溶血病的检测，其中有121例直接Coombs试验及游离试验同时做传统的抗人球蛋白试管法。
126例抗体释放试验同时做传统的抗人球蛋白试管法，现将两种方法结果报告如下：1 材料、试剂及方法1.1 资料来源从2009年4月到2010年2月本院新生儿科住院病人送检的病例以及产后区母婴血型不合且黄疸进展快的病儿共126例。
其中男81例，女45例。
A型50例、B型59例、O型17例。
年龄1～天之间。
母婴血型不合有96例；其中O-A型41例、O-B型49例、A -O型2例、B -O型3例、A-B型1例、；母婴血型相合的19例：其中O-O型11例、A-A型1例、B-B型5例、AB�CA或B 型2例；母血型不详子A型或B型或O型有11例。
1.2 试剂 DiaCidel洗涤液（用前以蒸馏水1：10稀释），DiaCidel放散液，DiaCidel缓冲液、低离子/抗人球卡、孵育器及离心机、由达亚美公司生产，珠海保瑞达公司提供；正反定型试剂：抗-A、抗-B、抗-O，ABO标准红细胞、多特异性抗人球蛋白、多克隆抗-D（IgG）等由上海血液生物医药有限责任公司生产及提供。
两种不同放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的比较卜祥茂;刘国凤;李胜军;蒋玉红【摘要】目的观察比较酸放散和传统热放散在新生儿ABO溶血病检测中的应用效果.方法共收集344例新生儿血标本,同时进行酸放散和热放散试验,比较两者的差异及其与临床诊断的吻合度.结果酸放散阳性112例,阴性232例:热放散阳性112例,阴性232例.酸放散与热放散试验间差异无统计学意义(P＞0.05).结论对于新生儿ABO溶血病的诊断,酸放散与传统热放散试验的检测效果并无差别,且酸放散试验不受主观因素影响,缩短试验时间,不需要特殊的加热振荡水浴箱,值得推广.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2013(015)004【总页数】2页(P349-350)【关键词】新生儿ABO溶血病;高胆红素血症;放散试验【作者】卜祥茂;刘国凤;李胜军;蒋玉红【作者单位】266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科;266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科;266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科;266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R556.6+3;R446.11ABO新生儿溶血病(HDN)是母婴血型不合溶血病中最常见的一种。
母亲的 IgG抗-A或抗-B血型抗体通过胎盘进入胎儿血液循环,可引起胎儿或新生儿红细胞破坏。
在新生儿红细胞或血清中查出对抗其自身红细胞的血型抗体,是诊断 ABO溶血病的重要实验根据。
一般进行3种试验:直抗试验,游离试验,放散试验。
其中游离试验检查患儿血清中的抗体,若仅有游离抗体阳性,仅表示患儿体内有抗体,并不说明红细胞已被致敏,故只能疑诊为 ABO溶血病。
放散试验和直抗试验同为检测红细胞上致敏的抗体,但由于放散试验所用的红细胞表面上的血型抗原远远多于新生儿红细胞表面上的血型抗原,所以放散试验最为敏感。
为此比较两种不同的放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的应用效果,及其与临床诊断的吻合度,现报道如下。
微柱凝胶卡式法与试管法在ABO新生儿溶血病检测中的对比分析目的：探讨微柱凝胶卡式法对新生儿溶血病（HDN）的诊断价值。
方法：选取2012年7月-2013年7月本院儿科收治的疑似ABO母婴血型不合新生儿溶血病的278例新生儿血标本，分别用微柱凝胶卡式法和传统试管法进行直接抗人球蛋白试验、间接抗人球蛋白试验和放散试验，并对检测结果进行比较。
结果：278例中临床确诊263例。
微柱凝胶卡式法的直接抗人球蛋白试验阳性率76.4%明显高于试管法的59.3%，抗体游离试验阳性率90.5%明显高于试管法的66.2%，抗体放散试验阳性率99.2%明显高于试管法的79.1%，差异均有统计学意义（P ＜0.001）。
结论：微柱凝胶卡式法对于辅助诊断HDN优于传统试管法，操作简单，耗时短，结果易观察，值得在临床上推广。
标签：微柱凝胶卡式法；试管法；ABO；新生儿溶血病新生儿溶血病（Hemolytic disease of the newborn，HDN）是指母婴血型不合引起的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病[1]。
临床上其实验诊断依据主要是“三项试验”，即红细胞抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验和抗体放散试验[2]。
三项试验主要是检测新生儿血清中是否含有红细胞抗体或红细胞是否致敏，提高三项试验的敏感性及特异性，对优生优育和新生儿溶血病的早期准确诊断有十分重要的意义[3]。
微柱凝集试验作为一种免疫学检测的新技术，是一种新的改良抗球蛋白试验技术，在发达先进的国家已成为常规的血清学检测技术，近年来在我国输血领域已逐步作为常规应用。
本院2012年7月-2013年7月采用微柱凝胶卡式法及传统试管法对拟诊的278例ABO血型不合新生儿溶血病患儿进行平行检测，并进行比较分析，现报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料血标本来自2012年7月-2013年7月在本院儿科初步诊断疑似ABO母婴血型不合新生儿溶血病的278例患儿。
新生儿出生时间0.5～7 d，平均（4.8±2.5）d，其中男142例，女136例。
新生儿溶血病检测中两种试验方法的效果比较
目的觀察比较酶试验和微柱凝胶法（MGCP）在新生儿ABO溶血病诊断检测的效果。
方法收集50 例新生儿溶血病样本，分别用酶试验和MGCP试验方法进行试验，比较两者之间差异与临床诊断的吻合度。
结论酶试验与微柱凝胶法的检出率无差异。
标签：新生儿溶血病;酶试验;微柱凝胶法
新生儿溶血病（haemolytic disease of the newborn，HDN）是一种常见于胎儿和早期新生儿与溶血相关的自限性免疫综合征，由母婴血型不合引起，导致红细胞在单核-吞噬细胞系统内遭致破坏，引起溶血。
多种血型系统能够引起HDN，主要发生在ABO 血型系统，其次为Rh 血型系统，其他血型系统引起者偶见。
新生儿溶血病的检测包括产前检查及对出生后新生儿的检测，前者是指孕妇血型抗体IgG 效价测定，用于预测HDN 发病可能性，后者主要是指确诊HDN 的“三项试验”，即：直接抗人球蛋白试验（DAT）、游离试验、释放试验。
三种试验均用来检查患儿血清中的抗红细胞抗体，放散试验所检测的红细胞膜上的血型抗体要远远多于后者，所以放散试验在三项中最为敏感，是HDN的确诊试验。
新生儿溶血病的检测常用的方法为酶试验（木瓜酶）和微柱凝胶技术（MGCT）进行直接抗球蛋白试验、吸收和放散试验。
1 材料与方法
1.1 研究对象2008年至2014年期间来我院进行新生儿溶血病检测的血液标本，共50例，均为出生有高胆红素血症患儿，母亲血型为O型，新生儿血型为A型或B型。
1.2 试验仪器及试剂标准A、B血清试剂和标准ABO诊断细胞及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗体筛选细胞均由上海血液生物医药有限责任公司提供，离心机，戴安娜微柱凝胶卡、Coomb’S微柱凝胶卡、戴安娜专用配血离心机、戴安娜专用孵育器，均由西班牙戴安娜公司提供。
1.3 方法
1.3.1 ABO 血型鉴定用正反定型法测定母亲的ABO 血型，由于新生儿抗体较弱，故新生儿只做正定型。
母亲血型为O型，新生儿血型为A型或B型。
1.3.2 放散细胞准备将待检血液标本3000转/分钟离心10min，吸出上层血浆备用，剩余压积红细胞用大量生理盐水洗涤3遍，确保游离的抗体被充分洗掉，留取最后一次洗涤红细胞配制成5%的红细胞悬液备用。
1.3.3 微柱凝胶技术
1.3.3.1直抗试验（MGCT）取Coomb’S微柱凝胶卡加入50μl洗涤红细胞配制成5%的红细胞悬液，用专用离心机进行离心。
1.3.3.2 微柱凝胶技术游离试验：取抗IgG卡1张（3孔），前l、2、3孔分别加人50μl的5%A、B、O试剂红细胞悬液，再加入新生儿抗凝血标本血清25μl。
1.3.3.4 微柱凝胶技术放散试验：用热放散法提取致敏红细胞表面的抗体，取抗IgG卡1张（3孔），第4、5、6孔分别加人50μl的5%A、B、O试剂红细胞悬液，再加人制备好的患儿红细胞放散液25μl。
将加好的微柱凝胶卡放入戴安娜专用孵育器中孵育15min，再用专用离心机进行离心，读取结果。
1.3.4 酶试验则按照《输血技术手册》进行操作。
1.4 结果判定标准直抗试验以出现凝集为阳性，游离和放散试验以检出与新生儿红细胞反应的抗体为阳性，单项放散试验阳性及其他项目阳性同时合并放散试验阳性者，结果均判为HDN阳性，而直抗及游离试验1项或2项阳性者判定为HDN可疑阳性。
2 结果
本院儿科50例待检ABO新生儿溶血病血液样本分别进行MGCT和酶试验检测后结果。
50例血液样本两种试验检测结果及比较[n（%）]：
酶试验：直抗试验阳性数（%）：18（36），游离试验阳性数（%）：35（70）释放试验阳性数（%）：40（80）。
MGCT：直抗试验阳性数（%）：23（46），游离试验阳性数（%）：42（84）释放试验阳性数（%）：45（90）。
Pearson检验显示：酶试验和MGCP两种方法中直抗试验、游离试验和放散试验的阳性检出率差异无统计学意义（P>0.05）。
3 讨论
新生儿ABO 溶血病是早期新生儿高胆红素血症的重要病因之一，其病情进展快，程度重，严重病例可致脑干听觉传导通路损害和胆红素脑病，危及患儿生命，影响其生存质量。
因此，迅速准确的诊断HDN直接关系到治疗方案的选择。
对此，临床实验室检查一般包括血清胆红素、网织红细胞计数等，而实验室确诊试验为血液血清学诊断。
酶试验（木瓜酶）检测HDN，工序繁复.对技术人员操作要求高，难度大.耗时久。
近年来，MGCT应用于检测HDN，方便，快捷，结果可靠，便于保存。
通过这项检查可获知母婴血型是否相合，母血清是否存在与患儿红细胞相对应的IgG性质的抗体，患儿红细胞是否被母亲的IgG抗体所致敏。
准确、及时地提供检测结果，对临床治疗具有重要参考价值。
通过两种试验对50例疑似ABO新生儿溶血病血液样本进行检测，结果表明，酶试验和
MGCT两种方法中直抗试验、游离试验和放散试验的阳性检出率差异无统计学意义（P>0.05）。
但是，在临床应用过程中，MGCT耗时少，方便，快捷，对技术员操作要求难度不大，结果判定清晰。
因此，MGCT为临床做出正确快速的诊断提供了有力的保障，在实际应用中值得推广。
参考文献：
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