艾滋病抗体检测技术介绍(免疫印迹法)及质量控制(黎俊宏)
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测hiv有哪些方法
HIV检测是通过检测的人体中是否存在艾滋病病毒来判断是否感染HIV。
以下是常用的HIV检测方法:
1. ELISA检测:ELISA(酶联免疫吸附试验)是目前最常用和普及的HIV检测方法之一。
它能够检测到人体血液中的抗体反应,确定是否感染HIV。
2. 免疫印迹法(Western Blot):这种方法用于确认ELISA检测结果的,通过对阳性ELISA结果进行进一步的确认。
它可以检测血液中的有关艾滋病病毒的蛋白质。
3. 抗原检测:抗原检测可以直接检测体内的艾滋病病毒抗原,而不是检测人体的免疫反应。
抗原检测方法通常用于早期HIV感染的检测,因为在感染后早期,抗原会很快出现在血液中。
4. 核酸检测(PCR):核酸检测是一种能够检测到DNA或RNA的方法。
它可以通过检测血液中的病毒核酸来确认是否感染HIV。
PCR方法可以在感染后的早期就能够检测到病毒存在。
需要注意的是,这些方法都需要在专业的医疗机构进行操作,不能在家中进行。
如果有HIV感染的疑虑,请及时咨询医生或到专业机构进行测试和咨询。
艾滋病医院检查方法艾滋病检查是通过多种方法进行的,包括实验室检测和临床检查。
下面将详细介绍常见的艾滋病检查方法。
1. HIV抗体检测:这是最常用的艾滋病检测方法。
它通过检测人体内是否存在针对艾滋病毒的抗体来确定感染情况。
常见的抗体检测方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫层析试验(IC)等。
如果初步检测结果呈阳性,需要进行确认性检测。
2. 确认性检测:当抗体检测结果呈阳性时,需要进行确认性检测以确定是否真正感染了艾滋病病毒。
确认性检测常用的方法是免疫印迹法(Western Blot)和免疫荧光抗体试验(IFA)等。
这些方法能够检测到特定的抗体,以确保诊断的准确性。
3. HIV核酸检测:这是一种直接检测艾滋病病毒核酸的方法。
常见的核酸检测方法有聚合酶链反应(PCR)和核糖核酸杂交(Southern Blot)等。
这些方法能够检测到病毒的基因物质,可以在感染初期就进行检测,提高检测的敏感性和准确性。
4. 蛋白质检测:这是一种间接检测方法,通过检测艾滋病病毒蛋白质的存在来判断是否感染了病毒。
常用的蛋白质检测方法有抗体捕获试验(Antibody Capture Assay)和抗原检测试验(Antigen Assay)等。
这些方法可以检测到病毒的抗原或抗体,从而确认感染情况。
5. T淋巴细胞计数:艾滋病病毒会攻击人体的免疫系统,主要作用于T淋巴细胞。
因此,T淋巴细胞计数对于艾滋病的诊断和疾病进展的监测非常重要。
常见的计数方法有流式细胞仪(Flow Cytometry)和细胞自动分析仪(Cell Analyzer)等。
6. 临床症状检查:除了实验室检查,临床医生还会根据患者的症状进行检查。
艾滋病常见的症状包括发热、体重减轻、乏力、盗汗、反复感染等。
医生会进行详细的询问和体格检查,以了解患者的症状情况。
总结起来,艾滋病的检查方法主要包括HIV抗体检测、确认性检测、HIV核酸检测、蛋白质检测、T淋巴细胞计数和临床症状检查。
艾滋病的病检测技术有哪些艾滋病的检测技术有哪些艾滋病,一个令人闻之色变的名词。
它是一种严重威胁人类健康的传染病,由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起。
及时准确的检测对于艾滋病的诊断、治疗和预防至关重要。
那么,目前都有哪些艾滋病的检测技术呢?首先,我们来了解一下酶联免疫吸附试验(ELISA)。
这是一种常见的血清学检测方法。
它的原理是利用酶标记的抗体与待检测样品中的 HIV 抗原或抗体发生特异性结合,然后通过检测酶的活性来判断结果。
ELISA 检测方法具有较高的敏感性和特异性,能够大规模筛查艾滋病病毒感染。
接着是免疫印迹试验(Western Blot,WB)。
它被认为是艾滋病检测的“金标准”。
在这个检测中,通过电泳将 HIV 蛋白分离,然后将其转移到膜上,再与患者的血清进行反应。
如果血清中存在 HIV 抗体,就会在膜上形成特定的条带。
WB 检测能够准确地确认 HIV 抗体的存在,但操作相对复杂,成本也较高。
快速检测试剂也是常用的检测手段之一。
这种检测方法操作简便、快捷,通常在 15 到 30 分钟内就能得出结果。
常见的有胶体金法和免疫层析法。
快速检测试剂适用于现场检测和初步筛查,比如在一些不具备复杂检测条件的基层医疗机构或紧急情况下使用。
核酸检测技术在艾滋病的诊断中也发挥着重要作用。
核酸检测主要是检测 HIV 的 RNA 或 DNA。
这种检测方法能够在感染后的早期就检测出病毒,大大缩短了检测的“窗口期”。
对于急性期感染、晚期艾滋病患者、婴儿感染诊断以及监测治疗效果等方面具有重要意义。
病毒培养法是一种直接检测病毒的方法,但由于其操作难度大、成本高、对实验条件要求苛刻,一般不作为常规的检测手段。
不过,在一些特殊的研究和疑难病例的诊断中,病毒培养法仍有其不可替代的作用。
除了以上这些实验室检测技术,还有一些基于唾液、尿液等样本的检测方法正在不断发展和完善。
唾液检测相对方便,患者的接受度较高。
尿液检测则具有无创、易于采集的优点。
HIV抗体ELISA检测质量控制摘要】目的:对HIV抗体检测ELISA法的各个环节和影响因素进行质量控制,保证检验结果的准确无误。
方法:采用ELISA法,对2018年1月—2019年6月HIV 抗体检测,用上海科华试剂,设内部和外部质控、洗板和水浴厢、酶标仪,以s/co 计算统计均值,标准差画Levy-Jennings质控图,采用Westbard多规则技术质控规则,1-2S为警告,1-3S为失控限。
以S/CO的变异系数CV来判断控制检验结果的质量。
每月、每季度、半年、1年对结果分析,并对失控进行原因分析、处理和整改。
结果:空白OD值全部小于0.08,阴性全部小于0.04OD,两个阳性1大于0.81OD,阳2大于0.35。
CUT—off在0.085—0.115,实验有效,设置的外部质控5Ncu/mL与标本同时测定,s/co的总CV20内.2018年1月—2019年6月共做28050例,阳性197例送疾控检测完全符合,阴性抽检50例完全符合,参与云南省的HIV质控完全符合达100分。
结论:做好HIV抗体ELISA法的室内室间评是保证HIV抗体检测结果准确无误的唯一保障,是每一个初筛实验室严格操作和执行的行业要求标准。
【关键词】HIV抗体 ELISA S/CO【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2020)08-0237-02严格按照标准操作规程S0P文件,做好HIV抗体检测ELISA法的质量控制,是每个初筛实验必须遵循的风险规则要求[1]。
现对我院2018年1月起的HIV抗体检测的ELISA法,室内质控报告如下:1.资料与方法1.1 采用科华试剂外部质控品5Ncu/ML,在试剂2~3倍(Cut-off)左右,加样枪每年自己校准符合要求,水浴厢、洗板机、酶标仪、温湿度计完全按标准正常,在生物安全柜里面加样,加试剂。
1.2 内外部质控血清设置孔1空、孔2为阴,孔3、孔4为阳1,孔5为阳2、孔6为外部质控血清。
HIV抗体检测工作中的质量控制为实现《中国遏制与防治艾滋病“十三五”行动计划》“三个90%”的防治目标,扩大检测也成为我国长期实施的艾滋病防治策略,HIV抗体检测已经广泛深入基层。
作为一名从事HIV抗体检测工作人员,在工作中应注意些什么呢?现就血液作为检测样本总结如下:一、采血前准备按照临床采血技术要求操作。
准备好采血所需物品,注意受检者信息与样本容器表面的标记一致,并注明样本采集时间及唯一编码,使用专门的登记表记录样本信息,同时录入电脑保存。
二、样本的采集和处理1、抗凝全血:消毒局部皮肤,用加有抗凝剂(EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠)的真空塑料采血管抽取适量静脉血,轻轻颠倒混匀10-15次,备用。
2、血浆:根据检测需要,选择含适宜抗凝剂的塑料采血管,按照采血管说明采集静脉血,分离血浆;或将采集的抗凝全血1500~3000r /min离心15分钟,上层即为血浆,吸出置于合适的容器中,备用。
3、血清:根据检测需要,按照采血管说明书采集静脉血,分离血清;或用不含抗凝剂的真空塑料采血管抽取适量静脉血放置1~2小时,待血液凝固、血块收缩后再用1500~3000r/min离心15分钟,吸出血清,置于合适的容器中,备用。
4、采血完成后的穿刺针头必须丢弃于专用锐器盒内,妥善处理,防止发生职业暴露。
三、HIV抗体检测1、检测人员必须具备上岗资格证。
2、选择试剂必须是经国家药品监督管理局注册、在有效期的试剂。
推荐使用临床指令评估灵敏性和特异性高的方法和试剂。
3、在进行抗体检测之前,认真仔细阅读试剂说明书,熟悉操作流程及注意事项。
4、检测过程中做好个人防护,严格按照操作技术规范和试剂说明书进行检测,注意环境温度的控制、试剂的平衡、外部对照的使用,反应时间等。
5、实验结束后做好实验室消毒和废弃物的处理工作。
四、样本的保存1、用于抗体和抗原检测的血清或血浆样本,短期(1周)内进行检测的可存放于2~8℃,一周以上应存放于-20℃以下。
199BIOTECHWORLD 生物技术世界艾滋病,全称获得性免疫缺陷综合征(AIDS),是由免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种严重的传染性疾病,据国家卫生计生委2015年2月16日公布:我国2014年度新报告艾滋病感染者和病人10.4万例,较2013年增加14.8%。
因而对HIV 感染者进行筛查和确认是艾滋病预防控制工作的重要组成部分。
自1985 年美国批准第一种HIV抗体检测试剂以来,HIV抗体检测技术随着免疫学和分子生物学技术的迅速发展而不断更新。
本文就近年来HIV抗体免疫检测技术综述如下。
据卫生部2004年颁布的《全国艾滋病检测技术规范》,HIV抗体检测分为初筛、复检和确证三个步骤。
1 初筛、复检试验主要包括酶联免疫吸附试验、快速检测试验、化学发光免疫试验、时间分辨荧光免疫分析技术以及非侵入式HIV抗体检测。
1.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)HIV抗体ELISA 试剂历经四代。
1985年第1代间接ELISA,HIV 病毒裂解物为包被抗原,敏感性和特异性不高,窗口期约3个月;1990年第2代间接ELISA,基因工程重组或人工合成肽为包被抗原,能同时检测HIV-1 和HIV-2,特异性较第1代有了很大提高,窗口期缩短了约20天;1994年第3代双抗原夹心法,包被抗原同第2代,但新增gp41多肽,可检测包括IgG、IgM、IgA 等多种HIV 抗体亚类,敏感性和特异性较高,窗口期缩短至3-4周,是当前主流产品;1998年第4代,HIV 抗原和抗p24 的抗体包被固相载体,能同时检测HIV 抗体和p24 抗原,灵敏度进一步提高,“窗口期”进一步缩短4-8d,但出现“第2个窗口期”,目前用于辅助诊断。
1.2 快速检测(RT) 包括免疫斑点试验、免疫层析试验、明胶颗粒凝集试验[3]。
该方法操作简单:不需要专门的仪器设备, 快速:30 min内可以得到检测结果, 尤适用应急检测、HIV 监测哨点、乡镇卫生院及社区卫生站等。
艾滋病病的抗体检测与诊断技术艾滋病的抗体检测与诊断技术艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome,AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)引起的一种严重传染病。
随着艾滋病的全球流行,及早的检测和准确的诊断显得尤为重要。
本文将介绍一些现代艾滋病的抗体检测与诊断技术,包括常见的ELISA、免疫荧光抗体试验(IFA)、Western blot等技术。
一、ELISA技术ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种广泛应用于艾滋病抗体检测的常规检测技术。
ELISA技术基于抗原-抗体反应原理,通过特异性抗体与患者血液中的HIV抗体结合来进行检测。
1. 检测原理ELISA技术主要分为间接ELISA和直接ELISA两种方法。
间接ELISA通过将患者血清中的抗体与固定抗原结合,然后再加入标记抗体来进行检测。
直接ELISA则是将患者血清中的抗体直接与固定抗原结合,再加入标记抗体进行检测。
2. 优点与不足ELISA技术具有操作简便、成本相对低廉、准确度高等优点。
然而,在早期感染阶段,ELISA技术可能出现假阴性结果,因为此时患者体内抗体水平较低。
因此,ELISA技术通常需要结合其他检测方法进行确诊。
二、IFA技术免疫荧光抗体试验(Immunofluorescence Assay,IFA)是一种常用于艾滋病抗体检测的技术。
IFA通过检测患者血液中的荧光标记抗体与HIV抗原结合来进行诊断。
1. 检测原理IFA技术基于免疫荧光原理,将荧光标记的抗体与患者血清中的HIV抗体结合,并通过荧光显微镜观察是否发生荧光信号,判断是否感染艾滋病病毒。
2. 优点与不足IFA技术具有敏感性高、特异性强的优点,能够提供快速的诊断结果。
然而,由于操作技术要求较高,且结果的解读需要经验丰富的专业人员,所以在实际应用中需要慎重。