提高病理冰冻切片质量的

冰冻切片的要求
冰冻切片的要求主要包括以下几个方面：
1. 温度控制：冰冻切片的温度控制十分重要，需要将温度设置在适当的范围，一般为-20℃至-30℃。

温度过高或过低都会影响切片的品质。

2. 刀具选择：切片刀需要锋利，以一次性刀片为佳，一般一个刀口切5-6个组织后即应更换，以免影响切片的平整度和光滑度。

3. 切片厚度：冰冻切片的厚度一般需要控制在2-3mm，过厚或过薄都会影响病理医生的诊断结果。

4. 切片技巧：切片时用力要均匀，避免转速不稳，防止组织产生卷曲或皱褶。

切片后应及时观察切片的质量，如有问题应及时调整。

5. 组织处理：进行冰冻切片前，需要对组织进行处理，如清洗、固定等。

处理后的组织应平整、无气泡、无杂质，以保证切片的准确性和可靠性。

6. 注意事项：在进行冰冻切片时，需要注意防止组织过硬或过软，避免损坏刀刃或影响切片质量。

如发现组织变脆，可将冷冻的组织取出，于室温中停留片刻，再行切片。

此外，切片时还需注意防卷板的位置和角度，以保证切片的平整度。

总之，冰冻切片是一项技术性较强的工作，需要严格控制温度、选择适当的刀具、掌握正确的切片技巧和注意事项，才能获得高质量的切片，为病理诊断提供可靠的依据。

冰冻切片快速病理你了解多少冰冻切片快速病理是一种病理学诊断技术，是在手术中通过快速冰冻组织样本，然后在病理学家的监视下迅速切成组织切片，主要用于快速判断手术切除的组织是否患上疾病或肿瘤。

该技术能够在手术期间及时确定病变的性质及范围，早期明确诊断和采取病理学治疗，降低病人的手术风险，促进治疗的成功率，同时也能为接下来的治疗提供了参考。

下面我们深入了解一下冰冻切片快速病理。

1、什么是冰冻切片快速病理？冰冻切片是一种低温条件下使得组织快速冷却到一定的硬度，之后进行切片的方法。

因其制作过程比石蜡切片快捷、简便，且大多应用在手术中的快速病理诊断。

此种病理的时间比较长，需要3至5天左右。

因为这涉及到了诸多前期的组织处理，就比如脱水，组织的脱水、包埋、染色以及分片等。

为了应对手术过程中病理诊断的需求，冰冻切片就是最有效、最快的病理诊断方法。

冰冻就是临床医生将需要检查的组织送过来后，在大概零下20度左右的地方冷冻后，就能形成一个较硬的块，然后再将它切成薄薄的片，通过染色就能看到组织的结构，但速度是非常快。

冰冻通常是在30分钟之内就能得到病人的病例报告。

2、冰冻切片快速病理的操作步骤（1）采集组织样本并快速冰冻组织样本在切除后迅速取样，送至实验室迅速缓冲剂液中冻结保存，通常在-35℃的低温环境下冰冻20到30分钟，而进行快速冷冻的目的就是尽可能减少对组织的破坏，提高切片的质量。

（2）制备组织切片冰冻的组织样本在冰箱内恢复温度后，一方面可以通过炭气组织杖和毛刷表面清理组织，另一方面则使用超微切片机将组织薄片进一步加工制备，每个薄片厚度为5-15微米。

（3）组织切片染色通过特定的染色方法（如苏木精-伊红染色）、染色剂选择（如光泽剂、酸性染色和免疫组化染色等）来染色切片，以便医生识别细胞类型、炎症、肿瘤等等。

（4）组织学诊断通过光学显微镜观察和分析经过染色的组织切片，通过形态学及组织应学方面的一些标志来判断该组织是否有病变。

病理冰冻质控年终总结一、工作概况1. 病例数量本年度共完成病理冰冻诊断[X]例，较上一年度增加了[X]%。

其中，手术中冰冻诊断[X]例，门诊小标本冰冻诊断[X]例。

2. 诊断准确率通过与常规石蜡切片诊断结果的对比，病理冰冻诊断的准确率达到了[X]%，较上一年度提高了[X]个百分点。

3. 报告时间平均报告时间为[X]分钟，其中手术中冰冻诊断报告时间在[X]分钟以内的比例达到了[X]%，满足了临床手术的需求。

二、主要工作措施1. 加强人员培训定期组织科室人员参加病理冰冻技术培训和学术交流活动，不断提高业务水平。

同时，安排新入职人员进行规范化培训，使其尽快熟悉工作流程和操作规范。

2. 完善质量控制体系建立了严格的病理冰冻标本接收、登记、取材、制片、染色和诊断等环节的质量控制标准，并定期进行质量检查和评估。

对发现的问题及时进行整改，确保了病理冰冻诊断的质量。

3. 优化工作流程通过对工作流程的梳理和优化，减少了不必要的环节，提高了工作效率。

例如，在标本接收环节，采用信息化管理系统，实现了标本信息的快速录入和传递；在制片环节，采用先进的冰冻切片机和染色设备，提高了制片质量和速度。

4. 加强与临床科室的沟通协作定期与临床科室召开座谈会，了解其对病理冰冻诊断的需求和意见，及时解决工作中存在的问题。

同时，建立了危急值报告制度，对于术中发现的恶性肿瘤等危急情况，及时向临床医生报告，为患者的治疗赢得了宝贵的时间。

三、存在的问题1. 个别病例诊断难度较大由于某些病变的组织学形态较为复杂，或者标本取材不理想，导致诊断存在一定的困难。

在今后的工作中，需要进一步加强与临床医生的沟通，提高标本取材的质量，同时加强疑难病例的讨论和会诊，提高诊断水平。

2. 设备维护和更新不够及时部分冰冻切片机和染色设备使用时间较长，性能有所下降，影响了工作效率和制片质量。

在今后的工作中，需要加大设备维护和更新的投入，确保设备的正常运行。

3. 质量控制工作仍需加强虽然建立了较为完善的质量控制体系，但在实际工作中，仍存在一些执行不到位的情况。

病理报告与术中快速冰冻切片检查及术后诊断不符的原因分析引言术中快速冰冻切片检查是一种常用的病理学检查方法，它在手术过程中可以迅速提供组织学信息，以协助医生做出及时的治疗决策。

然而，有时术中快速冰冻切片检查的结果与术后病理报告的诊断不符，这给临床工作带来了一定的困扰。

本文将分析病理报告与术中快速冰冻切片检查及术后诊断不符的原因，并提出相应的解决方案。

术中快速冰冻切片检查的局限性术中快速冰冻切片检查具有以下的局限性，这些因素可能导致与术后病理报告的诊断不符。

1. 样本质量：术中快速冰冻切片检查的样本质量可能受到手术时间紧迫和操作技术等因素的限制，导致切片质量不佳。

这可能影响到病理学家的准确判断。

2. 时间压力：术中快速冰冻切片检查需要在有限的时间内完成，以提供及时的结果。

这可能导致病理学家在判定时过于仓促，从而产生误判。

3. 样本选择：由于术中快速冰冻切片检查需要在手术过程中获取样本，有时可能无法取得代表性的组织样本。

这可能导致诊断结果与术后病理报告不一致。

术后病理报告的准确性尽管术后病理报告是目前确诊疾病的黄金标准，但其准确性也可能受到以下因素的影响：1. 切片选择：病理学家在制作切片时可能会选择不同的区域进行检查，这可能导致结果的差异。

此外，由于切片检查仅针对样本的有限部分，不能对整个组织进行全面评估，也可能导致诊断与术中快速冰冻切片检查不一致。

2. 边界判定：某些病理学特征在切片上的可见性可能受到限制，如肿瘤与正常组织的边界模糊。

这可能导致病理学家的判断存在主观性，进而导致与术中快速冰冻切片检查结果的差异。

解决方案为了减少病理报告与术中快速冰冻切片检查及术后诊断不符的情况发生，我们可以考虑以下解决方案：1. 加强沟通：医生与病理学家之间应加强沟通，及时共享术中快速冰冻切片检查结果，并讨论潜在的诊断差异。

通过密切合作，可以更好地理解和解释检查结果的差异。

2. 提高技术水平：提高术中快速冰冻切片检查的技术水平，包括样本获取、处理和切片制备等方面。

有关冰冻切片的应用及制作方法的改进摘要：冰冻切片是借助低温冷冻将活体组织快速冻结达到一定的硬度进行制片的方法，我们通过探讨制片效果比较理想的冰冻切片制作方法，以提高冰冻切片的质量。

首先选取新鲜活体组织，取材后直接冻结，经恒温式冰冻切片机切片，冰冻固定液固定，HE染色。

剩余组织做石蜡切片对照。

结果，质量较好，染色鲜艳，镜下组织结构细胞形态清晰，细胞核浆对比分明。

因此，冰冻切片法简便快速，制片质量满意，可提高病理诊断的准确性。

关键词：冰冻切片；应用；制作；冰晶冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。

因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。

冰冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，甲醇循环制冷冰冻切片法等。

这些方法，随着时代的变迁，科技的发展，许多年前被认为是非常重要的技术，现在也逐步被淘汰了。

当然有些技术，如低温恒冷箱冰冻切片法，正在受到青睐。

一、冰冻切片的应用（1）在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断，原定手术方案不相符合，或者怀疑时，需要病理确定。

（2）了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。

（3）对于已确定为恶性肿瘤的患者，则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的肿瘤组织。

（4）在做剖腹探查时所发现的肿块或者异样的组织。

（5）显示组织中的脂肪和脂类物质，这常见于某些病例如脂肪瘤及肉瘤，某些科研组织等。

（6）某些酶的显示如ATP酶，琥珀酸脱氢酶等。

（7）神经病理学技术中的某些染色法如：Eager氏法，Marchi氏法，Cajal氏法，Hortega 氏法和Holzer氏法等。

（8）对某些物质所进行的免疫荧光的研究。

二、低温恒冷箱冷冻切片制作法以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例，该机的箱面上有电子控制板，装有即时冷冻键和除霜键，启动即时冷冻键，机器马上进行工作状态，并可持续10mins。

病理科全面质量管理及持续改进的方案与控制流程检查标准 1：病理部门布局、设施、设备、工作流程和人员结构合理，管理规范，满足临床工作需要。

考核方法与改进措施：（1）依法执业，设备人员准入，各类证书完备。

加强梯队建设，促进人员结构合理化。

（2）进一步完善病理科布局及用房，设施、设备及技术项目符合要求，满足临床诊断、科研及教学工作需要。

（3）健全各项规章制度、工作职责、工作流程，并落实执行情况，对发现的问题进行分析、总结，及时改进，从制度建设上不断补充、完善。

（4）加强科室新业务新技术、法律、法规的学习，有培训计划和记录，建立员工培训档案。

检查标准 2：建立并执行病理质量管理制度，定期开展质量评价和改进工作，严格执行标本核对制度。

考核方法与改进措施：（1）严格执行标本核对制度，两人同时对标本与送检内容是否相符；病史、实验室检查、手术所见等是否填写详实进行核对，病房手术室标本由手术室护理人员送病理科，然后验收同时签字。

（2）严格执行标本、切片核对交接制度，交接环节由诊断医师和病理技师同时核对、签收，并填写“病理科日常工作交接记录”。

（3）严格执行标本保存及销毁制度，制定工作流程。

（4）加强病理报告发送制度的落实，认真做好签收工作。

（5）加强病理结果登记制度的落实，做好各项信息核对和准确编写病理号的工作。

（6）严格执行冰冻快速预约和报告制度。

临床医师要提前一天预约，详细填写；病理医师与病人或家属沟通，共同签署检查同意书；检查结果由病人家属签收送手术室。

（7）科室质控人员定期对各项制度的执行情况进行自查并记录。

每月召开质量安全管理和持续改进工作会议，对存在的问题及时分析、总结、讲评、改进并备案。

检查标准 3：病理报告及时、准确、规范，严格审核制度。

考核方法：定期抽查常规制片、冷冻切片制作、术中冰冻病历送检结果出具、一般病理检查报告时间。

查看高级诊断医师审核诊断、会诊的记录。

改进措施：（1）严格工作流程，明确职责任务，司职到位，确保常规及疑难诊断报告质量。

提高甲状腺冷冻切片制作质量的体会摘要】甲状腺疾病是内分泌系统常见疾病，影响着人们的健康和生活质量，为提高临床病理诊断的准确性，本文对提高甲状腺冷冻切片制作质量做一介绍。

【关键词】甲状腺冷冻切片【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）35-0347-01冷冻切片是一种在低温条件下，使组织快速冷冻到一定的硬度，然后进行切片的一种方法[1]。

甲状腺疾病是内分泌系统的常见病和多发病，且其结构特殊，在冷冻切片的过程中易产生影响病理诊断的假象。

本研究就如何提高甲状腺冷冻切片制作质量的体会介绍如下。

1.材料与方法1.1 材料选取本院2014年1月至2014年12月手术送检的甲状腺标本756例。

1.2 设备英国产Thermo FSE型冷冻切片机，Thermo MX35一次性刀片，OCT包埋剂。

1.3试剂甲醇固定液、Gill改良苏木素染色液、醇溶性伊红、梯度酒精和二甲苯等。

1.4方法①根据所取组织的大小在组织托上滴上适量的OCT包埋剂；②将组织块平放于包埋剂上并用冷冻锤轻压组织10S，使组织迅速达到较低温度以防冰晶的形成，切片机冻头温度控制在-14℃～-16℃为宜；③切片时用力均匀，厚度6μm左右，用常温载玻片粘贴后放入甲醇中固定1min左右；④放入Gill改良苏木素染色1min，水洗后直接用温水（45℃左右）返蓝，伊红染色，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

整个过程时间在5～7min完成。

2.结果甲状腺冷冻切片质量较好，切片完整无皱褶，组织结构清晰，染色鲜艳，核浆对比度好，合乎医生诊断需要。

（附图甲状腺组织冷冻切片图1：10×10组织结构清晰，颜色鲜艳，透明度较好；图2：10×40细胞核结构清楚，核浆着色分明。

）极少出现影响诊断的因素，准确率达99%以上。

3.讨论甲状腺组织在冷冻切片中占有很大的比例，而甲状腺内含有结缔组织和滤泡，滤泡内充满胶质，空洞感较强，易发脆、收缩，组织经常出现破碎，或者出现粉末状，或者是组织切片有很多小裂口，产生冰晶，影响切片质量。

冰冻切片已成为数病理科的常规工作，随着临床诊断要求的不断提高，尤其对术中快速冰冻切片的诊断准确性的要求越来越高，就需要提高冰冻切片的质量。

我们科室在制作冰冻切片过程中，也摸索到一些提高切片质量的可行方法，现和同行交流，报告如下。

1 材料与方法1.1 标本江苏省南通瑞慈医院手术室(2004年11月)送检的术中冰冻标本100余例。

1.2 固定液 A.A.F固定液(40%福尔马林液10ml，70%酒精液85ml，冰醋酸液5ml)。

1.3 染色液Harris苏木精液、乙醇溶性伊红液。

1.4 恒冷箱冰冻切片机LEICA CM1900，购自上海莱卡仪器公司。

1.5 方法与步骤将术中送检组织取材后，置于恒冷箱冰冻切片机切片架上，待组织块冷冻变硬后切片，厚度为5～7μm。

将切片贴附在载玻片上，空气中稍风干(1～2min)，后放入A.A.F固定液(≥2min)，梯度酒精液浸洗，水洗，1%铁明矾液中浸2～5次，充分水洗后苏木精染色1min(最好在50℃左右恒温箱内进行)，水洗，盐酸酒精液分化，水洗，PBS(p H 7.4)液复蓝，入乙醇溶性伊红染液染色10s(新配置的时间可缩短，陈旧者适当延长染色时间)，梯度酒精液逐级脱水，石炭酸、二甲苯液(1∶3)透明，中性树胶封片。

1.6 对照另切取完全相同的切片，不采用铁明矾媒染处理，余步骤同前。

2 结果2.1 未采用铁明矾处理的标本结构欠清，细胞核浆不鲜明，对比度差，诊断困难。

2.2 采用铁明矾处理的标本组织和细胞结构清晰，染色鲜艳，对比度高。

3 讨论术中快速冰冻切片的诊断在一定程度上决定了临床上对采取何种手术方式，所以，病理诊断医生对切片的质量要求也不断提高。

经过长时间的摸索我科积累了一些小经验：(1)采用梯度酒精，既可以延长固定时间，还可以防止脱片；(2)采用铁明矾，用1%浓度的铁明矾媒染后，核的颜色更深更鲜明，与胞浆对比度大。

但媒染时间不能太长(不超过2min)，否则核发黑。

病理冰冻切片工作制度一、目的病理冰冻切片是病理科对临床送检组织进行快速诊断的重要技术之一。

本制度的建立旨在规范病理冰冻切片工作的操作流程，确保切片质量，提高诊断准确率，保证医疗安全。

二、适用范围本制度适用于病理科所有从事病理冰冻切片工作的医护人员。

三、工作流程1. 接收标本：病理科收到临床送检的组织标本后，应及时登记，并对标本进行核对，确保标本的完整性和准确性。

2. 取材：病理科医生根据临床申请单上的要求，选取适当的组织块进行切片。

组织块应尽量选取有代表性的部位，避免坏死、出血等影响诊断的因素。

3. 固定：将选取的组织块放入适当的固定液中，固定时间为1-2小时。

固定液的选择应根据组织类型和切片要求进行调整。

4. 切片：将固定后的组织块放入切片机中，调整切片厚度，进行切片。

切片过程中应保持切片机清洁，避免切片的污染。

5. 染色：将切好的切片放入染色剂中，根据染色剂的要求进行染色。

染色时间为1-2小时。

6. 脱水：将染色后的切片进行脱水处理，脱水时间为1-2小时。

7. 透明化：将脱水后的切片进行透明化处理，透明化时间为1-2小时。

8. 封片：将透明化后的切片放入封片机中，进行封片。

封片时应避免气泡的产生。

9. 诊断：病理科医生对切片进行镜下观察，并根据诊断结果填写病理报告。

10. 质控：病理科应定期进行质量控制，确保切片质量和诊断准确率。

四、工作规范1. 病理冰冻切片工作应由具有相关专业背景和经验的医护人员负责。

2. 病理科医生在进行切片前，应仔细阅读临床申请单，了解患者的病史和临床表现，以便更好地进行切片选择和诊断。

3. 病理冰冻切片应按照标准化操作流程进行，确保切片质量和诊断准确率。

4. 病理科医生在镜下观察切片时，应仔细观察组织的形态、结构、细胞学特征等，并根据诊断标准进行诊断。

5. 病理科医生在填写病理报告时，应准确、清晰地描述诊断结果，并提供相应的临床建议。

6. 病理科应定期对病理冰冻切片工作进行质量控制，包括切片质量检查、诊断准确率评估等，并对存在的问题进行及时改进。

病理冰冻工作制度一、目的病理冰冻工作制度旨在规范病理冰冻切片检查的流程，确保病理诊断的准确性和及时性，提高医疗服务质量，保障患者安全。

本制度适用于病理科（室）进行冰冻切片检查的所有工作人员。

二、工作原则1. 严格遵循国家相关法律法规和医疗机构管理规定，执行病理冰冻切片检查的标准操作程序。

2. 坚持以患者为中心，尊重患者权益，保护患者隐私。

3. 强化团队合作，确保各部门、各环节密切配合，高效运作。

4. 不断提高病理冰冻切片检查的技术水平，提升病理诊断能力。

三、工作流程1. 接收标本：病理科（室）收到临床科室送检的标本后，应及时进行核对，确保标本名称、数量、送检单等信息准确无误。

2. 预处理标本：根据标本类型和性质，进行相应的预处理，如固定、染色、脱水、透明化等。

3. 制作冰冻切片：将预处理后的标本放置在低温恒冷切片机中，按照设定的参数制作冰冻切片。

4. 切片观察：制作好的冰冻切片应立即在光镜下观察，判断切片质量，如有问题应及时处理。

5. 诊断报告：病理医师根据冰冻切片观察结果，撰写诊断报告，并由主治医师或以上职称的病理医师审核签字。

6. 发送报告：将诊断报告及时发送给临床科室，确保患者治疗方案的制定和实施。

7. 归档管理：将病理冰冻切片资料进行归档管理，便于后续查询和质控。

四、工作要求1. 人员配备：病理科（室）应配备足够数量的病理医师、技术员和辅助人员，确保病理冰冻切片工作的正常开展。

2. 培训与考核：对新入职的病理医师和技术员进行专业培训，并进行考核，合格后方可从事病理冰冻切片工作。

3. 设备维护：定期对低温恒冷切片机、显微镜等设备进行维护和保养，确保设备性能稳定。

4. 质量控制：建立和完善病理冰冻切片质量控制体系，定期进行质量评估，持续改进工作流程。

5. 应急预案：制定病理冰冻切片检查的应急预案，确保在突发事件或设备故障时能及时采取措施，保障患者利益。

6. 科研与学术交流：鼓励病理医师和技术员参与科研活动，积极参加学术交流，提升病理冰冻切片技术水平。

一．取材送检的新鲜组织不需固定直接取材，以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空泡，使细胞内结构移位导致误诊。

因此减少冰晶形成是提高冰冻切片质量的关键。

所以病理科务必要求手术室用干纱布或洁净塑料标本袋送检标本。

取材中也应避免不必要的脂肪及坏死组织附着；要尽量剔除毛发，硬骨或钙化物；保乳手术切缘由于脂肪组织较多，取材厚度最好不要超过3mm；甲状腺及淋巴结组织要带全组织被膜并除去多余的脂肪组织。

二．黏附剂的选择与使用冰冻组织较小时要加适当多的包埋剂，增加厚度及加大切片面积，同时用速冻头压出平面后再切片，避免组织边缘折叠，破碎。

囊壁及需要观察被膜的组织需先将包埋剂加入已冻好的冷冻头上稍凝结后再将囊壁组织嵌入，以保证切片完整。

三．温度的选择为减少组织冷冻过程中冰晶的出现，同时便于切片时随时根据送检组织的性质小幅度快速调高或降低温度，节省制片时间，切片前应将冷冻切片机的常规待机温度调整为-20度。

平时应将冷冻头放置于冷冻台上，以加快冷冻时间。

冷冻切片的温度要适宜，温度过低会导致组织块过硬，切片碎裂，出现梯田状薄厚不均或空洞；反应，温度过高，组织块硬度不够，切片不易成形或成皱褶。

对纤维组织成分较多的组织，像宫颈组织，乳腺纤维瘤，卵巢颗粒细胞瘤等，可先用戴手套的手指去捂一下组织块，待组织稍软后再切，可保证切片平整无碎裂。

我们建议冷冻温度如下：脂肪组织及保乳手术切缘-35—40度，乳腺，胃，肠等-20—23度，甲状腺，淋巴结，宫颈，肝肾，脾等冷冻后切片易碎裂，温度不能太低，-15度左右，脑组织，-8—12度即可。

四．切片厚度的选择冷冻切片并不是越薄越好，普通组织厚度约6微米即可，过薄，则易造成组织皱缩和镜下细胞核的碎裂。

但是淋巴组织由于细胞间质少，切片可达4-5，脂肪组织要8-9方可观察到完整的脂肪细胞。

组织结构单一的可薄切，含脂肪多的，结构复杂及硬度较大的可适当厚切。

总之，以切出完整，平滑的切片为准。

切好的组织在干净的玻片上黏附时顺着一个方向稍微用力轻轻一带，可避免组织摊片过程中皱褶，保证组织结构的完整及切片的美观。