实验一 钾离子对气孔开度的影响

11
植物根系活力的测定
也可以测定溶液中被氧化的α-萘胺量， 来表示根系活力的大小。α-萘胺在酸性 环境中与对氨基苯磺酸和亚硝酸盐作用 生成红色的偶氮染料，通过比色测定α萘胺含量。
α-萘胺氧化反应如下： NH2
[O]
NH2
OH
α-萘胺
α-羟基 -1- 萘胺(红色)
12
植物根系活力的测定
SO3H + 2H+ + NO-2 NH2 对氨基苯磺酸 SO3H + 2H2O N+≡N 重氮化合物
7
蔗糖浓度(1mol/L)
渗透势(MPa)
质壁分离的相对浓度 （作图表示）
0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 0.20 三. 结果计算 测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分 离的最高浓度平均值（C）后，按实验1中的公式φS =iRCT计算溶 液的渗透势或植物组织的渗透势(或水势)。 四.实验作业 1. 试述细胞渗透作用的原理。
磷含量(%)= C×比色溶液体积×分取倍数 ×100 6 样品重×10 式中： C---从标准曲线上查得的P2O5的浓度（单位ug/ml） 106---将微克换算成克 100---换算成百分数 分取倍数：消化液定容体积 / 吸取消化液体积(ml)
16
实验六 硝态氮含量的测定
氮是植物的三大要素之一，大多数植物，尤其是陆生 植物最主要的氮源是硝态氮。植物从土壤中吸收硝酸 盐，一部分在根内被还原为氨，再转变为有机含氮化 合物(氨基酸或酰氨)向植物地上部分运输，其余部分 则运到叶片中再还原。植物体内硝酸盐的含量能反映 出土壤中硝态氮的供应情况，因此可作为对土壤施肥 的指标。 一、原理 植物中的硝酸盐可以用1%醋酸溶液提取，在 PH5.6的条件下，用锌粉将硝酸根还原为亚硝酸根。 亚硝酸根在酸性条件下与磺胺和-萘胺反应，生成玫 瑰红色的偶氮化合物，其颜色的深浅与硝态氮的含量 在一定范围内呈线性关系。主要化学反应如下：

酶活性：
C V1 / V2 W t
C—反应液催化产生的亚硝态氮总量 （μg） V1—提取酶液时加入的缓冲液体积 （ml） V2—酶反应时加入的粗酶液体积（ml） W—样品重量（g） t—反应时间（h）
实验四 钾离子对植物气孔开度的影响
一、原理


保卫细胞的渗透系统可由钾离子所调节， 无论是环式或非环式光合磷酸化都可形 成ATP，ATP不断供给保卫细胞膜上的H+ 泵作功，使保卫细胞中的H+泵出，并从 周围表皮细胞吸收钾离子，降低保卫细 胞的水势，使保卫细胞吸水，气孔张开。 要求：了解K＋对蚕豆气孔运动的影响
三、实验步骤
（2）称取根样品0.5g，放入小培养皿，加入 0.4%TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液10ml，把 根充分浸没在溶液内，在37℃下暗处保温1h，此 后加入1mol/L硫酸2ml，以停止反应。（与此同时 做一空白实验，先加硫酸，再加根样品，其他操 作同上）。 （3）把根取出，吸干水分后与乙酸乙酯3～4ml和少 量石英砂一起磨碎，以提出TTF。把红色提出液移 入试管，用少量乙酸乙酯把残渣洗涤二至三次， 皆移入试管，最后加乙酸乙酯使总量为10ml，用 分光光度计在485nm下比色，以空白作参比读出光 密度，查标准曲线，求出四氮唑还原量。
实验二 氯化三苯基四氮唑(TTC)法 测定根系活力
一、原理
氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化 还原电位为80mV的氧化还原物质，溶于 水中成为无色溶液，但还原后即生成红 色而不溶于水的三苯基甲 （TTF），如 下式：
生成的TTF比较稳定，不会被空气中的 氧自动氧化，所以TTC被广泛地用作酶试 验的氢受体，植物根所引起的TTC还原， 可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到 增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以 TTC还原量能表示脱氢酶活性，并作为根 系活力的指标。

原理：气孔密度（单位面积上气孔的数目）可用显微镜视野面 积（S=πr2，r可用40倍镜下物镜测微尺量取）内观测到的气 孔数求得。
注意：目镜测微尺刻度的大小是随显微镜放大的倍数而不同的， 必须用物镜测微尺来决定放大时目镜测微尺刻度的大小。
2. 实验器材
（1） 材料：蚕豆叶（洗净） （2） 仪器：显微镜、物镜测微尺 （3） 试剂：无水乙醇、胶棉液
3. 实验步骤
➢ 取3 个培养皿编号，分别放入15ml 0.5%KNO3、 0.5%NaNO3、蒸馏水。
➢ 撕蚕豆叶下表皮分别放入3 个培养皿。 ➢ 将3 个培养皿放入人工光照条件下，保温1 小时。 ➢ 分别取出叶表皮放在载玻 片上，盖上盖玻片，在显微 镜下观察气孔的开度。
开度
4. 数据记录及处理
• 吸水后，作用于外壁上的 （净）压力通过微纤丝传到 内壁，成为作用于内壁、背 离气孔口方向的拉力
实验目的
1 掌握测定气孔密度和开度的方法； 2 学会分析外界因素对气孔运动的调节； 3 学会利用物镜测微尺标定目镜测微尺及测定视野
直径的方法。
（Ⅰ）气孔状态的观察
1、 实验原理
1) 印迹法 原理：以有机物质的溶胶涂在植物的表面，胶体风干后就凝成薄膜，这 层膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹。除用来观察气孔状况外，还 可用于观测植物表皮上的细胞、茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺鳞片等。 优点: 非破坏性取样，方便快捷； 缺点: 边界痕迹不明显的样品印迹模糊，凹陷气孔难以取到印迹，清晰 薄膜制作有难度。
实验三 气孔状态观察及K+对气孔 开度的影响
• 长7-40μm (H2O-0.54nm; CO2-0.46nm)
• 多数植物下表皮气孔数 目多于上表皮。
肾型： 双子叶植物,

《植物生理生化》实验教学大纲实验一钾离子对气孔开度的影响（3学时）一、实验目的通过本实验的观察验证气孔运动的无机离子吸收学说，通过与钠离子、蒸馏水做对照，观察钾离子对气孔开度的影响。

二、实验性质验证性实验三、实验内容钾离子对茶树叶片气孔开度的影响。

四、实验材料与仪器设备(一)材料：茶树叶片(二)仪器设备：显微镜，温箱，镊子，盖玻片，载玻片，培养皿(三)试剂：0.5% 硝酸钾溶液，0.5% 硝酸钠溶液，蒸馏水五、实验方法与步骤（1）每2人一组。

取三个培养皿编号，分别放入15ml的0.5% 硝酸钾溶液、0.5% 硝酸钠溶液和蒸馏水。

（2）撕茶叶表皮分别放入上述3个培养皿中。

（3）将3个培养皿放入25℃温箱中。

（4）取出培养皿置于人工光照条件下照光0.5h。

（5）分别取出叶表皮放在载玻片上，加盖玻片，在显微镜下观察气孔的开度。

六、作业1．完成实验报告。

编写人：茶学与生物系洪永聪实验二植物细胞渗透势的测定（3学时）一、实验目的渗透势与植物水分代谢、生长及抗性等有密切关系，因此，在植物的水分生理和抗性生理研究中经常需要测定渗透势。

要求学生通过本实验熟悉植物细胞渗透势的测定方法。

二、实验性质验证性实验三、实验内容洋葱细胞渗透势的测定。

四、实验材料与仪器设备(一)材料：洋葱(二)仪器设备：显微镜，载玻片，盖玻片，温度计，尖头镊子，刀片，小培养皿，试剂瓶，烧杯，容量瓶，量筒，吸管等（三）药品试剂：蔗糖、0.03%中性红溶液五、实验方法与步骤（1）每2人一组。

取培养皿9套编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序加入各培养皿。

（2）用镊子博取0.5平方厘米的洋葱表皮，吸去表面水分，放入0.03%中性红溶液中染色5min，吸去表面水分后浸入不同浓度的蔗糖溶液中，浸泡30min。

（3）取出切片放在载玻片上，并滴一滴同浓度的蔗糖溶液，盖上盖玻片，于显微镜下观察。

六、作业1．完成实验报告编写人：茶学与生物系洪永聪实验三叶绿体色素的提取分离及理化性质（4学时）一、实验目的学会叶绿体色素提取和分离的方法；了解叶绿体色素的荧光现象、皂化反应等理化性质。

• 低倍镜下选视野，高倍镜下观察记数，观察3个视野的气 孔数目。
4） 固定法观察气孔密度
• 用镊子撕剥叶片下表皮（用刀片切一小口以利于撕取或直 接将镊尖插入下表皮后侧拉），迅速（愈快愈好）放入无 水乙醇中固定2～3 min， • 把固定好的表皮平放在载玻片上，加几滴无水乙醇，压上 盖玻片，镜检， • 低倍镜下选视野，高倍镜下观察记数，观察3个视野的气孔 数目。
中固定2～3 min，把固定好的表皮平放在载玻片上，加几滴无水乙醇，压 上盖玻片，镜检，观察3个视野的气孔数目。
5）K+ 、Na+ 对气孔开度的影响： 3个培养皿中分别放0.5% KNO3 、
0.5% NaNO3溶液和水各15 ml；每个培养皿分别放2~3张从相似叶位/相近 大小的叶片上取下的下表皮；25℃下，光照处理60 min；依次制片和镜下 观察气孔开度，记录与开度相应的目尺格数。每个处理随机观察5个气孔。
2. 实验原理
2.1 印迹法
以有机物质的溶胶（火棉胶、牛皮胶、醋酸纤维素胶、指甲 油等）涂在植物的表面, 胶体风干后凝成薄膜，这层膜上印 有表皮组织各细胞的界迹边痕，从而显示出气孔的开闭情况 。 将印膜撕下，供观察和测量。
除用来观察气孔状况外，还可用于观测植物表皮上的细胞、茸毛、 蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。
2）用物尺标定目尺（ 40×）
由于不同显微镜镜筒长度不同，或不同的目镜和物镜 组合放大倍数不同，目尺每小格所代表的实际长度也不 一样。 因此，用目尺测量物体大小时，必须先用物尺校正， 以计算出在一定放大倍数目镜和物镜下目尺所代表的实 际长度，然后才能用来测量物体大小。
物尺
每格10μm
目尺
低倍镜下找到物尺，并移 至视野中部，高倍镜下标 定目尺。

综合表 10、表 11、表 12 作图如下：
5
钾离子浓度对气孔开度的影响
14 12
气孔开度/μm
10 8 6 4 2 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19
钾离子浓度为0mM时 的气孔开度 钾离子浓度为50mM 时的气孔开度 钾离子浓度为250mM 时的气孔开度
钾离子浓度为 0mM 的培养皿中， 叶片下表面气孔平均开度为 2.69μ m， 标准误为 0.27618。 钾离子浓度为 50mM 的培养皿中，叶片下表面气孔平均开度为 5.31μ m，标准误为 0.443103。 钾离子浓度为 250mM 的培养皿中，叶片下表面气孔平均开度为 8.00μ m，标准误为 0.66268。 如图可知，钾离子对气孔张开有促进作用。一定范围内，钾离子浓度越高，气孔开度越 大。
3 材料、药品、设备
3.1 材料
蚕豆叶片
3.2 药品
500mM CaCl2 ，1mM ABA，10mM Tris-HCl 缓冲液（pH=6.1） ，NaOH，
3.3 设备
普通光学显微镜（OLYMPUS CX 21） ，直径 3.5cm 培养皿 6 套，镊子，盖玻片，载玻片， 滴管，1000μ L 微量可调移液器，200μ L 微量可调移液器，刀片，50mL 烧杯，记号笔，培 养皿，200mL 烧杯，光培养箱
表格 15：ABA 浓度为10−4 M 溶液中蚕豆叶片下表皮上保卫细胞开度处理后数据
6
序号 格数 大小 序号 格数 大小
1 0 0 13 1 2.5
表格 11：钾离子浓度为 50mM 溶液中蚕豆叶片下表皮上保卫细胞开度处理后数据 序号 格数 大小 序号 格数 大小 1 1 2.5 12 3.5 8.75 2 2.5 6.25 13 2 5 3 2.5 6.25 14 1.5 3.75 4 2 5 15 3 7.5 5 2 5 16 2.5 6.25 6 2.5 6.25 18 1.5 3.75 8 3.5 8.75 19 2 5 9 3 7.5 20 0.5 1.25 10 2 5 21 2 5 11 2 5 23 1 2.5

气孔运动及其影响因素、钙参与ABA 调控气孔运动的信号转导姓名：李希东专业：植物学学号：200808201 日期：09.4.25 成绩：一、实验目的：1. 探明植物激素和外界环境因素对气孔运动的影；2. 证明钙参与ABA对气孔运动的调控；3. 学习剥离表皮的方法和显微镜的使用。

二、实验原理：气孔是陆生植物与外界环境交换水分和气体的主要通道及调节机构，可通过开闭响应不同的环境条件。

保卫细胞的渗透系统受钾离子调节。

光下，保卫细胞中的叶绿体通过光合磷酸化生成ATP，ATP驱动质膜上K+-H+泵，使保卫细胞能逆浓度梯度从周围表皮细胞吸收钾离子，或从外界溶液中吸收钾离子，从而降低其渗透势，使气孔开放。

植物内源激ABA(脱落酸)、SA（水杨酸）、JA（茉莉酸）等均能够影响气孔的开闭运动。

Ca2+是ABA调节气孔运动信号转导的重要组分之一。

经不同处理后，可用镜检法测量气孔开度，三、实验器皿：实验材料：蚕豆叶片实验试剂：0.4％KNO3、0.4％NaNO3 ；1mmol ABA、1mmol SA、pH6.1的10mmol/L Tris 缓冲液、蒸馏水；100 mmol/L CaCl2溶液、20 mmol/L EGTA。

实验器皿：培养皿、手术刀片、眼科剪、眼科镊、毛笔、载玻片、盖玻片、移液器（1000μL、100μL）、光照培养箱。

四、实验步骤：1. 钾离子对气孔开度的影响1. 将三个培养皿中各放2ml的0.4％KNO3，0.4％NaNO3与蒸馏水（对照）。

2. 在暗处理的同一蚕豆叶上撕表皮若干，分放在上述的三个培养皿中。

3. 将培养皿置于人工光照条件下照光4 h左右，光照强度在40001x左右。

4. 分别在显微镜下（10倍或40倍）观察气孔的开度。

2. ABA和SA等植物激素对气孔关闭的作用1. 取3~4周龄蚕豆幼苗上端刚展开的叶片，光照2~3h，诱导气孔张开。

2. 用pH6.1的10mmol/L Tris缓冲液配制不同浓度的ABA和SA溶液（0、10-4、10-5和10-6mol/L）。

变革植物生理实验教学,培育学生创新能力《植物生理学》是研究植物生命活动规律及其与外界环境相互关系的一门科学，具有实验性强的特点，其实验教学是对理论课教学的验证和扩展，能加深学生对植物生理学理论的认识和掌握程度，提高学生的操作能力、观察能力和分析能力，培养学生的科学研究能力和创新能力。

但是，在植物生理学实验教学中，我发现传统的“注入”式教学方法缺乏创新和活力，不利于学生创新能力的培养。

为此，我经过多年的教学探索，不断改革传统教学方法，通过创新实验教学培养学生的创新能力，取得了较好的教学效果。

1.创造有利于创新思维发挥的教学环境，培养创新意识和创新精神。

培养学生的创新能力首先要培养学生的创新意识和创新精神。

所谓的创新意识，就是敢想，富于想象。

培养创新精神需要创设利于创新思维的教学环境，也就是说教师应为学生创造一个能支持或高度容忍标新立异者和偏离常规者的环境［１］，在这个环境里，学生的思想是自由的，不会因为有不同或奇怪的想法而受到老师的批评甚至责难，这样学生的思维就会活跃起来，有利于创新思维的培养。

同时老师要对有创新意识的同学给予及时的引导和鼓励，把富于创新的思考应用于实践，提高学生的创新能力。

正是基于这样的思路，我积极培养学生的创新精神，培养学生的直觉思维和发散思维，学生在植物生理实验的学习中涌现了许多富有创新的新实验方法和思路，比如：我院生物科学专业05级李华同学成功地改进了“植物呼吸强度简易装置”，这个装置的成功改进最初就源于李华同学富于创新的思考，认为原测定“植物呼吸强度的简易装置”有缺陷，不能直读。

当时他提出了这样一个想法，我敏锐地认为这是一个值得探索的有价值的问题，于是及时与他共同探讨，并鼓励和启迪他通过实验最终解决了这一问题。

通过这样的例子，可以看到，教师为学生创设利于创新思维的教学环境，可以启迪学生的创新思维，培养其创新能力。

2.扩展阅读，丰富专业知识，为创新思维培养奠定宽厚的基础。

心理学家普遍认为，在学校教育的过程中，知识的获得是提升创造力品质的重要前提［１］。

生命科学学院 龙云
方法： H2O 下表皮 → 0.5 % KNO3→ 光照0.5 h→镜检 0.5 % NaNO3 注意事项：镜检时一定要保证使用的是活体 装片，且处理液不变。 作业：比较3种处理中哪中的气孔开度最大， 为什么？
生命科学学院 龙云
小孔扩散效应（示范）
原理：小孔扩散具边缘效应，即：水分通过小孔扩 散的量与小孔的周长成正比，而不与小孔的面积成 正比。 扩散物质：酒精、丙酮等（易挥发液体） 操作：
① 0.1 mol/L 磷酸缓冲液（pH=7.5）5 ml + 蒸馏水 5 ml ② 0.1 mol/L 磷酸缓冲液（pH=7.5）5 ml + 0.2 mol/L KNO3 5 ml
生命科学学院 龙云
4、步骤 材料 0.3～0.4 g + 处理液 → 三角瓶 → 抽气 5 min → 30℃，酶促反应 30 min →反应液 1 ml → 30℃，显 色30min →测定OD520
6、作业 计算材料由KNO3 （NO3-）诱导产生的硝酸还原酶的活性 （NO2-：µg · h-1· g-1 FW）
生命科学学院 龙云
3、处理 ① 0.1 mol/L 磷酸缓冲液（pH=7.5）5 ml + 蒸馏水 5 ml ② 0.1 mol/L 磷酸缓冲液（pH=7.5）5 ml + 0.2 mol/L KNO3 5 ml 4、实验步骤 材料 0.3～0.4 g + 处理液→三角瓶→抽气 5 min → 30℃，酶促反应 30 min →反应液 1 ml → 30℃，显色 30 min → 测定OD520 5、标准曲线的制作 、标准曲线的制作 NaNO2浓度梯度设为：0、0.5、1、2、3、4、5 µg/mL。 取各标准液 1 ml 于试管中→加磺胺试剂 2 ml ，摇匀→ 加α-萘胺试 剂 2 ml，摇匀→ 30℃，显色 30 min → 测定OD520 6、作业 计算材料由KNO3 （NO3-）诱导产生的硝酸还原酶的活性（NO2-： µg · h-1· g-1 FW） （分子量NO2-/NaNO2=46/69=2/3）

韩山师范学院生物系
植物生理学实验
实验三 钾离子对气孔卫细胞质膜的H＋－ATPase被活 化，利用ATP水解所释放的能量将H＋泵到保 卫细胞外，使细胞膜外侧带正电，内侧带负电， 形成跨细胞膜的电压；在这一电压的驱动下， 钾离子通过膜上的钾离子通道进入细胞，使细 胞内细胞液浓度增加，降低保卫细胞的渗透势； 从而使保卫细胞吸水膨胀，气孔开放。
2. 根据实验结果，解释三组实验存在差异的原 因。
3. 思考题：钾离子引起气孔张开的原理是什么？ 4. 思考题：试分析影响气孔开闭还有哪些原因？
3. 撕芥蓝叶表皮若干放入上述三个培养皿中。 4. 培养皿放入25℃温箱中，使溶液温度达到25℃。 5. 将培养皿置于人工光照条件下照光 30 - 60 min。
（可适当延长时间） 6. 分别在显微镜下再次观察气孔的开度。
结果分析与思考
1. 仔细观察和记录实验结果，并画出三组实验 中气孔开度的示意图（气孔开或闭）！
目的：观察K+在气孔开张中的作用，加 深对“气孔运动---K+积累学说”的理解。
实验器材和试剂
植物材料: 芥蓝叶片
实验器材：显微镜、培养皿、温箱、镊子、载 玻片、盖玻片、吸水纸。
实验试剂： 2%硝酸钾、2%硝酸钠、蒸馏水。
实验步骤
1. 首先撕取芥蓝叶下表皮制作临时装片，观察气孔 开度。
2. 在三个培养皿中分别放入2%硝酸钾，2%硝酸纳 及蒸馏水各15 mL。

2015--植物生理学实验(1) D使保卫细胞吸水，气孔张开。

四、方法步骤1、在三个培养皿中各加入0.5%KNO3。

5%NaNO3及蒸馏水15m1。

2、撕蚕豆叶下表皮若干放入上述三个培养皿中。

3、将培养皿放入25℃温箱中，使溶液温度达到25℃。

4、将培养皿置于光照条件下照光半小时，然后分别在显微镜下观察气孔开度。

五、实验报告根据实验结果，解释钾离子引起气孔张开的机理。

六、思考题钾离子引起气孔张开的原理是什么？实验三希尔反应的观察（离体叶绿体对染料的还原作用）一、原理希尔反应（ Hill reaction ）是绿色植物的离体叶绿体在光下分解水，放出氧气，同时还原电子受体的反应，它是光合作用反应中的重要现象。

氧化剂 2,6 –二氯酚靛酚是一种蓝色染料，接受电子和 H + 后被还原成无色，可以直接观察颜色的变化，也可用分光光度计对还原量进行精确测定。

二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料菠菜或其他绿色植物新鲜叶片。

（二）试剂0.1 ％ 2,6 –二氯酚靛酚。

（三）仪器设备研钵，石英砂，小试管，试管架，漏斗，纱布，小烧杯，剪刀。

三、实验步骤取新鲜的菠菜或其他植物叶片 0.5 g ，剪碎后放入研钵中，加少量石英砂，研磨成匀浆。

加 50 mL 蒸馏水，通过 5 ～ 6 层纱布，过滤到小烧杯中，即得到叶绿体粗悬浮液。

取试管两支。

每管中加入叶绿体悬浮液 5 mL ， 0.1 ％ 2,6 –二氯酚靛酚溶液 5 ～ 6 滴，摇匀。

将其中一管置于直射光下，另一管置于暗处，注意日光下的试管液颜色变化。

5 ～ 8 min 后，将置于暗处的试管取出，比较两管溶液颜色变化，并解释原因。

[ 思考题 ]试管中蓝色褪色的原因是什么 ? 与光照有什么关系 ?实验四植物种子生命力的快速测定Ⅱ.染料染色法一、原理有生命力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染色。

而丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，染料可自由进入细胞内使胚部染色。

实验器材和试剂
植物材料: 芥蓝叶片
实验器材：显微镜、培养皿、温箱、镊子、载 玻片、盖玻片、吸水纸。
实验试剂： 2%硝酸钾、2%硝酸钠、蒸馏水。
实验步骤
1. 首先撕取芥蓝叶下表皮制作临时装片，观察气孔 开度。
2. 在三个培养皿中分别放入2%硝酸钾，2%硝酸纳 及蒸馏水各15 mL。
3. 撕芥蓝叶表皮若干放入上述三个培养皿中。 4. 培养皿放入25℃温箱中，使溶液温度达到25℃。 5. 将培养皿置于人工光照条件下照光 30 - 60 min。
（可适当延长时间） 6. 分别在显微镜下再次观察气孔的开度。
结果分析与思考
1. 仔细观察和记录实验结果，并画出三组实验 中气孔开度的示意图（气孔开或闭）！
2. 根据实验结果，解释三组实验存在差异的原 因。
3. 思考题：钾离子引起气孔张开的原理是什么？ 4. 思考题：试分析影响气孔开闭还有哪些原因？
韩山度的影响
背景知识
气孔运动：
在保卫细胞的调节作用下，气孔可以 运动-白天开放、晚上关闭。
引起气孔运动的主要原因是：
保卫细胞的吸水膨胀或失水收缩。 保卫细胞内侧细胞壁比较厚,外侧细胞 壁薄而有弹性。保卫细胞含水多时,膨 压高时,细胞向外凸出,气孔张开。 当细胞中水分减少,膨压降低时,细胞会 萎缩,保卫细胞内侧厚壁变直,互相挤靠, 气孔关闭.

Ｌ ａ — ｈ ｎ Ｉ Ｈｕ ｎ— ｏ ｇ ｚ （ ａｘ Ｆ ｒｓｙＶ ｃｔ ｎｌ ｎ ｅｈ ｉ ｌ ｏ ｅｅ Ｔｉｕｎ０ ００ ， ｃ Ｓ ｎｉ ｏｅｔ ｏａｉ ａ ｄＴｃ ｎ ａ Ｃ ｌｇ， ａ ａ ３ ０ ９ 职 Ｊ ｈ ｒ ｏ ａ ｃ ｌ ｙ Ａｂ ｔａ ｔ Ｔ ｅｅ ｅｔ ｏ Ｋｏ ａｉ ｉ ｆ ｈｔｓｎｈｔ ａｅ（ｎ ａｄｓ ｍ ｔｌ ｏ ｄｃａｃ Ｇ ） ｆ ｏｉｕ ｏｇｇｉ ｓｒ ｃ： ｈ ｆ ｃ ｆ ｎｖｒ ｔ ｎｏ ｏｏｙｔｅｉ ｒｔ Ｐ ） ｎ ｏ ａａ ｃｎ ｕｔｎｅ（ ｓ ｏ Ｃ ｔ ｓｃｇｙｒ ｆ ｓ ａｏ ｐ ｃ ｔ ｎ ａ
ｏ ｅｅｓｔ ｐ ｔａ Ｃ ， ： ． Ｋ ： ． ｆ ｗ ｒ ｅ ｕ ｔ Ｋ Ｋ１ ０３ Ｋ ｈ ％， ２ ０６ Ｋ ： ． ａ ｄ Ｋ ： ．％ （ ａ ｗ ｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎｔ ａｍ ｎ； ４ ｗ ｓ ％， ３ ０９ ｎ ４ １ ％ ２ Ｋ１ｗ ｓｌ ｏ ｃ ｎｒ ｉ ｒ ｔ ｅ ｔＫ ａ ｏ ａｏ ｅ
进行测定 Ｐ ｎ和 Ｇ 在 一 天 中 的 变化 规 律 。试 验 结 果 表 明 ： 处 理 与 对 照 Ｐ ｓ 各 ｎ的变 化 规 律 均 呈 现 出“ 峰 ” 化 曲线 以 及 明显 的 “ 双 变 午
休” 现象 ， 中浓度钾元素处理可 以提高“ 午休 ” 间的 Ｐ ； ｓ 期 ｎ Ｇ 表现 出 ２ 种变化规律 ， 对照和 Ｋ 、 ４ １Ｋ 处理呈现出单峰变化曲线 ， ２ Ｋ 与
ｏ ｖｏ ｓ”ｉ ｓａ ｈ ｎ ｍｅ ｏ ． ｎ ｄ ｌ ｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ｔｅ ｔ ｎ ａ ｍｐ ｏ ｅ ｔ ｅ Ｐ ｕ ｉ ｇ ” ｉｓａ’ ｅ ｏ ； ｈ ｗｅ ｂ ｉｕ ｓｅ ｔ ”ｐ ｅ ｏ ｎ ｎ ａ ｄ ｍｉ ｄ ｅ ｏ ｃ ｎ ｒ ｉ ｒ ａｍｅ ｔ ｎ ｉ ｒ ｖ ｈ ｎ ｄ ｒｎ ｓｅ ｔ ’ ｐ ｒ ｄ Ｇｓ ｓ ｏ ｄ ａｏ ｃ ‘ ｉ ｔ ｏ ｋ ｎ ｓ ｏ ａ ａｉｎ ｔ ａ ｏ ｔｏ，Ｋ１ ａ ｄ Ｋ４ ｓ ｏ ｅ ｉ ｇｅ ｐ ａ ｕ ｖ ｓ ｗ ｉ ｄ ｆｖ ｒ ｔ ｈ ｔｃ ｎ ｒｌ ｉ ｏ ｎ ｈ ｗ ｄ ａ ｓｎ ｌ ｅ ｋ ｃ ｒ ｅ ；Ｋ２ ａ ｄ Ｋ３ ｓ ｏ ｅ ｏ ｂ ｅ ｐ ａ ｕ ｖ ． ｎ ｈ ｗ ｄ ｄ ｕ ｌ－ ｅ ｋ ｃ ｒｅ Ｃ ｍｐ ｅ ｅ ｓｖ ｏ ａｉｏ ｎ ｉａｅ ｈ ｔｔ ｅ ｅｆ ｃ ｆ ｍｉ ｄ ｅ ｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ｏ ｒ ａ ｍｅ ｔ ｏ ｎ ａ ｄ Ｇｓ ｏ ｏｉ ｕ ｏ ｒｈ ｎ ｉｅ ｃ ｍｐ ｒｓ ｎ ｉｄ ｃ ｔ ｄ ｔ ａ ｈ ｆ ｔｏ ｄ ｌ ｏ ｃ ｎ ｒ ｉ ｆ Ｋ ｔ ｔ ｎ ｎ Ｐ ｎ ｆ Ｃ ｔ ｓ ｅ ａｏ ｅ ｎ

植物生理学实验教案唐为萍韩山师范学院生物系实验一、植物组织（半透膜）渗透现象的观察一、原理：利用半透膜的选择透性，观察不同浓度溶液间的渗透现象。

二、仪器、药品：铁架台、烧杯、长玻璃管、滴管、橡皮筋、1M蔗糖溶液（2000ml）、15%的HCL溶液。

三、材料：浸泡好的蚕豆或直接买鲜鸡蛋等半透膜及自备材料。

四、方法、步骤：1.取浸泡好的蚕豆种子，小心去出子叶；2.将空皮囊用橡皮筋系紧于玻璃管的一端；3.检查不漏气后，用滴管注入1M蔗糖溶液若干于玻璃管中；4.放入盛有清水的烧杯中，使二者液面平齐；5.过一段时间观察有什么变化？五、结果分析：结果：原因：现象如图：（注：34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，即为浓度1ml/L）附：植物组织含水量的测定一、原理：植物组织中水遇热可以蒸发成水蒸气，用加热烘干法测定植物组织中的含水量。

二、仪器分析天平、鼓风干燥箱、称量瓶（铝盒）、剪刀（自带）。

三、材料：各种植物的树叶。

（学生自己采集）四、方法步骤：1、在天平上称得铝盒的重量（W1）(精确到小数点后四位)。

2、将待测材料——树叶剪碎放入铝盒中盖好，准确称重（W2）。

3、置于烘箱内烘干，烘干后冷却至室温称重（W3）。

(注：新鲜组织先在105℃烘4~6小时杀死细胞组织后，再烘2小时至恒温。

)五、结果分析：树叶的含水量：占鲜重%= W2－W3×100%W2 －W1占干重%= W2－W3 ×100%W3－W1应注意的几个问题：①烘后一定要冷至室温称重。

②将材料置于烘干箱内烘干时，称量瓶（连盖）一起放入，注意在烘箱中打开盖子，再烘干。

③将烘干的材料从烘箱内取出时，一定先盖上盖子，再拿出来。

④烘干时温度、时间调整为105℃，2个小时。

（注：分几组测不同的树叶）实验二、植物组织水势的测定（小液流法）一、原理：当植物细胞或组织放入溶液中时，如果植物的水势小于溶液的水势，则组织吸水而使溶液浓度变大，反之，如果植物的水势大于溶液的水势，则植物失水，溶液浓度变小，若两者水势相等，则二者保持水分交换的动态平衡，溶液浓度不变。

植物⽣理学实验⼀．植物组织⽔势的测定（⼩液流法）【器材与试剂】1.实验仪器试管，移液管，长弯针头，直径0.5cm打孔器，镊⼦。

2.实验试剂 1.00mol/L蔗糖溶液（342.3g/L）,10%甲烯蓝（⽤⽔配制）。

3.实验材料菠菜叶⽚【实验步骤】1.⽤1mol/L蔗糖母液配制⼀系列不同浓度的蔗糖溶液（0.2，0.3，0.4，0.5，0.8mol/L）各10mL，注⼊5⽀编号号的试管中，各管都加上塞⼦，按标号顺序在试管架上排成⼀列，作为对照组。

将原液稀释10倍配10mL吸原液 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL 8 mL加⽔ 8 mL 7 mL 6 mL 5 mL 2 mL2.另取5⽀试管或青霉素⼩瓶，对应于对照组各管编号，作为试验组。

然后从对照组的各管中分别取4mL溶液移⼊相同编号的试验组试管或青霉素⼩瓶中，并都加上塞⼦。

3.菠菜洗净，⽤打孔器在叶⽚中部靠近主脉附近打取页原⽚，随机取样，向试验组的每⼀试管或青霉素⼩瓶中放⼊相等数⽬（10⽚）的叶圆⽚，加塞，放置30min，每⼗分钟摇动⼀次，每次30秒钟。

4.⽤点样针头蘸⼀下10%甲烯蓝溶液（如有条件的话，⽤微量移液器吸取1µL）加⼊每⼀试管或青霉素⼩瓶中，。

震荡，此时溶液呈蓝⾊。

5.⽤5⽀⾃制长弯针头，从试验组的各管中⼀次吸取着⾊的液体少许，吸取溶液量应相等，赶⾛溶液中⽓泡，如针头有液珠必须擦⼲，然后伸⼊对照组同样浓度溶液的中部，缓慢从针头尖端横向放出⼀滴蓝⾊溶液，轻轻取出滴管。

6.观察蓝⾊液滴的移动⽅向，如果蓝⾊液滴向上移动，说明⽐重⼩，原组织细胞失⽔，溶液从叶⽚细胞中吸出⽔分⽽被冲淡，密度⽐原来⼩了外液失⽔变浓，⽐重⼤；如果液滴向下移动，则说明叶⽚细胞从溶液中吸了⽔，溶液密度变⼤，外液失⽔变稀，⽐重⼩；如果液滴不动，则说明叶⽚与溶液的⽔分交换平衡，即叶⽚的⽔势与此种浓度的溶液的渗透式相等。

7.记录液温。

⾊滴不动的相应温度。

8.书写实验报告。