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叶下珠醇提物对实验性肝损伤的保护作用
周军;李茂;樊亦军
【期刊名称】《广西中医药大学学报》
【年(卷),期】2004(007)001
【摘要】[目的]研究叶下珠醇提物对实验性肝损伤的保护作用.[方法]观察药物对三种大小鼠动物肝炎模型,体外抗谷丙转氨酶及对肝药酶的影响.[结果]表明叶下珠醇提物能明显对抗四氯化碳(CCL4)、硫代乙酰胺(TAA)和D-氨基半乳糖(D-GN)引起的小鼠或大鼠谷丙转氨酶(ALT)升高;对正常小鼠的ALT水平,无论体内或体外试验均无影响;能显著缩短戊巴比妥钠引起的小鼠睡眠时间.[结论]叶下珠醇提物对肝损伤的保护作用机理是多方面的;叶下珠醇提物有诱导肝药酶活性的能力,这可能是叶下珠保肝作用的重要原因.
【总页数】3页(P5-7)
【作者】周军;李茂;樊亦军
【作者单位】广西中医药研究所,广西,南宁,530022;广西中医药研究所,广西,南宁,530022;广西中医药研究所,广西,南宁,530022
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.复方苦味叶下珠胶囊对实验性肝损伤的保护作用 [J], 李彩东;梁云;吴斌;王聪庆
2.叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用 [J], 李小翚;李钢;李常青;苏俊
芳
3.味下珠对小鼠实验性肝损伤的保护作用 [J], 任丽娟;张岚
4.叶下珠提取物对CCl4致小鼠化学性肝损伤保护作用 [J], 范适;左家哺;饶力群
5.复方叶下珠对小鼠实验性肝损伤作用的研究 [J], 苏洁寒;胡慧宁;谢志春
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叶下珠提取物对CCl4致小鼠化学性肝损伤保护作用范适;左家哺;饶力群【期刊名称】《江苏建筑职业技术学院学报》【年(卷),期】2016(016)003【摘要】Sixty Kuming mice were randomly divided into six groups including a normal control group,a model group,three PE-treatment groups at doses of 100mg/kg,200mg/kg and 400 mg/kg of PE re-spectively,and a positive control group treated with 200 mg/kg of dimethyl dicarboxylate biphenyl (DDB),1 0 mice in each group.Two hours after the 7 d administration with PE the mice in PE groups were treated with 50mL/kg CCl4 to establish hepatic injury model of mice.Then the levels of alanine aminotransferase(ALT),aspartate aminotransferase(AST),totalprotein(TP),albumin(ALB)in ser-um,and those of superoxide dismutase (SOD)and malondialdehyde (MDA)in liver homogenate were each measured.And the liver index and A/G (albumin/globulin)was calculated,and degree of liver in-jury observed in pathological sections.Results showed that active compound from Phyllanthusurinaria L.significantly blocked the elevations of ALT and AST,increased the synthesis of ALB and the value of A/G in serum of mice with liver injury,and improved the activity of SOD and reduced the production of MDA,and alleviated the cellular degeneration and inflammatory cell infiltration in hepatic tissue.Active compound from Phyllanthus urinariaL.has significant hepatoprotective activity.%将60只昆明小鼠随机分成正常对照组,模型组,100、200、400 mg/kg PE组和200 mg/kg联苯双酯阳性对照组共6组,采用50 mL/kg四氯化碳(CCl4)灌胃给药,连续给药7 d,制备小鼠化学性肝损伤模型,检测血清ALT、AST、TP、ALB的水平及肝组织匀浆液SOD活性和MDA 的含量,并计算出肝指数及A/G,观察病理肝脏的损伤程度。
影响叶下珠对乙型肝炎病毒疗效的因素探讨李华（南京军区南京总医院中医科，南京210002）关键词：叶下珠；乙型肝炎病毒；疗效摘要：综述影响叶下珠对乙型肝炎病毒疗效的若干因素，表明叶下珠抗乙肝病毒有效，不同的病例选择以及叶下珠的亚种、产地、使用方法乃至复合用药均可影响疗效。
自1988年Thyagarajan［1］报道苦味叶下珠Phyllanthus amarus [ WTBZ ] L. 治疗病毒性乙型肝炎可使59% 的乙肝患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg) 转阴后，各地争相实验、临床研究，但结果差异较大。
究其原因，与病例选择及叶下珠不同亚种、产地、使用方法乃至复合用药等有关，笔者就此作一综述。
1病例选择与疗效Thyagarajan 等［1］观察HBsAg 携带者78 例，实验组(40例)给予苦味叶下珠干粉胶囊600 mg/d 口服，对照组(38例)给予等剂量乳糖胶囊口服，疗程均为30 d。
结果实验组有59% (22/37)的HBsAg 消失(3例失访)，而对照组仅有4% (1/23) 的HBs-Ag 消失(15 例失访)。
可见，苦味叶下珠清除HBs-Ag 的作用十分显著，但乙型肝炎 e 抗原(HBeAg ) 的存在可降低这种作用。
关于叶下珠对HBeAg 阳性者疗效不佳的问题，国内亦有类似报道。
周杰等［2］用苦味叶下珠胶囊400 mg 口服，每日3 次，疗程4～8 周，治疗HBs Ag、HBeAg 和抗乙型肝炎核心抗原(HBc)IgM 三项同时阳性者22 例，结果仅 1 例HBsAg 和HBeAg 同时阴转，并出现抗HBe，而且在随访过程中(3 个月内)，HBsAg、HBeAg 再度出现阳性。
洪德庆等［3］采用随机、双盲对照法，观察HBsAg 阳性者113 例，实验组(58例) 口服苦味叶下珠糖衣片500 mg，每日3 次，疗程 3 个月；对照组(55例) 口服安慰剂，外型、剂量、服法、疗程同实验组。
叶下珠复方治疗肝炎的免疫作用研究
卢伟玲;徐培平;何家靖
【期刊名称】《中华中医药学刊》
【年(卷),期】2008(26)4
【摘要】通过小鼠四氯化碳、D-半乳糖胺盐酸盐急性肝损伤模型、小鼠炭粒廓清实验、免疫肝损伤模型研究叶下珠复方对肝损伤的保护作用以及有关免疫药理作用,结果表明:(1)叶下珠复方有保肝降酶的作用,对慢性肝细胞损伤可起到积极的保护作用。
对四氯化碳(CCL4),D-半乳糖胺盐酸盐所致的急性肝损伤以及卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)造成的免疫性肝损伤具有明显的保护作用,其降酶效果与阳性药物联苯双酯相当。
(2)叶下珠复方对免疫系统具有调节作用,对小鼠体液免疫功能呈抑制作用,能增强小鼠网状内皮系统的吞噬功能。
叶下珠复方有一定的免疫调节作用。
【总页数】3页(P838-840)
【关键词】叶下珠复方;慢性乙型肝炎;免疫作用
【作者】卢伟玲;徐培平;何家靖
【作者单位】广东环球制药有限公司,广东佛山528305;广州中医药大学,广东广州510405
【正文语种】中文
【中图分类】R512.6
【相关文献】
1.复方叶下珠胶囊体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的研究 [J], 李晖;张传涛;辜海英;陈昌金;曲俊彦;钟森
2.叶下珠复方体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究 [J], 王荣国;张奉学;朱宇同;王新华;周红燕;董伯振
3.叶下珠复方联合拉米夫定对拉米夫定耐药性肝炎抗病毒免疫机制的研究 [J], 刘亚梅
4.复方叶下珠胶囊体外抗乙型肝炎病毒作用的研究 [J], 李晖;张传涛;辜海英;陈昌金;曲俊彦
5.复方苦味叶下珠胶囊抗肝炎病毒作用研究 [J], 李彩东;吴斌;师彦平
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叶下珠抗乙肝病毒作用的研究现状
谢志春
【期刊名称】《广西医学》
【年(卷),期】2006(28)2
【摘要】当前全世界约有20亿人遭受过乙型肝炎病毒（HBV）的侵袭，其中有3．5亿发展成慢性HBV感染者。
慢性乙型肝炎可发展为肝硬化和肝癌，全球每年约有100万人死于HBV感染相关的疾病。
我国为乙型肝炎高发病区，约有50％的人感染过HBV。
慢性HBV携带者占全国人口的9．75％。
当前，国内外用于治疗乙肝的抗病毒药物主要有干扰素及拉米夫定，但效果不很理想。
因此仍然需要探讨和研制新的药物。
1988年印度学者Thyagarajan在英国LANCET杂志首次报道苦味叶下珠具有抗HBV作用，能使59％HBV携带者HBsAg转阴，引起了国内外极大的关注。
随后各地开展了广泛的实验研究和临床验证，现将国内外的研究状况综述如下。
【总页数】3页(P164-166)
【作者】谢志春
【作者单位】广西医科大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学教研室,南
宁,530021
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.叶下珠抗乙肝病毒研究概况 [J], 王荣国
2.叶下珠提取物抗乙肝病毒及乙肝病毒X基因的研究 [J], 彭立生;贺劲松;童光东;周大桥;张希;潘金波
3.复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒的初步实验研究 [J], 谭本仁;徐晓梅;罗君;郭基燕;许卫关
4.叶下珠化学成分及抗乙肝病毒活性研究进展 [J], 吴克霞;吴克芹
5.叶下珠抗乙肝病毒有效成分多靶点分子对接研究 [J], 王卫京;詹世平;丁仕强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用李小翚;李钢;李常青;苏俊芳【期刊名称】《广州中医药大学学报》【年(卷),期】2007(24)5【摘要】[目的]观察叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用.[方法]将NIH小鼠随机分成正常对照组,模型组,叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组(剂量分别为110、55、27.5g·kg-1),联苯双酯组(150mg·kg-1);以刀豆蛋白A(Con A)和D-氨基半乳糖(D-GalN)分别复制小鼠急性肝损伤模型,用叶下珠复方II号水提液进行干预治疗,并与联苯双酯进行对照,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,并观察肝组织病理改变.[结果]叶下珠复方Ⅱ号可显著性降低两种实验性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性,升高肝损伤小鼠肝组织SOD活性,与模型组比较差异有显著性意义(P＜0.01),与联苯双酯组比较差异无显著性意义(P＞0.05),且可明显减轻肝组织病理改变.[结论]叶下珠复方Ⅱ号对刀豆蛋白A和D-氨基半乳糖所致小鼠实验性肝损伤具有较好的保护作用,作用机制与抑制脂质过氧化损伤有关.【总页数】4页(P392-395)【作者】李小翚;李钢;李常青;苏俊芳【作者单位】广州中医药大学中药学院,广州,510405;广东化工职业技术学院,广州,510520;广州中医药大学热带医学研究所,广州,510405;广州中医药大学基础医学院,广州510405【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.叶下珠复方对刀豆蛋白A所致免疫性肝损伤小鼠的保护作用 [J], 鲁玉辉;符林春2.复方苦味叶下珠胶囊对实验性肝损伤的保护作用 [J], 李彩东;梁云;吴斌;王聪庆3.叶下珠醇提物对实验性肝损伤的保护作用 [J], 周军;李茂;樊亦军4.叶下珠复方对四氯化碳所致小鼠肝损伤的保护作用及影响 [J], 谢志春;胡慧宁;谭机永5.复方叶下珠对小鼠实验性肝损伤作用的研究 [J], 苏洁寒;胡慧宁;谢志春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用【摘要】观察叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用。
【方法】将NIH小鼠随机分成正常对照组，模型组，叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组(剂量分别为110、55、27.5g·kg-1)，联苯双酯组(150mg·kg-1);以刀豆蛋白A(Con A)和D?氨基半乳糖(D?GalN)分别复制小鼠急性肝损伤模型，用叶下珠复方II号水提液进行干预治疗，并与联苯双酯进行对照，检测小鼠血清谷丙转氨酶( ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性，并观察肝组织病理改变。
【结果】叶下珠复方Ⅱ号可显著性降低两种实验性肝损伤小鼠血清ALT 和AST活性，升高肝损伤小鼠肝组织SOD活性，与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01)，与联苯双酯组比较差异无显著性意义(P>0.05)，且可明显减轻肝组织病理改变。
【结论】叶下珠复方Ⅱ号对刀豆蛋白A和D?氨基半乳糖所致小鼠实验性肝损伤具有较好的保护作用，作用机制与抑制脂质过氧化损伤有关。
【关键词】叶下珠复方Ⅱ号/药理学肝损伤/中药疗法肝/病理学疾病模型动物小鼠叶下珠复方Ⅱ号是在叶下珠复方[1]的基础上加入桃仁、苦参等药物组方而成，具有解毒活血、疏肝健脾作用，临床上主要用于慢性乙型肝炎和肝纤维化的治疗。
为探讨该复方对实验性肝损伤保护作用的效果，我们以NIH小鼠为实验对象，观察该方对刀豆蛋白A(Con A)所致免疫性肝损伤模型和D?氨基半乳糖(D?GalN)所致化学性肝损伤模型的作用，现报道如下。
1 材料与方法1.1 动物 NIH小鼠，雌雄各半，体质量18～22g，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号为SCXK(粤)2003-0001。
1.2 药物叶下珠复方Ⅱ号组方药材购于广州中医药大学第一附属医院，水煎2次，混合后浓缩成含生药4kg/L，用时以蒸馏水配成所需浓度;联苯双酯滴丸由北京协和制药厂生产，批号04060106，每丸含联苯双酯7.5mg，试验时以30g/L的二甲基亚砜溶解，再用蒸馏水稀释至所需浓度;刀豆蛋白A(Con A)为美国华盛顿生物药品公司产品;D?氨基半乳糖(D?GalN)由重庆医科大学生化教研室生产，批号050326。
叶下珠提取物的抑菌活性研究作者：邓志勇来源：《湖北农业科学》2013年第12期摘要：采用生长速率法测定叶下珠（Phyllanthus urinaria Linn）的5种溶剂提取物对大肠杆菌[Escherichia coli （Migula） Casleillii & Chalmers]、伤寒沙门氏菌[Salmonella typhi （Schroeter） Warren & Scott]、痢疾志贺氏菌[Shigella dysenteriae （Shiga） Castellani & Chalmers]、蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus Frankland）、金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）的抑制活性。
结果表明，10 mg/mL叶下珠甲醇提取物、乙醇提取物和丙酮提取物对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌和伤寒沙门氏菌有较强的抑制活性，其抑菌率均不低于60%，对大肠杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑制作用较弱，抑菌率均不高于60%；10 mg/mL水提取物和石油醚提取物对5种细菌的抑制作用弱，抑菌率均在51%以下。
比较各提取物对5种供试菌的毒力可见，甲醇提取物对痢疾志贺氏菌的抑菌活性最强，其抑制有效中浓度（EC50）为2.915 5 mg/mL，乙醇提取物、丙酮提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强，EC50分别为3.440 2、4.320 6 mg/mL。
关键词：叶下珠；提取物；抑菌活性中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）12-2812-03Study on Antibacterial Activities of Extracts from Phyllanthus urinaria LinnDENG Zhi-yong（College of Chemical and Biological Engineering， Hezhou University，Hezhou 542800，Guangxi，China）Abstract： The antibacterial activities of 5 solvent extracts from Phyllanthus urinaria Linn against 5 species of bacterium were determined by growth rate method. The results showed that 3 solvent which were methanol， ethanol and acetone extracts had high antibacterial activities Shigella dysenteriae （Shiga） Castellani & Chalmers， Staphyloccocus aureus Rosenbach， Salmonella typhi （Schroeter） Warren & Scott with antibacterial rates more than 60%， and had low antibacterial activities against Escherichia coli （Migula） Casleillii and Chalmers， Bacillus cereus Frankland with antibacterial rates below 60%. The water extracts and petroleum ether extracts had low antibacterial activities against 5 species of bacterium with the antibacterial rates below 51%. The methanol extracts had the highest antibacterial activities against Shigella dysenteriae（Shiga）Castellani & Chalmers， whose EC50 was 2.915 5 mg/mL. The ethanol extracts had the highest antibacterial activities against Staphyloccocus aureus Rosenbach， which EC50 was 3.440 2 mg/mL. The acetone extracts had the highest antibacterial activities against Staphyloccocus aureus Rosenbach， whose EC50 was 4.320 6 mg/mL.Key words： Phyllanthus urinaria Linn； extracts； antibacterial activities植物源杀菌剂是指从植物中提取的具有杀菌、抑菌活性的物质，以及由其分离纯化的单体物质加工而成的药剂。
叶下珠有效部位总提取物一样药理作用研究温志坚，周永禄，曹毓，彭龙玲【摘要】目的观看叶下珠有效部位总提取物1次灌胃给药对中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统的阻碍。
方式叶下珠有效部位总提取物500，250，125 mg·kg-1次灌胃给药，观看该品对小鼠戊巴比妥钠睡眠时刻、戊巴比妥钠睡眠阈下剂量和1次灌胃600，150 mg·kg-1对小鼠自主活动的阻碍；叶下珠有效部位总提取物47，470 mg·kg-1十二指肠给药，观看对杂种狗血压、呼吸、心率、心电图的阻碍。
结果对小鼠戊巴比妥钠睡眠时刻、小鼠戊巴比妥钠睡眠阈下剂量、小鼠自主活动均无阻碍。
对狗血压、呼吸、心率、心电图（P R间期、Q-T间期、T波）均无阻碍。
结论叶下珠有效部位总提取物在所用剂量范围内，未显现对中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统有明显阻碍。
【关键词】叶下珠有效部位；药理作用Abstract：ObjectiveTo observe the effects of total extracts of Yexiazhu on nervous system,cardiovascular system,and respiratory system in mice and times of freedom movement in mice ,the effect on the hypnotic dosage andsubthreshold hypnotic dosage of Pentobarbital Sodium in mice,the blood pressure, heart rates in dogs were blood pressure,heart beat rate,heart rhythm,respiratory rate,depth of respiration ,freedom movement,hypnotic dosage and subthreshold hypnotic dosage of pentobarbital Sodium in animals had no obvious difference after given total extracts of extracts of Yexiazhu in effective dose have no obvious influence on nervous system in mice,respiratory system and cardiovascular system in dogs.Key words：Extracts of Yexiazhu; Pharmacology叶下珠Phyllanthus urinaria L.为大戟科Euphorbiaceae叶下珠属PhyllathusL.的全草，自印度学者Thyagarajan 1988年第一次报导苦味叶下珠Phyllanthus amarus L.医治乙型肝炎病毒携带者有良效以来，引发了国内外学者普遍、深切、持久的开发研究；本课题组采纳大孔树脂提取工艺制备的叶下珠Phyllanthus urinaria L.）有效部位总提取物及其制剂（叶下珠胶囊，下文均统称叶下珠），用于医治鸭乙肝［1］和临床预试［2］均获良效。
珍珠草破坏乙肝病毒“叶下珠”，顾名思义就是一种它的叶子下面藏有珠子。
它又珍珠草，全国各地几乎都有分布，常常生长在野外荒地，路边，草地和庄稼地如玉米地，红薯地等珍珠草（叶下珠）：为大戟科植物叶下珠的干燥全草或带根全草。
主产广东、广西、四川等地，安徽、江苏、浙江、江西、福建、贵州、云南等地亦有分布。
夏、秋二季采集地上部分或带根全草，洗净泥土，除去杂质，鲜用捣汁或捣敷。
或晒干，切段，生用。
【药性】甘、苦，凉。
归肝、肺经，【功效】利湿退黄，清热解毒，明目，消积。
【应用】1．湿热黄疸，泄痢，淋证。
本品苦甘性凉，苦以泄降，凉可清热，其入肝经，通利肝胆，去湿退黄，对于湿热蕴结肝胆，面目皮肤色黄如橘者，与茵陈同用；本品还可清热利湿通淋，可与金钱草等药相伍，用于膀胱湿热之热淋涩痛与砂淋、石淋；本品既利湿热，又解热毒，配黄连、木香等，还常用治湿热毒邪下注大肠所致的泄泻或便下脓血，里急后重。
2．疮疡肿毒，蛇犬咬伤。
珍珠草性凉，清热解毒。
可治疗热毒蕴结之疮毒痈肿、毒蛇咬伤或狂犬咬伤。
可内服外敷并用，或与白花蛇舌草、蚤休等伍用。
3．目赤肿痛。
本品入肝经，苦凉泄火，清热明目。
单用或配菊花内服外洗，可治肝热上攻，风热注目之赤眼火肿，涩痛难忍。
4．小儿疳积。
本品甘可健脾，凉以清热，治小儿禀赋素弱，过食肥甘，脾胃失运，食积化热所致的疳积，可单用水炖服。
【用法用量】煎服，15～30g。
鲜品30～60g。
外用适量。
【使用注意】苦凉之品，阳虚体弱者慎用。
【古籍摘要】1．《生草药性备要》：“治小儿疳眼，疳积，煲肉食或煎水洗。
又治亡乳汁，治主米疳者最效。
”2．《临证指南》：“治小儿诸疳瘦弱，眼欲盲。
”【现代研究】1．化学成分：全草含酚性成分，三萜成分及没食子鞣质。
2．药理作用：珍珠草对金黄色葡萄球菌，福氏痢疾杆菌抑制作用较强，对溶血性链球菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌均有抑制作用”。
本品对乙型病毒性肝炎有突出治疗作用。
另有研究认为珍珠草对鸭乙肝病毒逆转录酶及人肝癌细胞具有明显抑制作用。
叶下珠提取物体外抗氧化和保肝作用
郑秀青
【期刊名称】《福建畜牧兽医》
【年(卷),期】2008(30)6
【摘要】采用叶下珠水提取物、75%乙醇提取物、95%乙醇提取物体外对羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-)的清除和抑制H2O2诱导小鼠红细胞氧化溶血性等方法来研究叶下珠的抗氧化活性.以体外培养法获取罗非鱼的原代肝细胞,用CCl4对肿细胞建立体外损伤模型,研究叶下珠水提取物、75%乙醇提取物、95%乙醇提取物对丙氨酸转氨酶(Alanine aminitransperase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)活力的影响.叶下珠水提取物对羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-)的清除和抑制H2O2诱导小鼠红细胞氧化溶血性最强.加药组丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶活性显著低于损伤组,差异极显著(P<0.01).叶下珠提取物具有明显的体外抗氧化和保肝作用.
【总页数】3页(P5-7)
【作者】郑秀青
【作者单位】厦门大学医学院,福建厦门,361005
【正文语种】中文
【中图分类】S8
【相关文献】
1.叶下珠提取物对酪氨酸酶的抑制和抗氧化作用 [J], 陈良华;刘轩;明艳林;童庆宣;秦江;陈清西
2.叶下珠提取物体外抗氧化和保肝作用 [J], 郑秀青
3.叶下珠水提取物体外抗菌作用 [J], 郑秀青
4.叶下珠提取物对CCl4致小鼠化学性肝损伤保护作用 [J], 范适;左家哺;饶力群
5.叶下珠提取物对CCl4致小鼠化学性肝损伤保护作用 [J], 范适;左家哺;饶力群;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
叶下珠复方抗小鼠肝纤维化作用的实验研究
谢志春;胡慧宁
【期刊名称】《微创医学》
【年(卷),期】2002(021)004
【摘要】目的探讨叶下珠复方(PUC)对小鼠实验性肝纤维化的影响.方法经小鼠皮下多次注射CCL4,促成小鼠肝纤维化,同时给予大、中、小剂量的PUC,并以秋水仙碱做阳性对照药.给药6周后检测小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)及肝组织中的羟辅氨酸(Hyp)含量,并观察小鼠肝组织病理改变.结果 PUC各剂量组均可升高血清中SOD含量及降低其它指标的含量,并且高剂量PUC对升高SOD和降低ALT、AST、MDA、Hyp的效果优于秋水仙碱,病理观察表明PUC可减轻CCL4所致的小鼠肝组织纤维化程度.结论 PUC有抗CCL4所致的肝纤维化作用.
【总页数】4页(P425-428)
【作者】谢志春;胡慧宁
【作者单位】广西医科大学公共卫生学院,南宁,530021;广西医科大学公共卫生学院,南宁,530021
【正文语种】中文
【中图分类】R575.2
【相关文献】
1.叶下珠复方体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究 [J], 王荣国;张奉学;朱宇同;王新华;周红燕;董伯振
2.叶下珠复方制剂对小鼠肝癌的抑制作用的实验研究 [J], 杨书兰;邝幸华;朱宇同
3.叶下珠复方Ⅱ号体内抗鸭乙肝病毒的实验研究 [J], 李小月;何金洋;李常青;苏俊芳;董伯振;李向阳
4.叶下珠复方体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究 [J], 王新华;方宏勋
5.福建叶下珠抗小鼠免疫性肝损伤的实验研究 [J], 冯天保;田广俊;李华;唐明增;陈培琼;王新华;张奉学
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叶下珠有效部位总提取物对大鼠长期毒性实验温志坚彭龙玲杨亚斯赵军宁周永禄薛米伦【摘要】目的观看叶下珠有效部位总提取物长期毒性可能造成对机体的毒性反映，为临床提供平安依据。
方式叶下珠有效部位总提取物 1 280，640，320 mg/kg天天灌胃1次，持续给药180 d及停药后30 d观看对大鼠生长发育和血液学常规、血液生化指标、和要紧脏器体重比、要紧脏器病理形态、心电图的阻碍。
结果对大鼠生長发育、血液学常规、血液生化指标均在正常范围：要紧脏器体重比、要紧脏器病理形态、心电图均未显现毒性改变。
结论大鼠180 d长毒实验结果说明，叶下珠有效部位总提取物是低毒的。
【关键词】叶下珠总提取物；长期毒性Abstract：ObjectiveTo observe the chronic toxicity of TEY in rats. MethodsRats of three experimental groups were administrated. TEY at dose of 1280，640 and 320 mg/kg·d-1, respectively，6 days per week for 6 months．Rats of control group were given distilled water with the same volume．Growth of rats were observed．Indexes of hematology and blood biochemistry weremeasured．Ratio of viscera to body were measured and the major organs were examined by the pathology．All these tests were carried out three and six months after administration and one month after stopping administration．ResultsThe outer appearance and behavior, weights, the indexes of hematology and blood biochemistry were normal. The organ coefficient, the cardiogram, the pathological examination had no significant difference by comparing with control group. ConclusionTEY has no significant toxicity for long term administration to rats.Key words：Total extracts of Yexiazhu；Chronic toxicity叶下珠有效部位总提取物是四川中药研究所叶下珠课题组采纳大孔树脂提取工艺制备的样品，作者曾报导该品的一样药理作用，该研究结果未发觉对中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统有明显的阻碍。
叶下珠水提物对HBx致肝癌细胞miRNA-21和miRNA-145异常表达的影响贺劲松;魏春山;童光东;彭立生;周晓初;周大桥【期刊名称】《中西医结合肝病杂志》【年(卷),期】2015(25)6【摘要】目的:探讨HBx基因(简称HBx)对人肝癌HepG2细胞miRNA(亦称miR 或mincmRNA)-21、miR-145表达的影响,以及叶下珠水提物对HBx和miR-21、miR-145异常表达的影响.方法:体外培养HBx阴性的HepG2-CAT及稳定表达HBx的HepG2-HBx细胞,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-21、miR-145表达的变化;分别以不同浓度叶下珠水提物(15mg/ml、7.5 mg/ml、3.75 mg/ml、0 mg/ml)处理96h后,RT-PCR检测HepG2-HBx细胞中HBx的表达变化,以及HepG2-CAT和HepG2-HBx细胞中miR-21、miR-145的表达变化.结果:叶下珠能浓度依赖性地抑制HBx的表达(P＜0.05或0.01),HBx蛋白可显著上调miR-21表达及下调miR-145的表达水平(P＜0.01).叶下珠水提物明显下调HepG2-HBx细胞中miR-21表达水平,且随着药物浓度的增加抑制作用显著增强(P＜0.01);中浓度叶下珠水提物促进HepG2-HBx细胞中miR-145表达(P＜0.01),高浓度叶下珠水提物明显提高HepG2细胞中miR-145的表达(P＜0.01).结论:抑制HBx进而下调miR-21及上调miR-145表达,或直接上调miR-145表达可能是叶下珠抗肝癌的作用机制之一.【总页数】4页(P352-355)【作者】贺劲松;魏春山;童光东;彭立生;周晓初;周大桥【作者单位】深圳市中医院肝病科广东深圳,518033;深圳市中医院肝病科广东深圳,518033;深圳市中医院肝病科广东深圳,518033;深圳市中医院肝病科广东深圳,518033;深圳市中医院肝病科广东深圳,518033;深圳市中医院肝病科广东深圳,518033【正文语种】中文【相关文献】1.叶下珠水提物对裸鼠人肝癌移植瘤HBx和VEGFR3表达的影响 [J], 魏春山;唐海鸿;王宏艳;邢宇锋;童光东;周大桥;2.叶下珠水提物对裸鼠人肝癌移植瘤HBx和VEGFR3表达的影响 [J], 魏春山;唐海鸿;王宏艳;邢宇锋;童光东;周大桥3.叶下珠提取物对肝癌细胞的抑制和对Bcl-2表达的影响 [J], 洪剑锋;饶力群4.人重组干扰素α和叶下珠提取物对人肝癌细胞株PLC/PRF/5产生HBsAg的影响 [J], 纪徐淮;秦一中;汪伟业;朱建英;刘喜泰5.苦味叶下珠提取物对人肝癌细胞株PLC/PRF/5产生HBsAg的影响 [J], 纪徐淮;秦一中;汪伟业;朱建英;刘喜泰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
叶下珠提取物对急性乙型肝炎小鼠乙型肝炎病毒复制及其抗原表达的影响目的观察叶下珠提取物在小鼠急性乙型肝炎病毒（HBV）感染模型中对HBV复制及其抗原表达的影响。
方法C57b/6小鼠尾静脉注射1.3倍HBV真核表达质粒（pHBV1.3），20 μg/只，建立小鼠急性HBV感染模型。
实验小鼠随机分为正常组、病毒组及中药高、中、低剂量组，感染后第1日起，给药组分别给予相应剂量药物灌胃，连续3 d。
感染后第4日，化学发光法检测血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）水平，PCR检测血清HBV-DNA 含量；免疫组化法检测肝组织乙型肝炎核心抗原（HBcAg）、HBsAg表达。
结果中药各剂量组均能明显降低感染小鼠血清中HBsAg、HBeAg含量，与病毒组比较差异有统计学意义（P＜0.01）；中药高剂量组显著降低血清中HBV-DNA水平，与病毒组比较差异有统计学意义（P＜0.01），中药中、低剂量组血清HBV-DNA 含量降低，但与病毒组比较差异无统计学意义（P>0.05）；中药高剂量组明显抑制了肝组织了HBcAg及HBsAg的表达（P＜0.05）。
结论叶下珠提取物明显抑制小鼠急性HBV感染模型小鼠HBV的复制与表达，具有直接抗病毒作用。
标签：叶下珠提取物；乙型肝炎病毒；复制；表达；水动力法；小鼠乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是危害人类健康的重要致病因子，HBV感染所致的慢性乙型肝炎常常会发展成为肝纤维化、肝硬化甚至肝癌，导致全球每年约有100万人死于乙肝相关疾病[1]。
我国是HBV感染的高发区，有效的抗HBV感染的治疗在全世界尤其在我国显得尤为迫切[2]。
目前对HBV感染的治疗主要依赖于非特异性的治疗药物如干扰素和核苷类似物，但由于不良反应较大、病毒变异逃逸等问题，治疗效果不很理想。
叶下珠是近年来发现可抗HBV感染的中药，具有直接抑制病毒蛋白表达、降低病毒滴度的作用，是为数不多的能够具有直接抗病毒作用的药物，且抗HBV-DNA的效果优于虎杖、五味子等中药[3]。
我们的前期研究也在HBV体外瞬时转染细胞系中，检测到叶下珠水提物能剂量依赖性地抑制HBV-DNA复制及乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎核心抗原（HBcAg）表达。
为了进一步明确叶下珠在体内模型中的抗病毒作用，本实验运用高压水动力法建立了小鼠急性HBV感染模型，在此基础上观察叶下珠提取物对HBV复制及其抗原表达的影响，从而进一步明确叶下珠的抗病毒作用，为其临床运用提供依据。
1 实验材料1.1 质粒与动物pHBV1.3为含1.3倍HBV ayw型全基因组真核表达载体，重庆医科大学感染性疾病分子生物学实验室馈赠。
C57b/6小鼠30只，7～9周龄，雌性，体质量18～20 g，清洁级，重庆医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：SYXK20120001。
1.2 药物叶下珠醇提物，外观为棕色粉末，西安金绿生物工程技术有限公司制备并提供质检报告，批号BW2012013B，由西北大学生命科学院检测符合2010年版《中华人民共和国药典》标准。
1.3 主要试剂与仪器去内毒素的质粒大量提取试剂盒（德国Qiagen公司），HBsAg Ⅱ和乙型肝炎e抗原（HBeAg）检测试剂盒、HBV核酸定量检测试剂盒（德国Roche公司），鼠抗人- HBs单克隆抗体、兔抗人-HBc多克隆抗体、DAB检测试剂盒（福州迈新生物技术开发有限公司）。
电化学发光全自动免疫分析仪cobas E601、480 PCR 扩增仪（德国Roche公司）。
2 实验方法2.1 药物制备叶下珠全草，采自川西大雪山，购自安徽亳州药材市场，清洗2遍后脱水烘干，粉碎过40目筛后直接投料；50%乙醇、60 ℃提取2 h，共提取3次，用板匡（滤网规格300目）过滤后，常压浓缩，制得流浸膏；粉碎机粉碎喷粉，添加辅料糊精混合，使用不锈钢磁体筛网80目过筛，超高温灭菌消毒，薄层色谱硅胶板检测药材斑点进行质量控制。
最终的提取物每克相当于原药材3 g。
称量药物粉末，溶于灭菌的PBS中，配成0.5、0.25、0.125 g/mL的药物溶液。
2.2 造模与分组5 s内尾静脉高压注射pHBV1.3质粒20 μg/只（溶于1.6 mL PBS缓冲液中），建立小鼠急性HBV感染模型。
小鼠随机分为5组，每组6只。
正常组注射PBS 缓冲液1.6 mL/只；病毒组注射pHBV1.3 20 μg/只；中药高、中、低剂量组，在注射pHBV1.3后第1日，分别予叶下珠提取物0.5、0.25、0.125 g/mL 1 mL灌胃，连续3 d。
2.3 血清乙型肝炎表面抗原、e抗原含量测定感染后第4日，摘除小鼠眼球取血，孵出血清后，电化学发光法检测血清中HBsAg、HBeAg含量，临界值指数（COI）<1为阴性。
2.4 血清乙型肝炎病毒DNA含量测定感染后第4日，摘眼球取血，PCR荧光探针法检测血清中HBV-DNA水平，PCR扩增仪扩增，Fosun复星诊断，按HBV核酸定量检测试剂盒说明操作。
2.5 肝组织乙型肝炎病毒核心抗原、乙型肝炎病毒表面抗原表达测定感染后第4日，断颈处死小鼠，剪开腹腔，取出肝脏，用锋利刀片切取5 mm×6 mm大小的组织块，4%多聚甲醛固定后，常规石蜡切片，分别孵育鼠抗人- HBs （稀释度1∶100）、兔抗人-HBc（稀释度1∶50）后，按DAB检测试剂盒操作，组织切片予苏木素染色。
采集图像，镜下观察并计数。
3 统计学方法采用SPSS16.0统计软件进行分析。
实验数据均以—x±s表示，多组间比较采用方差分析，两组间均数比较用t检验。
P＜0.05表示差异有统计学意义。
4 结果4.1 小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型的建立与鉴定水动力法注射pHBV1.3后第1、4、7日进行检测，小鼠血清HBsAg含量分别为20.21±1.86、14.11±1.20、4.62±0.89，说明小鼠感染模型建立成功，HBsAg 在注射后第1日表达量最高，然后逐渐降低，感染后第10日检测HBsAg为阴性。
4.2 叶下珠提取物对血清乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗原和乙型肝炎病毒DNA含量的影响感染后第4日（用药3 d后），中药各剂量组血清HBsAg含量明显降低，与病毒组比较差异有统计学意义（P＜0.01）；药物对HBsAg的降低作用随药物浓度升高而增加，高剂量组HBsAg降低至阴性表达。
病毒组HBeAg呈阳性表达，中药各剂量组HBeAg均阴性表达。
中药各剂量组血清HBeAg水平明显降低，与病毒组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。
中药各剂量组均降低了感染后HBV-DNA含量，但仅高剂量组HBV- DNA含量与病毒组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。
结果见表1。
4.3 叶下珠提取物对肝组织乙型肝炎病毒核心抗原、乙型肝炎病毒表面抗原表达的影响HBcAg是病毒在肝脏中复制的指标，免疫组化显示其在肝细胞的胞核、胞浆中均有表达，与病毒组比较，中药高剂量组肝组织HBcAg表达量明显降低（P ＜0.05），中药中、低剂量组变化不明显，与正常组相似，见图1。
HBsAg表达在肝细胞胞浆中，与病毒组比较，中药高剂量组中HBcAg表达量明显降低（P ＜0.05），中药中、低剂量组变化不明显，见图2。
5 讨论HBV感染细胞及动物模型是研究HBV的主要途径，由于HBV感染的高度种属特异性，其感染模型的建立是HBV研究中的难点。
一直以来，HBV研究受到缺乏合适的动物感染模型的限制。
土拨鼠肝炎病毒（WHV）慢性感染的土拨鼠和鸭乙肝病毒（DHBV）感染的北京鸭是常用的研究HBV的体内模型，但其局限在于感染的肝炎病毒为WHV或DHBV，与HBV有一定差异，使对乙型肝炎的发病机理和机体应答的研究受到限制。
而HBV转基因小鼠的病毒基因均是整合在宿主染色体上的，没有经过和靶细胞受体结合穿透的过程，与自然感染不同，无法检测到细胞内cccDNA，应用也受到限制。
因此，在体内模型方面，需要建立类似于HBV自然感染的动物模型，以解析药物对HBV复制及表达的影响。
而水动力法小鼠乙肝模型的建立，为人们建立跨种属的HBV体内模型提供了新的思路，是目前研究miRNA作用中常用的体内动物模型[4]。
1999年，Zhang 等[5]提出可通过尾静脉注射含HBV全基因组的裸质粒使外源基因在小鼠肝细胞内高表达，这种转染外源质粒的方法又称为水动力法。
我们曾在水动力法小鼠乙肝模型上，成功观察了RNA干扰对HBV复制的抑制作用[6]。
因此，本课题采用水动力法乙肝小鼠为体内模型，观察叶下珠提取物体内抗病毒效果。
前期实验表明，pHBV1.3在体外HepG2细胞系及小鼠体内模型中，能有效地启动HBV的复制，具有肝细胞特异性[7-8]。
本实验利用高压水动力法将pHBV1.3导入小鼠体内建立急性HBV感染模型，C57b/6小鼠感染率为100%。
在小鼠急性HBV感染的模型中，宿主对HBV的感染是一急性自限性的过程，C57b/6小鼠尾静脉注射pHBV1.3 20 μg后第1日HBsAg表达量最高，持续4 d 高表达后逐渐降低，第7日仍有阳性表达。
考虑到药物作用时间，我们选择感染后第4日观察叶下珠提取物对HBV复制、表达的影响。
结果表明，中药各剂量组均有效抑制了血清HBsAg的表达，中药高剂量组血清HBsAg表达为阴性；中药各剂量组均明显降低了HBeAg的表达至阴性，可能与本模型中HBeAg的表达量较低有关。
定量检测HBV-DNA的结果表明，中药各剂量组均可降低血清中HBV-DNA的水平，其中中药高剂量组对HBV-DNA的抑制最明显，与病毒组比较差异有统计学意义。
肝组织内HBcAg表达是HBV复制的标志，因此，我们运用免疫组化法检测了叶下珠提取物对小鼠肝组织中HBcAg的表达，结果表明药物对肝细胞内HBcAg的表达显示出明显的抑制作用，同样，药物也明显降低了肝组织中HBsAg的表达。
综上，本实验结果表明，叶下珠提取物在体内HBV 感染的小鼠急性肝炎模型中能明显抑制病毒的复制与表达，具有明确抗病毒作用。
目前，叶下珠抗HBV感染作用是中药治疗乙肝中研究的热点，国内不同产地、品种的叶下珠属植物提取物均有抗HBV作用[9]。
以叶下珠为主要成分的复方制剂，如复方苦味叶下珠胶囊、叶下珠复方等，均显示了较好的临床疗效[10-11]。
本实验为叶下珠提取物及其复方制剂用于临床治疗乙肝提供了实验依据，并为进一步研究叶下珠及其提取物抗病毒作用的具体环节和分子机制提供了良好的基础。
参考文献：[1] Neuveut C，Wei Y，Buendia MA. Mechanisms of HBV-related hepatocarcinogenesis[J]. J Hepatol，2010，52（4）：594-604.[2] Férir G，Kaptein S，Neyts J，et al. Antiviral treatment of chronic hepatitisB virus infections：the past，the present and the future[J]. Rev Med Virol，2008，18（1）：19-34.[3] 米志宝，张习坦，陈鸿珊，等.中草药抗鸭乙肝病毒的效果[J].中西医结合肝病杂志，1994，4（4）：24.。
