CLSI折点更新课件
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CLSI临床微生物实验室标准解读葡萄球菌CLSI 临床微生物实验室标准解读第一辑2009年CLSI (M100-S19)中葡萄球菌属药敏更新部分中国医学科学院北京协和医院王辉陈宏斌2009年CLSI在版式上的显著变化是将K-B法和MIC法放在同一个表格中,方便比较。
对于葡萄球菌属,主要有以下更新和变化:一是去除凝固酶阴性葡萄球菌苯唑西林纸片扩散法试验;二是删除了万古霉素纸片扩散法的药敏折点;三是增加了金葡菌莫匹罗星高水平耐药性的检测。
一、β-内酰胺类的变化2009年CLSI指出在报告青霉素对葡萄球菌敏感之前,即当MIC≤0.12μg/ml或抑菌圈直径≥29 mm,需要做可诱导的β-内酰胺酶试验。
其操作如下:将分离菌株传种至血平皿或MH琼脂上,贴上作为诱导子的苯唑西林或头孢西丁纸片,35℃孵育16-18h,挑取抑菌圈边缘的细菌做b-内酰胺酶试验。
b-内酰胺酶试验阳性可以预测青霉素、氨苄西林、阿莫西林、羧苄青霉素、替卡西林、美洛西林和哌拉西林耐药。
在检测MRS时,金葡菌、路登葡萄球菌和其它凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)对苯唑西林的折点和选取的药敏方法有所不同,具体见表1(见下页)。
在CoNS(除外路登葡萄球菌以外)中,由于苯唑西林纸片扩散法存在太多假―R‖,所以此法被去除,而是采用头孢西丁纸片法、苯唑西林/头孢西丁MIC法检测mecA介导的苯唑西林耐药。
对于由CoNS(除外表皮葡萄球菌)引起的严重感染,当苯唑西林MIC值在0.5-2μg/mL之间时,应当检测该菌株是否产mecA基因或PBP2a(图1)。
利用头孢西丁检测mecA 介导的苯唑西林耐药所推荐的质控菌株是金葡菌ATCC25923-mecA阴性(抑菌圈直径23-29mm)和金葡菌ATCC43300-mecA阳性(抑菌圈直径≤21mm)。
图1 CoNS*苯唑西林MIC结果报告策略二、糖肽类耐药性的检测2009年CLSI推荐采用MIC法检测所有葡萄球菌对万古霉素的敏感性,去除了纸片扩散法。
抗生素折点简介体外试验敏感和耐药的标准,是由所谓的折点(breakpoints)来界定的,折点是指具体的MIC值,是根据MIC的频度、细菌耐药的机制、抗菌药物的药动学和药效学、临床的相关性作出的,CLSI/NCCLS不断根据临床的资料更新折点的界定,比如2002年CLSI/NCCLS头孢噻肟和头孢曲松对呼吸道标本来源的肺炎链球菌敏感和耐药的折点从原来≤0.5 ug/mL为敏感,放宽到≤1.0 ug/mL为敏感,耐药的标准也从>2ug/mL,放宽到>4ug/mL。
折点的具体意义折点界定的敏感、中介和耐药,其具体意义为:① 敏感(S):“敏感”表明该菌株所致感染可以此种抗微生物药物常规剂量进行治疗,除非存在禁忌证。
② 中介(I):“中介”类包括这些菌株,即其MIC接近于血液和组织中通常可达到的水平,而抗微生物药物治疗的反应率可能低于敏感株。
“中介”意味着药物在生理浓集的部位(如尿液中的喹诺酮类和β一内酰胺类)具有临床效力,或者可用;高于通常剂量的药物进行治疗(如β-内酰胺类)。
“中介”还意味它是一个缓冲区,避免微小的、未能控制的技术因素造成重大的结果解释错误,特别是对那些药物毒性范围窄的药物。
③ 耐药(R):耐药株是指常规剂量药物通常达到的全身浓度,不能抑制生长的菌株和/或MIC落在存在某些特定的耐药机制(如β一内酰胺酶)范围内,并且治疗研究显示其临床疗效并不可靠的范围内的菌株。
折点的局限性体外药敏实验根据折点决定的耐药和敏感,并不能完全代表细菌在体内对抗菌药物耐药和敏感。
抗菌药物对某种细菌敏感还是耐药,决定于抗菌药物的作用机制和细菌的基因型,耐药基因的检出可以直接预告耐药,但由于许多细菌的耐药涉及许多的机制,其原因也没有完全阐明,监测耐药的分子生物学方法相对于体外药敏试验更需要复杂的设备和仪器。
因此,目前临床微生物实验室主要还是通过体外药敏试验来预测细菌耐药。
由于体外药敏结果是决定于基因型的表型,细菌在体外对抗菌药物耐药,体内必定耐药,而在体外敏感的,体内就不一定敏感。
2014年CLSI更新要点(M100—S24)唐朋2014·4第三军医大学新桥医院·微生物室2CLSI 是什么?p CLSIClinical and Laboratory Standards Institute ,临床实验室标准化协会。
CLSI 前身是NCCLS ,National committee for clinical laboratory ,美国临床实验室标准化委员会。
美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准,是目前国内临床微生物检验遵循的标准。
由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力,所以大多数国家包括中国都还没有能力建立自己的标准,而依赖CLSI的方法和标准。
第三军医大学新桥医院·微生物室3第三军医大学新桥医院·微生物室4CLSI 2014肠杆菌科细菌头孢吡肟修订了折点,并补充“SDD”头孢唑林增加了尿培养的折点不动杆菌属增加了多立培南的折点,修订了亚胺培南和美罗培南的折点移动了米诺环素的位置第三军医大学新桥医院金黄色葡萄球菌取消了万古霉素纸片法对VRSA筛选取消了苯唑西林对金葡菌纸片法药敏强调了在长期万古霉素治疗过程中万古霉素敏感菌株转变为中介的潜在趋势第三军医大学新桥医院头孢吡肟(MIC)“S” 1g q 12h SDD:基于较高的头孢吡肟暴露疗法的方法,即高于常规给药剂量或者多次给药,期待获得与“S”相同的临床疗效第三军医大学新桥医院第三军医大学新桥医院·微生物室8肠杆菌科细菌p 头孢吡肟(MIC)第三军医大学新桥医院·微生物室9肠杆菌科细菌p 头孢吡肟(KB)第三军医大学新桥医院·微生物室10肠杆菌科细菌p 头孢吡肟第三军医大学新桥医院·微生物室11肠杆菌科细菌p头孢唑林注射类口服类第三军医大学新桥医院·微生物室12肠杆菌科细菌p头孢唑林第三军医大学新桥医院·微生物室13肠杆菌科细菌p头孢噻吩肠杆菌科细菌头孢唑林VS 口服类头孢菌素非复杂性尿路感染患者头孢唑林的药敏试验结果可以代表其他口服类头孢菌素第三军医大学新桥医院·微生物室14增加了多立培南的折点修订了亚胺培南和美罗培南的折点第三军医大学新桥医院第三军医大学新桥医院·微生物室16不动杆菌属多立培南亚胺培南美罗培南三者的药敏结果不能相互替代!!!多烯环素四环素米诺环素取消了万古霉素纸片法对VRSA筛选取消了苯唑西林对金葡菌纸片法药敏强调了在长期万古霉素治疗过程中万古霉素敏感菌株转变为中介的潜在趋势第三军医大学新桥医院金葡菌VS 万古霉素纸片法为什么万古霉素纸片法不用于筛选VRSA ??l耐药表型罕见l有潜在的假耐药菌株l必须用MIC方法确证第三军医大学新桥医院葡萄球菌属M100—S24:万古霉素纸片法既不能区分万古霉素敏感和中介的金黄色葡萄球菌,也不能区分万古霉素敏感、中介和耐药的CoNS。
clsi 制定的药敏试验折点药敏试验折点是临床医学中常用的术语之一,它与临床治疗存在密切的关联,能够帮助医生确切地判断抗生素在治疗感染性疾病中的使用情况。
其中,CLSI 制定的药敏试验折点在临床医学中占有重要的地位。
接下来,我将结合相关知识点,为大家详细介绍这一概念。
一、什么是药敏试验折点?药敏试验折点是指对药敏试验结果进行分析以依据所使用的抗生素的微生物学敏感性或耐受性得出的浓度或直径解释的浓度。
其形式通常采用表的形式进行展示,其中包含了最小抑菌浓度(MIC)或直径数据及分类结果。
药敏试验折点决定抗生素是否被认为具有足够的毒性来有效控制病原微生物的生长及繁殖。
二、CLSI 制定的药敏试验折点CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)是临床和实验室标准研究所,其主要任务是制定标准,培训和提供相关的信息资料,以帮助实验室工作更为规范和高效。
其中,该组织制定的药敏试验折点在医学界中得以广泛使用。
CLSI 制定的药敏试验折点是在实验条件下通过对众多菌株微生物进行药敏试验及对试验结果进行统计学分析得出的。
其目的是为了在临床中确定治疗感染性疾病所需的最佳治疗方案。
同时,该药敏试验折点还可以被用于判断耐药性及其对细菌菌株的发展情况。
对于临床医生而言,药敏试验折点的意义是显而易见的。
医生可以根据制定的折点来选择适合的药物来进行治疗,从而让治疗更加精准、有效。
三、药敏试验折点的应用药敏试验折点的应用范围非常广泛,包括了抗菌药物的研究、生产、临床应用及药敏试验技术的发展等,对于临床治疗具有重要的实际意义。
此外,药敏试验折点还可以作为监测细菌感染流行病学及细菌耐药性的重要指标。
总的来说,药敏试验折点的制定对于临床医生和实验室技术员等有着重要的意义。
良好的制定方法及统计学分析是决定药敏试验折点的科学性和实用性的关键。
需要不断的整合、创新才能更好地服务于临床医学,为患者提供更好的诊疗服务。
clsi产气荚膜梭菌的折点判读法摘要:1.产气荚膜梭菌的概述2.产气荚膜梭菌的检测方法3.折点判读法在产气荚膜梭菌检测中的应用4.折点判读法的优势和局限性5.结论正文:一、产气荚膜梭菌的概述产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种革兰氏阳性杆状厌氧菌,因其能分解肌肉和结缔组织中的糖类而产生大量气体,并在体内形成荚膜而得名。
该菌广泛分布于人类和其他脊椎动物的肠道、昆虫和土壤等处。
产气荚膜梭菌是气性坏疽病原菌中最常见的一种梭菌,对低浓度的游离氧具有耐性,最适培养温度为37℃。
二、产气荚膜梭菌的检测方法产气荚膜梭菌的检测方法包括传统的微生物学检测方法和现代的分子生物学检测方法。
传统的微生物学检测方法主要包括涂片镜检、细菌培养和分离、生化试验等。
现代的分子生物学检测方法主要包括PCR、LAMP 和CRISPR-Cas 等。
三、折点判读法在产气荚膜梭菌检测中的应用折点判读法是一种基于PCR 技术的分子生物学检测方法,通过设计特异性的引物,将目标DNA 片段进行扩增,并通过电泳观察扩增产物的迁移情况,从而判断目标菌是否存在。
在产气荚膜梭菌的检测中,折点判读法具有较高的灵敏度和特异性,能够快速、准确地检测出产气荚膜梭菌。
四、折点判读法的优势和局限性折点判读法在产气荚膜梭菌检测中的优势主要表现在:1.灵敏度高,能够检测出低浓度的产气荚膜梭菌;2.特异性强,能够准确地区分产气荚膜梭菌与其他细菌;3.操作简便,结果快速、可靠。
然而,折点判读法也存在一定的局限性,如对PCR 仪器和试剂的要求较高,扩增产物的迁移速度受电泳条件影响较大等。
五、结论产气荚膜梭菌是一种重要的病原菌,对其进行准确、快速的检测对于临床治疗和疾病防控具有重要意义。
折点判读法作为一种分子生物学检测方法,在产气荚膜梭菌检测中具有较高的灵敏度和特异性,能够为临床实验室提供有效的技术支持。
CLSI折点判读法是指通过CLSI(临床实验室标准化协会)制定的标准来判断菌株对抗菌药物的敏感性或耐药性。
该方法主要涉及抗菌药物折点的概念,即药敏试验中用来判断菌株对抗菌药物的敏感性或耐药性的界限值。
CLSI折点判读法根据抗菌药物浓度的大小,将菌株分为敏感、中介和耐药三类。
具体而言,敏感菌株是指在标准浓度下,抗菌药物能够抑制或杀灭菌株;中介菌株是指在标准浓度下,抗菌药物对菌株的抑制作用较弱,需要增加药物浓度才能抑制或杀灭菌株;耐药菌株是指在标准浓度下,抗菌药物对菌株几乎没有抑制或杀灭作用,需要增加药物浓度或者更换其他抗菌药物才能有效抑制或杀灭菌株。
需要注意的是,CLSI折点判读法是建立在大量数据和科学实验基础上的,具有较高的科学性和可靠性。
然而,由于不同菌种和不同抗菌药物的特性差异较大,因此在实际应用中需要结合具体情况进行判断。
此外,CLSI折点判读法只是一种参考方法,具体的治疗方案还需要根据患者的病情、医生的经验和当地流行病学等因素综合考虑。
clsi折点判读法概述:CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)折点判读法是一种常用的微生物敏感性试验结果判读方法。
通过确定微生物对不同药物的最低抑制浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),进而根据折点(Breakpoint)来判断微生物对药物的敏感性或耐药性。
本文将介绍CLSI折点判读法的基本原理和应用。
1. CLSI折点判读法的基本原理CLSI折点判读法基于MIC,即最低抑制浓度,用于评估微生物对药物的敏感性。
MIC是指能完全抑制微生物生长的最低药物浓度,通过测定在不同药物浓度下,微生物能否生长来确定MIC值。
折点是一个预先确定的浓度阈值,用于将敏感、中介和耐药三种药物反应类型进行区分。
2. CLSI折点判读法的应用范围CLSI折点判读法广泛应用于临床微生物学和药物治疗。
它可以帮助临床医生选择合适的抗生素,指导临床用药方案的制定。
此外,CLSI折点判读法也可以用于监测细菌的耐药性发展趋势,提供药物研发和抗菌治疗策略的参考。
3. CLSI折点判读法的步骤3.1 选取适当浓度范围:根据待测药物和微生物特性,选择药物浓度范围,包括初始浓度和多级递减浓度。
3.2 肉眼观察结果:观察细菌在各不同浓度下的生长状况,判断细菌是否受抑制,找到最低抑制浓度。
3.3 利用CLSI折点表:根据CLSI提供的折点表,将MIC与折点进行比较,判断细菌对药物的敏感性或耐药性。
4. CLSI折点判读法的局限性和挑战尽管CLSI折点判读法被广泛应用,但也存在一些局限性和挑战。
首先,不同实验室可能使用不同试剂和仪器,导致结果的不一致性。
其次,细菌的耐药性可能由于多种因素引起,因此单纯依靠折点判读法可能无法全面评估微生物的耐药机制。
此外,随着新药物的不断开发和新的耐药菌株的出现,CLSI折点表可能需要不断更新和修订。
结论:CLSI折点判读法是一种常用的微生物敏感性试验结果判读方法,基于MIC和折点,用于评估微生物对药物的敏感性和耐药性。
clsi折点判读法摘要:1.介绍CLSI 折点判读法2.CLSI 折点判读法的原理3.CLSI 折点判读法的应用4.CLSI 折点判读法的优势与局限性正文:一、介绍CLSI 折点判读法CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute,美国临床实验室标准化协会)折点判读法是一种在微生物学实验室中用于抗菌药物敏感性试验结果判读的方法。
这种方法主要通过观察药物对细菌生长的抑制作用,以判断细菌对药物的敏感性。
二、CLSI 折点判读法的原理CLSI 折点判读法基于最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)的概念。
MIC 是指能够抑制细菌生长的最低药物浓度。
在折点判读法中,通过比较不同浓度药物对细菌生长的影响,找到MIC 值。
具体操作过程包括:将药物稀释到不同浓度,与细菌接种液混合,观察不同浓度药物下细菌生长情况,记录能够抑制细菌生长的最低药物浓度。
三、CLSI 折点判读法的应用CLSI 折点判读法广泛应用于抗菌药物的敏感性试验,为临床抗生素治疗提供依据。
通过折点判读法,实验室人员可以为临床医生提供关于病原菌对抗生素的敏感性信息,帮助医生选择合适的抗生素,提高治疗效果,降低抗生素滥用风险。
四、CLSI 折点判读法的优势与局限性1.优势:CLSI 折点判读法操作简便,结果直观,易于被实验室人员掌握。
同时,这种方法具有较高的敏感性和特异性,可以较准确地判断细菌对药物的敏感性。
2.局限性:CLSI 折点判读法受到实验条件、细菌培养基和药物浓度等因素的影响,可能存在一定误差。
此外,对于某些特殊类型的细菌和不规则生长现象,折点判读法可能无法准确判断药物敏感性。
在这种情况下,需要结合其他检测方法,如微量肉汤稀释法等,以提高判断准确性。
总之,CLSI 折点判读法是一种实用、简便的抗菌药物敏感性试验方法。
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