骨髓基质干细胞自体移植治疗心肌梗死的研究进展

TUNEL法-也称DNA 断裂的原位末端标记法，这一方法能对DNA分子断裂缺口中的3’-OH进行原位标记TUNEL法-也称DNA 断裂的原位末端标记法，这一方法能对DNA分子断裂缺口中的3’-OH进行原位标记，借助一种可观测的标记物，如荧光素，能对凋亡细胞核DNA中产生的3’-OH 末端进行原位标记，用荧光显微镜即可进行观察。

学术术语来源——骨髓基质干细胞缺血心肌内移植早期：可减少心肌细胞凋亡但未改善心功能文章亮点：1 实验通过结扎法切断心脏血流造成大鼠急性心肌梗死模型，观察到骨髓基质干细胞移植到缺血坏死心肌内对心肌细胞凋亡有保护作用，但对于心肌血流动力学、心脏功能保护方面短期内未见改善作用，这说明骨髓基质干细胞移植早期对心脏功能改善作用不甚明显。

2 作者认为，在骨髓基质干细胞移植早期，细胞在局部增殖分化为新的心肌细胞比例有限，尤其是在心肌梗死早期有大量心肌细胞死亡，局部发生严重的炎症反应等多种因素都不会使得心脏血流动力学或心脏功能明显改善。

关键词：干细胞；移植；骨髓干细胞；骨髓基质干细胞；移植；急性心肌梗死；细胞凋亡；血流动力学；超声心动图；SD大鼠主题词：骨髓；干细胞；心肌梗塞；细胞凋亡摘要背景：骨髓基质干细胞移植到梗死心肌组织能够起到抑制和减少心肌细胞凋亡的效应，而这一作用与心功能改善是否有相关性还不清楚。

目的：观察缺血心肌内移植骨髓基质干细胞早期对心脏功能的影响。

方法：采用结扎左前降支的方法建立大鼠急性心肌梗死模型，假手术组仅穿线不结扎。

骨髓基质干细胞移植组于心肌梗死术后30 min分5个位置于梗死边缘向心肌组织内移植大鼠骨髓基质干细胞0.1 mL(2×106)，而假手术组、模型组术后分别向心肌内注射相同剂量的生理盐水。

细胞移植后3 d监测血流动力学、超声心动图，TUNEL法检测心肌细胞凋亡的变化。

结果与结论：移植后第3天，与假手术组相比，模型组梗死区及缺血区心肌细胞凋亡明显；骨髓基质干细胞移植组梗死区和缺血区心肌细胞凋亡数目均较模型组显著减少。

干细胞在器官移植中的研究进展随着生物技术的不断发展，干细胞治疗已经成为医学界的一项重要研究领域，尤其是在器官移植方面，干细胞也被逐渐应用于临床实践中。

本篇文章将从以下三个方面来讨论干细胞在器官移植中的研究进展。

一、干细胞在器官移植中的应用随着人口老龄化的越来越显著，器官供给短缺问题日益严重，器官移植成为解决器官需求的重要方式。

干细胞作为一种具有多能性的细胞，可以被应用于器官移植的各个阶段，例如干细胞的扩增培养、干细胞分化以及干细胞前体移植等。

一种关键的研究领域是器官再生，它需要能够恢复失去的组织结构和功能的细胞。

通过将干细胞注入到受损的肝、肺、心脏等器官，可以修复这些器官的损失，并使其恢复正常功能，同时减少捐赠器官对供体的依赖。

这种方法已在实验室中得到了一些成功，并吸引了众多学者的关注，但在临床实践中，仍需要继续研发和改善。

另一个关键的应用领域是器官移植前的器官维持。

器官转运和保存过程中，细胞和组织的缺氧等不利因素对器官的质量造成了很大影响。

这一问题对于肝、肺、心脏等对缺血敏感的器官尤其明显。

通过将干细胞应用于器官冷静保存的过程中，可以保护组织和细胞的完整性和功能，从而提高器官质量和移植成功率。

二、目前的研究进展干细胞在器官移植中的应用还处于研究阶段。

目前的研究重心主要集中于两个方面。

一是研究合适的移植载体，以便将干细胞移植到器官中，并促进干细胞与宿主组织的整合。

目前的载体主要包括生物基质、支架和控释薄膜。

这些载体能够为移植的细胞和生长因子提供支持，并促进组织修复和再生。

二是研究更准确、更稳定、更有效地将干细胞移植到受体体内的技术。

研究人员需要寻找更加准确的方法来将干细胞注入到器官移植的部位，以确保细胞在宿主组织中能够定位到正确的位置。

同时，需要研究与组织工程有关的其他技术，如光造影技术和3D打印技术等。

三、展望和挑战随着干细胞在器官移植中的应用越来越广泛，也将面临许多挑战。

干细胞的应用涉及到许多技术问题，例如细胞扩增和分化、干细胞的注入和移植，以及移植后对组织的监测和评价等。

干细胞技术的研究热点领域与最新进展1.神经退行性疾病治疗：神经退行性疾病如帕金森病、阿尔茨海默病和脊髓损伤等一直是医学界的难题。

然而，干细胞技术为这些疾病的治疗提供了新的思路。

最新研究表明，通过将干细胞转化为特定的神经细胞类型，可以在动物模型中实现神经退行性疾病的修复，并且在临床试验中也取得了一些进展。

2.心脏病治疗：心脏病是目前全球范围内的主要死因之一、传统的治疗方法，如药物和手术治疗，只能缓解症状，而不能修复心脏的受损部分。

然而，近年来的研究表明，通过将干细胞注入患者的心脏组织中，可以促进心肌细胞的再生和修复，从而提高患者的心脏功能。

3.癌症治疗：干细胞技术在癌症治疗方面也有着重要的应用。

研究人员发现，癌症干细胞是肿瘤生长和转移的关键因素。

因此，通过干细胞的研究，可以理解肿瘤的发生机制，并发展新的靶向治疗方法。

最新的研究进展包括使用干细胞修复癌症治疗中引起的组织损伤，以及利用干细胞进行肿瘤的药物筛选。

4.组织工程：干细胞技术在组织工程领域也有巨大的应用前景。

研究人员开发出了一种新的方法，利用干细胞来生产各种组织和器官，如皮肤、肌肉和器官血管等。

这种方法不仅可以为整形外科和器官移植提供新的选择，还可以用于替代受损组织的修复和再生。

5.基因治疗：基因治疗是一种利用基因工程技术来修复或代替异常基因的治疗方法。

干细胞技术可以用来生产大量的健康细胞，并用于基因治疗中。

最新的研究进展包括使用干细胞来修复遗传性疾病，如囊性纤维化和血友病等。

总结起来，干细胞技术在神经退行性疾病治疗、心脏病治疗、癌症治疗、组织工程和基因治疗等领域都有着重要的应用。

随着研究的不断深入，我们相信干细胞技术将会为人类的健康和医学领域带来更多的突破和进展。

福音！国内干细胞治疗心血管疾病项目正在开展中根据新民晚报的报道[1]，同济大学附属第十人民医院心脏中心徐亚伟教授牵头的干细胞治疗缺血性心力衰竭临床研究取得初步成功，干细胞治疗心梗后心衰的项目已在临床开展。

该团队早在2010年已开展自体骨髓间充质干细胞对急性心肌梗死患者的治疗研究[2]，经过离心、分选、纯化后通过特殊的心脏导管经冠状动脉将干细胞回输至缺血区域，促进坏死心肌的修复，经过长达8年的随访，患者心功能恢复良好。

此外，国内还有其他机构也在开展干细胞治疗心血管疾病的临床研究。

根据医学研究登记备案信息系统上的信息[3]，河北医科大学第一医院正在开展《自体骨髓“间充质干细胞心梗注射液”移植治疗急性心肌梗死的随机、双盲、安慰剂对照、多中心临床试验》。

河北医科大学开展的这项临床研究已经完成了备案，计划招募124例急性心梗病人。

整个研究共分为2个阶段，第一阶段主要是探讨干细胞安全性和最优剂量，预计招募24例病人；第二阶段计划在最优干细胞剂量的基础上，探讨阿伐他丁治疗与干细胞移植治疗心梗的协同作用，预计招募100例病人。

临床试验数据显示治疗的安全性干细胞治疗心血管疾病的安全性和有效性已经在多个临床研究项目中得到证实。

《干细胞转化医学》（Stem Cell Translation Medicine）曾对23项临床研究1148例患者的干细胞治疗的安全性和有效性进行了评估[4]，包含了509例急性心肌梗死，和639例缺血性心力衰竭。

结果发现，接受间充质干细胞治疗的患者总体左心室射血分数（LVEF）有显著的改善，试验组和对照组的死亡率无显著差异。

因此，这项荟萃分析的系统评价结果表明，间充质干细胞治疗缺血性心脏病心脏病看起来是安全的。

这批数据分析告诉人们，间充质干细胞治疗急性心梗和缺血性心力衰竭的整体结果是积极的。

干细胞治疗心血管疾病前期可期干细胞治疗心血管疾病是十分热门的领域，全球有多个项目正在开展中，其中绝大多数采用的是间充质干细胞。

・３８２・．，ｏｌｌｍｄｚｏｆＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＥｘｐｅｒｉｒｎｅｎｔａｔＭｅｄｉｃｉｎｅＶｄ．９，Ｎｏ．５Ｍａｒ．２０１０骨髓干细胞治疗心脏病的研究与进展龚怡综述雷长城’审校（南华大学附属第二医院湖南衡阳４２１０００）【关键词】骨髓干细胞心血管疾病移植各种心脏病发展到晚期大多导致心力衰竭，心力衰竭严重影响着心脏病患者的预后及生活质量。

而常规治疗手段效果有限，骨髓干细胞的临床研究越来越多。

现就骨髓干细胞的分类、作用机制、途径、存在的问题及前景等作简要介绍。

１研究背景及现状冠状动脉粥样硬化性心脏病、风湿性心脏病、扩张型心肌病等各种原因所致的心肌损伤发展到晚期大多伴有心腔扩大和舒缩能力下降，虽然成熟的心肌细胞不是终末分化细胞，但由于其增殖、分裂能力有限，新生成的心肌细胞远远无法修复坏死的心肌，具有完整舒缩功能的心肌细胞数量相对或绝对减少，受损心肌细胞由纤维组织瘢痕修复，未受损的心肌细胞代偿肥大，造成心肌功能收缩功能下降，最终导致心力衰竭。

目前常规的治疗手段只能缓解心衰症状，不能修复死亡或濒死的心肌。

心肌细胞在出生后已失去增殖能力或增殖能力极低，因此增加具有完整舒缩功能的心肌细胞数目，是改善心功能的关键。

细胞移植是一个切实可行的增加成体心肌细胞的方法，骨髓干细胞在体外有良好增殖能力，能在心肌内环境下分化为损伤组织所需要的心肌细胞，且无移植后的免疫排斥反应，因此在心肌损伤的治疗中备受关注。

Ｓｏｏｎｐａａ等¨１首先尝试了心肌细胞移植，初步证实了心肌细胞移植的可行性。

他们将小鼠胚胎心肌细胞移植到正常小鼠心脏中，发现移植的心肌细胞能够存活并与受体心肌细胞产生闰盘连接。

随后，各种干细胞用于心脏病治疗。

干细胞移植成为心力衰竭治疗的一种新尝试。

德国和香港两个研究小组曾利用心肌梗死患者自身骨髓干细胞修复其受损伤的心脏取得成功。

另据报道，美国、德国、中国研究人员利用骨髓干细胞、或自体骨髓干细胞治疗心脏病或心肌梗死患者均取得重要进展。

２００９年２月第６卷第４期骨髓基质干细胞临床研究进展・研究进展・钦斌１。

蔡建平２‘（１．南京中医药大学２００２级中西医结合七年制研究生，江苏南京２１００２９；２．无锡市中医院，江苏无锡２１４０００）【摘要】随着细胞研究的发展，骨髓基质干细胞的临床应用越来越受到重视。

本文对骨髓基质干细胞的生物学特性、取材、分离、培养、临床前期研究成果和面临的问题进行了综述。

【关键词】骨髓基质干细胞；生物学特性；取材；分离；培养；临床应用【中图分类号】Ｒ３２９．２【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７３－－７２１０（２００９）０２（ａ）一０１１—０２１８６７年．Ｃｏｈｎｈｅｉｍ首先提出了骨髓内含有骨髓基质干细胞（ＭＳＣｓ）的观点；而Ｆｒｉｅｄｅｎ—ｓｔｅｉｎ于１９６６年首先发现。

它是骨髓基质的组成成分。

能分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞。

骨髓是由造血干细胞和非造血干细胞组成的器官，非造血干细胞（即ＭＳＣｓ）由骨前体细胞、软骨前体细胞、脂肪前体细胞、神经细胞和肌细胞前体细胞组成．因此。

ＭＳＣｓ是由骨髓组织干细胞或前体细胞和躯体组织干细胞组成的成分及功能复杂的细胞群体『Ｉ】。

许多年来，ＭＳＣｓ基础研究和临床应用的前期研究取得了重大进展．但是仍有许多问题尚待解决。

１细胞形态ＭＳＣｓ具有３种细胞形态：①梭形细胞；②巨大扁平细胞；③体积非常小的球形细胞１＂２１。

２生物学特性ＭＳＣｓ有以下生物学特性：①自我更新能力。

ＭＳＣｓ在体内具有很强的自我更新能力，是传代细胞１３１。

②很强的黏附性。

体外培养收集细胞时ＭＳＣｓ容易与骨髓基质分离形成细胞悬液，体外低密度培养时ＭＳＣｓ迅速黏附。

反复冲洗可与非黏附的造血干细胞分离嘲。

③可塑性。

ＭＳＣｓ具有可塑性．即具有多向分化的潜能。

骨髓脂肪细胞株在体内可分化为真正的骨组织［４１，骨髓网状细胞在体内可转变为脂肪细胞。

在适宜的微环境下，ＭＳＣｓ可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞、星形细胞、少突树突细胞及神经细胞等．而且能跨胚层分化，属于不同胚层的ＭＳＣｓ或前体细胞还能分化成与本身组织不相关的其他胚层组织．如骨髓中存在成肌细胞前体细胞，神经干细胞能重新分化成造血细胞．骨髓细胞分化为神经细胞和肝细胞［５－－１１。

骨髓间充质干细胞骨髓间充质干细胞（ bone marrow derived mesenchymal stem cells，BMSC)是骨髓内存在的一类非造血干细胞，也称骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells，MSC)。

其在体内外具有支持和调控造血的作用，并且在体内可分布于多种组织和器官，并具有多向分化潜能，能够向成骨系细胞、成纤维系细胞、网状细胞、脂肪细胞和内皮细胞等分化。

因此其在目前医学上难以攻克的一些疾病上具有重大的应用潜力。

二、骨髓间充质干细胞研究进展早在1867年，德国的病理学家Cohnheim在研究伤口愈合的过程中，提出骨髓中存在有向非造血系统分化的干细胞，并提出了骨髓具有造血以外的功能。

1869年，Goujon发现自体红骨髓异位移植后具有成骨作用。

1968年Friendenstein等才首先通过体外培养发现从骨髓中能分离出具有向多种间质细胞分化的祖细胞，当时他们称之为骨髓多能基质干细胞(marrow pluripotent stromal stem cells)。

1985年，Owen认为骨髓基质细胞系统是伴随造血干细胞系统生长的，可以自我更新并分化为各种间充质组织的细胞群，由此提出骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells，MSC)的概念。

1999年，Pittenger Pittenger等利用梯度离心法，在骨髓中分离出成纤维样贴壁细胞，在体外不同分化条件的诱导下，可以形成成骨细胞、软骨细胞或脂肪细胞，并且克隆以后的细胞具有类似的分化特性，充分证明骨髓MSCs是多潜能干细胞。

鉴于它们最终都可以分化为间充质系统细胞，所以定义为间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs）。

2000年，Sanchez-Ramos用神经营养因子5及RTRA为诱导剂建立了体外诱导MSCs向神经细胞分化的培养体系。

2000年，Brazelton等和Mezey等分别采用不同的方法证实小鼠BMSCs在脑内可分化为神经细胞，且体外扩增后可经尾静脉注射、骨髓移植、脑部直接注射等途径进入脑内可迁徙分布各个脑区，Mezey 等还在脑组织切片中发现了来源于BMSCs的神经细胞。

自体骨髓间质干细胞移植治疗急性脑卒中49例临床分析目的观察自体骨髓间质干细胞移植治疗急性脑卒中患者的临床效果及安全性。

方法选择2010年1月～2012年12月江西省人民医院神经内科收治的急性脑卒中患者49例，其中脑出血16例，脑梗死33例。

患者在病情稳定后予以粒细胞集落刺激因子进行骨髓干细胞动员，采自体骨髓间质干细胞进行鞘内注射移植治疗，骨髓间质干细胞数量为（1.0～10.0）×107，1 次/周，共治疗2次。

参照美国国立卫生研究院脑卒中量表（NIHSS）、简化Fugl-Meyer运动评分法（FMA）。

改良Barthel指数（MBI），对患者术前、术后神经功能缺损程度、运动功能和日常生活能力进行评定，观察患者的不良反应和副作用。

结果49例患者均进入结果分析，中途无脫落。

与治疗前比较，患者移植后1、6、12个月后NIHSS评分显著降低，差异有统计学意义（P < 0.05）、FMA和MBI显著升高，差异均有高度统计学意义（P < 0.01）。

术后出现10例低热和6例低颅压性头痛，临床处理后症状完全消失。

随访12个月，头颅MRI和肿瘤标志物均未见异常。

结论自体骨髓间质干细胞移植可以一定程度地改善急性脑卒中患者的临床症状，提高生活质量，不良反应轻微。

[Abstract] Objective To observe the clinical effect and safety of autologous marrow mesenchymal stem cells （MSCs）transplantation treating for acute stroke. Methods 49 patients with acute stroke in the Department of Neurology of Jiangxi Provincial People′s Hospital from January 2010 to December 2012 were selected，including 16 cases of cerebral hemorrhage and 33 cases of cerebral infarction. All the patients in stable condition were given mobilized with granulocyte colony-stimulating factor，then autologous MSCs with number of （1.0-10.0）×107 were administrated via intrathecal for each patient once per week，for 2 weeks. The NIH stroke scale （NIHSS），the Fugl-Meyer assessment （FMA），the Modified Barthel Index （MBI）were used to evaluate the degree of nerve functional defects，motor function and the daily life activities ability of preoperative and postoperative，meanwhile，the patients’ adverse reactions and side effect were observed. Results All 49 patients were included in the final analysis without loss. Compared with before transplantation，the NIHSS scores were significant decreased at 1，6 and 12 months after treatment，and the FMA，MBI scores were significant increased at 1，6 and 12 months after treatment，all the differences were statistically significant （P < 0.05 or P < 0.01）. Among these patients，10 cases of low grade fever and 6 cases of intracranial hypotension headache were observed，all the symptoms were complete restored after symptomatic treatment. After 12 months of followed-up，the abnormality of head MRI and tumor markers were not showed. Conclusion Autologous MSCs transplantation can ameliorate clinical symptoms，improve life quality of patients with acute stroke，and the adverse reactions are slight.[Key words] Autologous bome marrow mesenchymal stem cell；Transplantation；Cerebral infarction；Cerebral hemorrhage脑血管病是我国中老年的常见病、多发病。

心肌梗死后心肌细胞再生与修复机制研究心肌梗死是由于冠状动脉狭窄或闭塞，导致心肌缺血、缺氧、坏死等病理变化的一种严重心血管疾病。

虽然目前有心肌梗死的诊疗方法和药物治疗，但心肌细胞的再生和修复机制仍然是一个研究热点。

本篇文章将对当前心肌梗死后心肌细胞再生与修复机制的研究进展进行阐述。

1.心肌细胞再生的途径一般来说，心肌细胞具有极低的再生能力，因此心肌梗死后的心肌细胞再生往往依赖于其他类型的细胞进行分化。

目前已知的心肌细胞再生途径主要有以下几种：1.1.心肌干细胞再生心肌干细胞是一类静止在心脏中的未分化细胞，其具有分化成心肌细胞的潜能。

因此，在心肌细胞损伤的情况下，心肌干细胞可以通过分化为心肌细胞来修复心肌。

研究表明，心肌干细胞在心肌再生中的作用比较有限，其数量和细胞增殖能力都十分有限，这也限制了其在临床上的应用。

1.2.骨髓干细胞移植骨髓干细胞是具有分化为不同细胞类型的潜能的一类细胞。

研究表明，通过骨髓干细胞移植可以促进梗死区域的再生和修复，因为骨髓干细胞可以分化为心肌细胞、内皮细胞等，并产生细胞因子促进养分供应和心肌细胞增殖。

1.3.心包、脾等组织移植除了骨髓干细胞外，我们还可以利用其他组织，如心包、脾等的移植来促进心肌细胞的再生。

通过这种途径，不仅可以实现心肌细胞的再生，还可以提高心肌细胞的再生效率，同时降低副作用和风险。

2.心肌细胞修复的机制2.1.心肌细胞增殖心肌细胞增殖是维持心脏功能稳定的重要机制，但在成年人中，心肌细胞的增殖速度非常缓慢，随着年龄的增长，增殖能力逐渐减退。

但比较新的研究表明，通过某些因素（如线粒体电位变化、心肌创伤等）可以激活心肌细胞的增殖能力，从而实现心肌细胞的再生。

2.2.细胞因子介导的心肌细胞再生心脏内存在着一种协调细胞再生和修复的细胞因子系统。

在心肌梗死后，心肌细胞会释放一系列细胞因子，如肿瘤坏死因子α等，通过这些细胞因子，心肌细胞可以吸引更多的细胞参与去梗死区域进行修复。

骨髓干细胞优化移植治疗急性心肌梗死的实验研究的开题报告题目: 骨髓干细胞优化移植治疗急性心肌梗死的实验研究一、研究背景和意义：急性心肌梗死是指冠状动脉血流突然中断引起的急性心肌缺血，严重威胁患者生命。

随着生活方式和环境的变化，心肌梗死的高发率令人担忧。

目前，急性心肌梗死的治疗主要包括血管溶栓以及导管介入治疗等手段，然而这些手段只能恢复血流，但不能修复因缺血而受损的心肌细胞，因此再造血管和心肌细胞的恢复仍是治疗的瓶颈。

干细胞是目前最为热门的心肌再生治疗手段之一，骨髓干细胞是其中一种常用的种类。

已有一些研究表明，骨髓干细胞移植治疗心肌梗死可以改善病人的心功能和生活质量。

但是，骨髓干细胞移植效果也受到一些限制，并且存在一定风险和副作用。

因此，本研究旨在探索骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死的优化策略，以提高治疗效果和减少风险，为临床治疗提供更多的选择。

二、研究内容和方法：本研究拟采用动物试验模型，建立大鼠急性心肌梗死模型，并进行骨髓干细胞移植治疗。

主要研究内容包括以下几个方面：（一）骨髓干细胞种类的优化选择：选择不同来源、不同分化状态、不同生长因子诱导等多种骨髓干细胞，通过体外实验比较其增殖、分化和生物学特性，确定最优的种类。

（二）骨髓干细胞应用方式的优化选择：探索不同的移植方法，包括直接注射、冠状动脉介入等，比较其对心肌再生的作用，以及对临床治疗的适用性和安全性的影响。

（三）骨髓干细胞移植前后的优化处理：通过预处理骨髓干细胞或改变患者心肌环境等方式来优化骨髓干细胞移植前和后的治疗效果，包括应用不同的生长因子、细胞因子等进行预处理，或采用保护性介入治疗等手段进行治疗前的优化，以及采用药物治疗、心肌支持治疗等手段进行治疗后的优化。

三、预期结果和意义：通过对骨髓干细胞移植治疗急性心肌梗死的优化策略探讨，本研究预期获得如下成果：（一）找到最优的骨髓干细胞种类和最适宜的应用方式，提高治疗效果和临床应用的可行性。

（二）通过骨髓干细胞移植前后的优化处理，进一步提高治疗效果和心肌再生程度，降低治疗风险和副作用。