检定菌管理程序

检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程1．目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。

2．依据：ChP2010版（一部）、《中国药品检验标准操作规范》（2010年版）。

3．范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。

4．责任:4.1.QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发.4。

2.微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。

5.相关文件及术语：5.1．术语标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。

传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种.工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后,作为日常工作使用的菌种。

菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。

6.标准：6.1．检定菌的申购QC主管每年根据检定菌种的使用情况(包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种(标准菌种);也可以直接向省（市）药检所购买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。

6.2．检定菌的接收菌种到达实验室后,由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上,内容包括：名称、数量、编号(无编号者按检定菌种的编号原则编号)、代数、来源、接收日期、接收人等，并将其暂贮存于4～8℃冰箱中,在一周内必须完成转种。

6。

3．检定菌的保存6.3。

1．工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法.将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至4~8℃冰箱中保存.此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况，经应灭活处理后销毁。

XXXXX有限公司1目的1.1建立微生物限度（初始污染菌）、无菌中所使用的检定菌、培养基的管理规程，确保其得到有效管理。

2范围2.1适用于检验用菌种、培养基的管理。

3参考资料3.1《中华人民共和国药典》（2015版）4责任人4.1品管部负责本规程的实施。

5内容5.1检定菌的管理5.1.1菌种的接收5.1.1.1检定菌由专人保管，此人须受过专业培训，有足够的菌种保存经验。

5.1.1.2根据检验品种的需要，由检定菌保管员制定购买计划，报品管部经理审核。

5.1.1.3检定菌保管员在接收标准菌种时，须填写《检定菌接收记录》，并在保存菌种的容器外加贴标签（内容为名称、编号、接收日期），妥善保管。

5.1.2菌种的移植传代5.1.2.1长久保存的菌种在启用时，要经过移种至适宜的培养基上进行培养，待生长后再进行移种，如此连续2-3次，直至出现典型的形态和生长特征为止。

5.1.2.2保存的菌种须按规定时间进行传代。

5.1.2.3在检查或保存菌种过程中，遇到形态构造上有变异或污染菌等情况，需进行菌种移种分离培养已得到纯菌。

5.1.2.4移植传代时须核对编号、传代次数、传代日期、所用培养基等并记录。

每次移植传代后，要与原种的编号、名称核对，检查培养特征无误时方可再继续保存。

5.1.2.5传代次数必须控制，传代次数越多，突变的机率越大，因此要尽量少传代，必须根据菌种保存情况规定最多传代次数。

5.1.2.6传代方法依据《菌种传代标准操作规程》的规定，每次传代需填写《检验用菌种传代接种记录》。

5.1.3菌种原种须按标签或所附说明妥善保存，移植传代后的菌种于普通冰箱内2-8℃保存，每周检查一次冰箱温度、湿度，菌种管的棉塞是否松动生霉，有无异常。

5.1.4菌种的使用和销毁5.1.4.1每次使用的菌种必须是培养后健康、生命力强、无变异的菌种。

每次使用菌种均须填写《检验用菌种使用记录》。

5.1.4.2超过传代限度或经鉴定检查不合格的菌种，报主管人员审核批准后销毁灭活（加热灭活），销毁灭活由两人共同执行，并填写《检验用菌种销毁记录》。

检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程1．目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。

2．依据：ChP2010版（一部）、《中国药品检验标准操作规范》（2010年版）。

3．范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。

4．责任：4.1.QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发。

4.2.微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。

5.相关文件及术语：5.1．术语标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。

传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。

工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。

菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。

6.标准：6.1．检定菌的申购QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。

6.2．检定菌的接收菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，并将其暂贮存于4～8℃冰箱中，在一周内必须完成转种。

6.3．检定菌的保存6.3.1．工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法。

将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至4～8℃冰箱中保存。

此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。

目的：本程序《药品生产质量管理规范》（2010修订版）。

规定了检验用培养基、检定菌的管理程序。

范围：本程序适用于本企业所有检验用培养基、检定菌的管理。

职责：质量管理部、QC内容：1培养基、检定菌的购买1.1检验用培养基应从省药品检验所或生产厂家直接购买。

检定菌应从省药品检验所购买。

2培养基、检定菌的贮存2.1培养基必须贮存在干燥、阴凉处，密封存放在专柜内。

2.2根据检定菌贮存条件进行贮存。

2.2.1定期移植常用保藏法：将菌种每隔1~3个月接种在新鲜的琼脂斜面、液体或半固体培养基中，按规定的温度和时间培养后，再于普通冰箱内继续保存。

2.2.3每周检查一次保存菌种的冰箱温度，菌种管的棉塞是否松动、生霉。

如有异常及时处理，并逐次记录。

2.2.4移植时须核对编号、传代次数、传代日期、所用培养基，并记录。

2.2.5每次移植培养后，要与原种的编号、名称核对，检查培养特征无误时方可再继续保存，并记录。

2.3检定菌定期检查保存期菌种的新陈代谢处于最低水平，易发生变异和死亡，因此必须对保藏期菌种定期检查。

2.3.1定期检查菌种外观及干燥状态。

2.3.2定期将菌种培养复活，检查保存菌种的存活率和形态并记录。

2.3.3控制传代次数。

传代次数越多，突变的机率越大，因此，应根据菌种情况进行传代。

经鉴定检查不合格的，应销毁灭活（加热失活），有灭活记录。

2.3.3控制传代次数。

传代次数越多，突变的机率越大，因此，应根据菌种情况进行传代。

经鉴定检查不合格的，应销毁灭活（加热失活），有灭活记录。

3培养基、检定菌的使用3.1培养基使用前，将培养基加入纯化水或蒸馏水充分溶解后按包装标签说明的方制，装入专用容器中（装量约为容器高度的3/5），立即按说明书规定的灭菌温度和时间（一般不低于121℃、30分钟），在高压消毒柜内灭菌。

同时填写《培养基配制使用记录》。

3.2灭菌后的培养基置专用容器内，在1天内必须使用完备。

3.3培养基使用前必须在规定温度和时间（细菌培养基经30～35℃培养48小时，霉菌培养基经20～25℃培养72小时）做空白培养，应无菌生长。

1. 目的：规范检验用菌种的管理和使用，确保菌种质量。

2. 范围：适用于实验用各种菌种。

3. 职责：质量部负责执行此规程。

4. 内容：
4.1 检定菌的购买和验收
4.1.1 质量部门指定专人接收保管检定菌，检定菌保管员要受过专业的培训，有足够的菌种保存经验。

4.1.2 检定菌由质量部根据产品检测需要，由检定菌保管员填写申请购买单，报质量部负责人审核，总经理批准。

向中国药品生物制品检定所订购或向省市药品检验机构调剂。

4.1.3 检定菌收到后，应登记检定菌名称、编号、来源和菌龄等。

4.1.4 检定菌由质量部统一登记、保存、传代、分发。

4.1.5 领发检定菌时，应填写检定菌领发记录，领用人和发放人均应签名。

4.2 检定菌的保存
4.2.1 检定菌在保存期间应保证菌种不衰退、不变异，保持生命活力和所有的生物学特性，包括菌种形态特征、生理活动机能与代谢产物、繁衍子代的遗传稳定性等。

4.2.2 检定菌应在冷藏和暗处保存，一般可采用在4℃冰箱中保存。

4.2.3 对致病的检定菌菌株应严格管理，防止病菌扩散流行。

4.3 工作用菌种每1-3月传代一次，传代次数不超过5代，传代应及时填写《菌种传代、保存记录》。

4.4 工作用菌种使用时必须填写《工作用菌种使用记录》，记录使用日期、菌种名称、编号、用途、使用人。

4.5 检定菌的销毁已过效期或被淘汰的菌种应经灭活处理销毁(121℃灭菌30分钟)。

目的：建立一个检定菌的管理规程，使其管理标准化、规范化。

范围：本企业检验用菌种。

责任人：QC科内容：1检定菌的采购计划根据检验品种的需要，由QC科科长填写《检验用菌种申购单》。

内容为菌种名称、购买数量、用途、申请人、申请日期。

报质量管理部部长批准。

2 检定菌的购买2.1 《检验用菌种申购单》经质量管理部部长批准后，报财务部门做资金预算。

2.2 检定菌由供应仓储部采购员按采购计划进行购买。

2.3 购买一般到当地药检所或中国药品生物制品检定所购买。

2.4 因特殊原因临时需要购买检定菌，经质量管理部部长批准后，QC科可直接购买。

3 检定菌的接收3.1 检定菌买来后，检定菌管理员检查外包装完好、洁净、封口严密、标签完好、清楚。

3.2 检定菌管理员复核与采购计划的一致性，应准确无误。

3.3 由检定菌管理员填写《检验用菌种库存记录》和《检定菌管理记录》。

内容：菌种名称、来源、购买日期、形态特征、培养特征、菌种传代次数、传代时间间隔、操作人签名、最佳培养基、培养条件、保存方法、贮存条件等。

在保存菌种容器外加贴标签，内容为名称、编号、购买日期。

4 检定菌保存4.1定期移植常用保藏法：将菌种每隔3个月接种在新鲜的琼脂斜面、液体或半固体培养基中，按规定的温度和时间培养后，再放入普通冰箱内继续保存。

4.2 每周检查一次保存菌种的冰箱温度、湿度，菌种管的棉塞是否松动、生霉。

如有异常及时处理。

各类菌种保存温度与时限检定菌管理规程编号ZL-G-024版次：01第 2 页共 2页4.3 移植时须核对编号、转代次数、转代日期、所用培养基并记录。

4.4 每次移植培养后，要与原种的编号、名称核对，检查培养特征无误时方可再继续保存并记录。

5检定菌定期检查保存期菌种的新陈代谢处于最低水平，易发生变异和死亡，因此必须对保藏期菌种定期检查并填写《检验用菌种检查记录》。

5.1每月检查菌种外观及干燥状态。

5.2每月将菌种培养复活，检查保藏菌种的存活率和形态并记录。

检定菌管理程序1目的：建立一个检验分析用检定菌管理程序，确保检验工作的正常进行。

2范围：适用于检定菌的管理。

3职责：QC室管理员：严格按本程序对检定菌进行管理。

化检员：严格执行本程序。

4内容：4.1检定菌由微生物限度检验人员负责管理。

该人员应由具有微生物专业知识，了解检定菌的性质和储存条件。

4.2 菌种代号4.2.1国内药品微生物检验所用菌种的代号是CMCC(F)或CMCC(B)。

CMCC表示中国医学菌种保藏中心，B代表细菌，F代表真菌。

4.2.2 菌种的具体代号大肠埃希菌【CMCC(B)44102】乙型副伤寒沙门杆菌【CMCC(B)50094】铜绿假单胞菌【CMCC(B)10104】金黄色葡萄球菌【CMCC(B)26003】枯草芽孢杆菌【CMCC(B)63501】白色念珠菌【CMCC(F)98001】黑曲霉【CMCC(F)98003】4.3菌种购买4.3.1检定菌管理员根据企业生产品种的需要和检定菌的传代要求，根据需要提前提出购买计划。

4.3.2管理员填写《检定菌购买与验收、领用记录》中“购买”部分的内容，经质量部经理批准后，到法定机构购买。

4.4验收与编号原则4.4.1 检定菌购回后，管理员应先目测检定菌外观生长情况，标签完好、清楚，菌种管塞子无松动。

并填写《检定菌购买与验收、领用记录》中“验收”部分的内容，然后将检定菌暂时储存于冰箱中，在一周内必须完成转种工作。

从药检所购买回的菌种编号规则为：菌种代号+ 购买年份.月份+代数，例如：B44102-1507-2，即表示为即表示为大肠埃希氏菌，2015年7月购买，为第二代。

4.4.2转接菌种管编号规则为：菌种特定编号+ 年份.月份+代数+流水号，例如：B44102-1507-4-1，表示大肠埃希氏菌2015年7月份购买，此次传代代数为第4代，是此次传代的第一支菌种管。

同时填写《检定菌购买与验收、领用记录》中“领用”部分的内容和《检定菌传代记录》。

北京百慧生化制药有限责任公司管理标准1目的：建立检定菌管理规程，规范检验员的操作，保证实验的安全性、准确性。

2范围：适用于本公司菌种接收、传代及销毁的操作管理。

3责任：质量管理部及微生物检测人员对本规程实施负责。

4内容：4.1检验依据：《中国药典》2015年版四部。

4.2标准菌的来源：标准菌株由中国食品药品检定研究院医学菌种保藏中心（China Medical culture collection ,CMCC）提供的冷冻干燥菌种（0代）。

黑曲霉的0代菌种为保存于含15%甘油的0.9%无菌氯化钠溶液中的孢子悬液冷存管。

4.3标准菌的验收：从菌种保藏中心购买的原始菌种管是玻璃安瓿装的冻干菌，接收同时应检查是否有随菌种附有的相关资料。

接收菌种时应检查安瓿的数量和名称，和每一支安瓿的完整性。

在相应的菌种接收记录上记上所有的关于菌种的信息，如名称、数量和接收日期等。

在菌种安瓿及菌种管上粘贴标签，内容包括：菌种名称、菌种代号、代次、接收日期、接收人、贮存条件、有效期至。

新购入的0代原始菌种储存于4～8℃，有效期为1年。

从上级药检部门购买的已接种好的菌种斜面（3代）应检查菌种管是否完好。

储存于2～8 ℃，有效期为3个月。

4.4菌种传代需用的培养基：4.4.1沙氏葡萄糖琼脂培养基:用于黑曲霉的复苏、复壮。

4.4.2胰酪大豆胨液体培养基或胰酪大豆胨琼脂培养基：用于金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌的复苏、复壮。

4.4.3沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培养基：用于白色念珠菌的复苏、复壮。

4.5菌种：金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]；大肠埃希菌[CMCC(B)44102]枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]乙型副伤寒沙门菌[CMCC(B)50094]白色念珠菌[CMCC(F)98001]黑曲霉菌[CMCC(F)98003]4.6 标准菌的复苏、确认、传代、保藏及菌悬液的制备：4.6.1物品及试剂：接种针、酒精灯、移液管、75%酒精及75%酒精棉球、1ml吸管、消毒干纱布等。

检定菌管理规程1. 目的规范检定菌种的管理与使用程序，确保菌种的溯源性和稳定性，保证微生物限度检查的结果准确可靠，保证检验人员的安全。

2.范围检定菌的申购、接收、保存、传代、使用与销毁等。

3.术语或定义3.1标准菌株：来自认可的国内或国外菌种保藏机构，其复苏、复壮或培养物的制备应按供应商提供的说明或按已验证的方法进行。

3.2 标准储备菌株：从国内或国外菌种保藏机构获得的标准菌株经过复活并在适宜的培养基中生长后，即为标准储备菌株。

标准储备菌株应进行纯度和特性确认。

3.3 工作菌株：是指用标准储备菌种接种至普通琼脂斜面培养基上，作为以后工作使用的菌株。

4. 职责4.1 质量控制部主任负责菌种的申购。

4.2 微生物检验人员负责菌种的验收、保管、传代、使用及销毁等。

4.3 质量管理负责人负责菌种申购计划的批准。

5. 程序5.1 检定菌种的购买质量控制部主任根据菌种使用情况（包括临时检验需要），提出申购计划，由质量管理负责人批准后，申购记录（附件1）交给物供部负责人购买。

5.2 检定菌种的接收菌种到达实验室后，由微生物检验人员验收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在检定菌种接收记录（附件2）上，内容包括：菌种名称、数量、编号、代数、来源、接收日期、接收人等。

5.3 检定菌种的保管5.3.1 菌种保管应有专人负责，保存于加锁的冰箱中，将购进的试管斜面菌种放入（2～8℃）冷藏保存，有效期为3个月。

确保菌种安全，因工作变动时，必须做好交接工作。

5.3.2 工作用菌种采用斜面低温保存法。

5.3.3 检定菌种的定期检查在菌种的保存期间，应每周检查保存菌种冰箱的温度、菌种管的塞子是否松动或生霉，并及时填写《检定菌种观察记录》（附件3），如有异常应及时灭活处理后销毁。

5.3.4 所保管的菌种，不能随意转让其他单位和个人，需要时应有单位证明和批准手续方可供应。

5.4 检定菌种的传代5.4.1 1代是指将活的培养物接种到微生物生长的新鲜培养物中培养，任何形式的转种均被认为是传代1次，从菌种保藏机构获得的标准菌种为第0代。