小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)elisa试剂盒使用

小鼠白细胞介素-2（IL-2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中小鼠白细胞介素-2（IL-2）含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2（IL-2）水平。

用纯化的小鼠白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入小鼠白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的IL-2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的IL-2呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2（IL-2）浓度。

试剂盒组成：样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

血管内皮生长因子检测45（最新版）目录一、血管内皮生长因子的概念二、血管内皮生长因子的作用三、血管内皮生长因子的检测方法四、血管内皮生长因子检测的意义五、结论正文一、血管内皮生长因子的概念血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，简称VEGF）是一种在血管内皮细胞中表达的蛋白质，它可以促进血管内皮细胞的增殖和迁移，从而促进血管的发生和生长。

在生理过程中，血管内皮生长因子对于血管的生长和发育具有重要的调节作用。

二、血管内皮生长因子的作用血管内皮生长因子主要有以下作用：1.促进血管内皮细胞的增殖和迁移：血管内皮生长因子可以刺激血管内皮细胞增殖和迁移，从而促进血管的发生和生长。

2.促进淋巴管的形成：血管内皮生长因子可以与淋巴细胞结合，通过与血管内皮生长因子受体结合，诱导淋巴管的形成。

3.参与肿瘤生长和转移：血管内皮生长因子在肿瘤生长和转移过程中发挥重要作用，它可以促进肿瘤血管的发生和生长，从而为肿瘤提供营养和氧气，促进肿瘤的生长和转移。

三、血管内皮生长因子的检测方法血管内皮生长因子的检测方法主要包括以下几种：1.免疫学检测方法：如酶联免疫吸附试验（ELISA）等，通过检测血液或组织中血管内皮生长因子的表达水平，了解其含量。

2.实时荧光定量 PCR 法：通过检测血管内皮生长因子 mRNA 的表达水平，了解其基因表达情况。

3.蛋白质印迹法：通过检测蛋白质表达水平，了解血管内皮生长因子的含量。

四、血管内皮生长因子检测的意义血管内皮生长因子检测对于了解血管内皮生长因子在疾病发生和发展中的作用具有重要意义，它可以：1.诊断和监测肿瘤：血管内皮生长因子在肿瘤发生和转移过程中发挥重要作用，通过检测血管内皮生长因子的水平，可以了解肿瘤的发生和转移情况，为肿瘤的诊断和监测提供依据。

2.评估治疗效果：在治疗过程中，通过检测血管内皮生长因子的水平，可以评估治疗的有效性。

3.研究血管发生和生长的机制：通过检测血管内皮生长因子的水平，可以了解血管发生和生长的机制，为相关领域的研究提供依据。

产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。

储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。

开封后，保存温度详见说明书。

产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。

人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。

由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。

VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。

VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。

VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。

骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。

血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。

VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。

VEGFR2调节血管炎症和血管新生的机制的开题报告一、研究背景与意义：血管炎症和血管新生是多种疾病的主要病理生理特征，如癌症、动脉粥样硬化等。

在这些疾病中，VEGFR2（vascular endothelial growth factor receptor-2）在调节血管炎症和血管新生方面具有非常重要的作用。

VEGFR2是一种高度表达在内皮细胞的受体蛋白，它通过VEGF-A （vascular endothelial growth factor A）信号传导途径起到调节血管生成、内皮细胞增殖、迁移和凋亡等作用。

近年来，越来越多的研究表明，在正常和疾病状态下，VEGFR2的信号通路有着复杂的调节机制，如以往研究中提到的抗VEGF-A药物能够通过抑制VEGFR2信号通路来抑制血管新生等作用的发现，以及VEGFR2的糖修饰与emplotin的结合在血管新生中的作用的研究等。

这些研究使得我们有必要深入研究VEGFR2在调节血管炎症和血管新生方面的机制，以期找到更为有效的治疗疾病的方法。

二、研究方法与流程：本研究将采用小鼠作为模型动物，通过基因敲除和转基因技术建立VEGFR2基因敲除和VEGFR2过度表达的小鼠，比较其在血管炎症和血管新生上的差异。

采用组织学检测、ELISA、Western blot等方法分析VEGFR2在血管新生和炎症过程中的表达情况。

同时，通过细胞实验检测VEGFR2信号途径在内皮细胞增殖、迁移和凋亡上的调节机制，探究VEGFR2调节血管炎症和血管新生的分子机制。

最后，通过小鼠模型实验验证其调节血管炎症和血管新生的作用。

三、研究预期结果：我们希望通过本研究，能够深入研究VEGFR2在血管炎症和血管新生方面的作用机制，为深入治疗相关疾病提供一定的理论基础和实验依据。

同时，本研究结果将有望为制备更为有效的治疗血管炎症和血管新生的药物提供一定的指导意义。

小鼠神经生长因子(NGF)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中神经生长因子(NGF)的含量。

试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：请来电咨询保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠神经生长因子(NGF)水平。

用纯化的小鼠神经生长因子(NGF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入神经生长因子(NGF)，再与HRP标记的神经生长因子(NGF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的神经生长因子(NGF)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠神经生长因子(NGF)浓度。

一、产品简介 ������������������� ���������二、检测原理 ������������������� ���������三、试剂盒组分 ������������������� ���������四、储存条件 ������������������ ����������五、注意事项 ������������������ ����������六、其它实验材料 ������������������� ��������七、使用说明 �������������������� �������7.1、样品收集、处理及保存方法 �������������������� � 7.2、试剂准备 �������������������� ������� 7.3、操作步骤 �������������������� ������� 7.4、操作流程图 �������������������� ������� 7.5、操作要点提示 �������������������� ���7.6、结果判断 �������������������� �������八、常见问题分析及解决 ���������� ������������� 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 6 6 8目 录全国统一热线：400-600-4213 Elisa试剂盒使用说明书本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中天然和重组IL-2浓度。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分，如有任何疑问请与北京兰杰柯科技有限公司或经销商联系，公司将为您提供强有力的技术支持。

仅供研究，不用于临床诊断。

二、检测原理本实验采用双抗体夹心ELISA，用抗人IL-2单克隆抗体预包被酶标板，加入适度稀释的样本和标准品，其中IL-2会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人IL-2抗体，抗人IL-2抗体与结合在单抗上的人IL-2结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有IL-2，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色；加终止液变黄。

人血管内皮生长因子(VEGF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T30pg/ml-1200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中血管内皮生长因子(VEGF)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血管内皮生长因子(VEGF)水平。

用纯化的人血管内皮生长因子(VEGF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血管内皮生长因子(VEGF)，再与HRP标记的血管内皮生长因子(VEGF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的血管内皮生长因子(VEGF)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人血管内皮生(VEGF)浓度。

试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育 3 0分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。

小鼠免疫球蛋白E（IgE）ELISA检测试剂盒使用说明书小鼠免疫球蛋白E（IgE）ELISA检测试剂盒说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被免疫球蛋白E（IgE）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。

颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E（IgE）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明书操作时样本已经稀释5倍，最结束果乘以5才是样本实际浓度。

严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。

全部液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0S5）浓度依次为：0、0.75、1.5、3、6、12μg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。

人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒使用说明书【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒试剂盒名称】人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒试剂盒用途】定量人血清、血浆及相关液体样本中可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)的含量【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。

将标准品、待测样本加入到预先包被可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)含量。

【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL 2标准品：200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL20mL9终止液6mL 320倍浓缩洗涤液4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

假尿苷酸合酶3(PUS3)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液假尿苷酸合酶3(PUS3)ELISA试剂盒说明书试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。

人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。

假尿苷酸合酶3(PUS3)ELISA试剂盒说明书自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

假尿苷酸合酶3(PUS3)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

避免用手接触，有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

假尿苷酸合酶3(PUS3)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。

它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。

本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。

一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。

2.样本准备：根据实验要求，准备样本。

如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。

3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。

例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。

4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。

5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。

确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。

二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。

确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。

2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。

标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。

3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。

孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。

4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。

洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。

5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。

6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。

7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。

丹红注射液改善糖尿病小鼠下肢缺血血管新生的研究张争艳;王鹏;伍锋;吴宗贵【摘要】Objective To investigate effect and mechanism of Danhong injection (DHI)on angiogenesis in the diabetic hind limb is-chemia mouse model.Methods Thirty diabetic hind limb ischemic model mice and ten normal mice,established by intraperitoneal (i.p.)injection of streptozotocin (STZ)or PBS and ligation/excision of femoral artery,then,twenty diabetic hind limb ischemic model mice of al were evenly randomized to saline (control)and DHI i.p.injection (2μL/g weight for 7days)groups.Limb perfusion recovery and femoral vessel regeneration and lower limb vascular endothelial growth factor (VEGF)expression were evaluated during inter-vention and after euthanasia,respectively. Results DHI i. p. increased ischemic limb perfusion and promoted col ateral circulation generation without decreasing blood glucose level.Increased local VEGF expression contributed to beneficial effects of DH injection. (n=10,P<0.05).Conclusion The activation of local VEGF signal pathway might participate in pro angiogenesis effects of DHI injection in diabetic hind limb ischemia model mice,suggesting a potential therapy for diabetic patients with critical limb ischemia.%目的：观察丹红注射液对糖尿病小鼠下肢缺血后血管新生的影响。

细胞因子检测试剂盒的原理及实验操作流程细胞因子检测试剂盒是一种用于检测细胞因子水平的实验试剂盒。

细胞因子是一类具有调节和介导免疫、炎症和细胞增殖等生物学功能的蛋白质分子，它们在机体免疫应答、疾病发展以及药物研究等领域具有重要的意义。

细胞因子检测试剂盒通过特定的试剂和技术，可以快速、准确地检测细胞因子的水平，为科学研究和临床诊断提供有力的支持。

细胞因子检测试剂盒的原理主要包括两个方面：免疫学方法和酶联免疫吸附测定法（ELISA）。

免疫学方法是通过免疫学反应原理来检测细胞因子的水平。

具体步骤包括：1. 样品收集和预处理：收集需要检测的样品，如血液、血清、血浆或细胞上清等。

对样品进行预处理，例如离心、稀释或加标等，以提高检测的灵敏度和准确性。

2. 抗体结合：将与目标细胞因子相关的抗体加入样品中，通过抗原-抗体结合的方式，形成特异性复合物。

这些抗体通常是特异性识别目标细胞因子的单克隆或多克隆抗体。

3. 洗涤：对于非特异性结合的物质，通过洗涤步骤将其除去，以减少干扰并提高检测的特异性。

4. 信号产生：添加特定的辅助试剂，如酶标记的二抗或荧光标记的二抗等，在免疫结合复合物中形成信号物质。

5. 信号检测：利用光谱设备或荧光显微镜等仪器对信号物质进行检测和定量分析。

检测的方法根据试剂盒的不同而有所差异，常见的包括酶标记法、荧光法、放射免疫法等。

ELISA法是目前最常用的细胞因子检测方法之一，其原理基于酶标记物介导的免疫反应。

ELISA法可以快速、准确地检测细胞因子的水平，并且具有灵敏度高、重复性好的特点。

具体步骤如下：1. 吸附：将经预处理的样品加入包被了特异性抗体的微孔板孔中，目标细胞因子会与抗体结合。

2. 洗涤：将非特异性结合的物质通过洗涤步骤除去，以减少背景干扰。

3. 检测：添加特异性酶标记的二抗，它会与目标细胞因子结合。

通过酶底物的作用，产生可定量测定的颜色反应。

4. 反应终止：通过反应终止剂停止酶反应，阻止进一步的颜色反应产生。