血红蛋白提取分离课时2学案

课题5.3 血红蛋白的提取和分离教学目标：1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理教学重点：凝胶色谱法的原理和方法教学难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填教材分析：教学过程：（一）引入蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化合物。

对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。

所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。

怎样提取蛋白质呢？（二）新课1．基础知识蛋白质的相关知识回忆：蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。

1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（见课件图）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。

（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。

（3）分离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。

1．2凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。

（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质－SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

1．3缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。

（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

2．实验设计2.1蛋白质的提取和分离一般分为哪些基本步骤？样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。

（1）你认为鸟类血液和哺乳动物血液中，最好哪种血液来提取血红蛋白？为什么？白性质。

《血红蛋白的提取和分离》学案张建尚江苏省赣榆高级中学【学习目标】1. 尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法。

2.了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

【重点和难点】重点 : 凝胶色谱法的原理和方法。

难点 : 样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

【课前预习】1. 不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量①的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程②，移动速度③，而相对分子质量④的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在⑤移动，路程⑥，移动速度⑦，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。

1.①较小②较长③较慢④较大⑤凝胶外部⑥较短⑦较快2. 在一定范围内，缓冲溶液抵制外界的①对溶液pH的影响，维持pH②。

电泳是利用了待分离样品中各种分子③以及分子本身的④、⑤的不同，使带电分子产生不同的⑥，从而实现样品中各种分子的分离。

2.①酸或碱②基本不变③带电性质的差异④大小⑤形状⑥迁移速度3. 采用①的方法分离红细胞。

红细胞洗涤的目的是②，以利于后续步骤的分离纯化。

在洗涤好的红细胞中加入③，充分搅拌后红细胞破裂，释放出血红蛋白。

血红蛋白溶液经离心后，明显分为 4 层，从上到下的主要成分分别是④。

对血红蛋白溶液进行透析的目的是去除⑤。

3. ①低速短离心②去除杂蛋白③蒸馏水和甲苯④甲苯、脂溶性物质、血红蛋白和沉淀物⑤分子量较小的杂质4.制作凝胶色谱柱的材料有①。

装填凝胶色谱柱的材料是②，装填时要③缓慢倒人色谱柱内，不能有④存在。

装填完后，用20mmol/L 的⑤充分洗涤平衡凝胶12h。

加样时用吸管小心地将1mL透析后的样品加到⑥的顶端，注意不要破坏⑦。

4.①玻璃管、橡皮塞、移液管、尼龙纱、尼龙网②凝胶③一次性④气泡⑤磷酸缓冲液⑥凝胶色谱柱的顶端⑦凝胶面【课堂探究】一、基础知识1.下图是凝胶色谱法分离蛋白质的原理，据图分析：（1）（ 2）（3）（ 4）（5）蛋白质 a凝胶颗粒蛋白质 b多孔板A B（1）图 A中蛋白质 a 能进入凝胶颗粒内部而蛋白质 b 被排阻在凝胶颗粒外面的原因是①。

课题3 血红蛋白的提取和分离导学案[导学诱思]1．凝胶色谱法凝胶色谱法也称做，是根据分离蛋白质的有效方法。

凝胶实际上是一些由构成的多孔球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程，移动速度；而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度。

相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。

2．缓冲溶液缓冲溶液的作用是。

缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。

生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，例如：血浆的pH是，要在实验条件下准确模拟生物体内的过程，必须保持体外的pH与体内的基本一致。

3．电泳电泳是指。

许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上。

在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。

电泳利用了待分离样品中各分子以及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。

两种常用的电泳方法是和，在测定蛋白质分子量时通常使用。

蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于以及等因素。

4．蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离一般分为四步：、、和。

5．样品处理血液由和组成，其中红细胞最多。

红细胞具有的特点。

红细胞中有一种非常重要的蛋白质，其作用是，血红蛋白有个肽链组成，包括，其中每条肽链环绕一个，磁基团可携带。

血红蛋白因含有呈现红色。

红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的是，采集的血样要及时采用分离红细胞，然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的倒入烧杯，再加入，缓慢搅拌，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至，表明红细胞已洗涤干净。

血红蛋白的释放在和作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。

分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后，试管中的溶液分为4层。

第一层为无色透明的，第2层为白色薄层固体，是，第3层是红色透明液体，这是，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。

血红蛋白的提取和分离学案血红蛋白的提取和分离学案§5.3《血红蛋白的提取和分离》导学案班级：高二（）班姓名：【学习目标】1.详述凝胶色谱法、电泳法拆分大分子的基本原理。

2.晓得缓冲溶液的促进作用。

3.尝试对血液中血红蛋白进行提取和分离,体验从复杂体系中提取生物大分子的基础过程和方法。

4.掌握对样品的预处理、色谱柱制作及装填等操作,进行样品的加入和洗脱并最终分离出血红蛋白。

【独立自主自学】一、基础知识1.蛋白质的分离依据:蛋白质特性的差异,例如分子的形状和_____、所带_____的性质和多少、溶解度、_________和对其他分子的亲和力等。

2.凝胶色谱法:(1)概念:也称做___________,是根据____________________分离蛋白质的有效方法。

(2)凝胶的特点形态:微小的_________共同组成:大多数由_____________形成结构:内部存有许多___________(3)常用凝胶:_______和琼脂糖。

(4)拆分原理。

①相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程_____,移动速度_____,通过凝胶的时间_____。

②相对分子质量很大的蛋白质无法步入凝胶内部的地下通道,就可以在凝胶_____移动,路程_____,移动速度_____,通过凝胶的时间_____。

3.缓冲溶液:(1)作用:在一定范围内,缓冲溶液能够抵制______________对溶液ph的影响,维持ph 基本不变。

(2)配制:通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成。

调节缓冲剂的_________就可以制得____________________的缓冲液。

(3)意义:为了能在实验室条件下精确演示生物体内的过程,维持_____________与体内环境中的ph基本一致。

4.电泳:(1)概念:带电粒子在_____的作用下发生_____的过程。

(2)原理。

①带电粒子:许多关键的生物大分子,例如多肽、核酸等都具备_______的基团,在一定的ph之下,这些基团可以带___________。

血红蛋白的提取和分离教案教案一: 血红蛋白的提取和分离教学目标:- 理解血红蛋白的结构和功能。

- 学习血红蛋白的提取和分离方法。

- 掌握实验室中分离血红蛋白的步骤和操作技巧。

教学步骤:引入活动:在开始实验之前，首先向学生介绍血红蛋白的结构和功能，以及为什么需要提取和分离血红蛋白。

1. 血红蛋白的提取:a. 实验材料准备:- 鲜血样本- 磷酸缓冲溶液（pH 7.4）- 离心管- 离心机- 冷藏器b. 实验步骤:1) 将鲜血样本取出，用磷酸缓冲溶液稀释。

2) 将稀释后的样本置于离心管中，离心10分钟。

3) 将离心后的上清液转移至新的离心管中，置于冷藏器中。

2. 血红蛋白的分离:a. 实验材料准备:- 血红蛋白样本- 离心管- pH 4.7缓冲溶液- pH 5.2缓冲溶液- pH 6.0缓冲溶液- pH 7.0缓冲溶液b. 实验步骤:1) 将血红蛋白样本转移到离心管中。

2) 分别加入pH 4.7、pH 5.2、pH 6.0和pH 7.0缓冲溶液，使其达到不同的酸碱度。

3) 转动离心管，使其充分混合。

4) 将混合溶液置于冰箱中冷藏一段时间。

5) 通过离心，收集上层液体，然后分别加入酸、碱溶液，使其达到酸碱中和。

6) 重复以上步骤，直到获得纯净的血红蛋白。

实验注意事项:- 实验过程中要注意安全，佩戴实验室衣物和手套。

- 实验器材要严密封闭，避免反应物外泄。

- 实验后要彻底清理实验场地。

教学总结:通过本次实验，学生可以了解血红蛋白的结构和功能，并掌握了提取和分离血红蛋白的方法。

同时，学生也了解了实验室实验的注意事项和操作技巧。

课题3_血红蛋白的提取和分离_教学设计_教案教学准备1.教学目标（一）知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理（二）过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤（三）情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神2.教学重点/难点课题重点凝胶色谱法的原理和方法课题难点样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填3.教学用具多媒体4.标签生物,教案教学过程（一）引入新课蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化和物。

对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。

所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。

怎样提取蛋白质呢？（二）进行新课1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。

1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（图5－13a）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。

（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。

（3）分离过程：（图5－13b）混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。

1．2缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。

（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

1．3凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

［思考］阅读教材后，填写下表：。

血红蛋白提取分离教学设计血红蛋白是负责携带氧气的蛋白质，在医学研究和实验室中常常需要从血液中提取和分离血红蛋白。

以下是一个血红蛋白提取分离的教学设计，适用于高中生或大学生的实验课程。

教学目标：1. 了解血红蛋白的结构和功能。

2. 学习提取和分离血红蛋白的方法和步骤。

3. 培养实验操作技能和实验数据分析能力。

教学准备：1. 实验室用品：离心机、pH计、试管、显微镜等。

2. 材料：新鲜全血样本、10%的NaCl溶液、磷酸盐缓冲液、酒精、蒸馏水等。

3. 实验手册和指导书。

教学步骤：1. 引入（10分钟）简要介绍血红蛋白的结构和功能，血红蛋白是由四个亚基组成的大分子蛋白质，可以与氧气结合形成氧合血红蛋白，在体内实现氧气的运输。

2. 实验前准备（10分钟）学生们准备实验用品和材料，确保实验室的清洁和安全。

3. 血红蛋白提取（30分钟）步骤：a. 取一定量的全血样本放入试管中，加入酒精将红细胞溶解。

b. 加入磷酸盐缓冲液进行稀释，并用pH计调节pH值。

c. 使用离心机进行离心操作，将溶液分离成上层血原液和下层红细胞沉淀。

d. 将上层血原液收集到另一个试管中，留待后续使用。

4. 血红蛋白分离（30分钟）步骤：a. 取出收集到的血原液，加入10%的NaCl溶液，使血原液中的血红蛋白进行沉淀。

b. 使用离心机进行离心操作，将血红蛋白沉淀收集到试管中。

c. 用蒸馏水洗涤血红蛋白沉淀，去除余留的杂质。

d. 最后，使用显微镜观察血红蛋白的结构和形态。

5. 结果分析（20分钟）学生们进行实验数据的整理和分析，讨论血红蛋白的提取和分离方法是否有效，并分析实验中出现的问题和改进方法。

6. 实验总结（10分钟）总结实验过程中的关键点和注意事项，强调实验方法的重要性以及实验结果的可靠性。

7. 实验报告学生们根据实验操作和结果撰写实验报告，包括实验目的、方法、结果和讨论等内容。

教学扩展：1. 将分离的血红蛋白进行进一步的实验研究，如测定其吸收光谱等。