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石炭酸复红染液配制及使用方法

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石炭酸复红染液(苯酚品红染液)
产品说明：
石炭酸复红染色液又称苯酚品红染色液。

该染色液与醋酸洋红有相似之处，醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。

生物学上也常用石炭酸复红染色液作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。

染色体染色时用醋酸洋红染色液染色, 虽然染色效果较好, 但却存在着染色需时较长的问题。

石炭酸复红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法，染液稳定，主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色，是很好的细胞核、线粒体染色剂。

使⽤步骤（仅供参考）：
1. 固定将经过预处理或没有预处理的材料，放到卡诺氏固定液（3 份甲醇：1 份冰乙酸）中固定2～24h，再分别在95％和85％乙醇中各30min ，再转入70%酒精中，可4℃保存备用。

2. 解离取固定好的植物组织，用蒸馏水漂洗2～3 次，放入1N HCl 溶液中60℃水解8～12min，再用蒸馏水洗净。

3. 染色将组织放在载玻片中央，用镊子或解剖针将材料轻轻捣碎。

滴加苯酚品红染液，染色8～15min 后，盖上盖玻片。

4. 压片在盖玻片上面铺上滤纸，固定好盖玻片，用拇指垂直压片，然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片，至肉眼见材料呈雾状即可，使细胞核染色体分散。

5. 镜检观察显微镜下观察染色形态和计数，对典型分裂相细胞进行摄影记录。

注意事项：
1. 组织4℃保存时间最好不超过二个月。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴手套操作。

产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

北京华越洋生物提供QQ:1733351176储存条件：室温密封保存，有效期12 个月。

关键词：石炭酸复红染液(苯酚品红染液)
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常用染色液配方

常用染色液配方

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

抗酸染色——标准操作

抗酸染色——标准操作

抗酸染色一、原理本试剂盒采用WHO推荐的Ziehl-Neelsen法分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。

但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色。

齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用盐酸酒精处理也不脱色。

当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色。

二、试剂石碳酸复红染液、酸性酒精溶液、亚甲蓝溶液三、方法1.涂片：参见各标本操作程序涂片，涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥，但勿靠近火焰2.固定：常用高温进行固定。

即手持载玻片一端，标本面朝上，在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次，共约3~4秒。

要求玻片温度不超过60℃，以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜，放置待冷后染色3.染色3.1 滴加石碳酸复红染液盖满玻片，染色10分钟或更久，无需加温3.2 流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水3.3 滴加酸性酒精溶液盖满玻片，脱色1-2分钟，如有必要，需流水冲去溶液后，再次脱色至痰膜无可视红色为止3.4 流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水3.5 滴加亚甲蓝溶液，染色30秒钟3.6 流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水，待玻片干燥后镜检3.7 一张染色合格的玻片，痰膜肉眼观察为亮蓝色，无红色斑块四、结果判定1.干燥后油镜观察300个视野（观察时间不少于4min），抗酸性细菌呈红色，其它细菌或细胞呈蓝色2. 报告方式2.1 未找到抗酸杆菌2.2 找到抗酸杆菌±：可疑，发现抗酸杆菌1-2条/300视野2.3 找到抗酸杆菌1+：发现抗酸杆菌3-9条/100视野2.4 找到抗酸杆菌2+：发现抗酸杆菌1-9条/10视野2.5 找到抗酸杆菌3+:发现抗酸杆菌1-9条/1视野2.6 找到抗酸杆菌4+：发现抗酸杆菌≥10条/1视野五、注意事项1.每一玻片只能涂一份标本，以防脱落混淆2. 脱色时间需根据涂片厚薄而定，厚片可适当延长，以无红色脱出为止3. 冬季室温过低时，染色时间要适当延长4. 有时同一个抗菌体上红色深浅也有不同，观察时应注意5. 每次试剂用完后，请迅速盖好，以免挥发，储存时应避免高、低温及阳光照射6. 在涂抹痰标本时，严禁对玻片加热7. 染色时勿使玻片上的染液干燥六、临床意义分支杆菌属（结核分支杆菌、麻风分枝杆菌、非典型分支杆菌）、放线菌抗酸染色阳性，可初步鉴定细菌。

实验室常用染色液和试剂配方

实验室常用染色液和试剂配方

实验室常用染色液和试剂配方【很全】实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

常用染色液的配制

常用染色液的配制

常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。

2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。

B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。

一般可将此溶液稀释5-10倍使用。

但稀释液易变质失效,一次不宜多配。

3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。

(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。

(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。

取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。

4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。

(2)0.5%蕃红溶液。

(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。

再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。

(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml, 然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。

6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。