植物组织切片
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第1篇一、实验目的1. 了解植物切片的制作过程及注意事项。
2. 掌握植物组织切片技术在植物学研究中的应用。
3. 通过观察植物切片,了解植物组织的结构特征。
二、实验原理植物切片技术是一种重要的植物学研究方法,通过将植物组织制成薄片,便于在显微镜下观察其结构特征。
本实验采用石蜡切片法,将植物组织固定、脱水、透明、包埋、切片、染色,最后进行封片。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:洋葱鳞片叶、马铃薯块茎、胡萝卜根等。
2. 仪器设备:切片机、显微镜、显微镜载物台、显微镜镜头、载玻片、盖玻片、酒精灯、酒精、二甲苯、甲醛、石蜡、刀片、剪刀、镊子、滴管、烧杯、滤纸等。
四、实验步骤1. 固定:将植物材料放入装有甲醛的烧杯中,浸泡24小时。
2. 脱水:将固定后的植物材料依次放入50%、70%、90%、95%、无水酒精中,每级酒精浸泡30分钟。
3. 透明:将植物材料放入二甲苯中,室温下浸泡,使组织透明。
4. 包埋:将透明后的植物材料放入熔化的石蜡中,使其成为石蜡块。
5. 切片:将石蜡块放入切片机中,切取5-10微米的薄片。
6. 染色:将切片放入染液中,如苏木精-伊红染色液,室温下染色30分钟。
7. 水洗:将染色后的切片用蒸馏水冲洗,去除多余的染液。
8. 封片:将冲洗后的切片用中性树胶封片,制成植物切片。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶切片观察:- 表皮细胞:细胞呈长方形,排列紧密,细胞壁较厚,细胞核较大,染色较深。
- 保卫细胞:位于表皮层,呈肾形,细胞壁较薄,细胞核较小。
- 保卫细胞间隙:保卫细胞之间形成的空隙,有利于气体交换。
- 气孔:保卫细胞之间形成的开口,是气体交换的主要通道。
2. 马铃薯块茎切片观察:- 表皮细胞:细胞呈多边形,排列紧密,细胞壁较厚,细胞核较大。
- 薄壁组织:位于表皮下方,细胞较大,细胞壁较薄,含有丰富的营养物质。
- 维管束:由韧皮部和木质部组成,负责水分和养分的运输。
3. 胡萝卜根切片观察:- 表皮细胞:细胞呈长方形,排列紧密,细胞壁较厚,细胞核较大。
辽宁中学教学用实验切片种类辽宁中学教学用实验切片种类实验切片是生物学、医学等领域中常见的一种研究方法。
在教学中,实验切片也是非常重要的一种教学手段。
辽宁中学在教学过程中,采用了多种实验切片,以帮助学生更好地理解和掌握知识。
下面将介绍辽宁中学教学用实验切片的种类。
一、植物组织切片1.根尖组织切片根尖组织是植物根部最末端的一部分,主要包括根毛、根冠和分生组织等。
通过观察根尖组织切片,可以了解植物的生长方式、营养吸收和水分利用等方面的知识。
2.茎叶组织切片茎叶组织是植物体内负责光合作用和物质输送的部分。
通过观察茎叶组织切片,可以了解植物体内各个器官之间的联系和作用。
二、动物组织切片1.肌肉组织切片肌肉是动物体内最重要的组织之一,主要负责运动和保护内脏器官。
通过观察肌肉组织切片,可以了解肌肉的结构和功能。
2.神经组织切片神经组织是动物体内最为复杂的一种组织,主要负责信息传递和调节。
通过观察神经组织切片,可以了解神经元的结构和功能。
三、微生物切片1.细菌切片细菌是一种微小的单细胞生物,广泛存在于自然界中。
通过观察细菌切片,可以了解其形态、结构和生活习性等方面的知识。
2.病毒切片病毒是一种非常微小的生物体,只能在宿主细胞内进行复制。
通过观察病毒切片,可以了解其形态、结构和感染方式等方面的知识。
四、其他实验切片1.化石切片化石是古生物学中非常重要的一种证据。
通过观察化石切片,可以了解古生物学中各个时期的生物群落和地质环境等方面的知识。
2.晶体切片晶体是一种具有特殊结构的物质,广泛存在于自然界中。
通过观察晶体切片,可以了解其结构和性质等方面的知识。
总结:实验切片是一种非常重要的教学手段,在辽宁中学教学中得到了广泛应用。
通过观察不同类型的实验切片,可以帮助学生更好地理解和掌握知识,提高他们的科学素养和实验能力。
植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定:用50%或70% FAA固定液(50%或70%酒精:甲醛:冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA;老的材料用70%的FAA),置于4℃固定24 h。
⑵脱水:将固定液倒去,加入50%乙醇,室温静置30 min;重复一次,室温静置20min。
换成1%番红O溶液(用70%酒精配制),室温脱水染色过夜。
次日继续脱水,酒精浓度梯度和时间依次为:80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min(2次)。
⑶透明:1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h,纯二甲苯1h、40 min(2次)。
最后加入少量二甲苯(浸没材料即可)和碎蜡,放入38℃温箱中过夜。
⑷浸蜡:将温箱温度调至56℃,计时1h;换成二级蜡1h;三级蜡(3次)各1h、1h、40min(从温度上升到56℃开始计时)。
⑸包埋:将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中,迅速放入冰水中使蜡凝固,防止气泡产生,以及凝蜡不匀。
⑹切片:修整蜡块,用LicaRM2126切片机切片,厚度5-10μm。
⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂,将切好的蜡带放入温水中,捞至载玻片上,最后置于37℃恒温箱过夜烤片。
⑻脱蜡及染色:①番红-固绿对染ⅰ脱蜡:二甲苯60m in,二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5min、无水乙醇5min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。
ⅱ染色:80%乙醇5 min,1%固绿(用95%酒精配制)迅速蘸一下,大约10s,直接放到95%乙醇5min、无水乙醇5m in、无水乙醇5m in、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min(2次)。
②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡:二甲苯60min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5min、无水乙醇5min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。
植物细胞学分析之组织切片技术一、试剂(1)卡诺氏固定液:无水乙醇与冰醋酸按体积比为3:1混合配制。
(2)1mol/L盐酸溶液:取浓盐酸(比重1.19)82.5ml,加入蒸馏水917.5ml。
(3)醋酸洋红染液:4-5g洋红,冰醋酸45ml,蒸馏水55ml,先将冰醋酸加入蒸馏水中煮沸,然后将火移去,立刻加入洋红,用玻璃棒搅匀溶化,冷却后过滤即成。
(4)70%酒精;95%酒精。
二、细胞分析方法1.有丝分裂全过程的染色体制片方法步骤:取材-预处理-固定-根尖解离1mol/L HCL-醋酸洋红染色-压片(1)发根挑选每份黑麦种子材料25粒,经流水冲洗,放于培养皿内温水浸泡24h。
置于25℃恒温箱中发根。
待根长到1~2cm时,于适宜时间用蒸馏水洗净,将水吸干,剪取根尖0.5~1cm进行预处理。
为获得尽可能多的分裂相,根尖以上午9~10时剪取为宜。
(2)预处理为了有利于有丝分裂中,染色体的观察和计数,通常要对材料进行不同的预处理。
预处理主要通过抑制和破坏纺锤丝的形成,来获得更多的中期分裂相,同时还可以改变细胞质的粘度,促使染色体缩短和分散,便于压片和观察。
将根尖浸于蒸馏水内,1-4℃低温处理24h。
(3)固定材料经预处理后,用流水冲洗2次,然后投入卡诺液(3份甲醇∶1份冰乙酸)中固定26h,用95%的乙醇洗两次,转入70%乙醇中保存备用(4℃)。
固定的目的是:①迅速防止细胞死亡后的变化,如自溶、腐败等,尽量保持生长状态结构。
②使细胞中的蛋白质、脂肪等成分转变为不溶性物质,以保持生前的形态。
③使组织内各种物质成分产生不同的折光率,便于观察和鉴定。
④使不同组织成分对染料有不同的亲和力,便于染色。
⑤防止细胞过度收缩或膨胀,失去原有的形态结构。
(4)解离常用酸解法:从70%乙醇中取出固定好的根尖,用蒸馏水冲洗后,吸水纸吸干,放入盛有1 mol/L的HCl的1.5ml离心管中,60℃水浴,恒温条件下解离10min。
植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用,分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体,因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离,这一操作称为解离。
植物组织制片技术是随着显微镜的出现而发展起来的技术,是人们认识植物体结构的有效手段,已成为植物生物学的重要组成部分。
植物制片技术已建立了许多方法,现简要介绍如下几种最常见的制片技术:徒手切片法、滑走切片法、离析法、压片法、石蜡制片法和冰冻切片法。
徒手切片法徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片,所作的切片通常不经染色或经简单染色后,制成临时的水装片用于观察,亦可以通过脱水与染色制成永久制片。
优点:简单、方便,不需要复杂的设备,不经过化学药物的处理,基本上保留了植物活体的状态。
用品与材料显微镜、载(盖)玻片、刀片、毛笔、培养皿、吸水滤纸、滴管、ddH2O或清水、1%番红水溶液、菜叶、胡萝卜、马铃薯实验材料对于软硬适中,便于手持的材料,可将实验材料截成适当小块,一般以长2~3cm,切片断面不超过3~5mm2为宜。
对于过于柔嫩的器官(如叶片等),一般可选用胡萝卜根、土豆块茎等作为支撑物,包被住材料后再进行切片。
有时也可将叶片卷成圆筒后再进行切片。
实验步骤1、在小培养皿中放入ddH2O或清水。
2、用左手拇指、食指和中指拿住材料,拇指略低于食指与中指,并使材料略为突出在指尖上面。
3、右手持刀,将刀片平稳地放在左手食指之上,与材料切面平行,然后以均匀的动作,自左前方向右后方,斜着向后拉切,切时用臂力而不用腕力。
4、切下许多薄片后,用湿毛笔将这些薄片放人培养皿中。
用毛笔挑选透明的薄片,放在载玻片上,用吸管滴一滴水在载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片进行观察。
注意事项1、在切片前,要不断地用水湿润材料和刀片。
2、切片时,两只手应该保持活动状态,不要使它们紧靠身体或实验台,且用力不要过猛,不能用刀片挤压材料或来回切割材料。
3、动作要敏捷,材料要一次切下,不要追求切片形状的完整。
简单的组织化学染色经徒手切片法切下的薄片,可以进行简单的组织化学染色,这样更容易分辨细胞的结构,同时可以观察到细胞各部分的化学成分。
一款制作植物组织永久切片的简单工序制作植物组织永久切片的简单工序___________________________________________植物的永久切片是由植物学家和生物学家制作的一种技术,可以用来观察植物细胞的结构和形态,从而获得有关植物生长、发育、适应性等的重要信息。
制作植物永久切片的工序简单易行,但需要一定的技术。
下面介绍了制作植物组织永久切片的简单工序:### 一、准备材料要制作植物组织永久切片,需要准备如下材料:1. 植物样本:通常是取自健康的植物,尽量避免使用伤口或染色体变异的植物;2. 水和盐水:用于浸泡样本;3. 一把实验剪刀:用来剪取植物样本;4. 盐酸:用于脱落去除样本表面的死细胞和细胞外物质;5. 水溶性胶:用于将样本固定在显微镜片上;6. 水溶性染料:用于染色切片;7. 显微镜片:用于观察切片;8. 盐水:用于保存切片。
### 二、准备样本1. 将样本浸泡在水中或盐水中10-15分钟,以便其表皮和内部的细胞均匀地膨胀;2. 使用剪刀剪取样本的一小部分,然后放入盐酸中浸泡5-10分钟,以去除表皮死细胞和外部物质;3. 用凉水冲洗样本,直至表皮无法剥离。
### 三、固定样本并制作切片1. 将样本放入水溶性胶中浸泡10-15分钟,以将样本固定在显微镜片上;2. 使用一把实验剪刀将样本剪成3-4微米厚的切片;3. 将制作出的切片放入盐水中浸泡5-10分钟,以保证细胞不被剪断。
### 四、染色并观察切片1. 将样本切片浸泡在水溶性染料中10-15分钟,以使其形成彩色染色效果;2. 将彩色的样本切片放入显微镜下观察,以获得关于植物生长、发育、适应性等信息。
### 五、保存切片1. 将彩色的样本切片取出后用凉水冲洗干净;2. 将冲洗后的样本切片放入盐水中保存。
通过以上步骤就可以完成一份优秀的植物永久切片。
在制作过程中要尽量避免使用伤口或变异的样本,以便得到真实而准确的信息。
一款制作植物组织永久切片的简单工序
植物组织永久切片,是一种实验室常用的技术,它能够精确地显示出细胞结构和组织关系,为进一步的生物学研究提供重要的实物参考。
本文将介绍一种简易的制作植物组织永久切片的工序。
1. 收集静态干燥的植物组织样品,若有生长的植物组织,可使用锋利的剪刀将其剪成稍细的片段,然后将其放入焦磷酸盐纸中,处理到它们在纸中能够保持它们的原形;
2. 将其从焦磷酸盐纸中取出,放入70%甲醇中浸泡5分钟,然后将甲醇沥干;
3. 将该块片段放入离心瓶中,倒入脱水甲醇,再加入2-3滴甲醇衍生物,然后像正常甲醇操作一样在37℃处理一小时;
4. 将片段放入脱模剂中浸泡5分钟,然后抽出片段,放入彻底的脱水甲醇中,处理2-3分钟;
5. 用混合85%醇,5%玻璃胶和10%蓝指甲油的溶液将片段放入,加热至60-65℃,处理五分钟;
6. 将处理过的植物片段放入原位置,放入含石蜡的贴片切片机中,切片,厚度约为4-5微米;
7. 将切好的片段放入石蜡胶片中,再放入至少5%氢氧化钾溶液中浸泡;
8. 胶片冷却到室温后,用正常的洗涤法洗涤,再用100%乙醇洗涤;
9. 用染料渗透染色,准备放大装配的抛光膜,细腻制作,就可以得到完美的植物组织永久切片了。
本方法均为视个体样品的不同而定,步骤或配方可调整。
作出完美切片不仅需要操作工具与药剂的加减,还需要有足够的经验和技能,只有经过细致的操作,才能将植物组织永久切片做得完美。
植物切片注解图棉花幼茎横切(初生)表皮厚角组织薄壁组织韧皮纤维髓束中形成层初生木质部棉花幼茎横切(次生)初生韧皮部次生韧皮部筛管韧皮纤维形成层次生木质部导管管胞初生木质部南瓜茎横切(示导管细胞)韧皮部后生木质部原生木质部韧皮部南瓜茎横切(示导管细胞)导管细胞单子叶植物茎横切基本组织原生木质部初生韧皮部微管束鞘后生木质部椴木三年生茎横切周皮次生韧皮部皮层韧皮射线形成层次生木质部髓射线木射线松三年生茎横切髓木射线木射线树脂道木质部形成层韧皮部皮层周皮睡莲叶横切木质部韧皮部厚角组织迎春叶横切栅栏组织海绵组织中脉夹竹桃叶横切(示气孔)气孔百合花蕾横切表皮药室内壁造孢细胞百合花药横切药隔维管束药隔基本组织药室花粉萌发装片萌发管生殖核营养核松幼雌球果纵切卵核颈卵器珠被珠心松幼雄球果纵切二分孢子四分孢子荠菜二细胞原胚切片二细胞原胚荠菜四细胞原胚切片胚体胚柄胚柄基细胞荠菜球形胚切片球形胚胚柄胚柄基细胞荠菜心形胚切片心形胚荠菜成熟胚切片胚芽子叶胚轴残留胚乳胚根青霉装片孢子分生孢子小梗梗基分生孢子梗曲装片霉泡囊-小梗-分生孢子(由内而外)分生孢子梗。