血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤

稀有血型、不规则抗体阳性、及配血不相
合等及时报告程序
为确保临床用血的安全和合理性，本文制定了稀有血型、不规则抗体阳性及配血不相符等情况的报告程序。

在进行交叉配血实验时，输血科人员应按照操作规程认真完成实验，并由另一人进行复核后签字发出血液。

如果发现稀有血型的输血需求，输血科应立即通知用血临床科室，并在血液储备不足的情况下暂停手术。

同时，输血科人员应上报输血科主任，与市中心血站联系，确保血液的供应。

对于紧急的稀有血型输血，输血科人员应立即上报输血科主任，输血科主任应与血站联系，确保急症抢救用血并上报医务科。

对于不规则抗体阳性及配血不相合等情况，输血科人员应重新做不规则抗体及交叉配合实验并复查血型，必要时更换试剂，重做试验。

如果仍然不相符，应上报输血科主任，输血科主任应上报医务科和主管院长。

输血科疑难交叉配血试验标准操作规程1.目的为规范疑难交叉配血试验操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。

2.适用范围适用于医疗机构输血科对临床疑难交叉配血受血者，主要是对红细胞ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性及自身免疫性溶血性贫血(AlHA)患者的交叉配血试验。

3.职责医疗机构输血科技术人员负责疑难交叉配血试验。

4.原理本规程中疑难交叉配血是指受血者ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性或受血者是自身免疫性溶血性贫血患者等情况下的交叉配血试验。

配血前需确定受血者的ABO血型或红细胞不规则抗体的特异性,选择ABO血型相容的红细胞或红细胞不规则抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。

5.所需设备和试剂普通离心机，血型血清学专用离心机，水浴震荡仪，普通显微镜等。

6.检测环境条件室温应控制在18-27°C,湿度应保持30%-70%°7.步骤与方法7.1交叉配血前受血者ABO血型鉴定不确定者执行《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》，确定ABO血型后，再选择ABO血型相同或相容的献血者血液进行交叉配血试验。

7.2红细胞不规则抗体筛选阳性时7.2.1随机与库存血中多袋血液进行交叉配血试验，选择交叉配血相合的血液输注。

7.2.2我院库存血中无相合的血液时，应立即联系临床医生说明情况：①上述实际情况；②应送市血液中心进行“疑难配血”，会产生费用，存在配血不成功的可能：③详细告知家属，决定是否送市血液中心。

7.2.3家属同意后，由医生填写“免疫学申请单”，并抽取血样EDTA抗凝血5-10ml,送输血科。

7.2.4输血科联系血液中心，并送血样。

7.3冷型自身抗体或冷型AIHA患者交叉配血试验：执行7.2.2-7.2.4程序8.交叉配血结果判定主侧、次侧交叉配血均无溶血、无凝集，表示配血相合。

对于AlHA患者，已经排除同种抗体的存在，而所有交叉配血又都不相和时，可选择凝集强度弱于自身凝集的血液输注。

临床血型复查、不规则抗体筛查、交叉配血实验等红细胞输注前检验要点临床治疗当中，输血治疗属于移植细胞治疗，红细胞作为运输氧气的重要载体，是治疗或者辅助治疗的重要手段，但不适当的血液制品的输注将造成不良后果，严重者可以危及生命，因此应该按照相关程序对受血者和供血者的血液进行准确的输血前血型血清学检查才能保证受血者的输血安全。

血型复查红细胞上的抗原纷繁复杂，但是具有重大临床意义的，也是现在临床上运用的是ABO 血型系统和Rh 血型系统，通常所有住院患者在一开始会常规查一个血型定性，就包括ABO 系统和Rh 系统。

大型医院一般微柱凝胶法，而在输血前也需要再进行血型复查，包括正定型（用抗-A 及抗-B 的试剂与被检测血细胞反应，检测红细胞表面是否存在A 抗原B 抗原），和反定型（用标准A 细胞和B 细胞与被检血清反应，检测血清中是否含有抗体），此时复查多采用试管法或者玻璃法，由于ABO 系统的天然抗体多属于IgM 型抗体，属于温抗体，盐水介质下就可以看见凝集，一般不需要离心即可看出结果，当受血者的抗体较弱时可以离心观察，临床上反定型防止假阴性均采用盐水介质法离心后观察。

不规则抗体筛查受血者有输血史、妊娠史或者短期内需要大量输血时应按规定进行不规则抗体的筛查和鉴定，以便及时发现有临床意义的不规则抗体从而避免输血反应的发生，不规则抗体指除了抗-A 和抗-B 抗体以外的抗体，分为自身抗体和同种异体抗体。

自身抗体是指受血者体内产生的抗体，针对自身红细胞的抗原，这种抗体不仅可以和自身红细胞反应还可以和大多数红细胞反应，而同种异体抗体是指多次输血或者妊娠刺激机体产生的针对同种异基因的红细胞的抗体。

不规则抗体按照抗体的类型可以分为IgM 和IgG 类，根据次分类可以选择不同的筛选方法，主要有盐水介质法、聚凝胺法、抗球蛋白实验，以及微柱凝胶法等。

交叉配血实验在完成前个试验后，复查收到的受血者血样的ABO、Rh 血型以及不规则抗体筛查实验，进行最后一步，交叉配血实验，主要是检查受血者血清中有无破坏供者的红细胞的抗体，使受血者和供血者的血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分，实验包括以下几项：1、主侧配血：受血者的血清和供血者的血细胞反应，检测受血者体内是否存在针对供者红细胞的抗体。

血型及交叉合血操作规程一、引言作为医疗机构中常见的操作流程之一，血型及交叉合血是确保输血安全的重要环节。

本文将介绍血型和交叉配血的基本概念、操作步骤以及注意事项，以提供规范的操作指南。

二、血型的基本概念血型是指个体红细胞膜上存在的抗原和抗体的组合情况，分为A、B、AB和O四种类型。

在血型鉴定中，需要使用抗A和抗B两种血清对被测血液进行试验，从而确定其血型类型。

此外，还需要测试被测血液中是否存在抗D抗体，以判断其Rh阴性或Rh阳性。

三、交叉配血的基本概念交叉配血是在输血前进行的一项重要试验，旨在检测受血者的血清中是否存在与供血者红细胞的抗体相对应的抗原，以避免输血反应的发生。

具体操作如下：1. 取受血者的血清和供血者的红细胞，将它们分别置于两个试管中。

2. 依次加入适量混合胶体试验红细胞悬液和抗人球蛋白试剂，轻轻振荡混合。

3. 观察反应是否出现凝集、增浊或溶解等现象。

4. 凝集或增浊反应表示交叉配血不合格，需停止输血操作；溶解反应则表示血型和抗体基本匹配，可以进行输血。

四、血型及交叉合血操作规程以下为血型及交叉合血操作的具体步骤，操作人员应根据实际情况进行：1. 准备工作a. 确认受血者的基本信息，包括姓名、住院号、血型等。

b. 根据受血者血型，选择相应的供血者。

c. 根据病情和输血需求，估计所需输血量。

d. 消毒操作台面和操作器具。

2. 操作步骤a. 将受血者的血液样本采集到干燥无菌试管中，标明受血者信息。

b. 将受血者的样本送至血库，进行血型鉴定。

c. 根据受血者的血型和抗体情况，在血库选择适当的供血者。

d. 从血库获取供血者的血液样本。

e. 将供血者样本标记并送至血型试验室进行交叉试验。

f. 根据交叉试验结果判断是否合适进行输血操作。

g. 如满足输血条件，按照医嘱进行输血操作。

五、注意事项1. 操作人员应进行严格的洗手和穿戴手套等防护措施，以防交叉感染。

2. 每一步操作都需要仔细核对患者信息，确保输血操作正确。

血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤一.1. 血型鉴定排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。

2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者 2%-5%红细胞悬液。

3.加样ABO正定型： 1 滴（ 50ul ）抗 A、抗 B 试剂加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。

ABO反定型： 1 滴（ 50ul ）患者血清加 1 滴（ 50ul ）反定型试剂红细胞。

RhD定型： 1 滴（ 50ul ）抗 D 血清加 1 滴（ 50ul ）患者红细胞悬液。

4.二. 结果判断离心（ 2 档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。

不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）1.排管标记 01、 02、 03 及自身对照管2. 加样各试管分别加入相应的患者血清 2 滴（ 100ul ）及筛选细胞 1 滴（ 50ul ）。

3.结果观察离心（ 2 档），观察结果先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。

各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留约，轻轻混匀肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min 内消失显微镜检查三. 交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）1.标本准备分离供血者血浆与红细胞三次洗涤，制备供血者 2%-5%红细胞悬液2.排管标记排管，主侧、次侧及自身对照管3.加样各试管分别加入相应的备检血清 2 滴（ 100ul ）及 2%-5%备检红细胞悬液 1 滴（ 50ul ）4.结果观察离心（ 2 档），观察结果先看上清液有无溶血轻轻混匀，肉眼观察有无凝集结果判断并记录各试管分别加入低离子介质，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴（ 100ul ）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留，轻轻混匀肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液 2 滴（ 100ul ），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min 内消失肉眼观察阴性者，显微镜检查记录交叉配血结果A、 B、O试验红细胞悬液的制备1.分别采取已知A、 B、O 三种血型的红细胞，经盐水洗涤 3 次，以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液（见表格）红细胞悬液的配置悬液浓度（ %）压实红细胞（滴）盐水（滴）2 1 （ 40）5 1 （ 16）10 1 （ 8）20 1 （ 4）2.为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取 3 个以上健康成人血液，按A、B、O 型分别混合后，按上法制备。

⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。

根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。

5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。

备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。

⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。

【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。

【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。

【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。

输血前检测及核对制度一、输血前检测1、血型鉴定患者在输血前，必须进行 ABO 血型和 RhD 血型的鉴定。

采用正反定型两种方法进行血型鉴定，以确保结果的准确性。

对于血型鉴定结果有疑问或不明确的，应进行进一步的检测和确认。

2、抗体筛查对患者进行不规则抗体筛查，以发现可能存在的意外抗体。

抗体筛查应使用能够检测出常见不规则抗体的试剂和方法。

若抗体筛查结果为阳性，应进行抗体鉴定，明确抗体的特异性。

3、交叉配血试验完成血型鉴定和抗体筛查后，进行交叉配血试验。

交叉配血包括主侧和次侧配血，主侧是患者血清与供血者红细胞反应，次侧是患者红细胞与供血者血清反应。

交叉配血试验应在规定的时间内完成，并记录结果。

4、传染病检测对患者进行输血相关传染病的检测，包括乙肝表面抗原（HBsAg）、丙肝抗体（抗HCV）、艾滋病抗体（抗HIV）、梅毒螺旋体抗体等。

检测方法应符合国家相关标准和规范，检测结果应准确可靠。

传染病检测结果应记录在患者的病历中，并按照相关规定进行报告和处理。

5、血常规和凝血功能检测输血前对患者进行血常规检查，了解血红蛋白、红细胞、白细胞、血小板等指标。

对于有凝血功能障碍或出血倾向的患者，进行凝血功能检测，如凝血酶原时间（PT）、部分活化凝血活酶时间（APTT）等。

二、输血前核对1、患者信息核对输血前，医护人员应仔细核对患者的姓名、性别、年龄、住院号、床号等基本信息，确保无误。

核对患者的血型鉴定结果、抗体筛查结果、交叉配血试验结果等输血相关检测报告。

2、血液制品核对输血科工作人员在发放血液制品时，应与取血人员共同核对血液制品的血型、血量、有效期、血袋完整性等信息。

核对无误后，双方在血液制品发放和领取记录上签字确认。

3、输血过程核对输血开始前，护士应再次核对患者信息和血液制品信息，确认无误后方可进行输血。

输血过程中，密切观察患者的反应，如有异常应立即停止输血，并进行相应的处理。

三、输血记录1、输血前的检测结果、核对情况以及输血的指征、血液制品的种类和数量等信息应详细记录在患者的病历中。

输血科检验项目详解输血科作为医院中负责血液安全与管理的重要科室，承担着血型鉴定、交叉配血、抗体筛查以及输血相关疾病的检测等多项任务。

随着医学的不断发展，输血科检验项目也日益丰富和完善，为确保临床输血的安全性和有效性提供了有力保障。

本文将详细介绍输血科的主要检验项目及其在临床上的意义。

一、血型鉴定血型鉴定是输血科最基础也是最关键的检验项目之一。

它主要包括ABO血型和Rh 血型鉴定。

1.ABO血型鉴定ABO血型系统是人类最重要的血型系统，根据红细胞表面抗原的不同，将血液分为A型、B型、AB型和O型。

ABO血型鉴定主要采用凝集法，通过检测红细胞与相应抗体的反应来确定血型。

正确的ABO血型鉴定是安全输血的前提。

2.Rh血型鉴定Rh血型系统是继ABO血型系统之后发现的一个重要血型系统。

Rh阳性表示红细胞表面存在Rh抗原，而Rh阴性则表示不存在。

Rh血型不合的输血可能导致严重的输血反应，因此Rh血型鉴定同样具有重要意义。

二、交叉配血交叉配血是在输血前必须进行的检验项目，其目的是确保供血者的血液与受血者的血液相容，避免输血反应的发生。

交叉配血主要包括主侧配血和次侧配血两个步骤。

主侧配血是将供血者的红细胞与受血者的血清进行混合，观察是否发生凝集反应；次侧配血则是将受血者的红细胞与供血者的血清进行混合，同样观察凝集反应。

只有当主侧和次侧配血均不出现凝集反应时，方可进行输血。

三、抗体筛查与鉴定抗体筛查与鉴定是输血科另一项重要的检验项目，主要用于检测血液中是否存在不规则抗体。

不规则抗体是指除ABO血型系统以外的其他血型系统所产生的抗体。

这些抗体的存在可能导致输血反应或溶血性疾病的发生。

通过抗体筛查与鉴定，可以及时发现并处理这些潜在的风险。

四、输血相关疾病检测为确保输血安全，输血科还承担着一系列与输血相关疾病的检测任务。

这些疾病包括乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等传染病，以及血红蛋白病、红细胞酶缺陷等遗传性疾病。

通过这些检测，可以筛选出健康的供血者，降低输血传播疾病的风险。

疑难血型鉴定及交叉配血处理流程一、正反定型不一致1、重复试验（严格正规操作）。

2、重新取血（以纠正污染或弄错标本造成的不符），溶血标本不能用于合血。

3、洗涤红细胞后进行以下试验（正反定型凝集低于2+的，应首先怀疑是由于亚型或抗原抗体活降低引起。

）1）、用自身血清、红细胞做定型对照，检验自身有无完全抗体。

2）、用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。

3）、用抗A、抗AB、抗A1和抗H进行正定型：①A亚型细胞与抗A、抗AB的凝集强度低于A1细胞，但与抗H的凝集强度高于A1细胞（3+以上）；②A亚型（特别是A2中约有1-8%会产生抗A1），与抗A1基本不发生凝集。

③用抗AB（O型血清或血浆）是因为它的抗A效价较高，与弱A和弱B抗原亲和力强。

4）、分别用A1型和A2型红细胞反定型检查血清中有无抗A1存在（A亚型中有部份会产生抗A1，能与A1发生凝集，但不与A2凝集。

）5）、询问病史，判断是否是由于病人抗体缺失或减弱引起反定型错误，可延长反应时间，或用灵敏度更高的血型卡做反定型。

6）、被检红细胞做直抗（观察有无被抗体致敏的情况），若为阳性，应将细胞放散至阴性后再定血型。

4、若还不能确定血型，应增加血型物质的检测（如唾液等）。

二、交叉配血不合（一）主侧端不相合1、血型鉴定不正确,重新鉴定血型。

2、病人血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原反应。

3、供血者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白试验阳性。

4、病人血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性。

5、试验系统被污染。

（二）次侧端不相合1、供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗体。

2、病人与供血者的ABO血型不相合。

3、病人的红细胞已经包被了抗体，直接抗人球蛋白试验阳性。

4、抗筛阴性，而次侧不合多由自身抗体引起（此是抗人球配血不合，而聚凝胺配血通过可输血）。

（三）配血不合的主要因素1、血型是否正确。

输血科操作流程详解输血作为一种重要的治疗手段，在医疗领域具有不可替代的地位。

输血科负责确保输血过程的安全、有效和高效，因此，拥有一套标准、规范的操作流程至关重要。

本文将详细阐述输血科的操作流程，包括输血前的准备、输血过程中的监控以及输血后的评估等环节。

一、输血前准备1. 医嘱审核输血科在接收到临床医生的输血申请后，首先要对医嘱进行审核。

审核内容包括：患者的基本信息、输血原因、输血类型、输血量等。

确保医嘱符合输血指征，避免不必要的输血。

2. 血型鉴定与交叉配血在输血前，必须对患者进行血型鉴定，以确保输注的血液与患者血型相匹配。

同时，进行交叉配血试验，检测患者血清中是否存在针对供血者红细胞的抗体，以预防输血反应的发生。

3. 血液制品选择根据患者的具体病情和输血目的，选择适当的血液制品。

常见的血液制品包括：红细胞悬液、血浆、血小板等。

在选择血液制品时，要确保其质量、安全性和有效性。

4. 输血器具准备准备输血所需的器具，如输血器、针头、消毒液、棉签等。

确保这些器具无菌、无热原，并在有效期内。

二、输血过程监控1. 患者身份核对在输血前，核对患者的身份信息，包括姓名、年龄、性别、住院号等，确保患者与输血申请单上的信息一致。

2. 血液制品核对核对所输注的血液制品的标签信息，包括供血者姓名、血型、血液制品类型、有效期等。

确保血液制品与患者需求相匹配，且在有效期内。

3. 输血速度控制根据患者的具体病情和输血类型，控制输血速度。

一般来说，成人输血速度约为每分钟4-6ml，儿童酌减。

对于年老体弱、婴幼儿及有心肺功能障碍的患者，应适当减慢输血速度。

4. 输血反应监测在输血过程中，密切观察患者有无输血反应，如发热、寒战、皮疹、呼吸困难等。

一旦发现输血反应，应立即停止输血，报告医生，并采取相应的救治措施。

5. 输血记录详细记录输血过程，包括输血开始时间、结束时间、输血种类、输血量、输血速度、患者反应等信息。

输血记录应真实、准确、完整，以便日后查阅和分析。

疑难血型检测及混合配血处理流程血型检测是检测一个人的血液所属血型的过程。

在正常情况下，人类血液可分为ABO血型系统和Rh血型系统。

疑难血型检测是指那些不能明确确定血型的血样，或在一些特殊情况下，涉及到了其他血型系统的血样。

1.血样采集：采集患者的静脉全血样本，注意遵守无菌操作，防止外界污染。

2.ABO血型鉴定：使用特定的抗血清或抗血型抗体来检测血样中存在的A、B抗原和相应的抗体。

3.Rh血型鉴定：使用特定的抗血清来检测血样中的Rh抗原。

4. 常见血型抗原鉴定：除了ABO和Rh血型，还需进行其他常见血型抗原（如Kell抗原、Duffy抗原等）的鉴定。

5.血型交叉试验：将供体血样与受者血样进行交叉配血试验，通过观察混合后的凝集反应和溶解反应来判断血型的相容性。

6.疑惑血型抗原鉴定：对于无法确定血型的情况，需使用特殊试剂来检测特定的血型抗原。

在进行混合配血处理时1.确定血型相容性：根据受者的血型及抗体情况，与供者的血型进行配对，确保不会发生严重的血型不相容反应。

2.交叉配血试验：将受者的血样与供者的血样进行交叉配血试验，观察凝集和溶解反应，确认供者血样与受者血样的相容性。

3.没有完全相容性的情况处理：若受者有多种抗体，导致没有完全相容性的情况，需要根据抗体特异性和滴度来选择相对相容性较好的供者血样。

4.选择最佳供者：根据受者的血型与抗体情况，选择合适的供者血样。

在选择供者时，还需考虑与受者的血数量、组织相容性等因素。

5.监测治疗效果：完成配血后，需要监测受者的治疗效果，包括血红蛋白水平、血小板计数等指标，确保配血的有效性和安全性。

总结起来，疑难血型检测及混合配血处理流程包括血样采集、血型鉴定、交叉配血试验、选择最佳供者和监测治疗效果等步骤。

在进行这些步骤时，需严格遵守操作规范，防止交叉感染和误配等危险。

同时，根据不同的疑难血型情况，可能需要使用特殊试剂和技术来进行鉴定和处理。

血型检测和配血处理的准确性和安全性对于患者的生命和健康至关重要，因此必须由经验丰富的专业人员进行操作。

血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤一.血型鉴定1.排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。

2.标本准备分离患者的血浆，取一滴压积红细胞，三次洗涤，制备患者2%-5%红细胞悬液。

3.加样ABO正定型：1滴（50ul）抗A、抗B试剂加1滴（50ul）患者红细胞悬液。

ABO反定型：1滴（50ul）患者血清加1滴（50ul）反定型试剂红细胞。

RhD定型：1滴（50ul）抗D血清加1滴（50ul）患者红细胞悬液。

4. 结果判断离心（2档）：轻摇试管，肉眼观察有无凝集，记录ABO、RhD血型结果。

二.不规则抗体筛查（生理盐水法+凝聚胺法）1.排管标记01、02、03及自身对照管2.加样各试管分别加入相应的患者血清2滴（100ul）及筛选细胞1滴（50ul）。

3.结果观察离心（2档），观察结果先看上清液有无溶血，轻轻混匀，肉眼观察有无凝集，结果判断并记录。

各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留约0.1ml，轻轻混匀肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失显微镜检查三.交叉配血试验（生理盐水法+凝聚胺法）1.标本准备分离供血者血浆与红细胞三次洗涤，制备供血者2%-5%红细胞悬液2.排管标记排管，主侧、次侧及自身对照管3.加样各试管分别加入相应的备检血清2滴（100ul）及2%-5%备检红细胞悬液1滴（50ul）4. 结果观察离心（2档），观察结果先看上清液有无溶血轻轻混匀，肉眼观察有无凝集结果判断并记录各试管分别加入低离子介质0.65ml，轻轻混匀（参照试剂说明书）各试管再分别加凝聚胺溶液2滴（100ul）混匀，离心先观察上清液有无溶血弃去上清液，留0.1ml，轻轻混匀.肉眼观察有无凝集（凝者继续试验，否则查找原因并重复试验）各试管分别加入重悬液2滴（100ul），轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失肉眼观察阴性者，显微镜检查记录交叉配血结果A、B、O试验红细胞悬液的制备1. 分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液（见表格）红细胞悬液的配置悬液浓度（%）压实红细胞（滴）盐水（滴）2 1 2.0ml（40）5 1 0.8ml（16）10 1 0.4ml（8）20 1 0.2ml（4）2. 为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个以上健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。

血型鉴定、交叉配血、不规则抗体筛查标本的采集1患者准备及原始标本识别1.1患者血液采集前，应避免跑步、骑自行车、爬楼梯等剧烈的运动，要求患者休息 15 分钟后进行采血。

冬季采血时应保持血液循环通畅；1.2.静脉血标本由临床医护人员采集，遵照医嘱准备好标本采集前所用的容器以及消毒器材、一次性注射器、标本条形码、检验申请单或输血申请单等备用。

首先确认患者姓名、住院号和血型，并将带有姓名、住院号、床位、检测项目的标本条形码贴于标本采血真空试管上；1.3.采血前应向患者作适当解释，以消除疑虑和恐惧。

如遇患者采血后发生晕厥，可让患者平卧，通常休息片刻即可恢复。

必要时可嗅芳香氨酊，针刺或指掐人中、合谷等穴位； 1.4.认真核对医嘱及患者信息，严格执行查对制度，询问患者姓名而不是询问你是 XX;. 采血前必须询问病人或病人家属，核对腕带，对受检者的身份信息进行确认，采血完成后必须再次核对病人与标本的条码信息是否一致。

1.5.标本条形码上的条形码是原始标本惟一标识。

1.6 非急诊输血时，ABO、RHD 血型鉴定和交叉配血标本不允许同一时间采集完成。

2 临床医生的指导2.1.临床医生必须对患者讲清楚血型鉴定、交叉配血检测的目的、采血时间(住院患者应在早晨卧床时取血；其他人员应最好在空腹时采血，急诊除外)及相关注意事项；2.2.临床医生应向患者讲清楚采集血液标本前，使用青霉素、非那西丁、氨基比林、磺胺、甲基多巴、肝素、右旋糖苷等药物可能会影响检验结果；临床医生确认患者近期使用上述药物，应在申请单中注明或直接通知检验科工作人员，以利于实验结果的正确判断。

3申请单的填写、处理及保存3.1.临床医生在开具输血申请单时，应采用计算机程序进行申请，填写完整，包括患者姓名、性别、年龄、申请科室、病人住院号、申请日期、标本类型、申请目的等。

输血申请单还需要填写患者输血前检测项目结果，包括 ABO 及RhD 血型、血红蛋白含量、白细胞计数、血小板计数、凝血酶原时间、凝血酶时间、部分活化凝血酶原时间、ALT、HBsAg 抗-HCV、抗HIV、梅毒实验结果；急诊申请输血时可写待定。

交叉配血试验（凝聚胺法）标准操作程序【项目名称】交叉配血试验【实验用途】辅助用于交叉配血【实验原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引。

此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子介质溶液，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺试剂，它是一种高价阳离子多聚物，是肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的聚集。

最后，加入重悬液，重悬液具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性聚集散开，试验结果为阴性。

【标本种类】被检验者的血液，ABO正反血型Rh（D）血型抽3毫升不抗凝静脉血，交叉配血及不规则抗体抽5毫升不抗凝静脉全血。

血清标本：取静脉血沿管壁慢慢注入干燥试管内，待血液凝固后离心分离血清。

红细胞悬液的配制：用于一般实验，以血型鉴定，配血等的红细胞至少要用大量生理盐水洗一遍，通过洗涤可以去除红细胞表面的下述物质：1、少量血浆蛋白，如纤维蛋白原、抗球蛋白抗体，会干扰特异凝集和中和加入的抗体；2、已溶解红细胞的基质，有竞争抗体的作用；3、可容性的抑制物，如A、B、Chido、lewis等物质；4、抗凝剂，有抗非体作用，如第1次洗后有溶血现象，则要洗第2次，如第2次洗后上清液仍不完全清澈，这种红细胞不亦使用，应弃去。

红细胞悬液常用浓度有2％、5％和10％，配制时应将最后一次洗涤的红细胞水平离心机3000转/分离心，30分钟压积，在不除去上层盐水的情况下，吸取一定量的压积红细胞按体积百分比配成所需浓度的悬液。

实际工作中，可用一般洗涤压积的红细胞1滴加8滴生理盐水，配成的悬液约为10％，按此比例配成其他所需浓度的悬液2％的悬液一般用于滴定抗体效价，5％的悬液常用于血型鉴定或间接抗球蛋白试验，10%的悬液则用于测定抗体的亲合力。

不规则抗体筛查标准操作规程(一)检验目的检测受血者、孕妇等血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、ABO血型正确定型(不规则抗体干扰反定型)以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。

(二)检验原理1.盐水介质法IgM类不规则抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法就可以判断受检者血液中是否存在IgM类不规则抗体。

2.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而被不规则抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断受检者血液中是否存在不规则抗体。

3.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，而未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。

(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、手工微柱凝胶法、手工玻璃珠微柱法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法不规则抗体筛查及鉴定试验。

(四)设备性能参数各种用于不规则抗体筛查试验的检测系统性能指标参见相应说明书。

(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型配血系统、阅片灯箱、卡式专用离心机、孵育器、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液器、一次性移液枪头。

疑难交叉配血试验标准操作规程一、目的为规范疑难交叉配血试验操作，保证临床输血安全有效。

二、适用范围输血科负责疑难交叉配血试验的工作技术人员。

三、原理疑难交叉配血仅指ABO血型鉴定困难，红细胞不规则抗体筛选阳性或者受血者是自身免疫性溶血性贫血（AIHA)的患者等情况下的交叉配血试验。

配血前须确定受血者ABO血型或者不规则抗体的特异性，选择ABO血型相容的红细胞或者不规则抗体对应阴性抗原的红细胞进行试验。

四、步骤和方法（1）ABO血型鉴定不确定时，按照《ABO疑难血型鉴定操作规程》确定血型后再选择与ABO血型相同或相容性的血液进行交叉配血。

（2）冷型自身抗体1、按照《吸收试验操作规程》，对受检者血清进行冷自身抗体的吸收和去除冷自身抗体红细胞的制备。

2、对去除冷自身抗体的血清进行不规则抗体的筛选，结果若为阴性则用该血清和去除冷自身抗体红细胞分别和血型相容的献血者血液进行交叉配血试验。

（3）温型AIHA患者配血1、采用单特异性抗-IgG和抗-C3d试剂做DAT，鉴别溶血原因是IgG还是补体引起的。

2、若为抗-C3d阳性、抗-IgG阴性，则选择ABO及RhD血型相容的献血者血液进行配血，或者用单特异性抗-IgG试剂进行抗球蛋白法交叉配血，输注主侧相合的洗涤红细胞。

3、若为抗-IgG阳性、抗-C3d阳性或者阴性，则与多名献血者血液分别进行主侧交叉试验，选择主侧相合或者凝集最弱献血者的洗涤红细胞。

也可对抗凝标本的红细胞进行充分放散试验，对不抗凝标本血清进行完全吸收试验后分别与血型相容的血液进行交叉配血。

（4）不规则抗体筛选阳性，已确定为特异性同种抗体的患者，采用与其相同特异性的单克隆抗体试剂进行对应的抗原阴性的红细胞进行交叉配血。

不规则抗体筛选阳性，但不确定特异性的同种抗体的患者，随机和多名献血者血液进行交叉配血，选择相容的血液进行输注。

（1）结果判断：主、次侧均无溶血、无凝集表示配血相合；对于AIHA已经排除同种抗体的存在，而所有交叉配血又不相合时，可选择凝集强度弱于自身凝集的血液。

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