不规则抗体筛查与鉴定
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不规则抗体筛查的判断和意义摘要:目的:探讨分析不规则抗体筛查的判断和意义。
方法:选择我院2013年10月到2014年10月期间所接受的350例输血治疗患者来进行研究,并把他们设为实验组,其中女157例,男98例,然后选取我院相同的年月份内接受的95名血型鉴定患者,他们都是没有接受过异体血液,女65例,男30例,设为对照组。
结果:实验组不规则抗体阳性率为3.84 %,对照组不规则抗体阳性率为0.96%,两组间具有统计学差异(P<0.05)。
结论:在输血之前,进行相应的血液不规则抗体的检查是非常有必要的,可以有效降低不相容性血液的输血反应,对于有过输血历史或曾经接受过血液方面有关的治疗的患者,或者是有过妊娠经历的女士,在对其输血前筛查不规则抗体变得更为重要,能够有效的避免阳性不规则抗体对人身的威胁。
关键词:不规则抗体;筛查;判断;意义不规则抗体就是指除了正常血型ABO意外的其他的血型与身体内的血液发生反应而产生的抗体,这类抗体与自身是不匹配的。
不规则抗体不能和血细胞抗原相结合,不然会对我们的健康产生极大的危害,甚至危及生命。
要想为受血者选择合适的供血者血液成份,确保临床输血安全有效的进行,就需要对需要输血的患者进行输血前不规则抗体筛查。
因此,在输血之前对不规则抗体进行筛查十分必要。
1 研究对象选择我院2013年10月到2014年10月期间所接受的350例输血治疗患者来进行研究,并把他们设为实验组,其中女157例,男98例,然后选取我院相同的年月份内接受的95名血型鉴定患者,他们都是没有接受过异体血液,女65例,男30例,设为对照组。
2 方法2.1 一般方法输血前空腹采集患者静脉血3ml,离心后收集血浆,随后用微柱凝胶法筛查收集到的血浆,严格按照说明书操作,微柱凝胶法的详细内容可以参考下面的参考文献。
根据红细胞所在的柱体位置来判断红细胞为阴性还是阳性,也以此判断红细胞是否与预支相应的抗体发生凝聚作用。
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤一.1. 血型鉴定排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。
2.标本准备分离患者的血浆,取一滴压积红细胞,三次洗涤,制备患者 2%-5%红细胞悬液。
3.加样ABO正定型: 1 滴( 50ul )抗 A、抗 B 试剂加 1 滴( 50ul )患者红细胞悬液。
ABO反定型: 1 滴( 50ul )患者血清加 1 滴( 50ul )反定型试剂红细胞。
RhD定型: 1 滴( 50ul )抗 D 血清加 1 滴( 50ul )患者红细胞悬液。
4.二. 结果判断离心( 2 档):轻摇试管,肉眼观察有无凝集,记录ABO、RhD血型结果。
不规则抗体筛查(生理盐水法+凝聚胺法)1.排管标记 01、 02、 03 及自身对照管2. 加样各试管分别加入相应的患者血清 2 滴( 100ul )及筛选细胞 1 滴( 50ul )。
3.结果观察离心( 2 档),观察结果先看上清液有无溶血,轻轻混匀,肉眼观察有无凝集,结果判断并记录。
各试管分别加入低离子介质,轻轻混匀(参照试剂说明书)各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴( 100ul )混匀,离心先观察上清液有无溶血弃去上清液,留约,轻轻混匀肉眼观察有无凝集(凝者继续试验,否则查找原因并重复试验)各试管分别加入重悬液 2 滴( 100ul ),轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min 内消失显微镜检查三. 交叉配血试验(生理盐水法+凝聚胺法)1.标本准备分离供血者血浆与红细胞三次洗涤,制备供血者 2%-5%红细胞悬液2.排管标记排管,主侧、次侧及自身对照管3.加样各试管分别加入相应的备检血清 2 滴( 100ul )及 2%-5%备检红细胞悬液 1 滴( 50ul )4.结果观察离心( 2 档),观察结果先看上清液有无溶血轻轻混匀,肉眼观察有无凝集结果判断并记录各试管分别加入低离子介质,轻轻混匀(参照试剂说明书)各试管再分别加凝聚胺溶液 2 滴( 100ul )混匀,离心先观察上清液有无溶血弃去上清液,留,轻轻混匀肉眼观察有无凝集(凝者继续试验,否则查找原因并重复试验)各试管分别加入重悬液 2 滴( 100ul ),轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min 内消失肉眼观察阴性者,显微镜检查记录交叉配血结果A、 B、O试验红细胞悬液的制备1.分别采取已知A、 B、O 三种血型的红细胞,经盐水洗涤 3 次,以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液(见表格)红细胞悬液的配置悬液浓度( %)压实红细胞(滴)盐水(滴)2 1 ( 40)5 1 ( 16)10 1 ( 8)20 1 ( 4)2.为了防止红细胞悬液敏感性不一致,可随机采取 3 个以上健康成人血液,按A、B、O 型分别混合后,按上法制备。
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程1.检验目的不规则抗体筛选和鉴定可在交叉配合之前进行或一起进行,这样有利于患者抗体的早期确认及鉴定,发现临床上有意义的抗体,避免一些可能的情况而造成病情的延误。
2.检验方法分盐水介质法、抗球蛋白法和微柱凝胶法。
3.检验原理让待检者的血清与已知血型的试剂红细胞即筛选红细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套)起反应,以发现在37℃中有反应活性的抗体。
这种抗体可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应、或使输入的红细胞存活期缩短等。
当不规则抗体筛选试验阳性后,再进行不规则抗体鉴定,即利用谱红细胞(11套鉴定细胞)与待检者的血清反应,根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别。
4.标本要求受检者不抗凝静脉血4.0ml,分离血清,48小时内使用5.试剂5.1.筛选红细胞:由2或3人份的O型红细胞组成为一套试剂,每套试剂筛选红细胞中至少有以下常见的抗原:D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a、Jk b等。
每次用3套试剂(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)进行抗体筛选,见表1005-1。
5.2.鉴定谱细胞:除包括常见的抗原以外还有:C w、Kp a、Kp b、Js a、Js b、Lu a、Lu b、Xr/min a等。
每次用11套试剂进行抗体鉴定,见表1005-2。
5.3.抗球蛋白试剂:多特异性抗球蛋白血清(IgG、C3d)。
5.4.致敏红细胞(质控细胞)。
5.5.0.9%生理盐水。
5.6.Coombs微柱凝胶卡。
6.器材试管、吸管、37℃水浴箱、台式离心机、滤纸、微量加样器等。
7.操作程序7.1.盐水介质法7.1.1.取受检者血清2滴于标记有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3支小试管中。
7.1.2.对应加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套2%~5%筛选红细胞生理盐水悬液1滴,37℃孵育30分钟。
7.1.3.以3000r/min离心10秒,观察凝集和溶血情况,并记录反应情况于表1005-1中。
如果抗体筛选试验阳性,继续做以下试验。
不规则抗体鉴定注意事项
1. 嘿,一定要记得采集血液样本的时候可不能马虎哟!就像给宝宝冲奶粉,水多了少了都不行呀!一定要严格按照要求来操作,不然检测结果可就不准确啦。
比如你采血量不够,那不就跟做饭盐放少了没味道一样嘛。
2. 哇哦,在进行抗体筛查时,要仔细再仔细呀!这可不是玩游戏,不能随随便便的。
就好比你搭积木,一块没搭好,整个就可能垮掉啦。
你说要是没认真做好筛查,那不就得重新来过,多麻烦呀。
3. 哎呀呀,试剂的选择可太重要啦!可不是什么试剂都能用的哦。
这就跟你挑衣服似的,得挑合适的呀。
要是随便选个不合适的试剂,那不就跟穿了双不合脚的鞋一样别扭嘛。
4. 嘿,实验操作的环境也不能忽视呀!要保持干净整洁呢。
这就好像你住的房间,要是乱糟糟脏兮兮的,你能舒服嘛?如果实验环境不好,那对结果也可能有影响呀。
5. 哇,对检测结果的判读可不能大意哟!这就像读书看字,得一个一个仔细看清楚呀。
如果判读错了,那不就跟认错人一样尴尬嘛。
6. 哎哟喂,结果的记录和保存可得做好呢!这就跟你写日记一样,要好好记下来呀。
要不然回头想找都找不到,那不就白做啦。
7. 记住啦,要是遇到不确定的情况,一定要去请教专业人员呀!别自己瞎捉摸哟。
这就好像你迷路了,不去问警察,自己瞎转悠,能找到路嘛?
我的观点结论就是:不规则抗体鉴定的每一个步骤都很关键,都要认真对待,一点都不能马虎,这样才能保证鉴定的准确性和可靠性呀!。
XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作,保证检查结果准确和临床输血安全、有效,依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。
2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。
3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定,但只对所筛选或鉴定的标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清(血浆)与筛选红细胞反应,检测受检者血清(血浆)中是否存在红细胞不规则抗体,红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应,根据反应格局鉴定抗体特异性。
7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等:玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
7.2. 检测环境:室温应控制在18~27℃,湿度应保持在30~70%。
8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂(抗IgG,C3d),均为有合格证件的正品。
②市售O型筛选红细胞:为三支以上不同人份的3%筛选红细胞,均为有合格证件的正品。
或自制O型筛选红细胞:选择已确认ABO血型为O型的健康者,采集EDTAK抗凝血2标本离心,取少许红细胞置于试管中,用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟(1000g),每次离心1分钟,离心后将上清液全部倒出],再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中,然后加入1ml生理盐水混匀,即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞;依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。