人(human)凝血酶敏感蛋白1(tsp-1)ELISA试剂盒说明书
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人凝溶胶蛋白(Gelsolin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:7.8ng/ml-500ng/ml最低检测限:1.95ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人凝溶胶蛋白,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中凝溶胶蛋白含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
概述凝溶胶蛋白(Gelsolin)是凝溶胶蛋白超家族的成员之一,是一种重要的肌动蛋白结合蛋白,其通过切断、封端肌动蛋白丝,或使肌动蛋白聚集成核等方式来控制肌动蛋白的结构。
凝溶胶蛋白除了在重组肌动蛋白丝中发挥作用以外,还在细胞运动、控制细胞程序性死亡等细胞活动中发挥重要的作用。
此外,肿瘤细胞中凝溶胶蛋白的表达量也发生变化。
凝溶胶蛋白的变异还是某些遗传疾病的基础。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗凝溶胶蛋白抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗凝溶胶蛋白抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的凝溶胶蛋白呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
REV20190712仅供研究,不用于临床诊断。
客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。
产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒(Human VEGF ELISA KIT)产品货号:H6139S, H6139M, H6139L产品规格:24T, 48T, 96T产品内容:注:终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。
储存条件4℃避光保存,有效期见外包装。
开封后,保存温度详见说明书。
产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒,可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。
人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白,基因定位于第6号染色体长臂,由8个外显子和7个内含子交替构成,约14 kb。
由于mRNA剪接方式不同,产生了单链分别含121,145,165,183,189和206个氨基酸的不同变异体。
VEGF 121分子量约为34-46 kDa,是可溶性分泌型蛋白质,以游离状态存在,不能与肝素结合;VEGF 165分子量为45 kDa,30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质,其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。
VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。
VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。
骨骼肌,心肌,肝细胞,成骨细胞,中性粒细胞,巨噬细胞,角质形成细胞,血小板,褐色脂肪组织,CD34+细胞,星形细胞,神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。
血清和血浆样本均可检测到VEGF,由于血小板可释放VEGF,因此血清中VEGF含量较高。
VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为2.2pg/ml ,与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
IL-1即白细胞介素-1(简称白介1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。
IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。
正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。
IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)白蛋白(Albumin)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被白蛋白(Albumin)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白蛋白(Albumin)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、15、30、60、120、240ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
2022年修订第一版(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H0064c产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人内皮素1(ET-1)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human ET-1(Endothelin 1) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话技术部电话************电子邮箱(销售)********************电子邮箱(技术)**************************网址:具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中ET-1浓度。
人结蛋白ELISA试剂盒说明书人结蛋白ELISA试剂盒说明书供应商:上海乔羽生物有限公司ELISA试剂盒规格:(1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔(2) 规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔人结蛋白ELISA试剂盒说明书Kit composition:Sealing film: 2 (48) / 2 (96)Specifications: 1 copiesSealing bag: 1Standard: 2700ng / L 0.5 * 0.5ml * 1 bottles, 1 bottles are stored in 2-8ELISA package is board: 1 X 48 x 961 2-8 stored inSample dilution: 3ml * 1 ml * 1 bottles of 6 bottles are stored in 2-8Color agent: Liquid 3ml * 1 ml * 6 bottles of 1 bottles in 2-8Color reagent B Liquid 3ml * 1 ml * 1 bottle 6 bottles stored in 2-8 Termination solution: 3ml * 6ml * 1 bottles and 1 bottles are stored in 2-8Concentrated laundry liquid: (2 * 20) * 1 bottles (20ml * 30) * 1 bottles stored in 2-8elisa试剂盒价格,elisa试剂盒说明书,elisa检测试剂盒人结蛋白ELISA试剂盒说明书试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。
实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中P21蛋白(P21)的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被人P21蛋白(P21)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人P21蛋白(P21)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人P21蛋白(P21)含量。
【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:48、24、12、6、3、1.5ng/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
TSP-1,牛血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA检测试剂盒Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)【血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存上海古朵血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:18pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
人凝血酶(TM)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,组织及相关液体样本中凝血酶(TM)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人凝血酶(TM)水平。
用纯化的人凝血酶(TM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入凝血酶(TM),再与HRP 标记的凝血酶(TM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的凝血酶(TM)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人凝血酶(TM)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:45ng/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
人凝血酶血栓调节蛋白复合物试剂盒,人(T-TM)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物供应This reagent is only for the study of the use of specimens: serum or plasmaShanghai Joe feather biological science and Technology Co., Ltd.使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)含量。
试验原理:T-TM试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知T-TM浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将T-TM和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中T-TM的浓度呈比例关系。
凝血酶血栓调节蛋白复合物试剂盒,elisa试剂盒说明书,ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,人elisa试剂盒说明书试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80ng/ml 1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗T-TM抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。
凝血酶敏感蛋白-1对胆囊癌细胞生长增殖的作用【摘要】目的探讨研究凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)对胆囊癌细胞株GBC-SD 生长增殖的作用及其作用途径。
方法根据处理因素将胆囊癌细胞分为:空白对照组,TSP-1组,CD36单抗阻断组、CD47单抗阻断组。
用四唑盐比色法(MTT)和流式细胞术检测TSP-1及受体CD36、CD47对胆囊癌细胞生长、细胞周期的影响。
结果TSP-1组、CD36阻断组、CD47阻断组细胞生长明显低于对照组(抑制率分别为:23.63%,9.57%,18.13%)。
CD36阻断组的抑制率小于CD47阻断组。
TSP-1组G0/G1期细胞数增加,S期和G2/M期细胞数减少,与对照组和CD36阻断组相比有显著性差异。
增殖指数分别为:对照组(39.55±2.12)、TSP-1组(26.21±0.61)、CD36阻断组(36.43±1.28)、CD47阻断组(30.73±0.38);各组之间两两比较均有差异。
结论TSP-1可对抑制胆囊癌细胞的生长,通过与受体CD36的结合阻滞胆囊癌细胞停止于G0/G1期可能是主要的作用途径。
【Abstract】Objective To explored the role and the mechanism of TSP-1 on the growth and cell cycle of of gallbladder carcinoma cellline GBC-SD.Methods The cell line was divided into 4 groups:control group,TSP-1 group,CD36-blocked group,CD47-blocked group.To detect the role of TSP-1,CD36,CD47 on cell growth by MTT test,on cell cycle by Flow cytometry.Results The growth of GBC-SD in other group were significantly slower than in control group,inhibitory rate was respectively 23.63%,9.57%,18.13%.Inhibitory effect of growth in CD36-blocked group was lower than in CD47-blocked group.Flow cytometry indicated that the cell number in G0/G1 phase in TSP-1 group increased than that in control group and CD36-blocked group,the cell number in S and G2/M phase in TSP-1 group reduced than in control group.The proliferation index was respectively:(39.55±2.12)(control group)、(30.73±0.38)(36.43±1.28)(CD36-blocked group)、(26.21±0.61)(TSP-1 group)、(CD47-blocked group),the difference among groups were significantly.Conclusion TSP-1 can inhibit the growth of HCCLM3 cell through combining with the receptor CD36.【Key words】Gallbladder carcinoma;Thrombospondin-1,cell cycle;Growth;Proliferation胆囊癌的发病率近年来有增加的趋势,发现时已多属中晚期,手术切除率低,生长快,恶性程度高[1],胆囊癌的生长增殖是在体内各种生长因子下共同作用的结果。
凝血酶敏感蛋白—1及其受体CD36在支气管肺发育不良患儿中的表达及临床意义目的:探讨凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)及其受体CD36在支气管肺发育不良(BPD)患儿血清、支气管肺泡灌洗液中的表达及临床意义。
方法:采用ELISA 法检测45例BPD患儿与32例非BPD新生儿血清、支气管肺泡灌洗液的TSP-1及CD36表达水平并进行比较,同时对BPD患儿的TSP-1及CD36表达进行相关性分析。
结果:BPD患儿血清、支气管肺泡灌洗液的TSP-1及CD36水平均高于正常儿童(P<0.05);BPD患儿血清、支气管肺泡灌洗液的TSP-1与CD36表达均呈正相关性关系(P<0.05)。
结论:TSP-1及其受体CD36可能参与了新生儿BPD的发病过程并起协同致病作用,具体机制有待进一步研究。
[Abstract] Objective:To investigate the expression and clinical significance of thrombospodin-1 (TSP-1)and its receptor CD36 in bronchopulmonary dysplasia (BPD)children serum and bronchoalveolar lavage fluid.Method:The expression of TSP-1 and CD36 in serum and bronchoalveolar lavage fluid of BPD children(n=45)and non-BPD neonatus(n=32)were detected by ELISA.Correlations of TSP-1 and CD36 levels and the comparisons between groups were analyzed respectively.Result:The expression of TSP-1 and CD36 in serum and bronchoalveolar lavage fluid of BPD children were significantly higher than those of non-BPD neonates respectively (P<0.05).There was a positive correlation relationship between the expression of TSP-1 and CD36 in serum and bronchoalveolar lavage fluid(P<0.05).Conclusion:TSP-1 and CD36 may play a role in the pathogenesis of neonatus BPD and act cooperatively through an unexplored mechanism,the specific mechanism needs further study.[Key words] Thrombospodin-1;CD36;Bronchopulmonary dysplasia;ELISA支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)常见于因急性呼吸窘迫而进行机械通气和氧疗的早产儿,其病理特征为严重的肺泡和肺血管发育不良,但病因及发病机制至今仍未完全清楚。
HELLP综合征的研究进展郝小强【摘要】HELLP综合征是妊娠期高血压疾病的严重并发症,常危及母婴生命,是导致孕产妇及围生儿死亡的原因之一.近年来,国内外学者对其发病机制进行了大量研究,有母胎免疫失衡,血小板聚集与消耗,血管内皮功能障碍及先天性固有脂肪酸氧化失调等学说,但其发病机制目前尚未阐明,可能是子痫前期或子痫的严重并发症,也可能是一种独立的疾病.%HELLP syndrome is a serious life-threatening complication of hypertensive disorders in pregnancy, which is one of the main causes of maternal and perinatal mortality. In recent years, domestic and foreign scholars have done a lot of studies about its pathogenesis, such as immune imbalance, platelet aggregation and consumption, endothelial dysfunction, congenital disorder of oxidation of fatty acid, but its pathogenesis is still not clarified. It may be an independent disease or aserious complication of preeclampsia or eclampsia.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2013(019)001【总页数】4页(P123-126)【关键词】HELLP综合征;人类白细胞抗原G;凝血酶敏感蛋白1;长链L-3-羟酰CoA脱氢酶;瘦素【作者】郝小强【作者单位】南京医科大学附属南京医院,南京市第一医院妇产科,南京,210006【正文语种】中文【中图分类】R714.25HELLP 综合征(hemolysis,elevated serum lever of liver enzymes,and low platelets syndrome,HELLP syndrome)为妊娠期高血压疾病的严重并发症,常危及母婴生命,在临床表现上主要以溶血、肝酶升高和血小板减少等多见。
EK165-01Catalog Number EK165-48EK165–96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)浓度。
本产品仅用于科学研究,非诊断试剂,不能用于临床诊断。
一、产品介绍1.背景介绍胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)主要由非造血细胞如成纤维细胞、上皮细胞和不同类型的基质或基质样细胞产生。
它主要影响骨髓细胞、诱导单核细胞释放T 细胞虏获趋化因子和增强髓样(CD11c +)树突状细胞成熟。
研究表明,TSLP 还可激活位于表皮的特定树突状细胞亚群—朗格汉斯细胞的成熟。
胸腺TSLP 激活髓样和浆细胞样(CD123+)树突状细胞会导致调节性T 细胞的产生。
TSLP 通过胸腺基质淋巴细胞受体CRLF2和IL-7Rα链组成的异源二聚体受体复合物产生信号。
结合STAT5后就会诱导其发生磷酸化,进而导致上游转录因子的表达。
TSLP 的表达与许多疾病包括哮喘、炎症性关节炎、特应性皮炎、湿疹及其它过敏状态有关。
2.检测原理本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。
特异性抗人TSLP 抗体预包被在高亲和力的酶标板上。
酶标板孔中加入标准品和待测样本,经过孵育,样本中存在的TSLP 与固相抗体结合。
洗涤去除未结合的物质后,加入生物素化的检测抗体孵育。
洗涤去除未结合的生物素化的抗体,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。
洗涤后,加入显色底物TMB ,避光显色。
颜色反应的深浅与样本中TSLP 的浓度成正比。
加入终止液终止反应,在450nm 波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。
3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。
2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。
3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变,都将影响结合反应。
4)本试剂盒在设计上去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素,并非所有可能的影响因素都已经去除。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、50、100、200、400、800ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
上海笃玛生物科技有限公司上海笃玛生物科技有限公司试剂盒性能1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:最低检测浓度小于1.0ng/mL。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Human thrombospondin1(TSP-1)ELISA KitinstructionIntended useThis TSP-1ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of TSP-1in the sample, this TSP-1ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus TSP-1concentration.The concentration of TSP-1in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum-Use a serum separator tube and allow samples to clot for30minutes before centrifugation for10minutes at approximately3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma-Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifuge samples for30minutes at3000×g at2-8℃within30minutes of collection.Store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorPrecautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal e only the reagents supplied by manufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips上海笃玛生物科技有限公司should be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature (20-25°C)Materials suppliedName96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent 6.0ml 3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A 6.0ml 3.0mlChromogen Solution B 6.0ml 3.0mlStop Solution 6.0ml 3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note:Standard(S0→S5)concentration was followed by:0,50,100,200,400,800 ng/mlReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.Assay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.3.Add Sample:Add testing sample10μl then add Sample Diluent40μl to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle, manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from light.7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.上海笃玛生物科技有限公司Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical(Y)axis versus the corresponding concentration on the horizontal(X)axis.2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on theY-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time ortemperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is1.0ng/ml6.StandardcurveStorage:2-8℃.validity:six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC ORDIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGHENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!上海笃玛生物科技有限公司。