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第三章样品制备样品制备（sample preparation）是农药残留分析方法的重要部分，它一般包括从样品中提取残留农药、浓缩提取液和去除提取液中干扰性杂质的分离净化等步骤，是将检测样品处理成适合测定的检测溶液的过程。
其目的是使样品经处理后更适合农药残留分析仪器测定的要求，以提高分析的速度、效率、准确度、灵敏度和精密度。
农药残留分析的样品种类多，其化学组成复杂，要使分析仪器能检测到痕量的残留农药，必须对样品进行细致的提取、浓缩和净化处理。
样品制备在农药残留分析中不仅最费时、费力、经济花费大，其效果好坏直接影响到方法的检测限和分析结果的准确性，而且还影响分析仪器的工作寿命。
在提取过程中要求尽量完全地将痕量的残留农药从样品中提取出来，同时又尽量少地提取出干扰性杂质；净化则要求在充分降低干扰分析的杂质的同时，最大限度地减少农药的损失。
很多情况下，当检测样品中农药残留量很低难以检出时，常常通过增大样品量和浓缩检测溶液体积来满足仪器最低检测限的要求。
3.1 样品制备的原理样品制备的原理主要是利用残留农药与样品基质的物理化学特性差异，使其从对检测系统有干扰作用的样品基质中提取分离出来。
化合物的极性和挥发性是指导样品制备最有用的理化特性。
极性主要与化合物的溶解性及两相分配有关，如在进行液液提取(liquid-liquid extraction)、固液提取(solid-liquid extraction)、液固提取(liquid-solid extraction)等操作时就是利用农药的极性这一理化特性。
而挥发性则主要与化合物的气相分布有关，如在进行吹扫捕集提取(purge-and-trap extraction)、顶空提取(headspace extraction)等操作时就是利用农药的挥发特性。
3.1.1 分子的极性和水溶性农药的极性和水溶性（polarity and water solubility）是选择提取和净化条件的重要参考依据，在残留农药的溶剂提取中常采用“相似相溶”原理，就是使用与农药极性相近的溶剂为提取剂，使残留农药在溶剂中达到最大溶解度。
农药残留快速检测流程一、前处理(一) 市场抽样：市场蔬菜样品的抽取应从同一货批的不同位置随机取样。
1、包装蔬菜的抽样：对于包装蔬菜（周转箱、纸箱、袋装等），同一货批样品，随机抽样，每件样品的取样量为1公斤。
2、散装蔬菜的抽样：散装蔬菜的抽样应与其总量相适应，每一货批蔬菜至少抽取5个样点。
在蔬菜个体较大情况下（大于2kg/个，样品至少由5个个体组成。
（二）样品的取样、制备和保存1 随机取5-10克样品（叶菜类取叶尖部位，瓜果类连皮带肉取样），放入小烧杯中，用剪刀剪成0.5cm*0.5cm大小，加蒸馏水至刚好将样品浸没。
2 置于超声波清洗器中震荡3分钟（如没有超声波清洗器可以用玻璃棒搅动，使菜叶与水分充分接触用手振摇1分钟）。
3 第一批最好做9个检样，同时做一个纯净水空白对照。
4 每剪完一个样品，剪刀要洗净后方可处理另一个样品，以免互相污染。
5、样品制备：将抽取的蔬菜样品混合，缩减成两份，一份作为检验样品，一份作为留样。
6、样品保存：样品应尽快检测。
当天不能检测，应保存于4度冷藏室中。
留样应低温冷冻保存。
二、样品测定步骤1 将农药残留速测仪接上电源预热，达到设定温度后即鸣笛提示。
取出速测卡，先将透明膜盖揭去，将速测卡沿中线对折一下，按农药残留速测仪说明书中的要求，将橙色药片向上插入试纸槽中。
2 用滴管吸取少量提取液，滴三滴至药片上，使其形成一个饱满的水珠。
3 加样完毕后，按开始键（START），速测仪自动计时，10分钟反应结束后会发出急促的提示音，此时合上仪器上盖，让橙红色药片与白色药片接触，3分钟显色反应完成后发出和缓的提示音。
结果判定打开速测仪上盖，观察和记录农药速测卡白色药片的颜色变化，蓝色为阴性，表明合格；浅蓝色为弱阳性，有微量农药残留，通常小于1mg/kg；白色为强阳性，表明农药残留大于1mg/kg不合格。
三、检测后处理1 将前处理装置，包括烧杯、滴管、剪刀等清洗干净，以免交叉污染。
2 用纸巾将仪器清洁，包括残留的水珠、菜叶、药片试剂。
农药残留分析中的样品前处理技术摘要：农药在保证和促进农林牧业发展，满足人们对农副产品需求方面发挥了显著作用，为了保护消费者的健康，加强农药残留的检测和控制显得十分重要，本文针对样品前处理技术进行了探讨。
20 世纪70 年代起，许多农药被禁止使用。
施用的农药进入环境后，不仅只以母体化合物存在，也会产生代谢物，加之环境介质的复杂性，使得对检测手段的要求越来越高。
农药残留分析前处理是农残分析检测的关键步骤，直接关系着整个分析过程的准确性与精密度。
农药多残留分析时进行样品前处理不仅要求尽可能完全提取其中的待测组分，而且还要求尽可能除去与目标物同时存在的杂质，以减少对检测结果的干扰，避免对色谱柱和检测器等的污染。
在样品前处理方面，索氏提取、振荡提取、液一液分配色谱、柱色谱等技术曾广泛使用。
尽管这些技术设备成本较低，但整个分析过程耗时长、误差较大。
有机溶剂的大量使用，也造成了对环境的污染。
目前，国际上较多使用固相萃取（sPE）、微波提取技术、凝胶层析（GPC）、加速溶剂提取（ASE）、基体分散固相萃取（MsPD）、超临界萃取（SFE）、固相微萃取技术。
我国目前仍主要采用采用传统的溶剂萃取，液液分配，柱层析净化，前处理方法自动化程度低、提取净化的效率不高、速度慢、环境污染严重。
前处理工作正朝省时、省力、低成本、减少溶剂消耗、降低环境污染、系统化、规范化、微型化和自动化方向发展：各种在线联用技术可避免样品转移损失，减少各种人为偶然误差。
农药残留检测的前处理主要有以下技术：一、相萃取（SPE）固相萃取是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，使其与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。
它建立在传统的液- 液萃取（LLE）基础之上，又克服了液- 液萃取及一般柱层析的缺点，具有有机溶剂用量少、待测组分回收率高、便捷、安全、高效等特点。
二、固相微萃取（SPME）固相微萃取是20 世纪90 年代兴起的一项新颖的样品前处。
一、二、首先进行样品液提取。
农药残留检测方法与步骤
检测样品样液提取方法
样品测量制剂添加量
三、取第一小吸液器先向各反应瓶中加入100ul酶。
四、再取另外一个大吸液器先向1号反应瓶中加入2.5ml缓冲液，其余反应瓶各加入对应提取液各2.5ml。
操 作 步 骤
取所要用到数量的反应瓶，从左到右依次顺序为1、2、3、4......。
七、10min后再用第三小吸液器分别吸取100ul底物到各反应瓶对应的比色皿中，再迅速将个反应瓶对应药液倒入比色皿放入主机检测。
八、
检测3min后查看结果，器对照△A值在0.3-0.8之间为正常后方可读取样品抑制率值，抑制率值>50%则产品农残超标，抑制率值<50%其产品合格。
五、再取第二小吸液器向各反应瓶中加入100ul显色剂，搅拌均匀放置10min。
六、静置药液的同时，打开主机预热10min。
第一章绪论农药残留：由于农药的应用而残存于生物体、农产品和环境中的农药亲体及具有毒理学意义的杂质、代谢转化产物和反应物等所有衍生物的总称。
农药残留根据使用有机溶剂和常规提取方法能否从基质中提取出来，分为：可提取残留和不可提取残留。
不可提取残留又分为：结合残留和轭合残留结合残留：农药亲体或代谢物与土壤中的腐殖质、植物体的木质素、纤维素通过化学键合或物理结合作用，牢固结合形成的残留物。
轭合残留：农药亲体或代谢物与生物体内耨写内源物质如糖苷、氨基酸、葡萄糖醛酸等在酶的作用下结合形成的极性较强、毒性较低的残留物。
初始残留量：在农药施用结束或暴露停止时发生的农药操了程度。
初始残留量的大小取决于农药施用和暴露量的大小，在此之后任一时间点的农药残留量则取决于初始残留量的降解速度残留半衰期：农药初始残留量至降解一半所需的时间农药残留毒性：因摄入或长时间重复暴露农药残留而对人、畜以及有益生物产生急性中毒或慢性毒害。
最大残留限量：农畜产品中农药残留的法定最大允许量，单位mg/kg。
农药残留分析：应用现代分析技术对残存于各种食品、环境介质中微量、痕量以至超痕量水平的农药进行的定性、定量测定残毒农药类型：除高毒农药外，构成突出残留毒性的农药有以下一些类型：①化学性质稳定，难以生物降解，脂溶性强，容易在生物体富集的农药，有机氯杀虫剂的许多品种都属于这一类②农药亲体或其杂质或代谢物具有三致性（致癌、致畸、致突变）的农药农药残留分析复杂的原因：①残留分析需分离和测定的物质在ng、pg、甚至fg水平，一次成功的分析需要有对许多参数的正确理解。
②样品使用农药历史的未知性和样品种类的多样性，造成了分析过程的复杂性。
③农药品种的不断增多，对农药多残留分析提出了越来越高的技术适应性要求。
农药残留分析可分为两类：单残留方法和多残留方法单残留方法：定量测定样品中一种农药残留的方法多残留方法：在一次分析中能够同时测定样品中一种以上农药残留的方法多残留方法可分为两类：选择性多残留方法多类多残留方法农药残留分析程序：样品采集，样品预处理，样品制备、分析测定选择农药残留分析方法时的考虑因素：1、目标农药的理化性质、分析任务的要求、样品的性质及样品来源的用药历史2、单残留或多残留方法3、考虑最大残留限量和方法检测限以及方法总误差4、分析时间和费用5、分析方法的有效性农药残留分析的发展表现了一下突出趋势：1、总体上，农药残留分析继续朝着安全，环保，高效，经济的方向快速发展2、样品处理出现了许多新技术3、在检测方面，多残留分析方法已经成为残留分析实验室的主要方法，4、以酶联免疫技术为代表的快速检测技术受到市场需求的刺激而发展迅速5、农药残留分析法的标准步伐加快，越来越多的农药残留实验室的质量控制和获得可，农药残留分析的技术与结果在国际间的协同化应用已成为可能6、世界经济一体化的趋势和现代人们日益强烈的质量和健康意识，农药残留已成为食品安全问题的重要构成，政府管理机构对农药残留的检测和管理正在形成完善的监控和决策体系第二章农残样品的采集农药残留分析样品按其来源可分为：主观样品、客观样品主观样品：人们为研究农药残留量与各种因素的关系，从设计的试验区内采集的样品。
农药残留量的分析方法色谱法是一种常见的农药残留分析方法，其原理是通过将样品分离为各个成分，并使用特定的色谱柱和检测器进行定量分析。
常用的色谱方法包括气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。
气相色谱法是一种高效、灵敏度高的分析方法，常用于分析挥发性或半挥发性农药。
在GC分析中，样品通常需要经过前处理步骤，如萃取、净化和浓缩，以便得到适于GC分析的样品。
萃取方法可以选择固相微量萃取（SPME）、固相萃取（SPE）或液液萃取等。
液相色谱法是一种基于液相萃取的分析方法，常用于分析极性、非挥发性或热稳定性差的农药。
常见的液相色谱方法包括高效液相色谱法（HPLC）和超高效液相色谱法（UHPLC）。
液相色谱法的前处理方法包括固相萃取、液液萃取和固相微量萃取等。
质谱法是一种灵敏度高、选择性好的分析方法。
质谱法常用于分析极低浓度的农药残留，如激光诱导击穿光谱法（LIBS）、质谱联用（MS/MS）和等离子体质谱法（ICP-MS）等。
质谱方法可以直接分析样品中的农药，而无需复杂的前处理步骤。
免疫分析法是一种快速、灵敏度高的分析方法，常用于农药残留的筛查。
免疫分析法基于抗原与抗体之间的特异性反应来检测和定量目标分析物。
常见的免疫分析法包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）和免疫传感器等。
除了上述方法外，还有其他一些常用的农药残留分析方法，如生物传感器法、电化学法和光谱法等。
这些方法具有操作简便、快速、灵敏度高和选择性好等特点。
总之，农药残留量的分析方法包括色谱法、质谱法和免疫分析法等。
根据不同的农药成分和分析目的，可以选择合适的分析方法来进行农药残留的检测和定量分析。
第一章绪论1、农药残留：指由于农药的应用而残存于生物体、农产品和环境中的农药亲体及其具有毒理学意义的杂质、代谢转化产物和反应物等所有衍生物的总称。
（P1）2、根据分离提取的程度：可提取残留和不可提取残留。
（填空）（P1）不可提取残留：又分为结合残留和轭合残留（1）结合残留：指农药亲体或代谢物与土壤中的腐殖质、植物体的木质素、纤维素通过化学键合或物理结合作用，牢固结合形成的残留物。
（2）轭合残留：指农药亲体或代谢物与生物体内某些内源物质（如糖苷、氨基酸、葡萄糖醛酸等）在酶的作用下结合形成的极性较强、毒性较低的残留物。
3、农药残留的来源（简答）（P2）（1）是来自施用农药后的直接污染。
农药直接应用于农作物、畜禽或环境介质（包括水、空气、土壤等）。
（2）是来自对污染环境中农药的吸收。
农药间接通过挥发、漂移、径流、食物或饲料等方式暴露于直接作用的受体。
（3）是来自生物富集与食物链。
用有农药残留的饲料饲喂家畜，或者在农药污染的土壤种植作物，就出现农药残留向家畜、作物的转移和蓄积。
4、农药残留量的影响因素农药残留量的大小取决于残留农药的降解速率（农药性质、受体性质及环境因素）。
①农药的性质：蒸汽压、稳定性（可降解性）、溶解性和分散性（施药方式）②分散性：农药在介质中的附着、分布、向大气的转移③受体的性质：农药的吸附、吸收、贮存和分布④植物的生长速率：对农药残留有显著的生长稀释作用⑤环境因子：如温度、降水、阳光、风等则影响农药的挥发、降解和转移等。
5、农药残留分析的目的和意义：①研究农药环境代谢，制定相关标准，注册和管理使用；②检测残留情况，以确定其质量和安全性，并作为安全评估标准和依据，满足监管；③检测环境介质（水、空气、土壤）和生态系生物构成的农药残留种类和水平，以了解环境质量和评价生态系统的安全性，满足环境监测与保护的管理。
6、农药残留分析特点：①残留水平低②分析过程的复杂性③技术要求提高7、农药残留分析方法（P4）（填空/名词解释）（1）单残留方法（SRM）（2）多残留MRM：①选择性多残留方法：指一种多残留方法仅分析同一类的多种农药残留。
