色谱柱的种类与评价
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色谱柱的分类及依据介绍如下:
色谱柱是色谱技术中的重要组成部分,它通常由填充物和柱壁组成,用于分离和纯化混合物中的化合物。
根据填充物的不同,色谱柱可以分为以下几类:
1.气相色谱柱
气相色谱柱是一种常用于分离气体混合物的色谱柱。
其填充物通常为无机物或有机物,如硅胶、活性炭、聚四氟乙烯和聚酰亚胺等。
气相色谱柱的选择应考虑到填充物的极性、热稳定性和化学惰性等因素。
2.液相色谱柱
液相色谱柱通常用于分离液体混合物中的化合物。
其填充物通常为无机物或有机物,如硅胶、氨基硅胶、聚苯乙烯和聚酰胺等。
液相色谱柱的选择应考虑到填充物的极性、孔径大小、表面积和耐化学性等因素。
3.离子交换色谱柱
离子交换色谱柱是一种用于分离和纯化离子的色谱柱。
其填充物通常是带有离子基团的树脂,如强碱性阳离子交换树脂和强酸性阴离子交换树脂等。
离子交换色谱柱的选择应考虑到填充物的离子官能团、离子交换容量和选择性等因素。
4.大孔径色谱柱
大孔径色谱柱是一种用于分离大分子化合物的色谱柱。
其填充物通常是具有大孔径的凝胶,如琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶等。
大孔径色谱柱的选择应考虑到填充物的孔径大小、交联度和表面积等因素。
综上所述,色谱柱的分类主要根据填充物的不同,填充物的选择应考虑到化学性质、孔径大小、表面积、选择性和稳定性等因素。
正确选择合适的色谱柱可以提高色谱分离的效率和精度,从而获得更加准确和可靠的分析结果。
液相色谱柱型号名称液相色谱技术是一种广泛应用于实验室和工业生产中的分离、纯化和分析技术。
而液相色谱柱作为液相色谱技术中不可或缺的组成部分,不同柱材质、柱型号都对色谱分离过程产生着重要影响。
以下是常用的液相色谱柱型号名称列表及其特点。
1. C18柱C18柱是一种经典的反相柱,在反相液相色谱分离中被广泛应用。
其最基本的特点是使用碳端基(-C18H37O)覆盖的硅胶基质,使得C18柱能够与极性化合物获得良好的相互作用,从而在分离过程中实现良好的分离效果。
C18柱的使用寿命长,稳定性高,适用于大多数样品分离。
2. C8柱C8柱与C18柱相似,但其具有更弱的相互作用能力。
因此,C8柱适用于一些更具极性的化合物分离,例如酚类、酮类和醛类等。
3. CN柱CN柱是一种极性的正相柱,在正相液相色谱分离中被广泛应用。
CN柱使用的是氰基覆盖的硅胶基质,能够与酸性和极性化合物获得良好的相互作用,对一些醇类、醛类和酮类等分子分离效果较好。
4. NH2柱NH2柱是一种偏极性正相柱,在正相液相色谱分离中应用较广。
NH2柱使用的是氨基覆盖的硅胶基质,能够与极性分子发生氢键作用。
NH2柱适用于如醇类、酮类、醛类、糖类等极性分子分离。
5. Phenyl柱Phenyl柱是一种反相柱,与C18柱相似,但其具有苯环的结构。
该结构赋予了Phenyl柱更强的π-π堆积相互作用,使得其中的芳香族化合物和芳基侧链能够得到更好的分离和识别。
6. C30柱C30柱是一种新型反相柱,在C18和C8柱之间。
C30柱的使用范围更广,能够处理更多的化学样品,例如脂肪酸、天然产物和药物等。
总之,不同的液相色谱柱型号具有不同的柱材质、柱层厚度、柱孔径、填充剂种类等特点,使用场合不同,选择的柱也不同。
选择合适的液相色谱柱型号来分离样品,将会获得更好的分离结果。
正相色谱柱类型
一、胶体硅基正相色谱柱
胶体硅基正相色谱柱是最常用的正相色谱柱,其主要由高纯度的硅胶为填充物,具有良好的催化性能和稳定性。
胶体硅基色谱柱广泛应用于生化、药学、环保等领域,适用于多种化学物质的分离。
二、亲水性正相色谱柱
亲水性正相色谱柱也称为极性分离柱,主要用于分离官能团极性比较接近的化学物质,如氨基酸、核苷酸、多肽等,其主要填充物为羟乙基纤维素等亲水性材料。
三、疏水性正相色谱柱
疏水性正相色谱柱具有电荷中性,疏水性较高,适用于分离疏水性化合物,如脂肪酸、脂溶性维生素等。
其填充物通常为碳链或含氟的材料。
四、离子交换正相色谱柱
离子交换正相色谱柱是一种将离子交换材料填充于色谱柱中的柱,主要用于离子的分离和富集。
其填充物种类较多,如强阳离子交换树脂、弱阳离子交换树脂、强阴离子交换树脂、弱阴离子交换树脂等。
五、金属氧化物正相色谱柱
金属氧化物正相色谱柱是一种由金属氧化物包裹在硅胶或多孔玻璃中的柱,常用的金属氧化物有二氧化钛、二氧化锆、氧化铝等。
该种色谱柱具有高的选择性和稳定性,适用于分离极性化合物,如酚类、多酚类、醛类等。
制备色谱柱种类色谱柱是分离和分析化学品混合物的常用工具,主要应用于高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)等分析方法中。
根据使用领域和色谱柱填料材料的不同,色谱柱可以分为多种种类。
1. 毛细管色谱柱(Capillary column)毛细管色谱柱是一种非常细小的色谱柱,其内部直径通常在0.1-0.25mm之间。
这种色谱柱主要用于气相色谱,可用于分析极微量的化合物。
2. 标准色谱柱(Packed column)标准色谱柱是一种中空的管状柱子,内部填充着固体颗粒,如硅胶或石墨化碳黑等。
标准色谱柱主要用于液相色谱,常见的填料材料有硅胶(Silica gel)、石墨化碳黑(Graphitized carbon black)等。
3. 反相色谱柱(C18 column)反相色谱柱是一种常用的液相色谱柱,在填料材料中掺入疏水基团,为分离疏水性化合物提供了良好的选择性。
C18柱是一种反相柱,其中的填料材料是十八烷基硅胶。
反相色谱柱被广泛应用于药物分析、环境分析等领域。
4. 离子交换色谱柱(Ion e某change column)离子交换色谱柱是一种特殊的液相色谱柱,其中的填料材料具有带电性,可以与离子化合物进行相互作用。
离子交换色谱柱常用于分离离子化合物和药物中的阳离子和阴离子。
5. 手性色谱柱(Chiral column)手性色谱柱是一种专用的液相色谱柱,用于分离手性化合物,即立体异构体。
手性色谱柱的填料材料通常包括手性选择性的混合物,例如手性碳、手性硅胶等。
6. 蛋白质色谱柱(Protein column)蛋白质色谱柱是一种专门用于分离和纯化蛋白质的色谱柱。
它通常具有特殊结构和表面修饰以实现蛋白质的选择性分离。
除了上述常见的色谱柱种类外,还有一些其他特殊用途的色谱柱,例如气相色谱中的金属填料柱(Metal column)用于分析金属有机化合物,以及尺寸排除色谱柱(Size e某clusion column)用于分离和分析不同分子大小的聚合物等。
常见气相色谱柱分类及适用范围在气相色谱分析中,色谱柱的选择是非常重要的。
根据填料的极性不同,色谱柱可以分为非极性、弱极性、中等极性和强极性。
以下是一些常见的色谱柱及其适用范围。
非极性色谱柱包括DB(HP)-1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1、HP-101、AC1、SP-2100、DB(HP)-5、AC5、SPB-5和DM-5.这些柱子都是由100%聚二甲基硅氧烷制成的,适用于分离非极性化合物。
中等极性色谱柱包括CPSiL8、Rtx-5、DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701和CP-Sil19CB。
这些柱子的填料具有中等极性,适用于分离中等极性化合物。
极性色谱柱包括DB(HP)–FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20、HP-Wax、DB-Wax、AC20、SPB-608和HP-608.这些柱子的填料具有高极性,适用于分离极性化合物。
填料的极性可以通过极性指数来表示。
非极性柱子的极性指数通常在1左右,弱极性柱子的极性指数在5左右,中等极性柱子的极性指数在50左右,而强极性柱子的极性指数则在几百到几千之间。
总之,在选择色谱柱时,需要根据待分离化合物的性质和极性来选择合适的柱子。
以下是经过格式修正和改写后的文章:非极性色谱柱适用于许多化合物,如碳氢化合物、氨基酸、基油、多核芳烃、酚、酯、药物和醇等。
其操作温度范围为50℃至300℃,或者是-350℃至50℃,或者是-280℃至350℃。
弱极性色谱柱常使用的两种商品名分别为AC5和OV-5,它们的化学成分分别为XXX和5%Phenyl1%XXX。
这两种色谱柱的区别不是很明显,通常混称使用。
中等极性色谱柱有两种常见的商品名,分别为OV-17和AC10.OV-17的化学成分为XXX和50%二苯基(50%)二甲基聚硅氧烷,而AC10的化学成分为14%XXX和14%氰丙基苯基(其中7%氰丙基7%苯基)(86%)二甲基聚硅氧烷。
3-1 柱的结构1、堵棒(或导管)2、接头3、接头4、密封圈5、螺帽6、柱密封圈7、柱管8、柱填料9 10、过滤片3-2 柱的分类:根据所有的担体材料分为三种:a.硅胶型:机械强度高,易制成小颗粒,理论塔板数高。
b.聚全物型:在广泛的PH值范围内稳定c.羟基磷灰石型:对蛋白质等生物高分子样品有特殊的选择性。
根据分离方式分类:a.硅胶型1)正相:SIL--磷脂、NH --糖、维生素E,CN--甾类激素。
2)反相:ODS(C18)、(C8 CN TMS Pheny1)低分子量化全物。
3)离子交换:WAX(弱碱阴离子交换)--核苷酸、蛋白质WCX(弱酸阳离子交换)--蛋白质SAX(强碱阴离子交换)--核苷酸SCX(强酸阳离子交换)--儿茶酚胶4)凝胶过滤:Diol--蛋白质GF--蛋白质b.聚合物型:1)反相:ODP--50--肽,蛋白质,低分化合物。
2)离子交换:ISC--氨基酸,胍类化合物,ISA--糖,IC--无机离子,PA--蛋白质,ES--蛋白质。
3)配位交换:SCR(磺化聚苯乙烯)--糖。
4)离子排阻:SCR-101H 102H --有机酸5)凝胶过滤:ION--多糖GS--水溶性分子6)凝胶渗透色谱(GPC):GPD--合成分子、橡胶。
7)羟基磷灰石型:HPC--蛋白质、核苷酸按尺寸分类:1.制备:30mm 50mm 内径,半制备:20mm内径。
2.分析:标准型柱:4_8mm内径。
快速色谱柱:3mm内径、5cm长、4.6mm内径。
小孔径柱:2.5mm内径,微孔径柱1mm内径。
3-3柱的技术指标*耐压:不小于40Mpa。
*渗透性:反相--流动相甲醇1ml/min,压力3Mpa。
正相--正乙烷1ml/min,压力3Mpa.*柱效:理论塔板极数>3x103。
*对称柱:葸峰不对称因子AS在0.8~2.0范围内。
*外观:光洁、标牌、尺寸、填充剂、流动相方向、日期等。
ODS柱ODS(C18)色谱柱是将十八烷基键合在担体的表面,然后填充的柱,在HPLC中应用广。
请从分离原理的角度介绍一下色谱柱的种类,以及对应的应用对象与流动相。
色谱柱作为一种常用的分离工具,在各种化学反应、化学分析中起着不可替代的作用,它的本质是利用分离原理将待测物质分解、精确测定。
根据不同的分离原理,色谱柱种类繁多,每种色谱柱的选择和使用均有一定的规律。
首先,我们可以对色谱柱进行大致的分类,按照分离原理可分为空气液色谱柱、固体色谱柱和超声波色谱柱三大类。
1. 空气液色谱柱:是根据它们在柱上的分子量和表面张力之间的相互作用而分离分子的。
其特点是分离效果显著,适用于液体分子的大分子量和表面张力,例如蛋白质、核酸、糖类等,可以准确检测分子的大小和结构。
2. 固体色谱柱:是基于柱固体内部的内禀协同和表面禀向效应而分离分子的,它们主要是由碳粉、杂质、填料组成的。
它们具有分离快速、准确度高等特点,可以进行物质组成的定性,批量分离等应用,主要用于大分子有机物和小分子有机物的分离,如芳香族类物质、传感器、药物分离等。
3. 超声波色谱柱:是基于柱内部电子跃迁以及超声波能量的作用而分离分子的,其特点是能够准确检测分子的大小、结构及分离的范围广。
它们通常用于物质的定量检测,如DNA测序、线性多糖分离、蛋白类物质定性及定量分析等。
此外,色谱柱还可以根据流动相的不同分为静态色谱柱和动态色谱柱,前者主要涉及液体或气体的分离,流速较慢,常用于检测液体或气体中的低浓度物质;后者则主要涉及固体束流分离,流速较快,常用于高浓度物质的定量分析。
总之,不同种类的色谱柱在不同的应用领域中都有着十分重要的作用,只有精准的选择和正确的使用,才能获得良好的测试效果。
色谱柱的分类色谱柱是化学分析和分离中重要的工具,主要通过物质在柱子中的分配或吸附来实现分离和纯化的过程,主要包括以下几种分类:1. 按填充物材料分类硅胶柱:主要是以硅胶为填充物的色谱柱,是一种具有亲水性的填充物,适用于分离水溶性化合物。
C18柱:以含有十八个碳原子的烷基为硅胶表面修饰剂的填充物,是无极性材料,适用于分离脂类、有机物等。
C8柱:以含有八个碳原子的烷基为硅胶表面修饰剂的填充物,相对C18柱而言,选择性稍强,适用于对多种类似化合物进行分离和纯化,特别是对极性较强的化合物有良好的保留作用。
C4柱:以含有四个碳原子的烷基为硅胶表面修饰剂的填充物,其中区别在于C4的烷基长度相对于C8和C18而言较短,因而其极性更强,适用于极性化合物的分离。
2. 按柱子内部结构分类固定相柱:柱子内壁被涂上一个薄的固定相膜层,它的性质直接影响到柱子的选择性。
开放式管柱:由许多平行(或螺旋状)的突柱或层柱组成,其间间隙呈开放的结构。
该类型柱子的动态范围要宽得多,使分离能力更强。
毛细管柱:柱子的内径很小(一般不超过0.5毫米),柱壁内部不涂覆固定相,分离作用主要是由填充物、柱长和柱温来控制的,它的分离能力相对较强,适合于分离化学结构近似的化合物。
3. 按分离机理分类反相柱:填充物的极性与流动相相反,化合物通过填充物与不同极性流动相之间的相互作用发生分离,常见的是碳链长度为18或8或4,或者是具有芳香环的取代基。
离子交换柱:填充物含有带电离子交换部位,当固定相上离子交换部位与离子状样品结合时,样品就会和离子交换柱固定相发生相互作用,其强度由离子的电荷和离子在样品中的浓度等因素决定。
手性柱:将具有手性(非对称性)的化合物进行分离的柱子,填充物中含有手性识别部位,通过化合物与填充物上手性识别部位的反应或结合来进行分离操作。
液相色谱柱的分类与选择液相色谱柱的分类(按色谱固定相基质分)1.硅胶基质:1.1反相色谱柱:反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
1.2正相色谱:正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),,二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
1.3离子交换色谱柱:以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱,常用规格:强阴离子色谱柱(SAX),强阳离子交换色谱柱(SCX)2.聚合物基质:聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。
相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
所有聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。
用于HPLC的高交联度聚合物填料,其膨胀和收缩要有限制。
溶剂或小分子容易渗入聚合物基质中,因为小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢,所以造成小分子在这种基质中柱效低。
对于大分子像蛋白质或合成的高聚物,聚合物基质的效能比得上陶瓷性基质。
因此,聚合物基质广泛用于分离大分子物质。
色谱柱的选择液相色谱仪基质的选择大致遵循以下法则,硅胶基质的填料被用于大部分的HPLC分析,尤其是小分子量的被分析物,聚合物填料用于大分子量的被分析物质,主要用来制成分子排阻和离子交换柱。
色谱柱的分类与选择色谱柱是色谱仪器中最为重要的部分,它能够将被测物质分离、纯化、鉴定。
而色谱柱的分类与选择也会影响色谱仪器的精准性与效率。
一般来说,色谱柱可以分为活性柱、吸附柱、固相提取柱和超声波分离柱四大类。
活性柱:活性柱是最常用的一种色谱柱,也叫作有机柱,它以有机亲水性的润湿剂为填充物,如:C18、SiO2等。
活性柱的填充物表面在水中具有正电荷,能够将非电荷的水溶性物质吸附,使其分离出来。
吸附柱:吸附柱是活性柱的衍生品,它以无机粒子或有机亲水性润湿剂为填充物。
与活性柱相比,吸附柱的填充物表面不具有电荷,而是通过“吸附”的原理将有机溶液中的物质进行分离。
吸附柱可以用来分离非电荷的水溶性物质,也可以用来分离有机物质。
固相提取柱:固相提取柱是一种新型的色谱柱,它采用固体萃取剂作为填充物,它能够将有机物质从固态物质中分离出来,如石油类、脂肪类、树脂类、植物油类等。
超声波分离柱:超声波分离柱是最新开发的一种色谱柱,它利用超声波的能量进行物质的分离,是一种高效的色谱技术。
一般来说,不同的色谱柱都有各自的特点,根据实际情况,应根据所测物质的性质和分离难度,选择合适的色谱柱。
首先,应根据被测物质的性质,确定所需要的类型,如果是有机物质,则应选择活性柱或者吸附柱;如果是固体物质,则可以采用固相提取柱;如果是水溶性物质,可以采用超声波分离柱。
其次,应根据所测物质的分离难度,选择合适的色谱柱。
对于有机物质,可以采用活性柱或者吸附柱,但在活性柱和吸附柱之间,应根据所测物质的分离难度,选择合适的色谱柱,如果分离难度较高,则应采用吸附柱,如果分离难度较低,则可以采用活性柱。
最后,在选择色谱柱时,应注意其尺寸、粒径、表面积、抗氧化能力等方面,以保证色谱柱的使用性能。
总之,色谱柱的分类与选择是影响色谱仪器的精准性与效率的重要因素,应根据所测物质的性质与分离难度,选择合适的色谱柱,并在选择时,注意色谱柱的尺寸、粒径、表面积、抗氧化能力等方面,以保证色谱柱的使用性能。
简述色谱柱的类型及特点
色谱柱是现代色谱分析中最重要的部分之一,根据不同的原理和功能,可以将其分为多种类型。
本篇文章将简述色谱柱的类型及其特点。
一、气相色谱柱
气相色谱柱是指用于气相色谱分析的色谱柱。
它们通常使用非极性或
低极性的填充物,能够有效分离大多数有机化合物。
气相色谱柱常用
于环境分析、石油化学、医学、食品科学等领域,具有分离效率高、
分离速度快的特点。
二、液相色谱柱
液相色谱柱是指用于液相色谱分析的色谱柱。
它们通常使用极性或中
性的填充物,可以分离多种有机分子、生物分子、无机分子等。
液相
色谱柱广泛应用于化学、医学、生物学、环境科学等领域,具有分离
效率高、分离精度高、分析速度快的特点。
三、离子交换色谱柱
离子交换色谱柱是指用于离子交换色谱分析的色谱柱。
它们通常使用
固定载体上的功能基团吸附和固定样品中的离子。
离子交换色谱柱应
用广泛,能够对药物、含氮等复杂物质进行分离和纯化。
四、凝胶过滤色谱柱
凝胶过滤色谱柱是指用于蛋白质和多肽分析的色谱柱。
它们通常通过一种特殊的凝胶过滤机制将样品分离出来,应用广泛于生物技术、医学、药学等领域。
五、亲和色谱柱
亲和色谱柱是指根据其样品特异性吸附效果而设计的一种分离方法。
亲和色谱柱常用于分离和纯化蛋白质、多肽、核酸等生物大分子。
以上是色谱柱的常见类型及其特点。
科学家们根据不同的样品特点和分析要求,选择不同种类的色谱柱进行分析,为科学研究提供了重要的工具。
色谱柱的类型在化学分析领域,色谱是测定物质成分的一种重要方法。
色谱柱是色谱技术中的核心部件,不同种类的色谱柱可以用于不同类型的分析。
下面介绍常见的几种色谱柱类型。
1. 气相色谱柱气相色谱柱是指在分析过程中气体或气态样品通过柱子中的填充物,用吸附、分子筛、离子交换、反相等作用原理分离分析样品成分的柱子。
气相色谱柱主要用于分离气体混合物中的成分,常用于食品、环境、石油化学、天然气等领域的分析。
2. 液相色谱柱液相色谱柱是指在分析过程中液体或液态样品通过柱子中的填充物,根据不同的作用原理分离分析样品成分的柱子。
液相色谱柱可以根据柱子内填充物的不同分为正相柱和反相柱,它们主要用于分离非挥发性物质,也可以用于复杂样品中成分的分离。
3. 离子交换色谱柱离子交换色谱柱是指利用离子间的静电作用力分离样品中的离子。
离子交换色谱柱内填充有离子交换树脂,能够根据不同的离子交换性质,分离出离子。
离子交换色谱柱广泛用于食品、环境、药品、化学品等领域的分析。
4. 大孔介质柱大孔介质柱是指柱子内部具有大的孔径和表面积,可以用来分离大分子混合物。
大孔介质柱主要用于分离蛋白质、多肽和其他大分子化合物。
5. 微柱分离柱微柱分离柱是一种针对微流控系统的色谱柱,其用途在于研究微纳米尺度下的分离特性和分析过程。
微柱分离柱的特点是针尖和针孔的直径都非常小,使得色谱分离能够在非常小的尺度内进行。
总之,不同种类的色谱柱具有不同的分析效果和适用范围。
在具体使用时应根据分析要求和样品特点选择合适的色谱柱进行分析。
TSK色谱柱种类及特性色谱柱是色谱分析中最重要的部分之一,它们起着分离和检测目标物质的关键作用。
不同种类的色谱柱具有不同的特性和优势,用于不同类型的分析和应用。
本文将介绍几种常见的色谱柱种类及其特性。
1.气相色谱柱(GC柱)气相色谱柱是通过气相色谱(GC)技术进行分析的主要工具。
它们通常由一个内部涂层的管壁构成,内部涂层可以是固定液体或固定固体。
不同的内部涂层和柱剂可以实现对不同类型化合物的选择性分离。
常见的气相色谱柱种类有:非极性柱、极性柱和特殊柱。
非极性柱具有较低的极性,常用于分离非极性化合物,如烷烃和芳香烃。
它们的分离速度较快,但选择性较差。
极性柱具有较高的极性,可用于分离极性化合物,如醇、酸、酮和醚。
它们的选择性较好,但分离速度较慢。
特殊柱包括手性柱、PLOT柱和固相微萃取柱。
手性柱用于分离具有手性中心的化合物,如手性药物。
PLOT柱用于分析高沸点气体或分析需要高灵敏度的应用。
固相微萃取柱则用于样品预处理和富集。
2.液相色谱柱(HPLC柱)液相色谱柱是通过液相色谱(HPLC)技术进行分析的主要工具。
液相色谱柱由固定相(固体或液体)和填充柱构成。
填充物可以是吸附剂,离子交换剂,大小分子筛剂等。
根据填料类型的不同,液相色谱柱可以分为几个不同的类别。
反相色谱柱是使用最广泛的液相色谱柱,用于分离极性化合物。
常见的反相柱填料材料有C18、C8、C4等,它们具有不同的疏水性,从而实现对样品的不同分离。
离子交换柱用于分离带电物质,如离子、酸、碱和蛋白质。
根据样品的离子性质,可以选择阴离子交换柱和阳离子交换柱。
凝胶过滤柱用于分析不同分子大小的样品,如多肽、蛋白质和核酸。
较大的分子会在填料中被阻滞,而较小的分子则通过填料。
亲和柱是专用于富集和分离特定目标分子的柱。
亲和柱利用特定的亲和剂,如抗体或金属离子,与目标分子发生相互作用,实现分离和富集。
3.薄层色谱柱(TLC柱)薄层色谱柱是一种简单的分离工具,通常用于分析和检测混合物中的化合物。
一、高性能色谱柱特点:柱效高,价格高,通用性好,使用寿命长,pH范围宽,一般这类色谱柱可用于解决一些疑难杂症,并不是平时经常使用的色谱柱。
1、waters公司Xbridge 色谱柱:2005年推出,应用杂化颗粒技术。
优点:pH 1-12, 在高pH状态下,没有能与此色谱柱匹敌的,目前市场的宽pH色谱柱在高pH的状态下(9-12)普遍寿命很短,如Gemini,资生堂公司Capcell,YMC Pro-C18,包括waters的第一代杂化柱Xterra都是寿命不长,Zorbax Extend更是不堪。
柱效与一流的硅胶柱相当,甚至有过之无不及,杂化颗粒柱和聚合物色谱柱的问题在于柱效,Xterra和常见的PSDVB的色谱柱都有不错的pH范围,但是柱效低的问题无法解决,这是聚合物填料一般比较软且不耐压的原因造成。
在如此宽的pH范围,最大的好处是可以在化合物的保留平台区去开发方法(pH1-3, pH9-12),这样能得到更稳定更容易重现的方法,对酸性,中性,尤其是碱性化合物都能得到理想的峰形。
缺点:价格高,不是大多数中国客户可以接受的,大多数客户的色谱柱报废了主要是盐或者样品堵了色谱柱,因为这个原因,昂贵的Xbridge很有可能2-3个月就被客户报废掉了。
点评:Waters公司的色谱柱,基本上都是属于高端的产品,质优价高,不能作为日常实验用色谱柱也在常理之中。
因其自身拥有色谱填料的生产能力,所以其色谱柱的重现性较好。
2、Phenomenex公司的Gemini 色谱柱:采用硅胶球聚合物包被技术。
优点:pH1-12,因为聚合物涂层抑制了碱性溶液水解硅胶,所以可以承受一定的碱性条件,由于是硅胶球颗粒,所以柱效不错,比Xterra或者PSDVB这类色谱柱柱效好。
单价不低,¥3200。
缺点:聚合物涂层稳定性比较差,所以当涂层损失时,色谱柱会很坏被碱性溶液溶解,这也是其寿命远不及Xbridge的原因。
另外涂层损失也会影响结果重现性。
3-1 柱的结构1、堵棒(或导管)2、接头3、接头4、密封圈5、螺帽6、柱密封圈7、柱管8、柱填料9 10、过滤片3-2 柱的分类:根据所有的担体材料分为三种:a.硅胶型:机械强度高,易制成小颗粒,理论塔板数高。
b.聚全物型:在广泛的PH值范围内稳定c.羟基磷灰石型:对蛋白质等生物高分子样品有特殊的选择性。
根据分离方式分类:a.硅胶型1)正相:SIL--磷脂、NH --糖、维生素E,CN--甾类激素。
2)反相:ODS(C18)、(C8 CN TMS Pheny1)低分子量化全物。
3)离子交换:WAX(弱碱阴离子交换)--核苷酸、蛋白质WCX(弱酸阳离子交换)--蛋白质SAX(强碱阴离子交换)--核苷酸SCX(强酸阳离子交换)--儿茶酚胶4)凝胶过滤:Diol--蛋白质GF--蛋白质b.聚合物型:1)反相:ODP--50--肽,蛋白质,低分化合物。
2)离子交换:ISC--氨基酸,胍类化合物,ISA--糖,IC--无机离子,PA--蛋白质,ES--蛋白质。
3)配位交换:SCR(磺化聚苯乙烯)--糖。
4)离子排阻:SCR-101H 102H --有机酸5)凝胶过滤:ION--多糖GS--水溶性分子6)凝胶渗透色谱(GPC):GPD--合成分子、橡胶。
7)羟基磷灰石型:HPC--蛋白质、核苷酸按尺寸分类:1.制备:30mm 50mm 内径,半制备:20mm内径。
2.分析:标准型柱:4_8mm内径。
快速色谱柱:3mm内径、5cm长、4.6mm内径。
小孔径柱:2.5mm内径,微孔径柱1mm内径。
3-3柱的技术指标*耐压:不小于40Mpa。
*渗透性:反相--流动相甲醇1ml/min,压力3Mpa。
正相--正乙烷1ml/min,压力3Mpa.*柱效:理论塔板极数>3x103。
*对称柱:葸峰不对称因子AS在0.8~2.0范围内。
*外观:光洁、标牌、尺寸、填充剂、流动相方向、日期等。
ODS柱ODS(C18)色谱柱是将十八烷基键合在担体的表面,然后填充的柱,在HPLC中应用广。
欧洲药典中使用的色谱柱
标题:欧洲药典中使用的色谱柱
在药物分析和质量控制中,色谱柱是色谱法中最重要的部分之一。
欧洲药典中详细规定了药物分析中使用的色谱柱的种类、性能和测试方法。
本文将介绍欧洲药典中常用的几种色谱柱。
1.硅胶色谱柱
硅胶色谱柱是最常用的色谱柱之一,主要基于硅胶颗粒作为固定相。
这种色谱柱具有高分离性能和稳定性,可用于分离多种类型的化合物,包括脂肪酸、类固醇、抗生素和蛋白质等。
欧洲药典中对硅胶色谱柱的粒径、孔径和表面酸性等性能进行了详细的规定。
2.聚合物色谱柱
聚合物色谱柱是基于聚合物颗粒作为固定相的色谱柱。
这种色谱柱具有广泛的适用性和高分离性能,可用于分离各种类型的化合物,包括脂溶性和水溶性化合物。
欧洲药典中规定了聚合物色谱柱的种类和性能,包括粒径、孔径和极性等参数。
3.凝胶色谱柱
凝胶色谱柱是基于凝胶颗粒作为固定相的色谱柱。
这种色谱柱适用于分离大分子量和具有复杂结构的化合物,如蛋白质、多糖和核酸等。
欧洲药典中对凝胶色谱柱的种类和性能进行了详细的规定,包括粒径、孔径和交联程度等参数。
4.反相色谱柱
反相色谱柱是基于反向吸附原理的色谱柱。
这种色谱柱适用于分离具有疏水性和亲脂性的化合物,如脂溶性维生素和抗生素等。
欧洲药典中对反相色谱柱的种类和性能进行了详细的规定,包括表面活性剂的类型和浓度、粒径和孔径等参数。
总之,欧洲药典中规定的色谱柱种类繁多,根据不同的分离需求选择合适的色谱柱是药物分析和质量控制的关键。
本文仅介绍了其中几种常用的色谱柱,对于更加详细的规定可以参考欧洲药典中的相关章节。
色谱柱的种类与评价
一般地说,根据样品的性质决定采用何种液相色谱方法,然后再选择不同类型的柱。
即不同类型的柱则代表了不同的色谱方法。
不同种类色谱柱的差异在于柱结构、柱填料和柱尺寸的不同。
色谱柱有不同的尺寸(长度和内径),分制备型、常规分析型和微型。
不同类型柱的硬件也不同,(包括接头、柱管等方面),还有径向加压柱和夹套加热柱等。
不同液相色谱法的尺寸根据需要可以选取,普通分析3~30cm 长,内径4~8mm。
常用20cm长、4.6mm内径的柱。
制备型柱内径一般为8mm、25cm长。
微型柱内径l~3mm,长10~20cm。
不同的填料分析的效果可能不同,这是因为生产过程不同所致。
同一厂商生产的同种填料因批号不同也会有差异,这种差异可能从基质就开始(表面积、杂质、特殊处理),还有键合的化学物质(一氯或三氯硅烷反应剂),不同厂家生产的填料还会因专利技术(预处理、键合过程、填装技术)等不同而呈现较大差异。
由于种种差异、仅能假设同一批号的柱有基本相同的性质。
多数柱填料基质采用多孔硅胶微粒,通常有球形和无定形两种,具有不同的粒度、孔径和表面积。
多孔聚合物微粒也适用于反相色谱。
聚合物柱的流动相范围广,流动相pH值可在1至13之间。
而硅胶基质pH仅能在2.5和7之间。
显然,聚合物柱要好一些,但目前仍是以硅胶基质的柱为主。
原则上,聚合物柱可以克服硅胶基质柱的某些不足,但需要大量的实验来证实,要进一步考查聚合物基质填料的全面优越性。
在实际工作中,选择性能良好的色谱柱可得到好的结果,首先要注意柱径、长度、填料种类和填料粒度。
评价色谱柱的好坏不仅只是N数,还应考虑组分在柱上的保留、键合相表面的物性、柱压降以及峰不对称因子As等。
每一根新色谱柱都应标出详细参数,主要内容包括公司名称、柱名称(商标)、柱填料、尺寸。
附一张标准参考色谱图,并标出色谱条件、样品名称、流动相组成、流速、柱温、进样体积、检测器、峰的保留时间及峰名称等。
评价一根色谱柱的主要指标是:①塔板数N值;②峰不对称因子As;③柱压降;④键合相浓度。
此文章由广州深华生物技术有限公司编辑修改。