高效液相色谱法测定蔬菜中四种农药的残留量

医学杂志２０１２年７月第３４卷第７期Ｎｉｎｇｘｉａ　』　Ｙ　：！　

文章编号：１００１—５９４９（２０１２）０７—０６２３—０３　・论　・６２３・　

著・　

高效液相色谱一柱后衍生荧光光度法测定蔬菜中　

氨基甲酸酯类农药的残留量　

胡建英，杨绯，高贵桃　

［摘要］　目的建立蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留量的高效液相色谱一柱后衍生荧光光度法检测方法。　方法利用仪器供应商提供的方法，参考“ＮＹ／Ｔ　７６１—２００８蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸　酯类农药多残留的测定”方法中高效液相色谱一柱后衍生、荧光光度法，建立蔬菜中７种氨基甲酸酯类农药的残留　量测定方法。结果７种氨基甲酸酯类农药方法的定量限０．００３　ｍＶｋｇ，线性范围０．００５一１．０００　ｍＶＬ，相关系数　均在０．９９９以上，回收率６７％～９５％。结论　所建立的方法灵敏度高，重现性好，检测限低，完全能够满足不同品　种蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留量的检测。　［关键词］　蔬菜；高效液相色谱柱后衍生；氨基甲酸酯类农药残留量　

［中图分类号］Ｒ１９３．３　［文献标识码］Ａ　

Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｒｂａｍａｔｅｓ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｉｎ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ｗｉｔｈ　ｃｏ１　ａｍ　ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ　

ＨＵ　Ｊｉａｎ—ｙｉｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｆｅｉ，ＧＡＯ　Ｇｕｉ—ｔａｏ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆｐｈｙｓｉｃａｌ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ｎｉｎｇｘｉａ　Ｃｅｎｔ￣ｒｆｏｒ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　Ｐｒｅｖｅｎ—　ｔｉｏｎ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ　７５０００４，Ｃｈｉｎａ　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ　ｔｈｅ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｏｆ　ｃａｒｂａｍａｔｅｓ　ｉｎ’ｃｅｇｅｔａｂｌｅｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＨＰＬＣ　ｗｉｔｈ　ｃｏｌｕｍｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ｂｙ　ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ　ｓｕｐｐｌｉｅｒ　ａｎｄ“ＮＹ／Ｔ　７６１—２００８　ｄｅｔｅｒｍｉｎａ—　ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ，ｏｒｇａｎｉｃ　ｃｈｌｏｒｉｎｅ，ｐａｒａｔｈｙｒｄｉｄｇ　ａｎｄ　ｃａｒｂｏｎａｔｅｓ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｉｎ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ”．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｓｅｖｅｎ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｃａｒｂａｍａｔｅｓ　ｗｅｒｅ　ｗｅｌｌ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ．Ｔｈｅｉｒ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅｓ　ｗｅｒｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．０５—１．０００　ｍｇ／Ｌ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　０．９９９．Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｒａｎｇｅｄ　ｆｒｏｍ　６７％ｔｏ　９５％ｗｉｔｈ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔｓ　ｏｆ　０．００３　ｍｇ／ｋｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｂｅｔｔｅｒ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｌｏｗｅｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔ．Ａｎｄ　ｉｔ　ｃｏｕｌｄ　ｍｅｅｔ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃａｒｂａ－　ｍａｔｅｓ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｉｎ　ＶａｒｉＯＵＳ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ．　

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药残留孙 涛X,刘河疆,胡开峰,乔昆云,周 俊(新疆农业科学院中心实验室,乌鲁木齐830091)摘 要:采用超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MSPMS)技术建立了同时检测蔬菜中7种氨基甲酸酯类农药多残留量的快速检测方法。样品经乙腈提取,氨基固相萃取柱净化,WatersC18超高效液相色谱柱分离,进入电喷雾串联四极杆质谱进行检测,采用多反应监测(MRM)分析,对液质分离条件和样品前处理条件进行了优化。结果表明7种氨基甲酸酯类农药在2~500LgPL范围内线性良好(r\019986)。在01005~0101mgPkg范围内,平均加标回收率在7214%~11211%之间;相对标准偏差小于13%。该方法检出限范围为1131~3172LgPL,测定结果满足多残留农残的检测要求。关键词:多残留量检测;氨基甲酸酯类;固相萃取;蔬菜;超高效液相色谱-串联质谱中图分类号:O657.63 文献标识码:A 文章编号:1000-0720(2010)04-087-05 氨基甲酸酯类农药是一类广谱杀虫剂,其在蔬菜中的残留以及对人类健康和环境造成的毒害也越来越为人们所关注[1]。目前报道的检测氨基甲酸酯类农药的方法主要有酶联免疫法和快速酶法[2],气相色谱法(GC)[3,4],气相色谱-质谱法(GC-MS)[5],液相色谱法(HPLC)[6,7],液相色谱-质谱法(HPLC-MS)[1,9~14]等法。超高效液相色谱-串联质谱法由于使用了电喷雾离子源和超惯压液相色谱柱AcquityBEHC18,不仅大大提高了检测灵敏度,同时缩短了样品分析时间。本实验研究了蔬菜中克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等7种氨基甲酸酯类农药残留分析的样品前处理方法和UPLC-MSPMS检测条件,715min完成一次分析。结果表明,本方法简便、灵敏度高,大大提高了蔬菜中多种氨基甲酸酯类农药残留检测工作效率。1 实验部分1.1 仪器与试剂ACQUITYUPLC超高效液相色谱仪、MicromassQuattroPremierXE三重四极杆串联质谱仪(美国Waters公司),配有电喷雾离子源(ESI)。高速组织捣碎机(德国IKA公司);旋转浓缩仪(日本EYELA公司);Mill-iQ超纯水设备(美国Millipore公司);漩涡混合器;固相萃取装置(美国Supelco公司);WatersNH2固相萃取柱(60mgP3mL)。NaCl(AR,用前120e烘4h);乙酸铵、乙腈、CH2Cl2、甲醇等均为色谱纯;其他试剂均为分析纯,水为超纯水。1.2 标准工作液的配制将克百威、三羟基克百威、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、甲萘威等标准品(1000mgPL,农业部农业环境监测总站)用甲醇配制成质量浓度为20mgPL的标准储备液,依据需要稀释成适当质量浓度的标准工作液,于4e下保存。1.3 色谱条件色谱柱:AcquityBEHC18(211mm@50mm,117Lm)。柱温:40e,样品室温度:10e;进样)87)第29卷第4期2010年4月 分析试验室ChineseJournalofAnalysisLaboratory Vol.29.No.42010-4

FOOD INDUSTRY· 75

张甜甜 孙正阳 通标标准技术服务有限公司果蔬农残检测方法同理化性质来进行分类，制作出相应的气相色谱图，从而看出残留物种不同种农药的数量的多少最后科学家可以通过显示屏来讲这种起像素色谱图制作成不同的电信号，然后将其投影在显示屏上，从而更加直观的测定不同种类的农药残留的状况。气相色谱法常用的检测器有很多种，但是目前最为常用的一种是电子捕获检测器，这种检测器是将一些具有放射性的放射源作为检测目标，它主要通过检测残留物中的电负性较高的物质，因此可以对果蔬中残留的农药中的卤素物质、硫元素物质、磷物质和氰基物质等进行准确的识别，这种通过电子捕获检测器的气相色谱法最适合一些具有较高的电负性的农药有机物，对这些物质的检测有很高的灵敏度和精准度，如今已经被厂泛应用到水果蔬菜的农药残留的检验和分析的方方面面中去。高效液相色谱检测法检测果蔬农药残留。高效液相色谱法主要是为了来弥补气相色谱法检测果蔬农药残留的一些不足，实现气相色谱法一些不能实现的功能。尤其是在对一些不够稳定的农药进行检测时，能够起到很有效的作用，避免气相色谱检测法对于一些高沸点、热不稳定性和大分子混合物的农药检测的效率低下的问题。这种检测方法通过调制出特点的检测液，然后用紫外线对溶解于这种液体的农药残留物进行紫外线照射，不同种类的农药对于紫外线的吸收程度也是不同的，因此边可以通过这种方式将农药残留中的不同物质根据其紫外线含量的高低来分离出来。目前在高效液相色谱法中的一种十分常用的检测器是紫外线吸收检测器，这也是在果蔬的农药残留检测中最为重要的一种检测器，这种检测器主要用来对农药中经常含有的各种含多菌灵的有机物和含嚓苯的有机物进行高准确度的识别，因此它对有机磷类的农药和含氮类的农药具有很高的灵敏度，能够帮助科学家快速的识别和检测出一些常见的农药。果蔬中的农药残留问题一直是影响居民生命健康问题的一个重要因素，也是国际上对于果蔬产品的质量进行衡量的一项重要指标。因此，对于果蔬农产品的农药残留问题的检测越来越受到人们的关注，目前已经有了多种检测方法，但是仍有很大的改进空间。今在农业生产过程中，很多企业和农民往往会使用一定的农药等产品，以此来降低农产品的病虫害，保持农产品的外观完整，同时也能够有效提高农作物的产量。但是农药的使用也会造成一定的副作用，在果蔬等农产品上造成一定的残留，影响食用者的健康。因此，为了对果蔬农残的量进行检测，必须对果蔬农残检测方法进行分析。果蔬农残的检测意义目前在我国，水果蔬菜上的农药施用量和残留量都是所有农作物中最高的，这就很有可能引发大量的食品安全问题，危害食用者的健康安全。但是随着科学技术的进步，科学家慢慢发明出了一系列针对不同杂草和害虫的农药类型。同时，随着害虫和杂草在长时间内逐渐对某种农药产生一定的抗药性，影响农药的使用效果，科学家不得不重新开发新的农药。在这种情况下，水果蔬菜的使用的农药的种类和功逐渐变得能越来越复杂。这就导致在食品安全学家对水果蔬菜的农药残留进行检测时，需要做的工作也大幅度增加，需要不断扩大农药的检测范围，针对不同农药的不同特点来制定相应的检测办法，从而准确的检测出果蔬中的农药残留。对果蔬的农药残留进行检测具有什么重要的意义，一方面它可以提高公众对于果树农残的认识程度，保证居民食用果蔬的安全性。很多居民在食用果蔬时，由于不注意上面的农药残留，导致自身摄入一定的农药和抗生素等物质，导致居民的健康安全出现问题，轻则导致腹泻等疾病，重则引起呼吸困难，甚至死亡。另一方面，对果蔬残留量进行检测，也能够规范果蔬种植行业的市场秩序，遏制农民的这种为了果蔬的产量和品相，不加限制的使用农药，将食用者的生命安全置之度外的不良风气。这样才能够最有效地改善农业果蔬业的生态环境，也有利于实践和开展可持续发展战略的理念，确保果蔬产品的绿色环保。目前我国果蔬农残的几种方法如今我国对于水果蔬菜的农药残留的检测方法很多，但最常用的还是以下几种。气相色谱检测法检测果蔬农残。在检测水果蔬菜的农药残留时，最常用的方法之一就是气相色谱法。这种方法的原理是利用各种不同性质的捕获检测器来对果蔬表面的各种残留物进行收集，然后再根据残留物中不同物质的不如

农药残留实验报告

【篇一：农药残留实验报告】

高效液相色谱法测定蔬菜与水果中

拟除虫菊酯类农药残留量

学 院： 班 级： 姓 名： 学 号： 指导教师： 完成日期：

化学化工学院 应用化学

年月日

高效液相色谱法测定蔬菜与水果中

拟除虫菊酯类农药残留量

一、实验目的：

1、掌握高效液相色谱法测定水果蔬菜中的农药残留量。 2、掌握综合实验的各种操作。 二、实验原理

农药是当前农业生产用于防治病、虫 、杂草对农作物危害不可缺少的物质 ，对促进农业增产有极重要的作用。农药施用到农作物上以后，一部分因多种原因而转移到环境水体中，一部分残留在水果蔬菜上，被人食用。拟除虫菊酯类农药具有高效、低毒以及生物降解快的特点，广泛用于蔬 菜、茶叶等农作物种植中害虫的防治。

因气相色谱温度高使农药发生分解，现采用高效液相色谱法测定拟除虫菊酯类中氯氰菊酯的含量，其国标含量为0.2mg/kg。 三、实验仪器及试剂

高效液相色谱仪，研钵，电子天平，超声波提取器，离心机，恒温水浴槽 有机溶剂:丙酮(分析级)，正己烷(分析级) ，市售的氯氰菊酯

四、实验步骤

2、浓缩：将烧杯中液体转移至离心管中离心，取上层清液在50℃恒温水浴槽中挥发溶剂至0.3ml，再次过滤将其转移至2ml的样品瓶中保存，用正己烷定容至1ml，加盖密封，以备液相需要。

3、标准溶液的配制：称取10mg氯氰菊酯,用正己烷溶解并定容至50ml。 4、色谱操作条件：色谱柱 ods-c8

检测波长 230nm

流动相 乙腈 流速 0.7ml/min进样 20?l

并且设位置好其它工作条件 还有如柱温，进样口温度，检测其温度，升温速度等。

下图谱： 由上图可知：保留时间为3.519min时，峰面积最大为13366mau*s,可知该物质即为氯氰菊酯。做工作曲线得：

6、注入我组从10克番茄和草莓中提取的清液注入，得到如下图谱：

由上图可知：3.561min时与标样时间最为接近，故可判断该时间即为氯氰菊酯的保留时间，对应的峰面积为373.773mau*s，由方程计算得氯氰菊酯浓度为