Fig. 3. Chromatogram of extract obtained by continuous flow-DUE coupled with on-line HPLC separation and detection.
从黄芩根的色谱提取物中得到的三种主要活性成分
结论:
连续采样动态超声波提取与高效液相色谱分离相 耦合的方法有以下优点:该方法可以在线测量,样品 与溶剂消耗量少,操作简单,设备较廉价 。该方法可 以直接用于药用植物中活性成分的提取测定,也可用 于环境生物食品中有机化合物的测定,不仅可以用于 固相样品也可以用于液相样品。
2 方法评价
标准曲线及目标化合物测定:DUE-HPLC连用测定黄芩 素,黄芩苷,汉黄芩素,其标准曲线用分析物浓度与峰 面积绘制;分光光度法测定黄酮类化合物总量,标准曲 线由黄酮浓度与吸光度绘制。(Table2)
样品分析:五种不同产地黄芩所得黄芩苷,黄芩素,汉黄
芩素分别在73.8–131.5, 6.7–15.9 和4.4–14.3ug/mg变 动。两种方法所得三种物质提取率相差不大,在线系统 的分辨率要差于闭合系统,但还可以接受。
型输液泵,蠕动泵,聚四氟乙烯线圈(PTFE),液相色谱仪 配置光电二极管阵列探测器和四元梯度泵,100W输出功率 的微波发生器,溶剂(脱氧处理) 化学品和样品预处理:超纯水(Milli-Q水处理系统处理) , 试剂(色谱纯),黄芩(本地购买,干燥粉碎,甲醇浸湿 然后自然风干)。 实验步骤:1. On-line continuous flow-DUE-HPLC
No. (A) 甲醇浓度 (B) 超声波功率 (C) 溶剂流速 提取率 1 A1 B1 C1 77.08 2 A1 B2 C2 71.64 3 A1 B3 C3 78.89 4 A2 B1 C1 129.07 5 A2 B2 C2 63.75 6 A2 B3 C3 66.84 7 A3 B1 C1 100.81 8 A3 B2 C2 86.11 9 A3 B3 C3 49.15 K1 75.87 102.32 76.68 K2 85.55 73.83 83.29 K3 78.69 64.96 81.15 R 9.68 37.36 6.61