2. 样品、缓冲液处理系统
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第一包1—1 全自动样品前处理系统1。
品名、数量及用途1.1品名:全自动样品前处理系统;1.2数量:1套;1.3用途:用于中药药材或生物组织样品中有机化合物的萃取纯化等。
2。
工作环境2。
1工作环境温度:15°C~32°C;2.2工作环境湿度:相对湿度10%~95%,无凝结;2。
3电源:100—240V.,50/60Hz。
3.技术要求3.1 全自动样品前处理仪#3。
1.1 萃取模式:支持柱萃取和96孔板萃取两种模式,两种模式之间可自由切换。
自动完成样品前处理的全过程(活化、进样、淋洗、洗脱收集或过滤等步骤),自动选择溶剂,适用1、3、6 mL萃取柱和96孔萃取板。
★3。
1.2 移液模式:采用多通道自动移液器配合移液吸头移液,样品和溶剂不需要进入多通阀、定量环或注射泵等环节,避免采用注射泵,从而避免溶剂管路和样品管路的堵塞及交叉污染;移液器通道数量不小于4通道。
#3.1。
3 支持的样品前处理方法:支持对蛋白沉淀(XX)、除磷脂(PLD)、固相支撑液液萃取(SLE)、固相萃取(SPE)以及过滤方法的自动化运行,并支持对样品进行稀释、内部添加、缓冲液添加、样品转移等操作。
3.1。
4 移液准确度和精度:准确度≤2% (0.05 - 1 mL);精度≤1.0% (0.05 — 1 mL)3。
1.5 样品处理通量:采用96孔板或1 mL小柱时,最大可同步处理96个样品,采用1、3、6 mL小柱时最大可同步处理24个样品3.1。
6 样品处理器:支持96孔板、1 mL和2mL96位阵列板,96位1m小柱,24位1、3、6mL小柱#3。
1。
7 过柱压力:采用正压过柱模式,压力可调范围0-5 bar,步进0.1 bar。
3.1.8 溶剂数量:可使用溶剂数量不小于5种,支持自动向溶剂槽中添加溶剂,不需要预先添加至溶剂槽,最大可使用10种溶剂;并配有单向通气溶剂安全瓶,避免溶剂挥发和污染3.1.9 批量处理模式:支持批量处理,可连续运行多种不同的方法而不需要停机重新设定#3.1.10 移液吸头:采用1mL透明移液吸头,系统可自动记忆指定位置的吸头所吸取的溶剂,下次吸取相同溶剂时会自动使用同位置吸头.3。
⾼效液相⾊谱仪使⽤注意事项[1]岛津液相⾊谱仪使⽤注意事项1.流动相必须⽤HPLC级的试剂,使⽤前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使⽤0.45um或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要⽤超声波脱⽓,脱⽓后应该恢复到室温后使⽤。
3.不能⽤纯⼄腈作为流动相,这样会使单向阀粘住⽽导致泵不进液。
4.使⽤缓冲溶液时,做完样品后应⽴即⽤去离⼦⽔冲洗管路及柱⼦⼀⼩时,然后⽤甲醇(或甲醇⽔溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离⼦。
对于柱塞杆外部,做完样品后也必须⽤去离⼦⽔冲洗20ml以上。
5.长时间不⽤仪器,应该将柱⼦取下⽤堵头封好保存,注意不能⽤纯⽔保存柱⼦,⽽应该⽤有机相(如甲醇等),因为纯⽔易长霉。
6.每次做完样品后应该⽤溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.C18柱绝对不能进蛋⽩样品,⾎样、⽣物样品。
8.堵塞导致压⼒太⼤,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。
清洗⽅法;①以异丙醇作溶剂冲洗:②放在异丙醇中间⽤超声波清洗;⑧⽤10%稀硝酸清洗。
9.⽓泡会致使压⼒不稳,重现性差,所以在使⽤过程中要尽量避免产⽣⽓泡。
10.如果进液管内不进液体时,要使⽤注射器吸液:通常在输液前要进⾏流动相的清洗。
11.要注意柱⼦的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放⼊烧杯中边振动边靖洗,然后插⼊新的流动相中。
更换⽆互溶性的流动相时要⽤异丙醇过渡⼀下。
液相⾊谱柱使⽤经验谈⾊谱柱在使⽤前,最好进⾏柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意:柱性能可能由于所使⽤的样品、流动相、柱温等条件的差异⽽有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照⾊谱柱出⼚报告中的条件进⾏(出⼚测试所使⽤的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可⽐性。
1、样品的前处理:a、最好使⽤流动相溶解样品。
b、使⽤预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产⽣不可逆吸附的杂质。
c、使⽤0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
凝胶过滤层析实验报告凝胶过滤层析实验报告引言:凝胶过滤层析是一种常用的生化分离技术,广泛应用于蛋白质纯化、分析和富集等领域。
本实验旨在通过凝胶过滤层析的方法,对混合蛋白样品进行分离和纯化,探究其原理和应用。
材料与方法:1. 凝胶过滤层析柱:选择合适的分子量截留范围,如10 kDa。
2. 混合蛋白样品:包含多种蛋白质,分子量范围从10 kDa到100 kDa。
3. 缓冲液:选择适当的缓冲液,如PBS。
4. 装载样品:将混合蛋白样品与缓冲液按比例混合,使其浓度适当。
实验步骤:1. 准备凝胶过滤层析柱:将柱子连接到系统中,并进行预洗,以去除残留物和杂质。
2. 样品装载:将装载样品注入凝胶过滤层析柱中,注意不要过载。
3. 层析过程:使用缓冲液进行层析,使样品在柱子中通过,并收集出流液。
4. 收集样品:根据需要,可以分别收集不同分子量范围的样品。
结果与讨论:通过凝胶过滤层析实验,我们成功分离并纯化了混合蛋白样品。
在层析过程中,不同分子量的蛋白质通过凝胶过滤层析柱时,会受到凝胶孔径的限制,从而分离出不同大小的蛋白质。
较大分子量的蛋白质无法通过凝胶孔径,会在柱中滞留,而较小分子量的蛋白质则能够通过凝胶孔径,从柱中流出。
通过收集不同分子量范围的样品,我们可以得到纯化后的蛋白质。
这些蛋白质可以进一步进行质谱分析、酶活性检测等实验,以获取更多关于蛋白质的信息。
凝胶过滤层析方法具有许多优点。
首先,它是一种快速、简单且高效的分离技术。
其次,凝胶过滤层析柱具有较高的容量和稳定性,可以处理大量样品。
此外,凝胶过滤层析适用于多种样品类型,包括细胞裂解液、培养基和体液等。
然而,凝胶过滤层析也存在一些局限性。
首先,凝胶孔径的选择需要根据样品的分子量范围来确定,如果样品中存在分子量相近的蛋白质,则可能无法完全分离。
其次,凝胶过滤层析无法去除溶液中的小分子物质,如盐离子和小分子有机物,这些物质可能对后续实验产生影响。
结论:凝胶过滤层析是一种常用的生化分离技术,通过分子量选择性分离和纯化蛋白质。
Integrion HPIC操作规程包括系统配置、样品准备、方法设置、运行分析以及数据处理等步骤。
具体来说:
1. 系统配置:使用Dionex Integrion HPIC系统,该系统配备有淋洗液发生器和脉冲安培检测器,适用于单糖和双糖的快速测定。
系统设计简洁,管路布局合理,便于操作和维护。
2. 样品准备:根据分析需求,准备相应的样品。
如果需要,可以使用Chromeleon 7 CDS 软件和部分定量环进样实现自动稀释。
3. 方法设置:在Chromeleon 7 CDS软件中设置分析方法,包括选择合适的色谱柱、淋洗液浓度、流速等参数。
4. 运行分析:将准备好的样品注入系统,开始进行分析。
Integrion HPIC系统具有高压离子色谱分析能力,可以实现更快速的分析而不影响数据质量。
5. 数据处理:分析完成后,使用Chromeleon 7 CDS软件对数据进行处理和分析,包括峰面积计算、定量分析等。
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程一、目的:为了确保蛋白纯化层析系统操作的准确性、稳定性和安全性,保证实验结果的可靠性,制定本操作规程。
二、适用范围:本操作规程适用于实验室内的AKTA蛋白纯化层析系统操作。
三、操作流程:1.准备工作:(1)预热:打开系统电源,预热至设定温度(一般为室温)。
(2)洗涤缓冲液:根据实验要求,制备所需的洗涤缓冲液,确保其浓度和pH值符合要求。
(3)净化缓冲液:根据实验要求,制备所需的净化缓冲液,确保其浓度和pH值符合要求。
(4)样品:根据实验要求,制备所需的样品。
2.系统配置:(1)连接仪器:将系统中的各个模块连接好,包括色谱柱、注射器、检测器等。
(2)配置方法参数:根据实验要求,在系统内设置合适的流速、梯度洗脱条件等相关参数。
3.样品处理:(1)样品加载:将样品注入到加载注射器中,通过样品加载阀注入到色谱柱中。
(2)洗脱:根据实验要求,设置梯度洗脱条件,将混合物中的目标蛋白纯化。
4.系统清洗:(1)注射器清洗:每次实验结束后,将注射器从系统中取出,用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
(2)色谱柱清洗:每次实验结束后,将色谱柱从系统中取出,用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
5.系统关闭:(1)关闭电源:关闭系统电源,断开电源线连接。
(2)清洗系统:将系统中的各个模块用水冲洗干净,保持干燥。
(3)整理工作台:将使用过的耗材整理归位,清理工作台。
四、操作注意事项:1.操作前应仔细阅读操作手册,了解仪器的基本原理和操作要点。
2.操作时要穿戴实验室个人防护用品,避免吸入或接触有害物质。
3.在操作过程中,要严格按照实验要求进行,避免操作失误。
4.定期检查系统的运行状态,保证系统正常工作。
5.操作完成后,要及时清洗和整理仪器,保持仪器的干净和完好。
五、风险控制与安全措施:1.使用过程中,注意避免溶液飞溅引起的伤害,避免溶剂和化学品的吸入或接触。
2.避免电源短路或其他电气故障引起的意外事故。
WB实验基本步骤WB实验是一种用于检测和分离目标蛋白质的常用技术,它结合了SDS-和免疫学技术。
以下是WB实验的基本步骤:1.样品制备:首先,需要从细胞,组织或培养物中提取目标蛋白质。
提取方法根据样品的性质而异,可以利用细胞裂解和离心来获取细胞和组织提取物,或者将培养物离心并用PBS洗涤来获取培养物提取物。
提取的样品通常需要加入蛋白酶抑制剂和磷酸盐缓冲液以保持目标蛋白质的完整性。
2. 蛋白质浓度测定:使用BCA、 Lowry或Bradford等标准浓度测定方法,测量目标蛋白质在样品中的浓度。
这是为了确保在加载样品到SDS-胶上时,每个样品都包含相等的蛋白质量。
3. SDS-电泳:将样品加入含有SDS和还原剂的Laemmli试剂,然后通过堆积凝胶(通常是12%)和分离凝胶(通常是4-20%梯度凝胶)分离蛋白质。
SDS在SDS-中提供负电荷,使蛋白质带有均等的负电荷,并且还原剂将蛋白质中的二硫键还原为单硫键,使其线性化。
加载的样品和分子量标尺(如预制的蛋白质标尺)通过电流进行电泳,直到达到所需的分离程度。
4.蛋白转移:将胶上的蛋白质转移到聚丙烯酰胺(PVDF)或硝酸纤维素(NC)膜或其他适用于蛋白质转移的膜上。
通常使用半湿式转移方法,其中将凝胶的胶异型架和转移膜浸泡在转移缓冲液中,并将电流应用于构成电泳腔的两侧。
电流通过凝胶和蛋白质,使蛋白质转移到膜上。
5. 蛋白质定位:使用染色方法(如Ponceau S染色或Coomassie蓝染色)将膜上的蛋白质定位。
这个步骤是为了检查蛋白转移的效果以及加载的标尺和样品之间的分离效果。
染色后,可以测量标尺和目标蛋白质的迁移距离,以及标尺和样品之间的大小分离。
6.阻塞膜:将转移膜浸泡在阻塞缓冲液中,通常是在蛋白质标识位点不与抗体结合的蛋白质(如牛血清白蛋白(BSA)或脱脂奶粉)中。
阻塞的目的是防止未结合的抗体与非特异性蛋白质位点结合。
7.一抗孵育:将目标蛋白质的特异性抗体孵育于阻塞转移膜的缓冲液中。
连续流动式自动生化分析仪单通道连续流动式生化分析仪是在微机控制下,通过比例泵将标本和试剂吸到连续的管道系统中,在一定的温度下,在管道内完成混合,去除干扰物,保温反应,比色测定,信号放大,运算处理,最后将结果显示并打印出来。
因为这种检测分析是一个标本跟着一个标本在连续流动状态下进行的,故称之为连续流动式分析仪。
这类仪器中,样品和样品之间可用空气来隔离,也可用空白试剂或缓冲液来隔离。
用空气分隔的叫空气分段式系统,用空白试剂或缓冲液分隔的叫非分段式系统。
下面介绍其中主要部件。
1.样品盘(加样器)为一可转动的圆盘状架子,在圆盘上放若干聚乙烯塑料杯(或试管),用以盛放待测样品和校正仪器用的标准液。
在程序控制器的控制下,转盘的移动与采样管上塑料软管探头的活动同步。
也就是说圆盘每隔一定时间自动转动一格,采样管吸取一次样品,依次类推,可按仪器的分析速度选用30份/小时、40份/小时、50份/小时等。
每个样品(或标准液)之间要以空气泡或蒸馏水隔开,或吸取少量生理盐水,作为洗涤采样管之用。
新式样品盘上还装有样品号码识别装置,该装置通过计算机与打印记录器相连,将某样品测定结果打印在该样品的编号下。
2.比例泵(称量泵)是一种蠕动泵,执行两个功能,即提供能使样品在仪器内进行运动的压力和向流经塑料管的液体注入空气。
它的作用是代替手工操作时的各种吸管。
样品的用量和各种试剂的用量以及管道气泡的多少均由比例泵决定。
比例泵主要由弹簧、压板、塑料管和转轴组成。
转轴由电机带动,几个转轴之间有链条相连。
转轴沿固定轨道循环转动,反复从特制的弹性输液管道上挤压滚过,从而推动管内的液体向前滚动。
比例泵的马达转速是恒定的,但配有不同内径而壁厚相同的塑料管,即可得到不同的流速。
也就是说流量与管径间有一定的比例关系,故称为比例泵。
对管道质量要求甚高,既要耐压和具有化学惰性,又要在压力解除后迅速恢复其原有孔径,以保持恒定的流速。
当比例泵开动后,样品、第一试剂和空气被同时吸入管道并进入混合管内,第二试剂和空气也同时被吸入另一管道。
DNA琼脂糖凝胶电泳介绍DNA琼脂糖凝胶电泳是一种常用的生物技术实验方法,用于分离DNA分子并确定其大小。
它基于DNA分子的电荷和大小不同,通过应用电场使DNA分子在琼脂糖凝胶中迁移,从而实现分离。
原理DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理是:DNA分子带负电荷,当置于电场中后,电场将使DNA分子向正电极移动。
然而,DNA分子在琼脂糖凝胶中的迁移速度取决于它的大小。
较长的DNA分子由于受阻力较大,迁移速度较慢,而较短的DNA分子迁移速度较快。
因此,琼脂糖凝胶电泳可以将DNA分子根据大小进行分离。
实验步骤1. 样品处理将待测DNA样品与凝胶电泳缓冲溶液混合,并加入负荷样品的染料来增加样品的重量和使其可见。
一般使用表现著名的溴化乙锭(Ethidium Bromide)来染色DNA分子。
2. 准备琼脂糖凝胶制备琼脂糖凝胶液,并根据实验需要将其倒入电泳槽中,并形成一个凝胶。
此过程需要使用琼脂糖凝胶制备缓冲液,一般为Tris–醋酸–EDTA缓冲液,简称TAE缓冲液。
3. 样品加载使用微量吸管或特殊的样品加载微孔将样品加载到琼脂糖凝胶上。
每个微孔能够承载一定量的样品,因此要根据样品的数量进行安排。
通常还会在凝胶上加载一个DNA分子大小标记(Marker)作为参考,以便确定未知样品的大小。
4. 电泳将凝胶放入电泳槽中,并将正负电极接入电源。
通过给定的电流和时间来进行电泳实验。
电流的选择取决于琼脂糖凝胶的密度和样品的大小范围。
5. 可视化和分析凝胶电泳完成后,通过紫外线照射或荧光成像系统来观察结果。
DNA分子在凝胶上能够与染料结合产生发光,从而可在琼脂糖凝胶上看到DNA分子的大小分布。
通过与已知DNA分子大小标记的对比,可以确定未知样品DNA分子的大小。
应用领域1. 分子生物学在分子生物学研究中,DNA琼脂糖凝胶电泳是一种常用的手段。
它可以用于检测DNA分子的大小、评估PCR反应的效果、验证基因敲除和插入等分子操作的成功性等。
ph缓冲溶液配制及保存配制和保存 pH 缓冲溶液是实验室中常见的操作之一,以下是一般的配制和保存方法:配制 pH 缓冲溶液:1.选择缓冲体系:•根据实验需要和 pH 范围选择适当的缓冲体系,如磷酸盐缓冲液、Tris 缓冲液、乙酸/乙酸钠缓冲液等。
2.计算配方:•根据所选择的缓冲体系,计算所需的试剂和水的量。
可以参考文献或专业实验室手册中的配方。
3.准备试剂:•根据配方,称量或稀释所需的化学试剂,注意保持试剂的纯度和质量。
4.配制溶液:•使用纯水(如去离子水或双重蒸馏水)配制缓冲液。
首先将适量的溶剂加入容器中,然后逐渐加入化学试剂,充分溶解并搅拌。
5.调节 pH:•使用 pH 仪或 pH 试纸等工具,逐渐加入酸或碱调节溶液的pH 值至所需范围。
在调节 pH 时应小心谨慎,避免过度添加。
6.最终体积调整:•根据配方,将溶液的体积调整至所需的最终体积,确保浓度准确。
保存 pH 缓冲溶液:1.标记容器:•在配制完成后,务必标记容器上的溶液名称、配方、pH 值、配制日期等重要信息。
2.密封保存:•使用密封的容器保存 pH 缓冲液,以防止外界的污染和挥发。
3.避光保存:•将 pH 缓冲溶液保存在避光的条件下,如暗柜、阴凉处或用铝箔包裹。
4.冷藏保存:•对于某些 pH 缓冲溶液,尤其是含有易氧化的成分的溶液,最好将其保存在冰箱中,以延长其稳定性。
5.定期检查:•定期检查 pH 缓冲溶液的 pH 值,确保其稳定性和准确性。
如有沉淀或异味现象应立即处理或更换。
6.避免重复使用:•为避免交叉污染,最好不要重复使用 pH 缓冲溶液,一次性使用完毕或者按照要求的频率更换溶液。
遵循以上步骤,可以有效地配制和保存 pH 缓冲溶液,确保实验结果的准确性和重复性。
液相色谱仪系统介绍用途_高效液相色谱仪工作原理高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统,下面将分别叙述其各自的组成与特点。
1.进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。
这对提高分析样品的重复性是有益的。
2.输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。
高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。
流动相贮存错和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。
这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。
3.分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。
色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔径可达1000?)和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样),或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。
因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。
例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。
另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应。
基质粒度小,微孔浅,样品在微孔区内传质短。
这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。
根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。
wb蛋白提取步骤WB蛋白提取步骤一、引言WB(Western Blot)蛋白提取是一种常用的蛋白质分析方法,通过将样品中的蛋白质分离、定量和检测,可以研究蛋白质的表达水平、功能和相互作用等。
本文将介绍WB蛋白提取的步骤及操作要点。
二、样品准备1. 收集样品:根据研究目的,选择合适的样品进行提取。
样品可以是细胞、组织、血清、培养基等。
2. 样品处理:对于细胞和组织样品,可先用PBS缓冲液洗涤去除残留的培养基或组织液。
对于血清样品,可离心去除悬浮的细胞或血小板。
三、蛋白提取1. 细胞裂解:将细胞沉淀离心后,加入细胞裂解液,使细胞膜破裂释放蛋白质。
可以选择不同的细胞裂解液,如RIPA缓冲液、NP-40缓冲液等。
2. 组织裂解:将组织样品切碎后,加入组织裂解液,将组织细胞破碎并释放蛋白质。
组织裂解液可以选择RIPA缓冲液、Tris-HCl缓冲液等。
3. 蛋白质提取:将裂解液离心,收集上清液,即为蛋白提取物。
可以通过BCA方法或Lowry方法等测定蛋白质的浓度。
四、蛋白质分离与检测1. SDS-PAGE凝胶电泳:将蛋白样品加热变性,然后加载到凝胶孔中,施加电场使蛋白质在凝胶中进行分离。
常用的凝胶浓度为8%~15%。
2. 转膜:将凝胶中的蛋白质转移到膜上,常用的转膜方法有湿式转膜和半干式转膜。
常用的膜材料有PVDF膜和NC膜。
3. 阻断与孵育:将转膜后的膜放入阻断液中进行孵育,阻断非特异性结合位点,避免假阳性结果的产生。
4. 一抗和二抗孵育:将目标蛋白特异性抗体(一抗)孵育于膜上,然后孵育与一抗结合的二抗,二抗中带有标记物,例如辣根过氧化物酶(HRP)等。
5. 显色与成像:使用化学发光法或染色法,使膜上特定蛋白质形成显色带,然后使用成像系统进行成像和分析。
五、结果分析通过观察显色带的位置和强度,可以初步判断蛋白质的表达水平。
根据需要可以进行定量分析,使用专业软件测量带的强度,并与内参蛋白进行比较分析。
六、注意事项1. 样品保存:样品提取后应及时保存,避免蛋白质降解。
HPLC溶液配制高效液相色谱法(HPLC)是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析方法。
HPLC的溶液配制是实验成功的关键之一,下面将详细介绍HPLC溶液的配制方法。
一、溶剂1. 流动相:高效液相色谱中,流动相是最主要的溶剂,用于溶解和携带待测组分通过色谱柱。
常用的流动相有甲醇、乙腈、水、四氢呋喃等。
根据不同的分析需求,可以选择不同的流动相。
2. 缓冲液:用于维持溶液的pH值稳定,常用缓冲液有磷酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液等。
配制缓冲液时,应选择合适的pH值,以保证待测组分的稳定性和色谱柱的使用寿命。
二、试剂1. 标准品:用于定量分析的已知纯度物质,应保证其纯度≥98%。
标准品的纯度越高,分析结果越准确。
2. 样品:待测物质,可以是液体、固体或气体。
样品应尽可能纯净,以降低背景干扰。
三、仪器和设备1. 高效液相色谱仪:包括输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统等部分。
2. 容量瓶:用于配制溶液,常用规格有100mL、500mL和1000mL等。
3. 移液管和吸管:用于精确移取一定量的溶液。
4. 过滤器:用于除去溶液中的杂质和颗粒物。
5. 超声波清洗器:用于溶解样品和去除杂质。
四、操作步骤1. 准备溶剂和试剂:按照分析需求选择合适的溶剂和试剂,并确保其质量可靠。
2. 配制标准品溶液:准确称取一定量的标准品,用流动相溶解并定容至所需浓度。
标准品溶液的浓度应准确已知,以便后续的标准曲线制作。
3. 样品处理:将样品溶解在适当的溶剂中,去除杂质和颗粒物,得到清澈透明的溶液。
样品处理是HPLC分析中非常关键的一步,直接影响到分析结果的准确性和可靠性。
4. 过滤和脱气:将流动相和样品溶液分别通过滤膜过滤,去除其中的颗粒物和大分子物质。
同时进行脱气处理,以防止气泡对泵造成损坏。
5. 上机分析:将过滤后的流动相和样品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行分析。
根据实验需求设置合适的色谱条件,如流速、进样量、检测波长等。
RNA电泳操作步骤1.准备实验材料和设备:-RNA样品:可以是从细胞、组织或血液中提取的总RNA或特定类型的RNA。
-RNA提取试剂盒:用于从样品中提取RNA。
-RNA样品质检:使用纳米光谱计或琼脂糖凝胶电泳检测RNA的浓度和纯度。
-RNA电泳仪和电泳槽:用于电泳分离RNA分子。
- RNA分离缓冲液:常用的缓冲液有甘胺盐酸盐缓冲液(Tris-Acetate-EDTA,TAE缓冲液)和甘胺盐酸盐磷酸盐缓冲液(Tris-Borate-EDTA,TBE缓冲液)。
- RNA标记物:如RNA分子量标记物(RNA molecular weight marker)和RNA荧光标记物(如SYBR Green)。
2.样品制备:- 根据实验需要,将RNA样品转移到RNase-free离心管中,并测量样品的浓度和纯度。
-根据RNA的浓度和纯度,确定要加载的样品量。
通常,加载2-5微克的RNA样品即可。
-将加载样品的体积参考样品体积的比例和实验方案的要求。
3.准备电泳槽和缓冲液:-将电泳槽放在平坦的台面上,并将边缘用胶带密封,以防溶液泄漏。
-根据实验要求,准备好适量的RNA分离缓冲液(TAE或TBE缓冲液),用来填充电泳槽和覆盖样品表面。
4.加载样品:- 将RNA样品与适量的缓冲液混合后,用RNase-free微量移液管将样品缓冲液缓慢地加入电泳槽的样品孔中。
-加载过程中要确保没有气泡进入样品孔内。
5.进行电泳:-将电泳槽放置在电泳仪中,连接电荷电源,并根据实验要求调整电压和时间参数。
-打开电荷电源并开始进行电泳,期间可以观察电泳过程。
6.准备凝胶成像系统:-在电泳仪和电泳槽上盖上透明的盖子,并将紫外灯放在透明盖子的上方。
-打开凝胶成像系统并准备好成像设备。
7.观察和记录:-当电泳进行到一定时间后,关闭电源并将电泳仪取出。
-使用对应的成像设备观察凝胶中RNA带的迁移情况。
-使用专业图像处理软件对凝胶图像进行分析和记录。
附录XX 单抗纯度测定方法-CE-SDS毛细管电泳(还原和非还原)本法系采用十二烷基硫酸钠毛细管电泳(CE-SDS)紫外检测方法,在还原和非还原条件下,依据分子量大小,定量测定重组单抗产品的纯度。
参照毛细管电泳法(附录V G)测定。
1. 毛细管电泳系统(1)检测器:紫外检测器,波长:214 nm。
(2)毛细管:非涂层-熔融石英毛细管(内径50μm),切割至总长为31 cm、有效长度为21 cm。
(3)孔塞大小: 8 (100×800 μm)2. 试剂(1)SDS样品缓冲液:含1% SDS的0.1M Tris-HCl溶液, pH 9.0。
(2)SDS 凝胶分离缓冲液:含0.2% SDS的缓冲液(pH8.0),含有适当的亲水性聚合物作为分子筛。
(3)0.1 N盐酸溶液(4)0.1 N氢氧化钠溶液(5)纯的2-巯基乙醇(6)烷基化溶液:0.8 M的碘乙酰胺水溶液, 如称取约74 mg 碘乙酰胺,加入500µL超纯水溶解,新鲜制备,避免光照。
(7)参比品溶液:终浓度1 mg/mL。
3. 供试品处理:(1)供试品溶液制备:用SDS样品缓冲液将供试品稀释至1mg/mL。
样品缓冲液以相同稀释倍数稀释,为空白对照。
(2)非还原供试品溶液制备:取供试品溶液(1mg/ml)95µL,加入0.8 M 碘乙酰胺水溶液5 µL ,涡旋混匀。
取空白对照95µL,加入0.8 M碘乙酰胺水溶液5 µL,涡旋混匀,为非还原空白对照。
(3)还原供试品溶液制备:取供试品溶液(1mg/ml)95µL,加入2-巯基乙醇溶液5 µL ,涡旋混匀。
取空白试剂95µL,加入2-巯基乙醇溶液5 µL ,涡旋混匀,为还原空白对照。
将供试品溶液和空白对照在68︒C -7 2︒C孵育,非还原供试品溶液孵育5min,还原供试品溶液孵育15min 。
冷却到室温后6,000 转/分离心1分钟。
蛋白分离的缓冲液系统(Laemmli buffer system Laemmli)比较解离/非解离native缓冲液系统很多应用蛋白质聚丙烯酰胺凝胶区带电泳(zone electrophoresis)的研究使用一种缓冲液系统,该系统的设计把所有的蛋白质分解成单一多肽亚单位。
最常用的解离试剂是十二烷基硫酸钠(SDS),一种离子型去污剂,它通过包围在多肽骨架的周围变性蛋白质。
在包含有过量的SDS和巯基试剂的蛋白质样品,100℃加热时,二硫键被打开,蛋白质完全解离成它的亚单位。
在这些情况下,大部分的多肽以一个恒定的重量比率(1.4g SDS:1g多肽)结合多肽。
与去污剂所提供的负电荷相比较,多肽固有的电荷变得微不足到。
因而,根据多肽的大小,相同大小的SDS-多肽复合物基本上具有相同的负电荷、形状和凝胶中的迁移率。
这种方法简洁而快速,加之只需要微克量蛋白这一事实,使SDS-PAGE成为最广泛使用的,用来确定多肽样品分子量的方法。
由于几乎任何来源的蛋白质很容易被SDS溶解,所以这种方法通常都可以适用。
与之相反,用来进行非解离native电泳的非解离native缓冲液系统,则设计用来分离蛋白质混合物,而亚单位之间的相互作用、蛋白质构象和生物学活性被保留。
在非解离native缓冲液系统中,蛋白质的分离基于它们的荷/质比率。
连续缓冲液系统在连续缓冲液系统中,凝胶的缓冲液和电泳缓冲液的组成基本上是相同的。
它们由单一的分离胶组成,而且全部的样品、胶和电极槽使用相同pH的同样的缓冲液离子。
在连续缓冲液系统中,分子电荷密度和胶孔大小是仅有的影响分子的堆积和条带的锐度的因素,。
使用连续系统时,蛋白质在样品孔中比在凝胶中移动的速度更快。
在缓冲液和分离胶的交界面,分子移动减慢,样品浓缩条带形成。
这种浓缩的方法有一定的局限,尤其是分离的分子在大小上变化较大。
小分子在溶液中运动和在凝胶中的运动没有太大的差别,因而在锐度方面不如对于大分子有利。
流式细胞仪工作原理流式细胞仪是一种广泛应用于生命科学研究领域的仪器,用于对细胞、细胞器和微粒进行分析和计数。
它能够快速、准确地获取细胞的多种信息,如大小、形状、表面标记、细胞内分子的含量等。
本文将详细介绍流式细胞仪的工作原理。
一、流式细胞仪的组成流式细胞仪主要由以下几个部分组成:1. 流体系统:包括进样系统、流体管道和废液排放系统。
进样系统负责将待检样品引入流式细胞仪,流体管道用于将样品与荧光染料、缓冲液等混合,废液排放系统则负责排出已经检测完的样品。
2. 光学系统:包括激光器、光学透镜、滤光片和光电探测器等。
激光器产生一束单色激光,通过光学透镜聚焦后照射到待检样品上,样品中的细胞或微粒吸收或散射激光,并发射出荧光信号。
滤光片用于选择性地捕捉特定波长的荧光信号,光电探测器则将荧光信号转化为电信号。
3. 信号处理系统:包括放大器、模数转换器和计算机等。
放大器将光电探测器输出的微弱电信号放大,模数转换器将模拟信号转换为数字信号,计算机则用于收集、处理和分析数据。
二、流式细胞仪的工作原理流式细胞仪的工作原理可以分为以下几个步骤:1. 样品进样:待检样品通过进样系统引入流式细胞仪。
为了确保样品的均匀分布和单个细胞的通过,样品需要经过预处理,如细胞悬浮液的过滤、离心等。
2. 细胞定位:样品通过流体管道进入流式细胞仪的流动室。
流动室中的样品以单个细胞的形式通过激光器的照射区域。
激光器产生的激光束聚焦在流动室中,使样品中的细胞或微粒逐个通过激光束。
3. 光信号探测:激光束照射到样品中的细胞或微粒上时,它们会吸收或散射激光,并发射出荧光信号。
这些荧光信号会被光学系统中的滤光片选择性地捕捉,然后由光电探测器转化为电信号。
4. 数据采集和分析:光电探测器输出的电信号经过放大器放大后,被模数转换器转换为数字信号。
这些数字信号被计算机收集、处理和分析。
计算机可以根据荧光信号的强度、波长等信息,对细胞或微粒的数量、大小、形状、表面标记等进行统计和分析。
工业制备液相色谱系统的原理
液相色谱系统是一种常用的分离和分析技术,用于化合物的分离和纯化。
其原理基于溶液中各组分之间的相互作用力,通过在固定相上进行分配和吸附来实现分离。
工业制备液相色谱系统的原理主要包括以下几个方面:
1. 固定相选择:通过选择合适的固定相材料,如硅胶、聚合物、C18等,使样品中的各组分能够在固定相上具有不同的分配或
吸附特性,实现分离。
2. 流动相选择:液相色谱系统中的流动相可以是有机溶剂、水、缓冲液等。
流动相的选择根据样品的性质和分离目标进行,通过控制流动相的组成和流速,可以调节样品成分的相对迁移速度,实现有效的分离。
3. 注射装置:液相色谱系统中的样品通常需要先进行注射,一般使用进样器进行自动或手动注射。
注射时需要控制样品的量和注射速度,以保证分离效果。
4. 色谱柱:色谱柱是液相色谱系统中的核心组件,其中装有固定相,用于分离样品。
色谱柱通常具有一定的长度和内径,选择合适的色谱柱可以实现不同分离效果。
5. 检测器:液相色谱系统中的检测器用于检测样品分离时的吸光度、荧光等信号变化,并将其转换为可读的电信号。
常用的检测器包括紫外可见光谱检测器、荧光检测器等。
6. 数据处理:液相色谱系统通常配备数据采集和处理软件,用于记录和处理分离过程中的数据,包括峰面积、保留时间等参数。
综上所述,工业制备液相色谱系统通过固定相选择、流动相选择、注射装置、色谱柱、检测器和数据处理等步骤,实现溶液中化合物的有效分离和分析。
临床生化化学及检验自动临床生物化学分析仪的应用及评价试题库1.关于各型自动生化分析仪的优缺点A.连续流动式生化分析仪在检测过程中,样品和样品之间需用空气进行隔离,或用空白试剂或缓冲液来隔离,检测分析是标本一个接一个在连续流动状态下进行B.离心式自动生化分析仪所用样品量和试剂量均为微量级,分析速度快C.分立式自动分析仪是目前国内外多采用的设计模式,具有结构简单、检测速度快的特点D.干化学式分析仪其干片为一次性使用,成本较高E.以上皆是2.试剂盒稳定性评价时最合适的指标是A.校准K 值B.比对试验C.时间进程曲线D.试剂空白吸光度E.试剂空白变化速率3.免疫比浊法试剂盒的评价指标应除外以下哪项A.灵敏度B.线性范围C.抗体的效价D.抗体的特异性E.不同抗原决定族的反应性4.生化自动分析中获得单色光的方式不包括A.使用可旋转式干涉滤光片B.采用单色光光源C.使用全息反射式光栅D.使用蚀刻式凹面光栅E.使用插入式干涉滤光片5.关于离心式自动生化分析仪工作原理及程序,描述正确的是A.将样品和试剂分别置于转盘相应的凹槽内B.当离心机开动后,受离心力的作用,试剂和样品相互混合发生反应C.各样品最后流入转盘外圈的比色凹槽内,通过比色计检测D.在整个分析过程中每一步骤几乎是同时完成的,又称为同步分析E.以上皆是6.半自动生化分析仪的特征结构部件是A.流动比色池B.后分光光度监测系统C.离心转盘D.比例泵E.清洗装置7.乳酸脱氢酶测定属于A.一点终点法B.两点终点法C.三点终点法D.固定时间法E.连续监测法8.单液体剂型的试剂盒的缺点A .无法进行预反应 B.抗干扰能力差 C.不能使用双波长D.稳定性不如干试剂和液体双试剂E.做样品空白不如双试剂方便9.离心式自动生化分析仪加样时,转头中的空槽也必须用相同方法加入蒸馏水是为了A.提高分析精密B.减少污染C.保持平衡D.校正零点E.作空白对照10.关于自动分析仪的工作程序,描述正确的是A.在微机的控制下,通过比例泵将标本和试剂注入连续的管道系统中B.在一定的温度下,在管道内完成混合,去除干扰物C.经保温、比色测定、信号放大D.运算处理,最后将结果显示并打印E.以上皆是11.关于分析仪分析效率的叙述以下哪些正确A.循环周期越短分析效率越高B.加样周期越短分析效率越高C.分析效率的是指单位时间内完成的测试数,用tests/h 来表示D.以上皆是E.仅BC 正确12.两点终点法的读数方式A.反应开始时和反应终点时各读取吸光度B.在一定的时间范围里连续读取各吸光度值C.反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度D.终点附近读两个检测点取均值E.比较反应监测开始若干点的变化率与反应监测最后若干点的变化率13.关于当前分析仪发展的成果,以下描述正确的是A.分析效率越来越高B.测试项目越来越多C.高度智能化D.分析精度及准确度较以往大幅提升E.以上皆是14.连续流动式分析仪特有的结构部件是A.混匀装置B.加样器C.反应杯D.透析器E.孵育装置15.BCG 法测定白蛋白A.一点终点法B.两点终点法C.三点终点法D.连续监测法E.固定时间法16.光路系统的进步不包括以下哪项A.光源以氙灯代替卤素灯B.后分光方式代替前分光C.光栅分光代替了干涉滤片分光D.以内外两套检测器代替一套检测器E.信号传递方式由光导纤维代替光电信号传送17.在后分光光路系统中,比色杯的位置处于哪两者之间A.透视镜和保护玻璃之间B.透视镜和快门之间C.热玻璃和透射镜之间D.两层保护玻璃之间E.快门和分光光栅之间18.氧化酶法测定甘油三酯A.一点终点法B.两点终点法C.三点终点法D.连续监测法E.固定时间法19.加样针上的探测感应器功能不包括A.阻塞报警功能B.防碰撞报警功能C.液面感应功能D.随量跟踪功能E.样品性状(溶血、黄疸、脂浊)检测功能20.有关免疫比浊法的有关叙述正确的是A.胶乳凝集法可以提高灵敏度B.校正曲线非线性时需要多点校正C.多点校正常用LOGIT 或SPALINE 方程拟合D.以上皆是E.仅AC 正确21.反射光度法的多层膜结构依次为A.渗透扩散层、反射层、试剂层、辅助试剂层、支持层B.渗透扩散层、反射层、支持层、试剂层、辅助试剂层C.支持层、试剂层、辅助试剂层、反射层、渗透扩散层D.试剂层、辅助试剂层、支持层、反射层、渗透扩散层E.支持层、反射层、试剂层、辅助试剂层、渗透扩散层22.样品前处理系统不包括以下单元A.移动机器人B.离心装置C.复检缓冲区和复检轨道D.机器人固定机械臂E.条码生成和阅读器23.连续监测的读数方式A.终点附近读两个检测点取均值B.反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度C.反应开始时和反应终点时各读取吸光度D.在一定的时间范围里连续读取各吸光度值E.比较反应监测开始若干点的变化率与反应监测最后若干点的变化率24.荧光反射光度法的多层膜结构的扩散层主要包括A.一氧化铁、表面活性剂等B.二氧化铁、表面活性剂等C.二氧化铁、缓冲剂等D.缓冲剂、一氧化铁等E.缓冲剂、表面活性剂等25.实施全实验室自动化的软件名称是 A.TLA B.TATC.LISD.HISE.MODULAR26.用于免疫比浊的前区检查A.反应开始时和反应终点时各读取吸光度B.反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度C.在一定的时间范围里连续读取各吸光度值D.终点附近读两个检测点取均值E.比较反应监测开始若干点的变化率与反应监测最后若干点的变化率27.同一种试剂盒,取10瓶试剂复溶,测定同一样品的含量,求平均值、标准差、变异系数,则表示的A.天间精密度B.批内精密度C.批间差异D.瓶间差异E.以上都不是28.底物耗尽是指A.高活性浓度的样品在开始读点时大量消耗底物B.低活性浓度的样品在延滞期内大量消耗底物C.高活性浓度的样品在延滞期内大量消耗底物D.低活性浓度的样品在延滞期内少量消耗底物E.以上皆不正确29.荧光反射光度法的多层膜结构依次为A.基片、光屏层、信号层、扩散层B.基片、扩散层、光屏层、信号层C.基片、信号层、光屏层、扩散层D.光屏层、基片、扩散层、信号层E.信号层、基片、光屏层、扩散层30.苦味酸法测定肌酐A.一点终点法B.两点终点法C.三点终点法D.固定时间法E.连续监测法31.终点法时间反应曲线要求应除外以下哪项A.刚开始时成线性变化B.试剂空白的吸光度是否符合规定标准C.反应达到平衡后,吸光度最大并维持不变D.试剂空白的时间反应曲线应平坦,且无明显波动E.反应能在读取测定吸光度的时间之前达到平衡32.荧光反射光度法的多层膜包括 A.扩散层 B.光屏层 C.信号层 D.基片 E.以上皆是33.关于反应杯的叙述,不正确的是A.不管比色杯的光径大小都已校正到1cmB.反应杯采用透光性能好的硬塑料或石英玻璃制成C.加样、加试剂、搅拌混匀、清洗均在反应盘静止时进行D.在反应盘旋转过程也可以进行各反应液吸光度的检测E.反应杯清洗后必须通过反应杯空白吸光度检测,才可继续循环使用34.关于生化分析仪交叉污染的叙述其中正确的是A.通比色杯机内制造不需清洗步骤,超声搅拌方式不用清洗步骤B.通过对试剂针、搅拌棒、样品针、比色杯的清洗来防止交叉污染的措施C.过空气隔绝、水(试剂)冲洗、惰性液几种方式防止交叉污染的措施D.特殊清晰步骤是额外增加对试剂针、搅拌棒、样品针、比色杯的清洗程序E.以上皆是35.可从以下方面对全自动生化分析仪的性能进行评价A.准确度和检测精度B.自动化程度C.分析效率D.实用性E.以上皆是36.试剂的瓶间差异、批内和批间差异用来评价A.试剂盒的准确度.B.试剂盒的稳定性.C.试剂盒的精密度D.以上皆不是.E.A B 正确37.双试剂剂型的ALT 试剂盒的第一试剂消除的目的干扰物是A.内源性NH3B.内源性TGC.抗坏血酸D.游离甘油E.内源性丙酮酸38.临床生物化学自动分析方法包括A.始点法、连续时间法、固定监测法B.终点法、固定时间法、连续监测法C.中点法、固定时间法、固定监测法D.始点法、固定时间法、连续监测法E.终点法、连续监测法、连续时间法39.回收率、与定值血清的靶值偏差、比对试验及干扰试验用来评价A.试剂盒的稳定性.B.试剂盒的准确度.C.试剂盒的精密度D.以上皆是.E. B C 正确40.生化试剂盒中的双液体试剂A.按比例混合后明显优于单液体试剂,单分开保存时稳定性差于单液体试剂B.按比例混合后优于单液体试剂,单分开保存时稳定性明显优于单液体试剂C.按比例混合后等同于单液体试剂,单分开保存时稳定性明显差于单液体试剂D.按比例混合后等同于单液体试剂,单分开保存时稳定性明显优于单液体试剂E.按比例混合后优于单液体试剂,单分开保存时稳定性明显优于单液体试剂41双试剂剂型的ALT 试剂盒的第二试剂主要成分是A.NAD+B.NADHC.LDHD.丙氨酸E.α-酮戊二酸42试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限A.试剂盒的准确度.B.试剂盒的精密度C.试剂盒的稳定性.D.以上皆是.E.A C 正确43.自动生化分析仪常用的分析方法不包括A.终点分析法B.连续监测法C.比浊测定法D.均相酶免疫分析E.荧光免疫分析44.生化室纯化水制备的方法不包括A.去离子法 B.加沉淀剂法 C.蒸馏法 D.逆渗透法 E.过滤法45.关于单液体试剂的适用A.适于自动生化分析仪及小型半自动生化分析仪B.适于半自动生化分析仪及大型自动生化分析仪C.适于半自动生化分析仪及小型自动生化分析仪D.适于自动生化分析仪及大型半自动生化分析仪E.适于自动生化分析仪及小型半自动生化分析仪46干粉试剂的优点是A.瓶间变异小B.抗干扰能力强C.溶解(复溶)后稳定性好D.稳定性好,便于运输和保存E.不受实验室水质的影响47.自动生化分析仪仪器性能评价指标不包括A.总精密度B.批内重复性C.批间重复性D.相关性E.波长校正48.干试剂生化试剂盒又可分为A.干粉试剂、晶状试剂、片状试剂B.干粉试剂、冻干试剂、片状试剂C.片状试剂、条状试剂、晶状试剂D.晶状试剂、冻干试剂、条状试剂E.晶状试剂、冻干试剂、片状试剂49.自动生化分析仪测定血清载脂蛋白A,B 时采用A.一点终点法B.两点终点法C.定时两点法D.连续检测法E.透射比浊法50.离心式分析仪的特点A.同步分析B.样品可以是全血C.反应杯也做比色杯用D.以上皆是E.仅AC 正确51.关于生化试剂盒的发展,正确的是A.自配试剂向商品化试剂盒过渡B.液体试剂盒逐渐取代干粉试剂盒C.单液体试剂盒向液体双试剂发展D.以上皆是E.仅AC 正确52.为消除内源性干扰自动生化分析仪利用下列哪种方法A.采用双试剂B.采用单试剂C.采用双波长D.采用单波长E.采用多通道53.自动生化分析仪一点终点法的读数方式为A.在一定的时间范围内连续读取各吸光度值B.反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度值C.终点附近读两个检测点取均值D.在终点附近读取两点,计算两点吸光度值的差值E.每经过比色窗口即读取一个吸光度54.干、湿化学分析仪的区别在于A.试剂状态:干化学为固体,湿化学为液体B.反应容器:干化学为固相载体,湿化学为反应杯C.检测方法:干化学为反射光度法,湿化学为透射光度法D.理论基础:干化学基于Kubelka-Munk 理论,湿化学基于Lambert-Beer 定律E.以上皆是55.临床上所用的专用生化分析仪主要是指A.试剂专用B.项目专用C.仪器专用D.分析物专用E.技术人员专用56.通常标本条码下有10个阿拉伯数字,其中第4~5位表示A.标本号B.组合号C.标本类型D.月份E.日期57.干、湿化学分析仪在以下方面有所区别A.试剂状态B.反应容器 C.检测方法D.理论基础 E.以上皆是58.回收实验检测的是A.偶然误差B.比例误差C.恒定误差D.系统误差E.灵敏度59.根据设计原理,分析速度最快的自动生化分析仪是A.离心式B.典型分立式C.流动式D.半自动分立式E.全自动分立式60.临床化学自动分析仪的发展方向A.要具有高产量、高速度和高精度的优点B.要具有高产量、高速度和低成本的优点C.要具有高产量、高速度和体积小的优点D.要具有高产量、高精度和高智能化的优点E.以上皆是61.自动生化分析仪中连续检测法的读数方式为A.在一定的时间范围内连续读取各吸光度值B.反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度值C.终点附近读两个检测点取均值D.在终点附近读取两点,计算两点吸光度值的差值E.每经过比色窗口即读取一个吸光度62.朗伯-比尔定律只适用于A.单色光,非均匀,散射,低浓度溶液B.白光,均匀,非散射,低浓度溶液C.单色光,均匀,非散射,低浓度溶液D.单色光,均匀,非散射,高浓度溶液E.白光,均匀,散射,高浓度溶液63.与国外同类产品相比,国内生产的生化分析仪A.大多属半自动型B.产品的型号种类少C.自动化程度、精度、工艺质量有待提高D.可靠性和稳定性有差距E.以上皆是64.关于试剂空白吸光度的变化错误的是A.内源性干扰物B.有些试剂久置后会变混浊C.ALP 试剂因基质分解出硝基酚而变黄D.Trinder 反应的试剂会因酚被氧化为醌而变红E.负反应试剂吸光度因NADH 氧化为NAD+而改变65.克服某些试剂不稳定引起的误差可以采用A.双波长法和双试剂两点法B.单试剂法和双试剂两点法C.双试剂单波长一点法和单试剂法D.双试剂两点法和双波长法E.双试剂单波长一点法和双试剂两点法66.回收实验检测的是 A.偶然误差 B.比例误差 C.恒定误差 D.系统误差 E.灵敏度67.临床化学自动分析仪的发展方向A.采用多自由机械臂来协调各个功能模块之间工作B.具有多种模式的不同通道的液体处理装置可供选择,使仪器具有极强灵活性,能够满足各种分析要求C.自动化工作站采用模块化设计思想,既便于实现高度集成,又便于满足用户要求D.根据需要融合模块化的工作台面,节省空间,缩短试验时间E.以上皆是68属于分析仪结构部分改进的不包括以下哪项A.线性范围扩展B.多头回旋混匀C.集束式点光源D.数字式加样系统E.陶瓷活塞非触壁式吸量器69.不去蛋白时,血清中肌酐多采用下列何种方法进行测定A.碱性苦味酸动力学法B.碱性苦味酸终点法C.酸性苦味酸动力学法D.酸性苦味酸终点法E.中性苦味酸动力学法70.透析器的透析效率与下列哪项因素无关A.渗透压差B.浓度差C.透析膜的孔径大小D.反应液的温度E.透析开始的时间71.自动分析仪的性能评价指标A.自动化程度B.分析效率C.应用范围D.精密度和准确度E.以上皆是72.离心机砖头的旋转速度为20000γ/min 的离心为A.低速离心B.平衡离心C.高速离心D.超速离心E.等密度离心73.通常标本条码下有10个阿拉伯数字,其中第7-8位表示A.标本号 B.组合号 C.标本类型 D.月份 E.日期74.自动分析仪的类型A.按反应装置的结构可分为连续流动式(管道式).离心式.分立式.干片式B.按自动化程度可分为单通道和多通道C.按同时可测定项目可分为单通道和全自动D.以上皆是E.以上皆不是75.通常标本条码下有10个阿拉伯数字,其中第6位表示A.标本号 B.组合号 C.标本类型 D.月份 E.日期76.时间分辨荧光免疫分析采用的标记物是A.放射性物质B.稀土元素 C.酶 D.地高辛 E.抗体77.自动分析仪的类型A.按反应装置的结构可分为连续流动式(管道式).离心式.分立式.干片式B.按自动化程度可分为单通道和全自动C.按同时可测定项目可分为单通道和多通道D.以上皆是E.以上皆不是78.自动生化分析仪两点终点法的读数方式为A.在一定的时间范围内连续读取各吸光度值B.反应尚未开始和反应终点时各读取吸光度值C.终点附近读两个检测点取均值D.在终点附近读取两点,计算两点吸光度值的差值E.每经过比色窗口即读取一个吸光度79.美国临床实验室标准化委员会(NC-CLS)所规定的一级纯水标准中没有明确规定的特性指标是A.微生物含量B.电阻率C.pHD.微粒E.有机物质80.自动分析仪的类型,按同时可测定项目可分为A.单通道和双通道B.单通道和多通道C.半自动和全自动D.单通道和全自动E.以上皆不是81.方法比较实验检测的是 A.偶然误差 B.比例误差C.恒定误差 D.系统误差 E.灵敏度82.关于双波长选择不正确的一项是A.以主波长减次波长计算吸光度值B.次波长一般要比主波长小100nm 左右C.被测物在主、次波长处的光吸收值应有较大的差异D.双波长可以消除部分来自标本的非化学反应干扰E.干扰物在主、次波长处的光吸收值应尽可能的接近83.自动分析仪的类型,按自动化程度可分为A.单通道和双通道B.单通道和多通道C.半自动和全自动D.单通道和全自动E.以上皆是84.重复性实验检测的是A.偶然误差 B.比例误差C.恒定误差 D.系统误差 E.灵敏度85.自动分析仪的类型,按反应装置的结构可分为A.连续流动式(管道式)B.离心式C.分立式D.干片式E.以上皆是86.自动生化分析仪BCG 法测定血清白蛋白时采用A.一点终点法B.两点终点法C.定时两点法D.连续检测法E.透射比浊法87.第一代自动分析仪是A.连续流动式 B.离心式C.分立式D.干片式 E.任选式88.当今国内外的主流机型是A.连续流动式B.离心式C.分立式 D.干片式 E.以上皆是89.以下哪项不属于分析后处理自动化A.结果审核B.可疑结果复查C.结果输出D.样品运输E.样品保存90.临床生物化学自动分析仪性能包括A.准确度和检测精密度B.自动化程度 C.分析效率D.实用性E.以上皆是91.简述自动生化分析仪的特点。
附件:项目需求书附件1液相色谱仪1台用途:仪器用于各类环境样品中有机污染物的分析包括土壤、污泥、废弃物、饮用水、地表水、地下水和各类药品、食品、动植物样品等。
符合美国国家环保局(EPA)的法规标准分析方法所规定的用于各类环境样品分析的标准方法。
1. 主要技术指标1.1 二元泵1.1.1 串联双柱塞往复泵,专利伺服控制主动入口阀, 可变冲程(20μL~100μL)设计;用户自主溶剂压缩因子设置,保证在不同流速及不同流动相组成的最佳流速稳定性。
1.1.2 流速范围:0.001~5.0mL/min, 0.001mL/min步进1.1.3 *操作压力:0~60 MPa (0~600 bar, 0~8700psi)梯度组成精密度:<0.15% RSD1.1.4 梯度组成准确度:±0.5%1.1.5 梯度延迟体积:120μL1.2 在线真空脱气机1.2.1 四通路在线真空膜过滤技术,内置真空泵,压力传感器,实时监控真空腔压力变化,保证及时高效的脱气操作。
1.2.2 真空维持:最大流速5.0mL/min1.2.3 内体积:1.0mL1.2.4 pH耐受范围:1~141.3 自动进样器1.3.1 进样范围:0.1~100μL,增量为0.1μL;1.3.2 进样精度:< 0.25% RSD(进样体积5~100μL)< 1% RSD (进样体积1~5μL)1.3.3 最快进样速度:1000uL/min1.3.4 样品粘度范围:0.2~50cp1.3.5 pH范围:1.0~9.51.3.6 样品容量:2 块多孔板(96孔板和/或384 孔板)+ 10个2mL样品瓶1个100 位样品盘,每个样品盘可放置100个2mL样品瓶2个40位样品盘,每个样品盘可放置40个2mL样品瓶1.3.7 样品残留:<0.01%1.3.8 *最大操作压力:600bar1.4. 柱温箱1.4.1 控温范围:室温下10℃~100℃1.4.2 控温速率:室温加热至40℃,5min;40℃降温至20℃,10min1.4.3 控温精度:0.15℃1.4.4 控温准确度:0.5℃1.4.5 柱容量:30cm×31.4.6 内体积:左控温模块3uL,右控温模块6uL;1.4.7 附加低扩散热交换器,并具有柱后降温功能,保证快速检测时基线平稳。
1.4.8 GLP 性能:柱识别器记录色谱柱的使用次数及使用方法1.5. 二极管阵列检测器1.5.1 光源:氘灯和钨灯1.5.2 *波长范围:190~950nm1.5.3 实时信号:同时输出8 个实时信号1.5.4 波长精度:1nm1.5.5 基线噪音:±1.0*10-5AU at 254 and 750nm(1mL/min甲醇)1.5.6 基线漂移:2*10-3AU/h at 254nm (1mL/min甲醇)1.5.7 线性范围:>2AU1.5.8 测量范围:>2AUFS1.5.9 带宽:2~400nm,可设定步长1nm1.5.10 *最快采样速率:80Hz1.6 荧光检测器1.6.1 灵敏度:蒽在250nm激发波长400nm发射波长的最低检出限(LOD)为10fg;水在350nm激发波长397nm发射波长的信噪比S/N:4001.6.2 光源:闪烁氙灯(标准型20W,经济型5W)1.6.3 脉冲模式:单一模式296Hz; 经济模式74Hz1.6.4 激发光柵:200~700nm1.6.5发射光柵:280~900nm1.6.6 实时信号:可同时输出4 个激发或发射波长的实时检测信号1.7. 仪器控制及数据处理系统1.7.1 参数输入:仪器控制参数,数据采集及计算处理参数的设定;1.7.2 报告:内置多种报告格式,自动生成系统适应性报告、峰纯度报告、光谱检索报告等;用户编辑个性化的报告模板;1.7.3 早期维护预警(EMF)1.7.4 安装验证(IQ):仪器软、硬件的自动认证;1.7.5 电子日志:实时记录仪器使用操作情况,随时查阅仪器状态。
2. 配置要求提供仪器运行所需的2年的消耗品清单。
附件2气相色谱/质谱联用仪1台用途:仪器用于各类环境样品中有机污染物的分析包括土壤、污泥、废弃物、饮用水、地表水、地下水和各类药品、食品、动植物样品等。
符合美国国家环保局(EPA)的法规标准分析方法所规定的用于各类环境样品分析的标准方法。
可实现和相同型号仪器的数据比对。
主要技术指标1.1气相色谱仪1.1.1柱箱1.1.1.1操作温度:室温以上4˚C-400˚C1.1.1.2温度分辨:1˚C温度设定,0.1˚C程序设定1.1.1.3四梯度/五平台程序升温1.1.1.4温度稳定性:<0.01˚C每1˚C环境变化1.1.2 毛细柱分流/无分流进样口(带电子气路控制)1.1.2.1 最高使用温度:400˚C1.1.2.2 *压力设定范围:0-150Psi, 精度0.01Psi1.1.3 自动进样器1.1.3.1 进样量范围:0.1~50μL1.1.3.2 进样量线性:≥99%2.1质谱检测器2.1.1 *质量数范围:1.6-1050amu,以0.1amu递增2.1.2 质量轴稳定性: 优于0.10amu/48小时2.1.3 灵敏度:全扫描灵敏度(电子轰击源EI):1pg八氟萘(OFN),信/噪比≥100:1 选择离子检测(电子轰击源EI):20fg八氟萘,信/噪比≥10:12.1.4 最大扫描速率:10,000amu/秒2.1.5 动态范围:全动态范围为1062.1.6 具有全扫描/选择离子检测同时采集功能2.1.7 离子化能量:5-241.5eV2.1.8 离子源温度:独立控温,150-300˚C可调2.1.9 分析器:双曲面四极杆,独立温控2.1.10 真空系统:分子涡轮泵,带机械泵2.2数据处理系统2.2.1 手动/自动调谐,数据采集,数据检索,分析结果报告,定量分析及谱库检索功能。
2.2.2 数据分析软件应包括常规数据和符合EPA 要求的专用环境数据处理等多种分析模式。
两种模式通过软件配置互相转换,均能独立工作。
2.2.3 谱库:NIST05谱库(19万张),化学结构式库(16万张)。
2.2.4 * 气相色谱-质谱具有保留时间锁定(RTL)功能。
此功能通过软件自动调整仪器工作参数,在五个不同条件下进样,分析锁定目标化合物而实现。
保留时间重现性: < 0.0012min; 峰面积重现性: < 2.0% RSD。
并提供详细保留时间谱库名单和内容。
2.2.5 硬件:进口品牌计算机,其配置不低于:P4/2.8 GHz/ 512 MB内存,80 GB 硬盘,CD-RW(可读写光驱), 17”LCD,HP 激光打印机2.3 必备附件、零配件2.3.1色谱柱:极性、非极性、中等极性色谱柱各一根(适合于不同温度下GC-MS 专用)2.3.2 起始工具包1套2.3.3 提供仪器运行2年所需的零配件及消耗品,请列详单。
附件3电感耦合等离子体质谱1台用途:仪器用于各类环境样品中无机元素分析包括土壤、污泥、废弃物、饮用水、地表水、地下水和各类药品、食品、动植物样品等。
它符合美国国家环保局(EPA)的法规标准分析方法所规定的EPA method 200.8、EPA method 6020等用于各类环境样品分析的标准方法。
ICP-MS必须具有以下分析特性:1)通过离子的荷质比进行定性分析;2)通过全扫描对所有元素进行半定量分析,不需要标准溶液;3)进行定量分析;4)同位素比测定;5)可与HPLC, GC, CE等色谱技术以及氢化物发生、流动注射、激光烧蚀等进样技术联用进行元素的价态、结合形态的分析和特殊要求样品的分析。
1、仪器工作环境:输入电压:单相220 -240 V,30A,频率50/60 Hz室温:15-30 ºC 湿度:20-80%2、主要技术指标:2.1 仪器主机2.1.1 雾化器2.1.2 雾化室:小死体积,低记忆效应,配置半导体制冷装置对雾化室制冷控温2.1.3 接口:Ni采样锥与截取锥2.1.4 气体控制:3路AFC高灵敏度气体流量控制器(包括冷却气、辅助气、载气)2.1.5 四极杆:双曲面钼质或陶瓷镀金,四极杆驱动射频2.0-3.0 MHz2.1.6 检测器:脉冲与模拟同时双通道模式检测器2.1.7 工作曲线线性动态范围:≥8个数量级2.1.8 质量范围:5 –250 amu2.1.9高性能等离子体屏蔽炬技术,具有热焰超高灵敏度功能、冷焰高性能去干扰技术,常规分析与冷焰、热焰模式等功能能够在一次分析中自动切换。
2.1.10 计算机配置: 操作系统为Windows XP操作环境,3.2GHz奔腾IV, 512MB内存,160G HDD, 48倍速可读写光驱), 17寸液晶显示器,激光打印机,ICP-MS操作软件及应用软件(包括:全自动调谐,炬管位置X、Y、Z方向由计算机全自动三维控制,打印所有仪器工作参数报告功能、个性化报告、智能序列软件、QA/QC软件、色谱与激光烧蚀瞬间信号采集功能。
)2.2 性能指标2.2.1 灵敏度轻质量数Li(7):≥8 Mcps/ppm中质量数Y(89):≥20 Mcps/ppm重质量数Tl(205):≥12 Mcps/ppm2.2.2氧化物(MO+/M+):≤1 %2.2.3 双电荷离子(M2+/M+):≤3.0 %2.2.2和2.2.3须同时满足。
2.2.4 丰度灵敏度:低质量端:≤1 x 10-6(或>1 x 106)高质量端:≤5 x 10-7 (或>1 x 106)2.2.5 短期稳定性(RSD):≤2% (20 min)2.2.6 长期稳定性(RSD):≤3% (2 hrs)2.2.7 热焰超高灵敏度分析指标:Y(89): ≥ 500 Mcps/ppm2.2.8 含1.0%NaCl高盐基体样品测定稳定性(RSD):≤5% (1小时以上包含Be,Al,V.Cr,Mn,Co,Ni,Cu,Zn,As,Sr,Ag,Cd,Ba,Tl,Pb,U)2.2.9 HPLC-ICP-MS接口性能指标:2.2.9.1软硬件指标:一体化联用技术,可以通过液相工作站或阀启动ICP-MS信号收集,联机具有同步功能。
联机接口硬件包括专用PEEK导管、导管接地三通、数据传输系统等硬件。
联机软件包括ICP-MS的“Time Resolved Analysis Mode”色谱分析专用功能、“Plasma-Chrom”数据处理专用软件,具有实时显示,实时分析功能。
2.2.9.2 *安装测试指标100ppt甲基Hg, 无机Hg2+,乙基Hg(以Hg计)等3种Hg形态的混合标准溶液可以用HPLC-ICPMS在10分钟内完全分离并得出积分峰面积和保留时间等信息,各个Hg形态峰的信噪比S/N>3,以国家计量认证数据为准。