药物分析中新型样品前处理技术-2013

第51卷第4期 辽 宁 化 工 Vol.51，No. 4 2022年4月 Liaoning Chemical Industry April，2022样品前处理技术在药物分析中的研究进展唐郡遥（沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 110016）摘 要： 对于药物分析来说，良好的样品前处理技术可为后续分析带来保障。

近些年随着科学技术水平的提高，样品前处理出现了诸多新方法，如固相微萃取、液液微萃取等。

对最近几年药物分析中样品前处理技术进行了综述总结。

关 键 词：样品前处理；固相萃取；液相萃取中图分类号：TQ460.7 文献标识码： A 文章编号： 1004-0935（2022）04-0512-03对于药物分析来说，药物样品的前处理十分重要，而且这是一个必要的环节，现已成为一个具有挑战性在问题。

样品前处理将被测组分从复杂样品中分离出来，制成便于测定的形式，同时，如果被测组分选定的分析方法难以检测，还需要通过样品衍生化处理为另一种适合检测的化合物。

对于固相样品，常常采取传统样品的制备方法，比如固相萃取法、液相萃取法、液液微萃取法。

本文综述介绍了近几年来多种萃取方法在药物分析前处理中的应用。

1 固相萃取1.1 固相萃取（SPE）固相萃取技术是一种高效、方便的提取技术，可同时完成样品的集中与洗涤，且萃取速度快。

吴莹[1]等利用固相萃取方法测定腹膜透析液中1,2-己二胺含量，该方法以甲醇、0.1%甲酸为流动相，进行洗脱，该方法灵敏度高，回收率为97.8%~108.0%。

邓晓晴[2]等建立串联质谱-固相萃取液相色谱测定人体血浆中抗抑郁药物含量，回收率为90.0%~97.3%。

狄鑫[3]等将固相萃取-液相色谱萃取串联，测得水中诺氟沙星、罗红素等7种抗生素含量，加标回收率为68%~112%，可证明该回收方法回收率高、精密度好。

周瑞铮[4]等利用固相萃取结合液色谱-串联质谱法测定淡水鱼中残留的磺胺类和喹诺酮类药物。

在不同浓度下，测得平均回收率为84.4%~114.6%。

体内药物分析中的样品预处理技术摘要：综述了国外近5年来体内药物分析中样品预处理技术的最新应用进展,包括固相微萃取技术和超临界流体萃取技术,以及这两种技术与现代分析仪器的联用,并展望了这些新技术的应用前景。

关键词：样品技术去蛋白分离与浓集缀合物的水解化学衍生化体内药物分析是通过分析的手段了解药物在体内（包括实验动物等机体）数量与质量的变化，获得各种药物代谢动力学的各种参数和转变、代谢的方式、途径等信息。

从而有助于药物生产、实验、研究、临床等各个方面对所研究的药物作出估计与评价，以及对药物的改进和发展作出贡献。

一：体内药物分析的样品可以分为（一）血样：血浆（plasma）和血清（serum）是体内药物分析最常采用的样本，其中选用最多的是血浆。

（二）尿样（urine）：尿样测定主要用于药物剂量回收研究、药物肾清除率和生物利用度等研究，以及测定代谢物类型等。

（三）唾液（saliva）：唾液中的药物浓度通常与血浆浓度相关。

样品易得，取样无损害，尤易为儿童接收。

（四）其它：乳汁、动物脏器组织匀浆等。

二：处理目的治疗药物监测中，除少数方法可以对采集的样品直接进行分析外，大多需要对样品进行必要的预处理。

预处理的目的是在不破坏待测定成分的前提下，用适当的方法分离纯化或浓缩待测药物，以减少干扰、提高检测灵敏度和特异性、降低对仪器的污染和损害。

所以，体内样品的预处理是体内样品分析的重要环节三：样品与处理方常用的体内样品的与处理方法大致分为去蛋白质法,分离与浓集法,缀合物的水解,化学衍生化法及微波萃取和微透析技术等。

1.去蛋白法在测定血样时，首先应去除蛋白质。

去除蛋白质可使结合型的药物释放出来，以便测定药物的总浓度。

去除蛋白质的方法有：容积沉淀法,中性盐析法,强酸沉淀法,热凝固发。

2.分离与浓集液·液萃取法是传统的分离浓集方法。

随着药物分离的不断提高，体内样品前处理技术得到了迅速的发展，在液相萃取的基础上出现了许多分离与浓集的新技术和新方法。

药物分析中的生物样品前处理方法研究近年来，随着生物医药领域的快速发展，药物分析在疾病的诊断和治疗中扮演着至关重要的角色。

为了获得准确可靠的分析结果，生物样品的前处理方法显得尤为重要。

本文将探讨药物分析中常用的生物样品前处理方法的研究进展。

一、血液样品的前处理方法研究血液样品作为一种常见的生物样品，在药物分析中扮演着重要的角色。

然而，血液样品中存在着各种成分的干扰，如蛋白质、血红蛋白等。

因此，研究人员提出了多种前处理方法来解决这些问题。

1. 血浆/血清的蛋白质沉淀方法血浆/血清中的蛋白质是最常见的干扰物之一。

为了降低蛋白质对分析结果的影响，研究人员开发了各种蛋白质沉淀方法。

例如，酸沉淀法可以通过改变pH值使蛋白质凝聚沉淀，从而去除蛋白质干扰。

此外，还有醇沉淀法、有机溶剂沉淀法等。

2. 血浆/血清的固相萃取方法固相萃取方法是血液样品前处理中常用的技术之一。

其原理是利用吸附剂对目标化合物进行特异性吸附，从而去除干扰物。

通过选择合适的吸附剂，可以实现对特定成分的富集。

例如，固相萃取柱常用于血浆/血清样品中药物的富集与净化。

二、尿液样品的前处理方法研究尿液样品常用于药物代谢和排泄的研究，但由于其复杂的成分和高度变异性，前处理方法显得尤为重要。

1. 尿液样品的前处理方法选择尿液样品前处理的关键是选择合适的方法。

常见的前处理方法包括尿液蛋白质去除、有机溶剂浓缩、尿液稀释等。

根据具体的分析需求和目标物质的特性，选择恰当的前处理方法可以显著提高分析结果的准确性和灵敏度。

2. 尿液样品的固相萃取方法研究固相萃取也是尿液样品前处理中常用的技术之一。

通过选择适当的吸附剂和前处理条件，可以有效地去除尿液中的杂质，提高目标物质的测量灵敏度。

例如，固相萃取柱结合气相色谱-质谱联用技术可以用于尿液样品中药物代谢产物的研究。

三、其他生物样品的前处理方法研究除了血液和尿液样品，还有其他生物样品在药物分析中的应用。

例如，头发样品被广泛用于毒品滥用的检测。

体内药物分析中的样品预处理技术体内药物分析是指体内样品（生物体液、器官或组织）中药物及其代谢产物或内源性生物活性物质的定量分析。

通常药物进入体内后，其化学结构与存在状态就可能发生显著变化。

在体液中，药物的存在形式多样化，除游离型的原料药物或其代谢物，也有原形药物或其代谢物与葡萄糖醛酸等内源性小分子经共价结合的结合物（或缀合物），还有与蛋白质分子经氢键及其他分子间力结合的结合型药物；而且药物及其代谢物的浓度通常很低、干扰物质多。

因此，在测定时，除少数情况将体液作简单处理后可直接测定外，通常在测定前要对体内样品进行分离净化与浓集等样品前处理，从而为体内样品中药物的测定提供良好的环境和条件。

常用的样品前处理方法有：去除蛋白质、缀合物水解、化学衍生化、分离浓集及微波萃取和微透析技术等。

一、体内样品种类：体内药物分析采用的体内样品包括血液、尿液、唾液、头发、脏器组织、乳汁、精液、脑脊液、泪液、胆汁、胃液、胰液、淋巴液、粪便等样品。

这些大都具有：①采样量少；②待测物浓度低；③干扰物质多的特点。

二、体内样品预处理的目的：⑴使待测药物游离，以便测定药物或代谢物的总浓度；⑵满足测量方法的要求，纯化浓集样品；⑶保护仪器性能、改善分析环境。

三、常用生物样品预处理技术：⒈有机破坏法：湿法破坏：电热消化器法、电热板消化法、烘箱消化法干法破坏：高温电阻炉灰化法、低温等离子灰化法氧瓶燃烧法⒉去蛋白质法：溶剂解法（加入与水相混溶的有机溶剂）、加入中性盐、加入强酸、加入含锌盐或铜盐的沉淀剂、超滤法、酶水解法、加热法⒊分离、纯化和浓集法：液﹣液萃取法、固相萃取法⒋缀水物的水解法：酸水解法、酶水解法⒌化学衍生化发：硅烷化、酰化、烷基化、紫外衍生化、荧光衍生化、点化学衍生化、生成非对映异构体衍生化发四、新兴生物样品预处理技术：⒈微波消解⒉自动化固相萃取⒊固相微萃取⒋液相微萃取⒌微透析技术⒍超临界流体萃取⒎分子印迹固相萃取这里就固相微萃取技术和超临界流体萃取技术进行简单说明：⑴固相微萃取固相微萃取( Solid phase micro2-extraction,SPME) 是80年代末发展起来的样品预处理方法, 其装置简单, 操作方便, 已实现自动控制, 适用于现场分析。

在测定生物样品中药物及其代谢物时，样品的前处理是十分重要的。

除了少数情况，将体液经简单处理后进行直接测定外，一般要在测定之前进行样品的前处理，即进行分离、纯化、浓集，必要时还需对待测组分进行化学衍生化，从而为测定创造良好的条件。

生物样品进行前处理的目的在于：①药物进入体内后，经吸收、分布、代谢，然后排出体外。

在体液、组织和排泄物中除了游离型（原型）药物之外，还有药物的代谢物、药物与蛋白质形成的结合物、以及药物或其代谢物与内源性物质，如葡萄糖醛酸、硫酸形成的葡萄糖醛酸甙（glucuronides）、硫酸酯（sulphates）缀合物等多种形式存在，需要分离后测定药物及代谢物；②生物样品的介质组成比较复杂。

如在血清中既含有高分子的蛋白质和低分子的糖、脂肪、尿素等有机化合物，也含有Na＋、K＋、X-等无机化合物］。

其中影响最大的是蛋白质，若用HPLC法测定药物浓度时，蛋白质会沉积在色谱柱上发生堵塞，严重影响分离效果。

因此，为了保护仪器，提高测定的灵敏度，必须进行除蛋白等前处理。

体内药物分析中的样品预处理技术【摘要】本综述主要阐述近年来体内药物分析中样品预处理技术的几种常用方法技术，包括有机破坏、分离蛋白法液—液萃取法、固相萃取法固相微萃取技术和超临界流体萃取技术等。

【关键词】样品预处理技术；有机破坏；分离蛋白法；液—液萃取法；固相萃取法；固相微萃取法；超临界流体萃取法；体内药物分析【正文】在体内药物分析中常采用的生物样品包括血液、尿液、唾液、乳汁、精液、泪液、胃液、胆汁、粪便等样品。

其中最常用的是血浆或血清，因为二者更能体现药物浓度与治疗作用之间的关系。

测定体内药物及其代谢物时，常常不能进行直接测定，需要实施分离、净化、浓集、化学衍生等，这些处理技术即为样品预处理技术。

样品预处理是体内药物分析中极为重要的环节，也是最困难，最繁琐的工作。

在分析过程中如何方便、快捷地对样品进行预处理，将少量的药物从大量复杂的生物基质中分离出来，以便准确定性、定量，是体内药物分析面临的首要问题。

常用的样品预处理技术有有机破坏法、蛋白分离技术、萃取技术等。

近几年研究表明：采用固相微萃取技术及超临界流体萃取技术处理生物样品具有快速简便，选择性好、回收率高、无需使用大量有机溶剂等优点，因此成为当今体内药物分析中最有发展潜力的两种样品预处理技术。

1.有机破坏技术有机破坏包括湿法破坏、干法破坏以及氧瓶燃烧法三种技术。

湿法破坏是以硝酸为消解液，与生物样品共热，生物样品被氧化破坏游离出待测组分；干法破坏是将生物样品高温炽灼，生物介质被灰化，经水或酸溶解后测定；氧瓶燃烧法是采用燃烧分解有机物的简单技术，能将待测元素定量分解成离子型。

2．分离蛋白质法蛋白质分离技术包括容剂解法、中性盐盐析法、强酸破坏、金属盐沉淀、超滤法、酶解法、加热法使蛋白质变性沉淀等。

前两者主要是破坏蛋白质表面电荷及水化膜是蛋白质沉淀；金属盐能与蛋白中的特定离子生成沉淀达到分离效果；超滤法是运用半透膜的原理来分离蛋白质；待测组分对热稳定时可采用加热方法是蛋白质变性，从而与待测组分分离。

药物分析中的新型样品制备方法的研究进展药物分析是药学领域中非常重要的一项研究内容，它涉及到药物的成分分析、质量控制、安全性评估等方面。

在药物分析中，样品制备是一个关键的环节，直接影响到分析结果的准确性和可靠性。

随着科技的进步和研究的深入，新型的样品制备方法不断涌现，为药物分析领域带来了新的发展机遇和挑战。

本文将对药物分析中的新型样品制备方法的研究进展进行探讨。

一、离心技术在样品制备中的应用离心技术是一种常用的样品制备方法，在药物分析中得到了广泛的应用。

通过离心将样品中的杂质、离子或颗粒物与药物分离，以提高分析灵敏度和准确度。

随着离心机技术的不断更新，现代离心机已经具备了更高的分离效率和样品处理能力，能够快速、高效地完成样品制备过程。

二、萃取技术在样品制备中的应用萃取技术是一种常见的样品前处理方法，通过选择合适的溶剂提取样品中的目标成分，使其与有机溶剂分离。

该方法具有操作简便、效果稳定的特点，已被广泛应用于药物分析中。

现如今，一些新型的萃取技术如固相微萃取、液相微萃取等，进一步提高了样品制备的效率和准确性，成为药物分析领域的研究热点。

三、固相萃取技术在样品制备中的应用固相萃取技术是一种基于吸附原理的样品制备方法，其原理是利用固相萃取柱将目标化合物吸附在固定相上，再通过洗脱将目标化合物与固定相分离。

该技术具有选择性好、灵敏度高、样品耗量小的优点，逐渐成为药物分析领域样品制备的重要手段。

四、微波辅助技术在样品制备中的应用微波辅助技术是一种利用微波加热样品的方法，在药物分析领域被广泛应用于样品制备过程中。

微波辅助技术具有加热均匀、加热速度快、效果显著等特点，能够提高样品制备的效率和准确性。

同时，该技术还可以减少有机溶剂的使用量，对环境友好，因此在实践中得到了广泛的推广和应用。

五、电化学技术在样品制备中的应用电化学技术是一种基于电化学反应原理的样品制备方法，该方法通过控制电位和电流来促进样品中的化学反应。

最前沿的样品前处理技术都在这了样品前处理的主要目的1、基体或共存物质干扰（干扰消除）2、样品浓度调节（浓缩、富集、稀释）3、样品介质不适合后续分离或检测（介质置换）4、避免系统污染，延长仪器寿命（仪器保护）固体样品中被测物的溶出技术1、溶解：被测物全部溶解，基体全部或大部分溶解（残渣）水溶、酸溶、碱溶、有机溶剂。

2、提取（浸取）：被测物和少部分基体物质溶解进入溶液（快速）索氏提取、微波/超声辅助，加速溶剂提取。

3、消解（裂解、降解）：破坏基体，释放出目标物质。

湿法：强氧化性酸解、微波消解、光解、酶解。

干法：灰化、熔融、氧弹（氧瓶）燃烧、裂解、燃烧炉。

样品净化新技术1、液相萃取：双水相、浊点、胶团、离子液体，微萃取2、固相萃取：基质分散SPE、磁SPE、微萃取3、色谱：GPC-色质、柱切换（在线干扰消除/在线富集）4、电化学：原位电沉积、电渗析、电泳（薄膜、凝胶）5、膜分离：超滤、透（渗）析、微透析、仿生膜6、超分子分离：主客体配合物、分子印迹、亲和（免疫磁珠）7、其他：超速离心、超临界流体萃取、分子蒸馏、芯片分离样品前处理技术发展趋势1、自动化（加速溶剂提取、SPE、稀释/浓缩）2、在线化（GPC-色质、SPE-色谱/色质、CIC、超滤-IC）3、微量化（液相/固相微萃取、芯片分离）4、多任务（平台）（稀释-渗析、固相萃取-浓缩）5、专门化（QuEChERS法、顶空-GC、氢化物发生-原子荧光）重要技术进展举例一、液相微萃取（LPME）1996年在液液萃取基础上发展起来，结合了液液萃取和固相微萃取的优点。

只需极少量的有机溶剂、装置简单、操作方便、成本低；适合萃取在水溶液中溶解度小的痕量目标物；方便与后续分析仪器连接，实现在线样品前处理。

最初的液相微萃取—单滴微萃取（single-drop microextraction) 一滴溶剂直接悬挂于色谱进样针尖，将其浸入样品水溶液（或样品顶空气相）中，分析物萃取到有机溶剂液滴中，直接注入色谱仪分析（分离进样）。

药物分析中的样品前处理技术研究在药物研发和应用过程中，药物分析是至关重要的环节之一。

而样品前处理技术在药物分析中扮演着重要的角色。

本文将从样品前处理技术的定义、分类、常用方法及其优势等方面进行探讨。

一、样品前处理技术的定义样品前处理技术是指在药物分析中，对药物样品进行预处理以消除干扰物质、提高药物测定的准确性和灵敏度的一系列操作。

样品前处理的目的是将复杂的实际样品转换为适于仪器检测和定量分析的形式。

二、样品前处理技术的分类根据样品的性质和分析目的的不同，样品前处理技术可以分为以下几类：1. 洗脱技术：通过洗涤样品来去除杂质，常用的洗脱技术包括溶剂萃取、水相萃取和固相萃取等。

2. 浓缩技术：将样品中的分析物浓缩到较小的容量中，常用的浓缩技术包括蒸发浓缩、气相浓缩和液相浓缩等。

3. 分离技术：将样品中的目标物与干扰物质进行分离，常用的分离技术包括萃取、析出、萃淋和分液等。

4. 净化技术：去除样品中的杂质或干扰物质，常用的净化技术包括沉淀净化、离子交换净化和凝胶渗透层析净化等。

三、常用的样品前处理方法根据样品的特性和分析目的，药物分析中常用的样品前处理方法包括以下几种：1. 固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）：通过吸附柱将样品中的目标物吸附，同时去除干扰物质，然后用溶剂洗脱目标物。

SPE具有简单、高效、高选择性和灵敏度高等优势。

2. 液-液萃取（Liquid-Liquid Extraction，LLE）：利用两相不溶的溶剂，将样品中的目标物从样品液相中转移到另一溶剂中，以实现分离和浓缩。

LLE具有选择性好、适用范围广等优点。

3. 直接注射（Direct Injection）：适用于目标物浓度较高、样品不含干扰物质或对干扰物质不敏感的情况。

直接注射省去了前处理步骤，简化了分析流程。

4. 溶剂萃取（Solvent Extraction）：利用溶剂与目标物之间的相溶性差异，将目标物提取到有机相中，以实现分离和浓缩。

药物分析中的生物样品前处理概况张亚琛;黄火强;杜丽洁【摘要】生物样品包括血浆、组织、尿液及细胞等,具有成分复杂、干扰物质多等特点,对生物样品前处理技术极大的影响了实验的灵敏度与准确性.文章主要对生物样品处理常用技术的特点、方法以及在药物研究方面的应用等进行了综述,并对未来技术的发展进行展望.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2017(026)019【总页数】4页(P42-45)【关键词】生物样品;蛋白质沉淀;液-液萃取;固相萃取【作者】张亚琛;黄火强;杜丽洁【作者单位】中央民族大学中国少数民族传统医学研究院,北京100081;中央民族大学中国少数民族传统医学研究院,北京100081;中央民族大学中国少数民族传统医学研究院,北京100081【正文语种】中文【中图分类】R917生物样品的前处理是生物分析的一个重要环节。

正常情况下，药物、代谢物以及生物标志物存在于复杂的生物基质中，主要包括盐、酸、碱、蛋白质和许多外源性或内源性小分子，比如脂类和脂蛋白。

而生物样品的前处理就是采取适当的技术，最大程度消除基质对分析物的影响，为药物及其代谢产物的测定创造条件。

有效的预处理是确保得到准确的生物分析结果的基础，且占用了80%的生物分析时间[1]，因此样品的制备被视为决定分析的步骤[2]。

生物样品主要包括血浆、血清、全血、尿液、唾液以及组织，其中最常用的是血浆或血清，可较好地体现药物浓度和治疗效果之间的关系。

当药物或其快速型代谢物大量排泄到尿中时，也采用尿液样品检测血样中不易检出的药物。

笔者主要对常用的生物样品的预处理方法进行阐述。

在处理生物样品时，首先要进行的就是去除蛋白质。

去除蛋白质有助于药物从血浆蛋白中分离出来，便于测定药物浓度；也可预防提取过程中蛋白质发泡，减少乳化的形成，增加样品的检测灵敏度。

常用的去除蛋白质的方法有溶剂解法、盐析法、加入强酸或沉淀剂以及超滤法。

水溶性溶剂能使蛋白质脱水，溶液的介电常数下降，蛋白质分子间的静电引力增大，从而使蛋白质凝聚和沉淀。