生长激素促进体外培养的Bel-7402肝癌细胞增殖

人肝癌多药耐药细胞系 Bel-7402／DOX 两种模型比较钟兴国;龚仁华;孙登群;曹葆强;范育林;姜世涛;蔡军;何新苗;骆会来【摘要】目的：比较体外浓度梯度递增诱导和裸鼠肝脏移植诱导两种方法建立人肝癌多药耐药细胞系Bel-7402/多柔比星（ Doxorubicin ，DOX）模型的生物学特性。

方法分别采用体外浓度梯度递增诱导和裸鼠肝脏移植诱导建立人肝癌多柔比星多药耐药细胞亚系Bel-7402/DOXV 和Bel-7402/DOXL 后，利用相差显微镜观察细胞，MTT法检测两种细胞的耐药性，细胞计数法绘制生长曲线并用公式法计算倍增时间，流式细胞仪测定细胞DOX的摄入和外排以及P糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、谷胱甘肽硫转酶系统（GSH/GST）的表达。

结果两组耐药细胞Bel-7402/DOXV 和Bel-7402/DOXL 对DOX、CD-DP均产生了交叉耐药性，较亲本Bel-7402 IC50值差异有统计学意义（P＜0．01）；较亲本细胞的倍增时间明显延长，分别为65 h和46 h；较亲本的DOX外排率明显升高，分别为81．06％、66．56％；两组耐药细胞P-gp、MRP表达较亲本细胞显著提高（ P＜0．01），而GSH/GST的表达无明显变化。

结论两种方法建立的耐药细胞系模型均有稳定的耐药性。

肝脏移植法更能高度模拟人肝癌，它是具有近似人肝癌生物学和抗癌药物动力学特征的较理想模型。

%Objective To compare the biological characteristics of two types of human hepatocellular carcinoma multi -drug re-sistant cell sub-lines Bel-7402/DOX models established by two methods .Methods We established human hepatocellular carcinoma doxorubicin multi-drug resistant cell sub-lines models Bel-7402/DOXV and Bel-7402/DOXL by in vitro concentration gradient in-creased induction and nude mice liver-implanted induction , respectively .Phase contrast microscopy was used to observe the cells and MTT ( methyl thiazolyltetrazolium ) method was used to detect drug resistance of the two different sub-lines of cells .The ingestion and excretion of cellular doxorubicin (DOX) and the expression of P-glycoprotein (P-gp), multi-drug resistance-sociated protein (MRP) and glutathione S-transfer enzyme system ( GSH/GST ) were detected by flow cytometry .Results The Bel-7402/DOXV and Bel-7402/DOXL generated cross-resistance to DOX and CDDP ( cis-Diaminedichloroplatinum ) , they showed a significant difference in re-sistance to Bel-7402 IC50 value (P<0.01).The doubling times were significantly extended , compared with the parent cell line (39 h) , and were 65 h ( Bel-7402/DOXV) and 46 h ( Bel-7402/DOXL) .The excretion rates of DOX were significantly increased , com-pared with the parent cell (34.14%) line and were 81.06%(Bel-7402/DOXV) and66.56%(Bel-7402/DOXL).Expressions of P-gp and MRP in the two groups of resistant sub-lines cells were significantly enhanced (P<0.01).There was no significant variation in the expression of GSH/GST (P>0.05).Conclusions Stable resistance is involved in the resistant cell line model established by the two methods above .Liver implantation is a good simulation of human hepatocellular and proves to be an ideal model with characteristics similar to human hepatocellular biology and the pharmacokinetics of anticancer drugs .【期刊名称】《武警医学》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】5页(P728-732)【关键词】肝癌;多药耐药;多柔比星;细胞系模型【作者】钟兴国;龚仁华;孙登群;曹葆强;范育林;姜世涛;蔡军;何新苗;骆会来【作者单位】230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科;230041 合肥，武警安徽总队医院普外科【正文语种】中文【中图分类】R735.7目前对于肝癌，尤其是对中晚期肝癌的治疗仍以手术及化疗相配合治疗为主。

丹参酮ⅡA对人肝癌BEL-7402细胞生长的影响及其机制唐忠志;唐瑛;付立波【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2003(023)006【摘要】目的研究丹参酮ⅡA对体外培养的人肝癌细胞系BEL-7402细胞生长的影响及其作用机制.方法0～10μg/ml丹参酮ⅡA作用人肝癌BEL-7402细胞72 h 后,用倒置相差显微镜观察丹参酮ⅡA对BEL-7402细胞的生长抑制作用;荧光显微镜、透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;流式细胞术检测不同浓度丹参酮作用后细胞凋亡率的变化.结果肝癌细胞经丹参酮ⅡA作用后,细胞生长明显受到抑制;荧光显微镜、透射电镜观察发现细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡及凋亡小体形成等凋亡特征性形态改变;琼脂糖凝胶电泳观察到DNA"梯状带";流式细胞仪定量分析示浓度为0.5、1.0、2.0、5.0、和10.0μg/ml的丹参酮ⅡA处理肝癌细胞72 h后,细胞凋亡率分别为(20.78±2.17)%、(24.64±2.07)%、(31.47±3.86)%、(43.65±4.04)%和(52.36±3.75)%,与对照组[(2.37±0.29)%]比较,均有显著性差异.结论丹参酮ⅡA能抑制体外培养的人肝癌细胞系BEL-7402细胞的生长,其机制可能为诱导细胞凋亡.【总页数】4页(P595-597，601)【作者】唐忠志;唐瑛;付立波【作者单位】广州军区武汉总医院,湖北,武汉,430070;广州军区武汉总医院,湖北,武汉,430070;广州军区武汉总医院,湖北,武汉,430070【正文语种】中文【中图分类】R285.6;R735.7【相关文献】1.白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞生长的影响 [J], 杨培民;代龙;李钦青;曹广尚;魏永利2.重组人生长激素对人肝癌细胞Bel-7402裸小鼠移植瘤生长的影响 [J], 刘建平;陈涛;凌云彪;陈小萱;区庆嘉3.链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞及人正常肝细胞生长的影响 [J], 李彦芹;王艳;曹宁;平国玲;李卫汉;张力平4.缺氧时三氧化二砷对人肝癌细胞株BEL-7402生长及凋亡的影响及机制 [J], 刘晓川;刘铁夫5.冬凌草甲素抑制人肝癌BEL-7402细胞生长及诱导细胞凋亡的机制研究 [J], 张俊峰;刘加军;陆敏强;李华;陈规划因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

BEL-7402肝癌细胞株的生长抑素受体放射分析李煜;李建生;许戈良;傅斌生;徐师国;张友久【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2004(039)003【摘要】目的探讨生长抑素受体在肝癌细胞株中的表达. 方法用125I-[Tyr3]-octreotide作为生长抑素受体的放射性配体,检测肝癌细胞株BEL-7402上受体位点数和亲和常数.结果受体放射分析显示肝癌细胞株BEL-7402上的生长抑素受体与125I-[Tyr3]-octreotide的结合可以达到较满意的饱和曲线;表达的生长抑素受体位点数为1.0×105个/细胞,位点数多;与octreotide的平衡解离常数(Kd)为0.24×10-9 mol/L,亲和力强. 结论肝癌细胞株上有生长抑素受体表达,密度高,且与临床常用药octreotide有较好的亲和力.【总页数】3页(P196-198)【作者】李煜;李建生;许戈良;傅斌生;徐师国;张友久【作者单位】安徽医科大学附属省立医院普外科,合肥,230001;安徽医科大学附属省立医院普外科,合肥,230001;安徽医科大学附属省立医院普外科,合肥,230001;安徽医科大学附属省立医院普外科,合肥,230001;安徽医科大学基础核医学教研室,合肥,230032;苏州大学附属苏州医学院基础核医学教研室,苏州,215000【正文语种】中文【中图分类】R392.11;R735.7【相关文献】1.44种生物碱类化合物对人胃癌细胞株BGC和人肝癌细胞株BEL-7402细胞增殖抑制活性的筛选 [J], 杨秀伟;冉福香;王瑞卿;吴军;彭俊;裴惠平;孙士勇2.40种香豆素类化合物对人胃癌细胞株BGC和人肝癌细胞株BEL-7402细胞生长抑制活性的筛选 [J], 杨秀伟;徐波;冉福香;吴军;王瑞卿;崔景荣3.人肝癌细胞株HepG2和BEL-7402对放射敏感性的体外实验研究 [J], 石卫民;范义湘;陈龙华4.肝癌细胞株BEL-7402超微结构观察与原发性耐药关系的分析 [J], 王树华;杨林;陈继贵5.131I-McAbJH107在载人肝癌BEL-7402裸鼠体内的放射免疫显像分析 [J], 颜江华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

冬凌草甲素对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用及其作用机制张俊峰;陈规划;陆敏强;刘加军【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2006(028)009【摘要】目的:探讨冬凌草甲素对肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化.应用PCR-ELISA及RT-PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及端粒酶hTERT mRNA表达水平的变化.结果:冬凌草甲素可显著的抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系.冬凌草甲素作用48～60h后在Hoechst 33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,同时端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低.结论:冬凌草甲素能抑制BEL-7402细胞的生长及诱导细胞发生凋亡;降低端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要作用机制之一.【总页数】5页(P1325-1329)【作者】张俊峰;陈规划;陆敏强;刘加军【作者单位】中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院血液科,广东,广州,510630【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.油樟叶提取物对人肝癌BEL-7402细胞增殖的抑制作用 [J], 杜永华;叶奎川;周黎军;张萍;魏琴;殷中琼2.海带多糖对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用及其机制 [J], 姜艳霞;纪朋艳;朱文赫;张巍;徐俊杰;李妍;雷钧涛3.水红花子不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖抑制作用的研究 [J], 陈红淑;冯耀荣;童晔玲;余美荣;李昌煜4.不同序贯的索拉非尼与化疗药物联用对人肝癌细胞 Bel-7402的增殖抑制作用[J], 魏超;蒋焱熠;韦金鑫;郭慧;周乃珍;张盛周5.冬凌草甲素对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用研究 [J], 张俊峰;陈规划;陆敏强;蔡常洁;杨扬;李华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

齐墩果酸诱导人肝癌Bel—7402细胞G2／M期阻滞及凋亡的机制研究该研究旨在探讨齐墩果酸在诱导Bel-7402肿瘤细胞凋亡过程中，细胞周期分布的变化及其相关的分子机制。

采用MTT法、台盼蓝拒染试验检测齐墩果酸对肝癌细胞增殖的抑制作用；PI单染检测细胞周期；Annexin V-FITC双染法观察细胞凋亡；Western blot法检测周期调控蛋白以及凋亡相关蛋白表达的变化。

结果显示齐墩果酸能显著抑制Bel-7402肝癌细胞株增殖，G2/M期的细胞比例显著升高，而G1期细胞明显减少，明显增加细胞凋亡率；同时下调细胞周期蛋白cyclin B1，使蛋白磷酸酶Cdc25C（Ser216）磷酸化而失去活性、引起Cdk1（Tyr15）以及蛋白激酶Chk1的磷酸化水平升高。

OA也可上调p21水平导致细胞周期阻滞在G2/M期；此外Bcl-2表达减少，Bax，Cyt c表达增加，cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-3蛋白表达增加。

以上结果提示齐墩果酸能明显抑制肝癌细胞的生长，诱导细胞凋亡，可能是通过激活凋亡线粒体信号通路而实现的。

标签：齐墩果酸；凋亡；肝癌；细胞周期[Abatract] This study was to examine the mechanism of oleanolic acid （OA）induces G2/M phase arrest and apoptosis in human hepatocellular carcinoma Bel-7402 cells. MTT and trypan blue exclusion test assay were adopted to detect the proliferate status of cells treated with OA. We assayed the cell cycle by flow cytometry using PI staining. Apoptosis was determined by Annexin V-FITC staining and PI labeling. The expressions of cycle related proteins and apoptotic related proteins were determined by Western blot analysis. OA strongly inhibited human hepatoma cells proliferation. When Bel-7402 cells were pretreated with OA for 24 h，OA induced apoptosis and G2/M phase cell cycle arrest in a concentration-dependent manner. Analysis of the cell cycle regulatory proteins demonstrated that OA decreased the protein levels of cyclin B1，but increased the protein levels of p-Cdk1 （Tyr15）and p-Cdc25C（Ser 216）. Moreover，OA modulated the phosphorylation of protein kinases Chk1 and p21.Western blotting assay also showed significant decrease of Bcl-2 protein expression and increase of Bax protein expression，the cytosol Cyt c level，cleaved-caspase-9 and cleaved-caspase-3 activity. These data suggest that OA produces anti-tumor effect via induction of G2/M cell cycle arrest and apoptosis.[Key words] oleanolic acid；apoptosis；hepatocellular carcinoma；cell cycledoi：10.4268/cjcmm20152429齐墩果酸（oleanolic acid，OA）为五环三萜类化合物，是一种天然产物化学成分，广泛分布于青叶胆、女贞子、楤木等植物中，给药后主要在肝脏分布和代谢[1]。

3种抗肝癌药物单用和联用对人肝癌细胞BEL7402和人正常肝细胞增殖的抑制作用肖亿【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2013(29)1【摘要】目的:观察DDP、5-Fu、EADM在单用、两两联用和3药联用时对人肝癌细胞株BEL7402和人肝细胞增殖的抑制作用.方法:MTT法测定3种药物对人肝癌细胞株BEL7402和人肝细胞增殖的抑制率.绘制生长曲线.结果:单用时3种药对BEL7402的抑制率分别为49.55%、31.46%、39.87%;对肝细胞的抑制率分别为27.32%、19.66%、21.58%;DDP+5-Fu对BEL7402的抑制率为72.39%,对肝细胞的抑制率为34.89%:DDP+EADM对BEL7402的抑制率为56.42%,对肝细胞的抑制率为32.46%:5-Fu+EADM对BEL7402的抑制率为67.92%,对肝细胞的抑制率为37.12%:3药联用对BEL7402的抑制率为86.93%,对肝细胞的抑制率为41.69%.结论:3种药物单药、两两联用和3药联用均对人肝癌细胞株BEL7402有明显的增殖抑制作用.同时可抑制人肝细胞的增殖.%Objective To explore the anti-proliferative effect of cisplatin (DDP), fluorouracil (5-FXJ), and EADM alone or in combination for liver carcinoma cell line BEL-7402 and human liver cells. Methods MTT assay and the cell growth curve were used to determine the inhibitory effect. Results The inhibitory rate of DDP, 5-FU, or EADM alone was 49.55% , 31.46% , and 39.87% for BEL-7402 and 27.32% , 19.66% , and 21.58% for normal live cells; the inhibitory rate of DDP plus 5-FU was 72.39% and 34.89% , respectively. The inhibitory rate of DDP plusEADM was 56.42% and 32.46%. The inhibitory rate of 5-FU plus EADM was 67.92% and 37.12%. The inhibitory rate of three antitumor drugs in combintion was 86.93% and 41.69%. Conlusions DDP, 5-FU, or EADM alone, or two or three drugs in combination has a marked inhibitory effect on proliferation of both liver carcinoma cell line BEL-7402 and normal human liver cells.【总页数】3页(P21-23)【作者】肖亿【作者单位】545005,广西柳州市人民医院【正文语种】中文【相关文献】1.灯盏花素对肝癌细胞HepG2和正常肝细胞LO-2的体外增殖抑制作用 [J], 梁福贵;罗军强;梁汉昌2.岩藻糖在正常人肝细胞、低转移人肝癌细胞和高转移人肝癌细胞表面的含量变化[J], 廖晖;廖彩仙;王宇;龚祖元;胡育海3.去甲肾上腺素对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响 [J], 施媛萍;罗光华;郑璐;魏江;于洋4.不同序贯的索拉非尼与化疗药物联用对人肝癌细胞 Bel-7402的增殖抑制作用[J], 魏超;蒋焱熠;韦金鑫;郭慧;周乃珍;张盛周5.抗人stathmin单克隆抗体与紫杉醇联用对人肝癌细胞增殖的抑制作用 [J], 原少斐;杜红延;陈筱婷;汪森明;李明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。