安捷伦1260操作规程1

安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备：最好使用流动相溶解样品；进样前样品需过滤膜，除去悬浮不溶杂质。

2.流动相的选择和处理：使用高纯度试剂，所有含盐或含水溶剂必须膜过滤，100%色谱纯有机试剂，滤膜过滤后方可使用；流动相现配现用，剩余的流动相（水相）及时清理，实验间隔>2天，建议倒掉；任何溶剂，如果有可见悬浮物、菌丝，不可使用；更换流动相之前，必须事先阅读色谱柱的说明书；除非有说明，反相柱不得使用100%水。

3.开机注意事项：先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源；等各电源开启后（30s），打开在线软件；冲柱子和平衡时，暂不开紫外灯；平衡完后，打开紫外灯，设置梯度和波长或引用方法。

4.实验结束：C18反相柱应用色谱甲醇保存，不能含任何酸、盐；用甲醇替换通道，四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中，以防长菌；流速调零，再关闭软件，最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机（1）打开计算机，登陆windows操作系统。

（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。

（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。

把各流动相放入相应的溶剂瓶中。

（4）编辑方法。

方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。

（5）排气。

旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。

一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。

关泵，关闭排气阀（顺时针）。

（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。

（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。

将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。

（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。

二、数据采集信息编辑及进样（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。

（2）编辑好样品信息后方可进样。

三、数据处理（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。

（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。

（3）谱图优化。

从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适为止。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源，待仪器自检完成后，确保所有指示灯都亮起。

2.检查溶剂瓶的液位，确保足够的溶剂供给。

3.清洁好色谱柱并连接到系统中。

三、仪器启动1.打开色谱软件，选择相应的方法。

2.点击“系统”菜单，选择“启动系统”命令，系统开始进行初始化。

3.在系统初始化完成后，点击“准备”菜单，选择“准备系统”命令，系统开始进行一系列的自动化准备工作，比如冲洗和平衡柱子。

4.检查系统的压力和温度，确保在正常范围。

四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。

2.将样品装入进样瓶中，注意不要超过瓶口。

3.将进样瓶插入样品进样系统中，按照方法设置的条件进行进样。

4.点击软件界面上的“进样”按钮，开始进样。

五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点，选择合适的色谱柱。

2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。

3.检查色谱柱的压力和温度，确保在正常范围。

六、色谱条件设置根据分析方法的要求，设置好色谱条件，包括流量、温度、柱温等参数。

七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器，比如紫外检测器、荧光检测器等。

2.设置检测器的工作参数，如波长、增益、基线噪声等。

八、开始分析1.在样品进样后，点击软件界面上的“开始”按钮，开始进行色谱分析。

2.监控检测器输出的信号，根据需要可以对信号进行放大或调整。

九、结果解析1.根据所用方法的要求，对分析结果进行解析。

2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。

十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。

2.关闭色谱柱进样系统。

3.关闭色谱仪电源。

此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程，希望能对使用者提供一定的参考和帮助。

在操作过程中，应严格按照安全操作规范进行，并及时进行维护和保养，以保证仪器的正常运行。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机（1）打开计算机，登陆windows操作系统。

（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。

（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。

把各流动相放入相应的溶剂瓶中。

（4）编辑方法。

方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。

（5）排气。

旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。

一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。

关泵，关闭排气阀（顺时针）。

（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。

（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。

将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。

（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。

二、数据采集信息编辑及进样（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。

（2）编辑好样品信息后方可进样。

三、数据处理（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。

（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。

（3）谱图优化。

从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适为止。

（4）积分。

从“积分”中选择“自动积分”，若积分结果不理想，从菜单中选“积分事件”，更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”，从“积分”中选择积分选项，则数据被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。

安捷伦1260LC操作规程一开机1)打开计算机，登陆windows操作系统。

2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

3)把各流动相放入溶剂瓶中。

4)旋开排气阀（逆时针旋开半圈左右），右键单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。

将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2~3min，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。

5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。

6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）。

7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20~30min。

8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。

二数据采集方法编辑1)编辑样品信息：现在“视图”菜单下“首选项”中添加路径，然后由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名、样品数据文件名、样品数据保存路径等。

2)编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项。

单击“确定”入下一画面“方法注释”，后单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”下一画面“设臵方法”进行参数设定。

3)四元泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1ml/min；在“溶剂”处根据各自的流动相比例填写即可(A=100-B-C-D)；设臵泵的“停止时间”（即样品的出峰时间）在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子，如：250bar。

4)TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度，并选中它，右侧选中“与左侧相同”使柱温箱的温度左右一致。

5)DAD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入样品所需的检测波长，如254nm，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min(2s)。

安捷伦HPLC1260二元泵（DAD）操作规程及维护一、操作1.开机前准备1.1配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，用超声波震荡10-15min，分别装入溶剂瓶。

1.2若流动相中含有缓冲盐，必须以每分钟2-3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。

2.采样前准备（排气泡）2.1打开计算机，进入windows系统，从上到下依次打开各模块电源（可同时打开Purge阀）。

2.2自检完成后，点击联机online，进入工作站画面。

2.3右击“泵Pump”，选择“方法Method”项，设定流速Flow 5ml/min，溶剂比Solvent处设置A通道为100%，点击OK。

再右击“泵Pump”，选择“控制Control”项，在泵的设置下单击ON，则系统开始排除A通道内气泡，清洗约3-5min，再依法排除B通道内气泡。

气泡排完后，将流速降为0ml/min，关闭Purge阀。

2.4将溶剂比设定实验所需比例，再将泵的流速逐步上升到实验所需流速（以0.2的上升幅度提高流速，每次柱压稳定后再上升流速），冲洗色谱柱，同时打开检测器的灯，待达到所需流速、柱压稳定后且基线平稳后即可进样。

3进样当进样器处于inject位置时，将进样针插入进样口，调节进样器于load处，进样，再迅速调回inject处，即可等待谱图。

4关机关机前，用90%-95%水乙腈溶液，冲洗柱子和系统约1h，流速设置1ml/min,再用100%有机溶剂（乙腈）冲洗半小时，然后关闭各模块电源，退出化学工作站，关闭计算机。

5编辑方法菜单栏处单击方法Method→编辑完整方法Edit entire method，选择除数据分析Data analyic外的另外三项（仪器/采集instrument/acquisition、方法信息method information、运行时间run time checklist）,点击确定OK，弹出选择进样方式select injection source对话框，选择手动进样Manual，点击确定OK。

安捷伦1260操作规程安捷伦（Agilent）1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器，具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。

该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。

二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。

2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。

3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充，以及是否有足够的溶剂。

三、方法设置1. 打开色谱软件，并选择合适的方法模板。

2. 根据分析需求，在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。

3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。

四、进样操作1. 打开进样器的盖子，将待测样品加入样品瓶中。

2. 点击软件中的进样按钮，设置样品名称和进样量。

3. 将样品瓶放入进样器，并关闭盖子。

4. 点击软件中的进样按钮，开始进样。

5. 进样完成后，从进样器中取出样品瓶，并将它放入垃圾桶中。

五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门，并将柱端与色谱柱连接。

2. 检查色谱柱是否没有泄漏，如果有泄漏，则需重新连接。

3. 检查色谱柱的温度，确保它处于合适的温度范围内。

六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源，并连接到电脑上。

2. 设置合适的流速和梯度梯度。

3. 点击软件中的启动按钮，开始进行分析。

七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。

2. 根据需要选择适当的数据处理方法，如峰面积计算、定量分析等。

3. 导出分析结果并保存。

八、仪器维护1. 分析结束后，关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。

2. 清洗色谱柱和进样器，保持其清洁。

3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。

九、安全操作1. 在操作仪器时，注意安全，避免接触到有害化学品。

2. 在操作过程中，严禁随意触摸仪器或移动连接线。

3. 在操作过程中，如遇到异常情况，请及时停止分析并向管理员报告。

通过以上操作规程，可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。

安捷伦1260型HPLC使用操作安捷伦1260型高效液相色谱仪（HPLC）是一种目前广泛应用于科研实验室和分析化验室的仪器，用于分离、鉴定和定量化学物质，尤其在药物研究、食品安全和环境监测等领域有着重要的应用价值。

下面将介绍如何使用安捷伦1260型HPLC进行操作。

1.准备工作-确保HPLC仪器和相关附件的电源已正常连接，并打开电源开关。

-检查溶剂瓶中的溶剂是否充足，并确保应用的溶剂完全溶解。

-测量并记录样品的重量或体积，并准备相应的样品溶液。

-在毛细管芯上安装合适的毛细管，确保毛细管没有损坏。

2.打开安捷伦1260型HPLC软件-打开计算机并登录HPLC软件。

-确保计算机与HPLC仪器连接正常，并与仪器建立通信。

-在软件界面上选择打开一个新的分析方法。

3.设置分析方法-在打开的分析方法中，设置适当的柱温、流速、柱压和波长等参数。

-根据样品的性质，选择合适的检测波长，以获得最佳的检测结果。

-设定进样器的进样体积和方法运行时间等参数，以获得期望的分析效果。

4.进样样品-使用自动进样器或手动进样器将待测样品进入HPLC系统中。

-设置进样器的洗涤方法，以确保不同样品的交叉污染风险降至最低。

-如果使用了自动进样器，将样品盘或样品架连接到进样器上，并设置自动进样的参数。

5.启动HPLC分析-在软件界面上，点击启动按钮，开始运行分析方法。

-监控仪器运行情况，确保流速、柱压等参数稳定在设定范围内。

-观察检测结果的峰形和峰高，并记录峰面积或峰高数据以便后续分析。

6.数据处理与结果分析-使用HPLC软件进行数据处理，可以进行峰识别、峰面积计算和浓度计算等操作。

-将结果数据导出并进行统计分析，如绘制色谱图、拟合曲线和计算浓度等。

-分析结果的可靠性和准确性需要通过质控样品或标准品进行验证。

7.仪器维护和清洁-定期对HPLC仪器进行维护，包括更换毛细管、清洗进样器和柱子，并检查其他配件的磨损情况。

-使用合适的溶剂进行清洗，以去除可能留在系统中的残留物。

一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。

A瓶：为水相B瓶：为有机相。

2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。

3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。

4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。

该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。

4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。

二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。

2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。

单击OK，进入下一画面。

3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。

安捷伦液相 1260 高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料（最好是外文文献）了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。

如果还不清晰样品是什么物质，最起码也应该对其极性进行了解，为选择合适的流动相和固定相打好基础。

流动相选择注意事项：① 避免使用高粘度的溶剂作为流动相；② 所选用的流动相一定要与样品相溶；③ 各流动相之间可以很好的相溶；固定相选择注意事项：a. 正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或者其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。

正相色谱使用的流动相极性相对照固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。

b. 反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。

反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。

样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

2.准备工作① 用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15µm 过滤器过滤，必须达到均匀而无颗粒的状态；② 流动相一定要选用色谱级别的（最好是默克、飞世尔、时联等牌子的），并且在使用之前一定要使用0.4µm 过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气处理20-30min；③ 在连接柱子和色谱仪之前，阀件或者管路一定要清洗干净，（一般用异丙醇将管路清洗）3.仪器操作（一）将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中：棕色瓶对应A 泵，该瓶中只能加双蒸水或者娃哈哈纯净水；B、C、D 泵根据需要添加。