实验五高效液相色谱法对两种氨基甲酸酯类农药的定性和定量分析1 实验目的掌握高效液相色谱法的基本原理方法；熟悉液相色谱仪基本结构及使用方法；掌握对两种氨基甲酸酯类农药的定性和定量分析的实验步骤及注意事项。
2 实验原理2.1方法原理色谱分离的基本原理是在外力作用的条件下，含有样品的流动相通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
样品中各组分在两相之中进行不同程度的作用。
与固定相作用强的组分随流动相流出的速度慢，反之与固定相作用弱的组分随流动相流出的速度快。
高校液相色谱是以溶剂为流动相的色谱方法，具有高效、高速、高灵敏度的优点。
由于流出速度存在差异即各组分保留时间不同，使得混合组分最终形成各个单组分的“带”或“区”，对依次流出的各个单组分物质可分别进行定性、定量分析。
样品中各组分在固定相的分离机理有许多种，包括不同组分在固定相的吸附作用不同；不同组分在固定相上的溶解能力不同；不同组分在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同；不同尺寸分子在固定相上的渗透作用不同。
定性：通过保留时间对目标物进行定性分析；定量：运用公式：C / A=C' / A'；其中C为待测样目标物的浓度；A为待测样目标物的峰面积；C'为目标物混标的浓度；A'为目标物混标的峰面积。
2.2仪器原理高效液相色谱仪包含五部分结构：高压输液装置、进样系统、分离系统、检测系统和工作站软件，还配有梯度淋洗、自动进样和数据处理装置[1]。
高压输液装置：包含贮液器、脱气、高压输液泵三方面。
通过超声波脱气或真空加热脱气。
溶剂通过脱气器中的脱气膜，相对分子量小的气体透过膜从溶剂中除去。
高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件之一，其功能是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。
由于液相色谱仪所用色谱柱径较细，所填固定相粒度很小，因此，对流动相的阻力较大，为了使流动相能较快地流过色谱柱，就需要高压泵注入流动相。
