P0067预染蛋白质分子量标准

常见蛋白质分子量参考值（单位：dalton）蛋白质分子量肌球蛋白[myosin]甲状腺球蛋白[thyroglobulin]β-半乳糖苷酶[β-galactosidase]副肌球蛋白[paramyosin]磷酸化酶a[phosphorylase a]血清白蛋白[serum albumin]L-氨基酸氧化酶[L-amino acid oxidase]地氧化氢酶[catalase]丙酮酸激活酶[pyruvate kinase]谷氨酸脱氢酶[glutamate dehydrogenase]亮氨酸氨肽酶[glutamae dehydrogenase]γ-球蛋白，H链[γ-globulin, H chain]延胡索酸酶（反丁烯二酸酶）[fumarase]卵白蛋白[ovalbumin]醇脱氢酶（肝）[alcohol dehydrogenase (liver)]烯醇酶[enolase]醛缩酶[aldolase]肌酸激酶[creatine kinase]220,000 165,000 130,000 100,000 94,000 68,000 63,000 60,000 57,000 53,000 53,000 50,000 49,000 43,000 41,000 41,000 40,000 40,000胃蛋白酶原[pepsinogen]D-氨基酸氧化酶[D-amino acid oxidase]醇脱氢酶（酵母）[alcohol dehydrogenase (yeast)]甘油醛磷酸脱氢酶[dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase]原肌球蛋白[tropomyosin]乳酸脱氢酶[lactate dehydrgenase]胃蛋白酶[pepsin]转磷酸核糖基酶[phosphoribosyl transferase]天冬氨酸氨甲酰转移酶，C链[aspertate transcarbamylase, C chain]羧肽酶A[carboxypeptidase A]碳酸酐酶[carbonic anhydrase]枯草杆菌蛋白酶[subtilisin]γ-球蛋白，L链γ-blobulin,L chain[]糜蛋白酶原（胰凝乳蛋白酶原）[chymotrypsinogen胰蛋白酶[trypsin]木瓜蛋白酶（羧甲基）[papain (carboxymethyl)]β-乳球蛋白[β-lactoglobulin]烟草花叶病毒外壳蛋白（TWV外壳蛋白）[TWV coat protein肌红蛋白[myoglobin]天门冬氨酸氨甲酰转移酶，R链[aspartate transcarbamylase, R chain]血红蛋白[h(a)emoglobin]40,000 37,000 37,000 36,000 36,000 36,000 35,000 35,000 34,000 34,000 29,000 27,600 23,500 25,700 23,300 23,00018,400 17,50017,200 17,000Qβ外壳蛋白[Qβ coat protein]溶菌酶[lysozyme]R17外壳蛋白[R17 coat protein]核糖核酸酶[ribonuclease或RNase]细胞色素C[cytochrome C]糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶）[chymotrypsin]15,500 15,000 14,300 13,750 13,700 11,700 11,000。

·研究论文·Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报摘 要：为了比较不同抗原含量的Ⅰ群禽腺病毒（4型）Fiber-2蛋白亚单位疫苗与全病毒灭活疫苗的免疫效力差异，本研究制备不同抗原含量的亚单位疫苗和全病毒灭活疫苗，采用超低免疫剂量20 μL/只免疫SPF 鸡，免疫21 d 后攻毒，通过死亡率、临床症状、大体剖检病变、免疫组化和泄殖腔拭子排毒等进行免疫效力比较。

试验结果表明，亚单位疫苗抗原含量AGP 效价不低于1∶8，全病毒灭活疫苗抗原含量为107.0 TCID 50/0.1 mL 时，可抵抗Ⅰ群禽腺病毒（4型）强毒株的攻击，提供100%的免疫攻毒保护，攻毒后3、5、7 d 泄殖腔拭子均未见排毒，且免疫组化均为阴性。

亚单位疫苗抗原含量AGP 效价为1∶4，全病毒灭活疫苗抗原含量为106.5 TCID 50/0.1 mL 时，在超低免疫剂量情况下，仍可提供至少80%的免疫攻毒保护，且攻毒后3、5、7 d 泄殖腔拭子排毒率仅为2/10～3/10，免疫组化阳性率仅为1/10。

但全病毒灭活疫苗抗原含量为106.0 TCID 50/0.1 mL 时，免疫攻毒保护效果不理想。

综合以上结果表明，Fiber-2蛋白具有良好的免疫原性，抗原含量AGP 效价不低于1∶4，与全病毒灭活疫苗抗原含量为106.5 TCID 50/0.1 mL 免疫效力相当，可用于疫苗研制开发。

关键词：禽腺病毒；Fiber-2蛋白；亚单位疫苗；全病毒灭活疫苗；免疫攻毒保护中图分类号：S859.797 文献标志码：A 文章编号：1674-6422（2023）03-0067-07Comparison of Immune Effect with Subunit Vaccine for Fiber-2 Protein Fowl Adenovirus Serotype 4 of Group I and Whole Virus Inactivated VaccineDU Dongying, HUO Huanyan, TIAN Hui, WANG Lulu, WANG Mengyue, HONG Sumei,GAO Xiaojing, TIAN Kegong(National Research Center for Veterinary Medicine, Luoyang 471000, China)收稿日期：2023-03-10基金项目：河洛创新人才（224100510007）作者简介：杜东颖，女，硕士，兽医师，主要从事禽病毒病疫苗研究；霍环艳，女，本科，主要从事禽病毒病疫苗研究通信作者：高晓静，E-mail：**********************.cn；田克恭，E-mail：**************Ⅰ群禽腺病毒（4型）Fiber-2蛋白亚单位疫苗与全病毒灭活疫苗的免疫效果比较杜东颖，霍环艳，田 辉，王璐璐，王孟月，洪素梅，高晓静，田克恭（国家兽用药品工程技术研究中心，洛阳471000）2023,31(3):67-73Abstract: In order to compare the difference of immune efficacy between Group I Avian adenovirus (type 4) Fibre-2 protein subunit vaccine and whole virus inactivated vaccine with different antigen content, this study prepared subunit vaccine and whole virus inactivated vaccine with different antigen content, immunized SPF chicken with ultra-low immune dose of 20 μL/bird, and challenged for 21 days after immunization. The immune efficacy was compared by mortality, clinical symptoms, gross biopsy, immunohistochemistry and cloacal swab detoxification. The results showed that when the subunit vaccine antigen content AGP titer was no less than 1∶8 and the whole virus inactivated vaccine antigen content was 107.0 TCID 50/0.1mL, it could resist the attack of Group I avian adenovirus (type 4) strong strain and provide 100% immune challenge protection. No detoxification was observed in cloacal swabs 3, 5, 7 days after challenge. The results of immunohistochemistry were negative. When the subunit vaccine antigen content AGP was 1∶4 and the whole virus inactivated vaccine antigen content was 106.5 TCID 50/0.1mL, it could still provide at least 80% immune challenge protection中国动物传染病学报· 68 ·2023年6月鸡肝炎-心包积液综合征（h e p a t i t i s-hydropericardium syndrome, HHS）是由血清4型禽腺病毒（Fowl adenovirus serotype 4, FAdV-4）引起的高致病性传染病[1]，近几年来，该病在我国广泛流行，给我国养禽业造成了巨大的经济损失，目前已成为危害养禽业的主要疫病之一[2-4]。

蛋白Marker可分为：一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。

在western blot 过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。

这个Western Blot 参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。

总体来说，蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。

以下是关于蛋白分子量标准的小叙：一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准未染色的蛋白分子量标准是最简单，也是最准确的一种。

由于没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精确判断蛋白大小必须的。

现在的Marker多数都选用预混和的Marker，方便不同大小的蛋白比较。

预混的Marker通常有几条带加倍浓度作为指示，因为混合的条带越多，越不好记，谁知道哪条是那条!数到眼都花了。

所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。

不过要记得，小带通常都不那么容易看清楚的。

在选择上来说，当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好，越近越好。

如果你的蛋白不幸在两条跨度较大Marker条带之间，选别的Marker吧。

预混的Marker 使用上不如预染Marker(pre-stained)好用，因为电泳过程中完全看不到，要和目标蛋白一起等到最后染色才“开蛊”，无法对实验起预示参照作用。

完全属于“后知后觉”型的，当然还是比“不知不觉”不做对照的要好。

①宽分子量蛋白标准如果从实验室总体考虑的，就选范围尽量宽，条带分布比较均匀的，这样你的蛋白无论在哪个区间都容易判断，避免正好落在一段空白区的危险。

蛋白质电泳分子量标准（蛋白marker 14.4-97.4 kd）【篇名】：探究蛋白质电泳分子量标准1. 引言在生物学研究中，蛋白质电泳是一种重要的实验方法，用于分离和分析蛋白质。

而蛋白质电泳分子量标准（蛋白marker）则是在蛋白质电泳实验中用来确定待测蛋白分子量的重要工具。

本文将探讨蛋白质电泳分子量标准的概念、应用以及其在生物学研究中的重要性。

2. 蛋白质电泳分子量标准的概念蛋白质电泳分子量标准是一系列已知分子量的蛋白质，它们被用作电泳实验中的参照物。

常见的蛋白marker包括14.4-97.4 kd等不同分子量的标准物质，通过蛋白电泳实验，可以通过蛋白marker的分离情况来确定待测蛋白的分子量。

3. 蛋白质电泳分子量标准的应用蛋白质电泳分子量标准可用于验证电泳实验的准确性，评估蛋白质分子的大小和形状，以及在分析未知蛋白质时提供参照标准。

通过与已知分子量的蛋白marker进行对比，未知蛋白的分子量可以被确定，从而为后续的生物学研究提供重要参考。

4. 蛋白质电泳分子量标准在生物学研究中的重要性在生物学研究中，蛋白质电泳分子量标准的应用极其重要。

它不仅可以帮助科研人员确定蛋白质标准品的分子量，还可以作为蛋白质分析实验的质量控制工具，确保实验结果的准确性和可靠性。

蛋白marker在蛋白质电泳实验中的使用，也有助于扩大科学家对蛋白质研究的视野，从而推动生物学领域的进步。

5. 个人观点作为生物学研究领域的从业人员，我深刻理解蛋白质电泳分子量标准的重要性。

对于生物学实验来讲，实验结果的准确性是至关重要的，而蛋白marker作为质量控制的一个重要环节，能够有效提高实验数据的可信度，也为科研人员提供更可靠的实验结果。

6. 总结蛋白质电泳分子量标准在生物学研究中具有重要作用。

通过对蛋白marker的使用，科研人员可以准确地确定蛋白质的分子量，从而为生物学研究提供可靠的数据和结果。

深入了解和掌握蛋白质电泳分子量标准的实验原理和应用方法，对于开展生物学研究具有重要的意义。