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维生素e的含量测定方法维生素E的含量测定方法维生素E是一种重要的脂溶性维生素，对人体的正常生理功能发挥着重要作用。
因此，了解维生素E的含量十分重要。
以下将介绍维生素E含量测定的一般步骤和方法。
1. 原理测定维生素E的含量一般采用紫外-可见分光光度法或高效液相色谱法。
紫外-可见分光光度法利用维生素E在特定波长下的吸光度来测定其含量。
高效液相色谱法则是通过将样品在色谱柱上分离，再利用检测器检测峰面积或峰高来确定维生素E的含量。
2. 实验步骤以下是测定维生素E含量的一般步骤：步骤一：样品的制备首先，将待测样品如食品、保健品等进行充分打碎或细磨，以确保样品中的维生素E能充分释放。
然后，取一定量的样品并溶解或提取维生素E。
步骤二：预处理如果样品中存在其他干扰物质，需要进行预处理。
预处理的方法包括提取、分离、净化等。
例如，可以采用萃取方法将样品中的维生素E提取至有机溶剂中，以去除其他干扰物质。
步骤三：测定方法选择根据实验条件和要求，选择合适的测定方法。
常用的方法有紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法。
这两种方法各有优缺点，需要根据实际情况进行选择。
步骤四：仪器准备和参数设置根据选择的测定方法，准备好相应的仪器设备，如紫外-可见分光光度计或高效液相色谱仪，并进行相关参数的设置。
步骤五：标准曲线的绘制为了准确测定维生素E的含量，需要首先绘制标准曲线。
标准曲线可以通过制备一系列维生素E浓度逐渐升高的标准溶液，并测定其吸光度或峰面积/峰高，然后绘制曲线。
步骤六：测定样品取一定量的样品溶液，按照所选择的测定方法进行测定。
根据标准曲线，通过测定吸光度或峰面积/峰高，计算出样品中维生素E的含量。
步骤七：数据分析根据测定结果，可以计算出样品中维生素E的含量。
同时，还可以进行结果的统计分析，如平均值、标准差等。
步骤八：结果的解释及验证对于测定结果，需要进行合理解释，并与其他数据进行对比，以验证结果的准确性和可靠性。
3. 结论通过上述步骤，可以测定出样品中维生素E的含量。
收稿日期:2003 09 11作者简介:王玉杰,女,副主任药师,Tel/Fax:(0431)7999477.气相色谱法测定亚油酸维生素E 胶丸中维生素E 的含量王玉杰1, 常 淼1, 马春玲2, 李运玲3(1.长春市药品检验所,吉林长春130062;2.吉林宇田天王药业有限公司,吉林长春130061;3.吉林省农安县制药厂,吉林农安130200)关键词:气相色谱法;维生素E;亚油酸维生素E 胶丸;程序升温中图分类号:O 658 文献标识码:A 文章编号:1000 8713(2004)04 0461 01亚油酸维生素E 胶丸是一种新的复方降血脂药,我国关于该药品的质量标准只有鉴别、检查等常规检验项目,无含量测定方法[1]。
美国药典 没有收载亚油酸维生素E 胶丸。
本文方法弥补了质量标准的不足,可以更全面地控制药品的质量。
由于本品中亚油酸和维生素E 的含量差别较大,若采用文献[2]中单方制剂维生素E 的恒温测定方法,则亚油酸与内标物和维生素E 分离效果不好。
经多次优化实验,本文作者最终采用程序升温方式,排除了亚油酸的干扰,使维生素E 的测定结果准确可靠。
1 实验部分1.1 仪器与试剂HP 6890气相色谱仪,配有氢火焰离子化检测器(FID)(美国安捷伦公司)。
正己烷、正三十二烷均为分析纯;维生素E 对照品(中国药品生物制品检定所);亚油酸维生素E 胶丸(吉林华港制药有限公司)。
1.2 色谱条件不锈钢填充柱2%OV 17(2m 2mm i d ,酸洗硅烷化Chromosorb W 担体,粒度80~100目);汽化室和检测器温度均为300 ;柱温:200 (8min)30 /min(8m in)30 /min243 (10min)5 /min280 (5min);载气(N 2)、H 2、空气的流速分别为40,40,400mL/min;进样量:1 L 或2 L 。
理论塔板数按维生素E 峰计为5000/m;维生素E 峰与内标峰分离度为2 8。
实验七 GC 法测定维生素E 胶丸的含量【学习目的要求】1、 掌握气相色谱法定量方法中内标法的原理及计算。
2、 了解气相色谱仪的基本结构。
3、 了解气相色谱法在药物分析中的应用。
【实验教学内容】一、仪器及试剂仪器 日本岛津GC-14C 气相色谱仪 检测器 FID色谱柱OV-17（硅酮）毛细管柱试药 生育酚作内标物 维生素E 对照品 维生素E 胶丸 正己烷作溶剂二、内容与方法照气相色谱法（中国药典2010年版二部附录VI E ）1、色谱条件与系统适用性试验色谱柱：色谱柱OV-17（硅酮）毛细管柱（柱长30m ，内径0.32mm ，膜厚度0.25μm ），柱温：265℃；理论板数按维生素E 峰计算应不低于5000。
2、溶液配制2.1 内标液 精密称取内标物生育酚适量（约相当于生育酚50mg ）置25ml 量瓶中，用正己烷定容，即得。
2.2 对照液 精密称取维生素E 对照品适量（约相当于维生素E20mg ）置10ml 量瓶中，用10.00ml 内标液溶解，即得。
2.3 供试液 取维生素E 胶丸10丸，精密称定，用刀片逐个划破囊壳，挤出内容物，并用适量乙醚洗净囊壳，置通风处挥干乙醚，精密称定囊壳质量，计算内容物的平均重量。
精密称取内容物适量（约相当于维生素E 20mg ）置10ml 量瓶中，用10.00ml 内标液溶解，即得。
3、测定法 分别取上述对照液和供试液各1μl 注入气相色谱仪，计算校正因子，按内标法加校正因子法计算含量，即得。
【实验结果】定量方法——内标对比法：⑴求f⑵ 求标示量%【实验结论】ChP 规定，维生素E 胶丸中含维生素E 应为标示量的90.0%~110.0% 数据：内标物（生育酚）0.0564g ，对照品（维生素E 标准品）0.0177g ，供试品（维生素E 胶丸）0.0236g ，标示量100mg/丸平均装量0.1492g/丸。
维生素E 软胶囊含量测定一、测定方法 采用气相色谱法（内标法）测定。
1.色谱条件与系统适用性试验 用硅酮（OV-17）为固定液，涂布浓度为2%的填充柱，或用100%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱；柱温265℃。
理论板数按维生素E 峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E 峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
最常用检测器是氢火焰离子化检测器，载气通常是氮气，分离度除另有规定外，应大于1.5。
2)(54.52/h R W t n = 2112)(2W W t t R R R +-= 式中 n 为理论塔板数； R 为分离度；R t 为保留时间； R t 为保留时间；2/h W 为半高峰宽。
W 为峰宽。
2.校正因子的测定 取正三十二烷适量，加正己烷溶解并稀释成1.0mg/ml 溶液，作为内标溶液。
另取维生素E 对照品约20mg ，精密称定，置棕色具塞瓶中，精密加内标溶液10ml ，密塞，振摇使溶解。
取1~3µl 注入气相色谱仪，计算校正因子。
sR R s c c A A f ⨯=式中 f 为校正因子； s A 为内标物的峰面积或峰高；R A 为对照品的峰面积或峰高；s c 为内标物的浓度；R c 为对照品的浓度。
例 按《中国药典》2010年版-二部规定用气相色谱法测定维生素E 软胶囊的含量。
先试验系统适用性：取含有维生素E 对照品2.015mg/ml 与内标物正三十二烷1.012mg/ml 的混合溶液2µl 注入气相色谱仪。
测定数据如下，计算理论板数、分离度和校正因子各为多少？并判定色谱系统适用性是否符合规定？解 理论板数n=5.5422/)(h R W t =5.542)52.068.9(=1921 分离度6.302.108.1)86.568.9(2)(22112=+-=+-=W W t t R R R校正因子s R R s c c A A f ⨯=5.1012.1015.21955423614546421=⨯= ∵理论板数大于500，分离度大于1.5，∴色谱系统适用性符合规定。
维生素E的含量测定（GC）一、目的要求1、掌握GC内标法测定药物含量的方法和计算。
2、熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。
二、主要仪器与药品岛津GC－14B气相色谱仪，DB-5毛细管柱；维生素E对照品、维生素E样品、正三十二烷、正己烷。
三、实验方法色谱条件与系统适应性实验：柱温为295℃，进样室温度300℃，检测器温度310℃；理论板数按维生素E峰计算应不低于5000，维生素E峰与内标物质峰的分离度应大于2，拖尾因子0.95～1.05。
校正因子测定：取三十二烷0.0025g，加正己烷溶解并稀释成每1ml中含1.0mg的溶液，摇匀，作为内标溶液。
另取维生素E对照品0.0253g，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解（维生素E对照品溶液浓度2.53mg/ml），取1µL注入气相色谱仪，记录色谱图及各参数，重复进样3次，计算校正因子。
样品测定：取维生素E0.0236g，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解（维生素E样品溶液浓度2.36mg/ml），取1µL注入气相色谱仪，记录色谱图及各参数，重复进样3次，计算含量。
计算方法：校正因子（f）=(A内标×C对照) /(A对照×C内标)C样品＝f×C内标×A样品/ A内标Ve含量＝C样品/C样品配制浓度×100％RSD=SD/平均值A—峰面积，C—浓度四、实验结果与讨论溶剂定位：t＝1.745min；内标定位：9.420min；维生素E定位：t＝9.765min。
保留时间（min）峰面积R 理论板数拖尾因子① 9.432 22618.1 7.273 58649 0.9759.823 58987.2 2.391 51721 0.774对照品 ② 9.415 4683.5 2.339 62936 1.0459.782 11103.1 2.339 56726 0.962③ 9.415 2947.4 83.508 60627 1.1279.790 6712.6 2.309 51371 0.941① 9.432 5146.5 2.306 65612 1.0099.790 11280.4 2.306 56823 1.033样品 ② 9.423 1773.6 83.598 63048 1.0279.782 3951.1 2.328 60850 1.032③ 9.446 9574.9 2.225 60949 0.9839.760 21759.5 2.225 53188 1.006计算结果：对照品①f＝0.970②f=1.067③f=1.111平均f＝1.049，RSD=6.88％样品①Ve含量＝97.4％②Ve含量＝99.0％③Ve含量＝101.0％Ve平均含量＝99.1％，RSD=1.82％Ve含量符合规定（90.0％～110.0％）。
维生素E胶丸的含量测定
摘要
目的：通过气相色谱法测定维生素E胶丸中维生素E的含量
方法：照气相色谱法（中国药典2000年版二部附录VE）测定。
以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%；柱温为265℃;理论塔板数按维生素E峰计算应不低于500，维生素E峰与内标物质峰的分离度应大于2。
结果：定量方法——内标对比法：
⑴求f⑵求标示量%
结论：ChP（2010）规定，维生素E胶丸中含维生素E应为标示量的90.0%~110.0%
关键词：维生素E胶丸、维生素E、气相色谱法
概述
维生素E胶丸是一种可预防维生素E缺乏、用于进行性肌营养不良的辅助治疗、可预防心脑血管疾病、预防动脉粥样硬化、能促进性激素分泌，预防流产的药品。
一、维生素E的研究现状
维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，又称生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E 活性明显降低。
生育酚能促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加；使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产，还可用于防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面。
近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末稍血管扩张，改善血液循环，预防近视发生和发展。
1.维生素E的化学结构
（Vitamin E，C31H52O3，FW=472.75）
本品为（±）-2，5，7，8-四甲基-2-（4，8，12-三甲基十三烷基）-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯
2.维生素E的性状
本品为微黄色或黄色透明的黏稠液体；几乎无臭；遇光色渐变深。
本品在无水乙醇、丙酮、乙醚或石油醚中易溶，在水中不溶。
对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。
二、气相色谱法
气相色谱法是一种在有机化学中对易于挥发而不发生分解的化合物进行分离与分析的色谱技术。
1.原理
在气相色谱分析法中，一定量（已知量）的气体或液体分析物被注入到柱一端的进样口中。
当分析物在载气带动下通过色谱柱时，分析物的分子会受到柱壁或柱中填料的吸附，使通过柱的速度降低。
由于固定相对样品中各组分吸附或溶解能力不同，即各组分在固定相和流动相之间的分配系数有差别，当组分在两相中反复多次进行分配并随移动相向前移动时，各组分沿管柱运动的速度就不同，各种不同组分就会在不同的时间（保留时间）到达柱的末端，从而得到分离。
检测器用于检测柱的流出流，从而确定每一个组分到达色谱柱末端的时间以及每一个组分的含量。
通过物质被洗脱的顺序和它们在柱中的保留时间来表征不同的物质。
2.仪器
气相色谱仪包括：进样口
色谱柱
检测器
数据处理系统
3.分析方法
3.1内标法
取标准被测成分，按依次增加或减少的已知阶段量，各自分别加入各单体所规定的定量内标准物质中，调制标准溶液。
分别取此标准液的一定量注入色谱柱，根据色谱图取标准被测成分的峰面积和峰高和内标物质的峰面积和峰高的比例为纵坐标，取标准被测成分量和内标物质量之比，或标准被测成分量为横坐标，制成标准曲线。
然后按单体中所规定的方法调制试样液。
在调制试样液时，预先加入与调制标准液时等量的内标物质。
然后按制作标准曲线时的同样条件下得出的色谱，求出被测成分的峰面积或峰高和内标物质的峰积或峰高之比，再按标准曲线求出被测成分的含量。
3.2绝对标准曲线法
取标准被测成分按依次增加或减少阶段法，各自调制成标准液，注入一定量后，按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵坐标，而以标准被测成分的含量为横坐标，制成标准曲线。
然后按单体中所规定的方法制备试样液。
取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱，求出被测成分的峰面积和峰高，再按标准曲线求出被测成分的含量。
3.3峰面积百分率法
以色谱中所得各种成分的峰面积的总和为100，按各成分的峰面积总和之比，求出各成分的组成比率。
4.分类
4.1定性分析
在给定的条件下，表示组分在色谱柱内移动速度的调整保留时间是判断组分是什么物质的指标，即某组分在给定条件下的t恼值必定是某一数值。
4.2定量分析
色谱峰的大小由峰的高度或峰的面积确定。
因组分进入检测器产生的相应的色谱信号大小（峰高或峰面积）随所用检测器类别和载气的不同而异，有时甚至受到物质浓度和仪器结构的影响。
所以须将所得的色谱信号予以校正，才能与组分的量一致，需计算各组分的校正因子。
5.应用
只要在气相色谱仪允许的条件下可以气化而不分解的物质，都可以用气相色谱法测定。
对部分热不稳定物质，或难以气化的物质，通过化学衍生化的方法，仍可用气相色谱法分析。
实验材料和方法
一、实验材料
1.仪器设备
1.1气相色谱仪
1.2 色谱柱
以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%；理论塔板数按维生素E峰计算不低于500（填充柱），维生素E峰与内标物质峰的分离度应大于2。
1.3色谱条件
柱温：265℃
检测器：氢火焰离子化检测器，温度300℃
进样口：温度290℃；分流进样，分流比1：20；进样量1μL
载气：氮气，流速5 mL/min
2.试剂及药品
维生素E胶丸、正己烷、正三十二烷
二、实验方法
1.称取供试品
取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于维生素E 20mg），置棕色具塞锥形瓶。
2.内标溶液的制备
取正三十二烷适量，加正己烷溶解并稀释制成每1mL中含有1.0mg的溶液。
3.对照品溶液的制备
精密称取维生素E对照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加异辛烷80mL，避免加热，超声处理1分钟使完全溶解，并加异辛烷至刻度，摇匀，冲氮密塞，避光，0℃以下保存。
⒋供试品溶液的制备
上述供试品精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，即得供试品溶液。
4. 操作步骤
分别精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液1~3μL 注入气相色谱仪测定、计算，即得。
5.校正因子测定
取正三十二烷适量，加正己烷溶解并稀释成每1mL中含有1.0mg的溶液，另取维生素E对照品20mg，精密称定，置棕色具塞锥形瓶中，精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取1~3μL注入气相色谱仪，计算校正因子。
