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Ki-67在卵巢癌中的表达差异及卵巢癌高危因素的研究尹龙燕;李莉平;杨静;耿宽;延根【摘要】目的通过分析恶性卵巢癌之间Ki-67表达的差异和高危因素的研究,探讨其临床应用价值.方法 156例卵巢癌患者,按病理FIGO(2000年)分期法分类:浆液性乳头状癌81例,黏液性乳头状癌26例,子宫内膜样癌16例,透明细胞癌8例,恶性畸胎瘤5例,颗粒细胞瘤12例,未分化癌3例,无性细胞瘤5例.通过Cox模型筛选法,参数评估生存率的危险因素,并通过免疫组织化学法分析不同分期卵巢癌病例Ki-67表达的不同情况.结果化疗次数和孕次是保护因素(b=-0.175,RR=0.840;b=-0.189,RR=0.828);局部淋巴结转移、远处转移和盆腔浸润是危险因素(b=0.638,RR=1.893;b=1.929,RR =6.886;b =0.971,RR=2.640).156例患者中85例患者进行Ki-67的免疫组织化学检测,其中18例患者Ki-67表达呈阴性(0级),21例患者Ki-67表达呈弱阳性(Ⅰ级),20例患者Ki-67表达呈强阳性(Ⅱ级),26例患者表达呈强阳性(Ⅲ级).有无侵润及不同病理组织分类中Ki-67表达水平比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论卵巢癌化疗次数和孕次是保护因素,而局部淋巴结转移、远处转移和盆腔浸润是危险因素.【期刊名称】《实用临床医学》【年(卷),期】2014(015)010【总页数】5页(P62-65,70)【关键词】Ki-67;卵巢癌;免疫组织化学【作者】尹龙燕;李莉平;杨静;耿宽;延根【作者单位】广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广州510180;广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广州510180;广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科,广州510180;汕头大学医学院第二附属医院影像科,广东汕头515041;汕头大学医学院第二附属医院影像科,广东汕头515041【正文语种】中文【中图分类】R737.31卵巢癌在女性生殖系统恶性肿瘤的中病死率一直居高不下。
Ki-67在癌前病变及胃腺癌中的表达及意义贾振军;李其海;曲勇;周平;韩红梅;周祖平【摘要】目的分析Ki-67在胃癌前病变及胃腺癌中的表达,探讨Ki-67与胃腺癌发生、胃腺癌分化程度和浸润深度的关系.方法采用SP免疫组织化学方法,对102例慢性胃炎、158例胃黏膜异型增生和130例胃腺癌患者进行Ki-67检测,分析其相关关系和临床病理意义.结果 Ki-67在胃炎、低级别异型增生、高级别异型增生及胃腺癌中阳性表达率明显递增,且随着病变加重,强阳性表达显著增多(P＜0.05).130例胃腺癌组织高中分化腺癌Ki-67阳性表达率低于低分化腺癌(P＜0.01).未侵及全层者Ki-67阳性表达率低于侵及全层或突破浆膜者(P＜0.01).结论 Ki-67在胃腺癌的发生中发挥重要作用,胃腺癌Ki-67表达与肿瘤分化程度和浸润深度有关.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2015(036)008【总页数】5页(P915-917,925,封3)【关键词】胃肿瘤;胃炎;Ki-67抗原;免疫组织化学【作者】贾振军;李其海;曲勇;周平;韩红梅;周祖平【作者单位】山东铝业公司医院病理科,山东淄博255069;山东铝业公司医院内科,山东淄博255069;山东铝业公司医院内科,山东淄博255069;山东省淄博市第一医院病理科,山东淄博255200;山东省淄博市中心医院病理科,山东淄博255000;淄博矿业集团中心医院病理科,山东淄博255120【正文语种】中文【中图分类】R735.2·论著·院副主任医师，医学学士，从事临床病理学研究。
[Key words] stomach neoplasms；gastritis；Ki-67 antigen；immunohistochemistry胃腺癌是最常见的消化道肿瘤之一，主要与遗传、自身免疫、幽门螺杆菌感染、生活环境和饮食等多种因素有关，其确切病因还不完全清楚。
cyclin D1与人类肿瘤现代学者在观看肿瘤的不和谐生长和增生时，发觉了与细胞周期调控有关的蛋白，并以为肿瘤与细胞周期调控失常有着紧密联系。
cyclin D1作为细胞周期调剂因子之一，其过度表达是多种人类原发性肿瘤的特点，对肿瘤的诊断和预后判定具有重要意义。
一、正常细胞周期调控细胞周期分为G一、S、G2和M 4时期，由3类因子进行周密调控，它们别离是周期素依托性激酶(cyclin-dependent kinases，CDKs)、周期素（cyclins）和周期素依托性激酶抑制因子(cyclin-dependent kinases inhibitors，CKIs)，其中CDKs处于调控中心地位，cyclins起正调剂作用，CKIs发挥负调剂作用。
1.周期素：目前已在哺乳动物细胞中分离出8类要紧的周期素，连同亚类共11种，别离是A、B一、B二、C、D一、D二、D3、E、F、G和H。
周期素含量随细胞周期而转变，不同的周期素在其相应周期时相达到含量和活性的顶峰，激活相应的CDKs，随后迅速降解失活［1］。
例如：cyclin C、D1-3和E在G1期达到最大活性，并调剂G1期向S期的过渡。
2. 周期素依托性激酶及其抑制因子：CDKs(CDK1-7)是一组依托于周期素，在细胞周期调剂中起关键作用的蛋白激酶，其活性也随周期而转变。
如CDK4、6要紧在G1期与D型cyclins相结合。
与细胞周期调控有关的还有CKIs，分为两类：一类是Kip/Cip家族，包括3种结构相关的蛋白（p2一、p27和p57）；另一类是INK4蛋白家族，由4种相似蛋白（p1五、p1六、p18和p19）组成。
Kip/Cip家族能结归并抑制大多数cyclin-CDK复合物，而INK4分子那么可能是含D 型cyclins复合物的特异性抑制因子。
二、肿瘤细胞周期调控在肿瘤细胞中，推动细胞周期的蛋白如周期素常过度表达，而减缓细胞割裂的蛋白如CKIs却常常失活。
2019年7月综述DOI :10.19347/ki.2096-1413.201920080作者简介：王秋云（1992-），女，汉族，安徽亳州人，硕士。
研究方向：血液病的基础与临床研究。
*通讯作者：潘湘涛，E -mail:panxiangtao@.CCND1基因在甲状旁腺瘤、乳腺癌、肝癌及食管、肺、头颈部鳞状细胞癌等肿瘤中均高表达，并且在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用。
但近期发现，CCND1在部分弥漫大B 细胞淋巴瘤（DLBCL ）中也有表达。
本文就最近的相关文献报道作一综述，以探讨CCND1基因表达与DLBCL 的关系及其临床意义。
1CCND1的概念及生物学特点1991年，MOTOKUTA T 等[1]在研究甲状旁腺腺瘤时发现了一个位于11q13号染色体的候选癌基因PRAD1，该基因有5个外显子，全长15kb 。
随后发现在克隆的人类胎盘中该基因的互补DNA 编码了295个氨基酸的蛋白质，序列与周期蛋白相似，现该基因称为CCND1基因，其编码蛋白质为Cyclin D1。
研究表明，该基因过表达可能在11q13异常的各种肿瘤的发展中发挥重要作用。
现已明确Cyclin D1是调控细胞周期G1期的关键蛋白，其主要功能是促进细胞增殖，推动细胞周期由G1期进入S 期。
同时，Cyclin D1还可以与一些转录因子结合，促进基因转录。
所以Cyclin D1在细胞外生长因子启动的信号转导和细胞周期调控之间起着至关重要的作用。
CHYTIL 等[2]检测的所有肿瘤上皮细胞系中均发现有Cyclin D1-Cdk2（细胞周期蛋白依赖性激酶）复合物的存在，结果表明Cyclin D1-Cdk2复合物可能在促进细胞增殖和肿瘤形成中发挥重要作用。
很多研究表明，Cyclin D1基因G1位点的丢失在几乎所有肿瘤中都很常见，已证明各种遗传和表观遗传机制在这一过程中均发挥了重要作用。
2CCND1与实体肿瘤易感性关系目前，Cyclin D1基因已被公认为一个原癌基因，基因重排或扩增导致的CCND1基因的高表达在甲状旁腺瘤、乳腺癌、肝癌及食管、肺、头颈部鳞状细胞癌的发生发展过程中均起着重要作用[1,3-4]。
P16、Ki-67和CyclinD1在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义P16、Ki-67和CyclinD1在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义摘要：头颈部鳞状细胞癌（Head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC）是一种常见的恶性肿瘤，而检测癌细胞特异性标志物可以为其临床诊断和治疗提供重要依据。
本研究旨在探究P16、Ki-67和CyclinD1三种标志物在头颈部鳞状细胞癌中的表达情况以及其临床意义。
关键词：头颈部鳞状细胞癌，P16，Ki-67，CyclinD1，表达，临床意义引言头颈部鳞状细胞癌是常见的恶性肿瘤之一，危害着患者的生活质量和生存期。
近年来，许多研究表明，癌细胞特异性标志物的表达与肿瘤的诊断、预后以及治疗效果密切相关。
而P16、Ki-67和CyclinD1作为常见肿瘤标志物，其在头颈部鳞状细胞癌中的表达及其临床意义还需要进一步研究。
P16在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义P16是一个细胞周期负调控因子，其与细胞周期调控分子CyclinD1和Cdk4/6结合，从而抑制肿瘤细胞的增殖。
通过免疫组织化学法检测，我们发现P16在头颈部鳞状细胞癌组织中表达异常降低。
研究显示，P16的降低表达与肿瘤的侵袭、转移、淋巴结转移和预后呈正相关。
因此，P16可能成为头颈部鳞状细胞癌治疗效果的预测指标，对患者的预后评估有重要意义。
Ki-67在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义Ki-67是一种可标记细胞增殖活性的核抗原，其在肿瘤细胞核中表达丰富。
Ki-67的高表达与肿瘤的侵袭性增加、晚期分期和预后恶化相关，在头颈部鳞状细胞癌中具有良好的临床应用前景。
研究结果还显示，Ki-67的表达水平与化疗药物敏感性和预后呈负相关，因此可作为预测患者对化疗反应的指标。
CyclinD1在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义CyclinD1是一个细胞周期正调控因子，其通过与Cdk4/6结合，促进肿瘤细胞增殖。
Cyclin D1在肿瘤及妇科领域的研究进展丁玉梅【摘要】Cyclin D1是细胞周期蛋白(cyclin)家族的一个成员,具有调控细胞周期进程的功能.随着细胞周期的进程,cyclin D1的水平呈周期性变化,并与多种蛋白相互作用,促使细胞的分裂与增殖.Cyclin D1是与肿瘤有直接关系的癌基因.Cyclin D1在许多恶性肿瘤中均过度表达,导致细胞周期缩短,使细胞过度增殖.近年的研究显示,cyclin D1蛋白的过度表达与妇科恶性肿瘤的发生、发展及预后有关.作为一项新指标,cyclin D1可能为今后妇科肿瘤的诊断、预测发生、发展及预后开辟广阔的前景.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2014(020)002【总页数】3页(P254-256)【关键词】细胞周期蛋白D1;肿瘤;妇科;进展【作者】丁玉梅【作者单位】淄博市中心医院妇科,山东,淄博,255036【正文语种】中文【中图分类】R737.3细胞周期蛋白(cyclin) D1是cyclin家族的一个成员。
Cyclin D1的过度表达与恶性肿瘤的发生、组织学类型、分化程度、侵袭性及患者预后存在密切关系,cyclinD1的扩增在许多癌变组织早期即可出现。
近年来，在妇科肿瘤领域，cyclin D1也成为了基础与临床研究的热点。
作为临床病理诊断的辅助指标，cyclin D1已成为判断病情和预后的重要参考，测定其表达可早期发现癌前病变，其研究在肿瘤的诊断和治疗上具有潜在的价值。
1 Cyclin家族与cyclin D11.1 Cyclin家族简介人cyclin家族分为8种(cyclin A-H)，共有14个成员，分别为cyclin A1、A2，cyclin B1、B2，cyclin C，cyclin D1、D2、D3，cyclin E1、E2，cyclin F，cyclin G1、G2，cyclin H，它们的高表达可以分别出现在不同的细胞周期。
Cyclin家族作为一系列周期性表达的核蛋白，分为三大类：调控细胞周期进程，如cyclin C，cyclin D1、D3，cyclin E；调控DNA合成，如cyclin A；调节有丝分裂，如cyclin B[1]。
乳腺癌术后病理免疫组化报告解读Revised by Jack on December 14,2020乳腺癌术后病理免疫组化报告解读术后病理中除描述有肿瘤具体分类名称、肿瘤大小、各切缘是否切除干净、淋巴结转移部位和数目以及血管淋巴管内和其他组织中有无侵润外，还有一些重要的可以提示预后的免疫指标，通过分析这些指标可以指导治疗和估计预后。
以下是各医院检查中可能出现的常用免疫指标以及对它们的解读，仅供参考：ER：雌激素受体，阳性提示预后比阴性患者要好，越多越好。
PR：孕激素受体，阳性提示预后比阴性患者要好。
正常乳腺上皮细胞内存在ER、PR。
当细胞发生癌变时，ER和PR出现部分和全部缺失。
如果细胞仍保留ER和（或）PR，则该细胞的生长和增殖仍然受内分泌的调控，称为激素依赖性；如果ER和（或）PR缺失，则该细胞的生长和增殖不再受内分泌的调控，称为非激素依赖性。
两者同时阳性预后最好，如一个阳性一个阴性中，雌激素阳性要好于孕激素阳性。
两者都是阴性预后不好。
阳性者可以术后或术前使用内分泌治疗。
Her-2(CerbB-2)：人类表皮生长因子受体2，是一种原癌基因。
它的过度表达即出现表明患者预后不好。
同时也提示患者易于出现腋窝淋巴结转移和上述两种激素受体可能缺乏。
在正常乳腺组织中呈低表达，在组织中表达率可增高，其表达与分级、淋巴结转移和临床分期呈正相关，表达率越高，预后可能也就越差。
但Fish检测两个以上者有进行生物靶向治疗的可能。
即使用曲妥珠单抗（赫赛汀）。
以上三个都是阴性患者，医学上目前被叫做“三阴”性，预后相对较差，缺乏药物治疗。
E-Cadherin：E-钙粘附蛋白是钙粘附蛋白分子家族中跨膜蛋白亚型的一种，集中表达在粘着连接，对维持上皮细胞的完整性、极性、形态和组织结构起重要作用。
它的高表达表明预后良好。
Ki-67index：是反应细胞增殖的一种增殖抗原，它的表达与发生、发展有关，是一个不良预后因素。
数值越高预后越不好。
抑癌基因p53及细胞周期素cyclinD1与胃癌的关系
抑癌基因p53和细胞周期素cyclinD1是胃癌的两个重要因素。
p53是一个负责细胞修复和细胞周期调节的基因。
这个基因在
正常细胞中起着重要作用，可以防止癌细胞的发生和恶性增殖。
细胞周期素cyclinD1则是一种参与细胞周期调控的蛋白质。
这个基因的异常表达也被发现是许多癌症的并发症之一。
在胃癌发生过程中，p53的变异和缺乏发生较为频繁。
它的缺
失会导致细胞的自身修复功能的丧失，并可能导致肿瘤细胞的积累。
而细胞周期素cyclinD1的异常表达也存在于许多胃癌
患者中。
一些研究表明，这种细胞周期素的过度表达可能会导致正常前胃腺细胞向胃癌细胞的转化，从而促进了胃癌的发展。
虽然实际机制还存在许多不确定性，但很多研究表明，p53和cyclinD1基因的失调是胃癌发生的重要因素。
因此，人们常常
通过检测这两个基因的表达以诊断和监测胃癌的发展。
一项最新研究还发现，p53和cyclinD1基因会以复杂的互相作用来调
节细胞周期，因此更全面的研究也是必须的。
在未来，如果我们能够了解p53和cyclinD1基因的详细机制
和互相之间的作用关系，就能更好地降低胃癌的风险和提高治疗效果。
同时，这些研究也可应用于多种癌症治疗中，为人类健康事业作出重要的贡献。
Ki-67在卵巢癌中的表达及其临床意义张爱臣;赵楠;张小红;冷维春;田秀娟;顾启梅【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2009(013)008【摘要】目的研究Ki-67在卵巢癌中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学法(SP方法),检测15例正常卵巢组织,15例卵巢良性肿瘤组织及60例卵巢癌组织中 Ki-67的表达情况.结果 Ki-67在正常卵巢组织中为阴性表达;Ki-67在良性卵巢肿瘤组织中的阳性表达率为33.3%,在卵巢癌组织中的阳性表达率为75.0%;卵巢癌临床分期越晚、组织学分化越差,Ki-67阳性表达率越高,阳性表达率与临床分期及组织学分级有关,与病理类型无关.结论 Ki-67在卵巢癌的发生、发展过程中起着重要的作用.【总页数】3页(P1069-1071)【作者】张爱臣;赵楠;张小红;冷维春;田秀娟;顾启梅【作者单位】吉林大学中日联谊医院,妇产科,吉林,长春,130033;吉林省妇幼保健院;上海公共卫生医院;吉林大学中日联谊医院,妇产科,吉林,长春,130033;吉林大学中日联谊医院,妇产科,吉林,长春,130033;蛟河县医院,妇产科【正文语种】中文【中图分类】R737.31【相关文献】1.同源异型框转录因子-2、细胞角蛋白7、细胞角蛋白20及Ki-67蛋白在原发性卵巢癌及转移性结肠癌组织中的表达及临床意义 [J], 李娟;顾笑梅;李宗涛2.上皮性卵巢癌中V-ATPase与Ki-67的表达及其临床意义 [J], 李泽莲;杨媛媛;韦雯雯;何静;颜士杰;肖兰3.P53蛋白和Ki-67在上皮性卵巢癌组织中的表达和预后分析P53蛋白和Ki-67在上皮性卵巢癌组织中的表达和预后分析 [J], 陈赟;蔡泓;王婷婷4.HDAC2,P53,P21,Ki-67在卵巢癌中的表达及临床意义 [J], 杨娟;程国梅;党雅娜5.HDAC2,P53,P21,Ki-67在卵巢癌中的表达及临床意义 [J], 杨娟;程国梅;党雅娜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
P16和Ki-67免疫组化检测在宫颈上皮内病变病理诊断中的应用价值分析【摘要】目的：分析在宫颈上皮内病变病理诊断中P16和Ki-67免疫组化检测的应用价值。
方法：纳入对象为在本院开展宫颈活检的患者（n=100），纳节点2019.5~2021.5月收治。
回顾、分析患者的相关资料，所有患者均开展P16和Ki-67免疫组化检测，分析P16和Ki-67阳性情况。
结果：P16在CINⅠ期、Ⅱ期、Ⅲ期的阳性率分别为49.9%、80.0%、100.0%；Ki-67在CINⅠ期、Ⅱ期、Ⅲ期的阳性率分别为76.3%、80.0%、100.0%。
随着CIN分期的增加，P16和Ki-67阳性率也会不断增加（P<0.05）；CINⅠ期、Ⅱ期、Ⅲ期与P16相比，无差异，P>0.05。
结论：将P16和Ki-67免疫组化检测用在宫颈上皮内病变病理诊断中，具有显著的应用作用，其可以提高不同CIN分期的诊断准确性，值得推广。
【关键词】宫颈上皮内病变；P16；Ki-67；免疫组化检测近年来女性受到生活、工作等多方面的压力，增加了宫颈疾病，特别是宫颈癌，其已成为引发女性死亡的常见恶性肿瘤。
据不完全统计，每年我国宫颈癌新发人数达到50万左右，而且死亡率也在不断增加，且越来越趋向年轻化方向发展，对其身心健康造成极大的威胁[1]。
而引发宫颈癌的主要原因为HPV感染，尤其是高危型的感染（HPV16、18型），如不及时治疗，会在短时间内危及患者生命。
宫颈癌早期会出现宫颈上皮病变，故评估上皮病变非常重要。
本文分析在宫颈上皮内病变病理诊断中P16和Ki-67免疫组化检测的应用价值，内容如下。
1.资料与方法1.1一般资料纳入对象为在本院开展宫颈活检的患者（n=100），纳入节点2019.5~2021.5月收治。
回顾、分析患者的相关资料，患者年龄26-70岁，均值（48.21±10.49）岁，以宫颈上皮内瘤变标准进行分级、病理活检确诊，其中CINⅠ期、Ⅱ期、Ⅲ期分别38例、30例、32例。
常用免疫组化指标的意义临床病理中，常用到“肿瘤细胞免疫组化耐药预后标记”,但是许多报告单只写阳性结果,不写临床意义，其结果导致许多病人及其拿到一张不知所云的报告单,以为她们不懂得这些结果的意义,有时候医生也解释不清楚,因此收集了大部分“肿瘤细胞免疫组化耐药预后标记”的意义，以供参考。
格式为:标记物-—作用--阳性部位-—临床意义.多药耐药基因蛋白（P-Gp）--药泵作用——胞膜/胞浆--阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托蒽醌、长春花碱、长春新碱、紫彬醇、泰素帝.谷光甘肽S转移酶（GST π）—-解毒作用——胞浆-—阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、顺铂、氮芥、环磷酰胺、瘤可宁。
拓扑异构酶Ⅱ（TOPOⅡ)——靶点作用——胞核-—阳性率越高,对下列药物越有效：蒽环类抗生素和鬼臼毒素类,如VP16、替尼泊苷、玫瑰树碱、新霉素、柔红霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。
阳性率高者对VP16尤其有效。
雌激素受体（ER）--性激素作用—-胞核——阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效，预后越好。
孕激素受体（PR)-—性激素作用--胞核—-阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效，预后越好。
C-erbB-2-—癌基因产物--胞浆-—阳性率越高，肿瘤恶性程度越高。
ER、PE阳性而C—erbB-2也阳性者，用三苯氧胺治疗效果不好。
Ki-67—-细胞增殖标志--胞核-—阳性率越高，肿瘤增殖越快，恶性程度越高。
Ki-67为细胞增值的一种标记，在细胞周期G1、S、G2、M期均有表达，G0期缺如，其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关。
PCNA（增埴细胞核抗原)。
CEA 多数腺癌表达CEARb (retinoblastoma视网膜母细胞瘤) 基因是肿瘤抑制基因，调节细胞周期。
P53在免疫组化中均为突变型,阳性率越高,预后约差。
野生型半衰期很短Nm23—-是转移抑制基因,其阳性表达和肿瘤转移呈负相关。
cyclinD1\P16\P27联合判断癌症患者病情的研究【摘要】目的: 通过分析不同病期血液中淋巴细胞cyclind1、p16、p27的表达情况，探索这些指标在癌症发生发展变化中的临床意义。
方法: 回顾性分析86例经病理诊断的癌症患者的血液学cyclind1、p16、p27的表达情况，比较稳定和进展组间cyclind1、p16、p27表达的差异性（其中52例稳定、34例进展），计量资料以(x±s)表示，采用两独立样本t检验，计数资料采用卡方检验，p 0.05），外周血淋巴细胞cyclind1、p16的表达进展组均显著高于稳定组（p 0.05）；logistic回归分析，cyclind1对病情的预测有统计学意义（p。
进展组：初次发病；或出现新的转移灶；和/或有可观察肿块增大>25%，肿瘤标志物任何一项增高(+++)以上并持续3个月以上者。
1.3 主要试剂和仪器:鼠抗人cyclind1、p16、p27单克隆抗体(1：100)购自福州迈新生物技术开发有限公司，异硫氰酸荧光素(f1tc)羊抗鼠igg(1：400)购自北京华美生物技术开发有限公司，流式细胞仪为美国bd公司facs420型。
1.4 实验方法。
1.4.1 取样。
稳定组在治疗4个周期后经影像学和实体瘤疗效评价达稳定时，抽血；进展组经影像学和实体瘤疗效评价为进展时，抽血。
在清晨、空腹、静卧条件下,取外周血2ml,注入盛有0.01ml0.1%乙二胺四乙酸二钠抗凝剂的试管中混匀。
1.4.2 实验步骤。
取抗凝外周血2ml，用国产淋巴细胞分离液分离人抗凝外周血中的淋巴细胞，用pbs洗涤，洗涤后用70％乙醇固定过夜。
离心去除乙醇，用pbs洗涤，调节细胞浓度为1×106/ml。
穿透，加入一抗(使用鼠抗人cyclind1、p16、p27单克隆抗体)、二抗(fttc-igg抗体)，加入1mlpbs缓冲液，并设同型阴性对照．样品放在0~4℃环境中．准备上机检测。
Ki-67在不同肿瘤中的表达及意义【中图分类号】r739 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）08-0583-01肿瘤的发生、发展与细胞的异常增殖密不可分。
细胞增殖是一个被高度协调机制控制的基本生物过程，人体复杂的调控机制负责胚胎的正常发育、伤害和感染等的调控，一旦调控平衡被打破，就可能产生肿瘤[1]。
1983年gerdes从何杰金瘤细胞系ia28的粗核成分免疫鼠制备名为ki-67的抗体，发现此抗体仅认可处于细胞周期的增殖细胞核抗原，其表达在人增殖细胞的g1、s、g2、m期，但在g0期无此抗原表达，由此命名这种抗原为ki-67抗原。
ki-67抗原基因定位于第l0号染色体上，ki-67蛋白由分子量为358761d 和319508d的两条多肽链组成，并由两个缝接的9768bp和8686bp 的m-rna所编码。
最近的研究证明，ki-67抗原是核基质的一部分，具有非蛋白的特点，它的表达因细胞周期而异。
通过详细的细胞周期分析显示：它从g1后期开始出现，分布于核仁周围，s和g2期逐渐升高，分布于细胞核内，m期达高峰，呈网状结构包绕整个染色体，而不出现在g0期，在有丝分裂中，ki-67出现在所有增殖细胞的染色体，并在后期迅速减少，半衰期不到一个小时，故ki-67的表达与细胞周期严格相关[1]。
这说明ki-67可作为标记细胞的“生长指数”来衡量肿瘤细胞的生长速度，与恶性肿瘤的发展、转移和预后高度相关。
1 肺癌宋作庆[3]采用免疫组化方法(s-abc法和s-p法)检测70例nsclc和20例同期良性病变肺组织中ki-67的表达，ki-67的阳性表达率为85.7％，而正常肺组织中无表达，差异有统计学意义。
说明ki-67的表达与肺癌的发生关系密切，是恶性肿瘤的特征性表现。
国内外多数学者研究发现，腺癌中ki-67的表达低于其他组织类型，可能与腺癌细胞增殖速度较低有关[1]。
李英杰[4]等运用免疫组化方法检测ki-67的表达，发现肺癌分期越晚，ki-67表达越高。
