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鼠神经生长因子对老年带状疱疹后遗神经痛病人的疗效评价蓝丽康;瞿砚舟;吕锦;雷四英【摘要】Objective:To investigate the clinical efficacy and safety of mouse nerve growth factor(mNGF) in the treatment of post-herpeticneuralgia( PHN) in old patients. Methods:Fifty old patients with PHN were randomly divided into the observation group( n=25) and controlgroup(n=25). The observation group were treated with 20 μg mNGF by intramuscular injection once a day,and the control group were treated with 500 μg vitamin B12 once a day for 14 days. The clin ical efficacy in two groups were evaluated using visual analogue scale before and after treatment,and the adverse action in two groups were recorded. Results:The VAS score of the observation group was significantly lower than that of the control group(P<0. 01). The total effective rate,degree of pain relief and pain disappear time in observation group were significantly better those in control group(P<0. 01). Conclusions:mNGF in the treatment of PHN was effective and safe.%目的:探讨鼠神经生长因子(mNGF)治疗老年带状疱疹后遗神经痛(PHN)病人的临床疗效.方法:将老年PHN病人50例,随机分成观察组和对照组,各25例,对照组予维生素B12500μg,每天1次;观察组予mNGF 20μg肌内注射,每天1次;2组疗程均14 d.2组病人治疗前后,均采用疼痛视觉模拟评分法(VAS)进行评分,评估疗效,并记录不良反应.结果:观察组VAS评分显著低于对照组(P<0.01),总有效率、疼痛减轻程度和疼痛消失时间均明显优于对照组(P<0.01).结论:采用mNGF治疗PHN安全有效.【期刊名称】《蚌埠医学院学报》【年(卷),期】2018(043)003【总页数】3页(P338-340)【关键词】带状疱疹;后遗神经痛;鼠神经生长因子【作者】蓝丽康;瞿砚舟;吕锦;雷四英【作者单位】浙江省丽水市人民医院神经内科,323000;浙江省丽水市人民医院神经内科,323000;浙江省丽水市人民医院神经内科,323000;浙江省丽水市人民医院神经内科,323000【正文语种】中文【中图分类】R246.6老年人患带状疱疹后30% ～50%伴随顽固、剧烈的后遗神经痛，临床表现为阵发性刺痛、针刺痛以及持续性烧灼痛，疼痛时间一般持续数月或数年不等。
腺病毒常见问题与解答1、腺病毒载体对目的基因的长度是否有要求？有要求。
对E1和E3双缺失的腺病毒载体，比如AdMax的Kit C、Kit D等，其总包装的外源片断要求小于8 kb。
而对于只有E1缺失或E3缺失的载体，比如Kit A、Kit B等，外源片断要求小于5 kb。
注意，外源片断指包括启动子、外源基因和poly A等在内的整个插入片断。
2、我的试验需要多少总量的腺病毒载体？腺病毒介导外源基因的基因治疗研究一般分为体外培养细胞试验(体外试验)和动物试验(体内试验)两部分，不同的实验设计所需要的病毒量也不尽相同。
根据经验，完成一个完整的肿瘤治疗实验需要腺病毒的病毒量总量约为3×1012VP左右.3、如何提高腺病毒的活性？提高腺病毒的活性，关键应该是在病毒包装过程和扩增过程。
纯化过程只是去掉有缺陷的病毒和细胞碎片等容易引起机体免疫反应的过程，如果扩增的病毒滴度高，那么纯化后就会更高的。
4、克隆到转移载体的基因中的5’和3’UTR（未翻译区）的额外的碱基会影响蛋白表达吗？UTR尽可能短一些，特别是在5’要避免在mRNA里形成二级结构。
在起始密码子ATG 前面可以加一小段（6-9bp）的碱基序列可以增强目的基因的表达，比如Kozak序列(GCCGCCACCATG)。
5、如何判断腺病毒载体是否能高效感染某种细胞？参照文献报道是很简单的办法，也可以用带报告基因的腺病毒先行预实验。
Ad5能高效感染绝大多数人类、小鼠等的体细胞（包括分裂和非分裂细胞），比如肝、肌肉、神经组织等。
但对血液系统来源细胞和某些肿瘤细胞，比如乳腺癌、白血病细胞等，感染效率较低。
6、腺病毒载体在体外实验（in vitro）中应注意哪些问题？1）由于细胞表面受体的差异，腺病毒载体在不同的细胞中转导效率不同。
可根据文献报道或用带报告基因的腺病毒载体判断病毒用量。
2）在细胞处于对数生长期时感染病毒效果较好。
避免在消化细胞后立刻感染病毒，因为此时细胞膜上的病毒受体往往受到了暂时的破坏。
骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白胶促进前交叉韧带重建后的腱-骨愈合朱乐全;卢剑华;冉俊岭;杨卫保;王辉【摘要】背景:骨髓间充质干细胞与纤维蛋白胶联合应用可提高前交叉韧带重建后的早期腱-骨界面断裂强度与刚度,促进移植物与骨隧道早期愈合.目的:探讨骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白胶对前交叉韧带重建术后腱-骨愈合的影响.方法:将腺病毒载体Ad-GFP-骨形态发生蛋白2转染至骨髓间充质干细胞,48 h后检测GFP基因表达及骨形态发生蛋白2表达.将54只新西兰大白兔(购买于重庆市医学实验动物中心)随机分为空白组、实验组、对照组,每组18只,均建立前交韧带重建模型,实验组将基因转染48 h的骨髓间充质干细胞与纤维蛋白胶混合,注射至腱-骨界面;对照组将未转染的骨髓间充质干细胞与纤维蛋白胶混合,注射至腱-骨界面;空白组未注射任何材料.术后第4,8,12周分别获取股骨-移植肌腱-胫骨标本,进行组织学检测与生物力学检测.结果与结论:①转染48 h后,荧光显微镜下可见细胞表达绿色荧光,转染效率为(86.1±6.3)％;SP免疫组织化学检测细胞胞浆内骨形态发生蛋白表达阳性;Western-blot检测可见骨形态发生蛋白2阳性表达条带;②苏木精-伊红染色显示,实验组、对照组腱-骨愈合效果明显优于空白组,实验组腱-骨愈合效果优于对照组;③生物力学检测显示,实验组、对照组的最大载荷、刚度均强于空白组(P<0.05),实验组的最大载荷、刚度均强于对照组(P<0.05);④结果表明,骨形态发生蛋白2进一步增强了骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白胶促进前交叉韧带重建后的腱-骨愈合效果.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2019(023)001【总页数】5页(P30-34)【关键词】前交叉韧带重建;骨形态发生蛋白2;骨髓间充质干细胞;纤维蛋白胶;腱-骨愈合;干细胞【作者】朱乐全;卢剑华;冉俊岭;杨卫保;王辉【作者单位】重庆市黔江中心医院·吉首大学附属黔江医院骨科,重庆市 409000;重庆市黔江中心医院·吉首大学附属黔江医院骨科,重庆市 409000;重庆市黔江中心医院·吉首大学附属黔江医院骨科,重庆市 409000;重庆市黔江中心医院·吉首大学附属黔江医院骨科,重庆市 409000;重庆市黔江中心医院·吉首大学附属黔江医院骨科,重庆市 409000【正文语种】中文【中图分类】R459.9;R394.20 引言 Introduction前交叉韧带在维持膝关节稳定性方面起着重要作用，一旦其受损，自愈能力极差，需进行前交叉韧带重建治疗，但腱-骨界面愈合过程复杂且缓慢，愈合强度较差，直接影响了患者术后早期康复，进而影响治疗效果[1-3]。
临床研究用人间充质干细胞质量评价规范（讨论稿）前言人间充质干细胞(human MSCs, hMSCs)是一类具有一定的自我复制更新和多向分化潜能的成体干细胞，广泛存在于胎儿和成人各组织中，如骨髓、脂肪、皮肤、牙髓、肌腱，以及新生儿附属组织，如脐带、胎盘、羊膜等等组织。
除一定程度的分化潜能外，hMSCs还具有独特的免疫调控和组织再生功能，参与调控异常免疫反应、维护免疫平衡，帮助机体形成有利于病损组织细胞修复或再生的微环境，以促进损伤组织细胞的修复或再生。
hMSCs独特的生物学功能决定了其应具有广泛的临床适应症，并使其成为近十年来细胞治疗领域中发展最为广泛、最为迅速的干细胞类型。
过去10年来所积累的大量临床前及临床研究数据显示，不同组织来源的hMSCs均具有不同程度，针对不同临床适应症的治疗效果。
目前在登记的各种自体或异体组织来源的hMSCs临床适应症类型或疾病亚型已有上百种，其中常见的临床适应症类型包括骨关节疾病、心血管疾病、器官功能衰竭、神经退行性疾病、移植物抗宿主病、多发性硬化、脊髓损伤、炎性结肠炎、脊髓侧索硬化、系统性红斑狼疮，等等。
然而，无论是临床前或临床研究阶段，现有的研究结果仍都存在不同程度的问题，而所有问题又都不同程度地汇聚到hMSCs的质量问题上。
其中临床前研究所表现的问题是，不同研发者所使用的hMSCs来源、培养体系、制备工艺、质量标准、评价技术等存在很大差异，也存在质量评价内容和技术的合理性等问题，因此导致不同研究者间的研究结果很难具有可比性，或结果难以重复，因此也很难形成相对统一的质量标准。
而临床研究中所存在的问题是，绝大多数临床研究还处在早期阶段，所观察的病例数还很有限，临床研究中细胞质量的标准化和细胞使用的规范性仍存在巨大差异，所有这些尚不足以完全支持hMSCs的安全性和/或疗效。
除此以外，因hMSCs临床前研究还远不够完善，对其临床研究的指导作用还不强，或者临床前研究与临床研究存在严重脱节现象，临床研究阶段细胞质量的稳定性研究欠缺，细胞质量评价和受试者评估体系尚未建立，等等。
碱性成纤维细胞生长因子重组腺病毒转染兔骨髓间充质干细胞的表型变化蔡弢艺;陈雄生;贾连顺;孙延卿;林斌;陈长青【摘要】BACKGROUND:Exogenous basic fibroblast growth factor (bFGF) plays an important role in the ligament tissue healing process, and the use of transgenic methods to transfect exogenous genes into cells can promote the secretion of bFGF. OBJECTIVE:To observe phenotypic changes and the bFGF protein expression after bFGF recombinant adenovirus was used to transfect rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). METHODS:Passage 2 BMSCs were divided into three groups:Ad.bFGF-eGFP group, Ad.eGFP group and control group. Under a phase contrast microscope we observed the changes in cellmorphology. The expression of bFGF protein in BMSCs was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The proliferative curve was detected by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). RESULTS AND CONCLUSION:The transfected cells showed a uniform phenotype of fibroblasts. MTT colorimetric assay revealed that more proliferative activity of transfected BMSCs was shown in the Ad.bFGF-eGFP group than in the Ad.eGFP group and control group. ELISA results showed that expression of bFGF protein was higher in the Ad.bFGF-eGFP group than in the Ad.eGFP group and control group (P<0.05). BFGF recombinant adenovirus can induce the differentiation of BMSCs into fibroblasts, increase proliferative ability and promote the expression of bFGF protein.%背景：外源性碱性成纤维细胞生长因子在韧带组织的愈合过程中发挥着重要作用，采用转基因方法将外源性基因转入细胞内能促进碱性成纤维细胞生长因子分泌。
小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中的核受体Rev-erbα及Rorα林富伟;徐晓梅;崔琰;谢乙加;赵青【摘要】BACKGROUND: The orphan nuclear receptors Rev-erbα and Rorα play important roles in lipid metabolism and glucose metabolism. But it is unclear whether they are involved in bone metabolism. OBJECTIVE: To observe the expression of Rev-erbα and Rorα during the osteoblastogenesis process of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). METHODS: BMSCs were isolated and purified from C57BL/6 mice by the whole bone marrow adherence method followed by morphology observations and then BMSCs were induced to differentiate into osteoblasts and adipocytes. We detected their differentiation abilities using oil red O staining and alizarin red staining, respectively. Real-time PCR and western blot assay were conducted to detect the mRNA and protein levels of Rev-erbα and Rorα in BMSCs cultured in the osteogenic medium for 0, 7, 14 days. RESULTS AND CONCLUSION: BMSCs fromC57BL/6 mice were mainly spindle-shaped and exhibited the swirl-like pattern of growth. Following induction, oil red O staining and alizarin red staining produced a positive reaction in these cells. Rev-erbα expression at both gene and protein levels decreased at 0, 7, 14 days after osteogenic induction, while Rorα expression increased at both gene and pro tein levels. These findings indicate that Rev-erbα and Rorα may participate in the osteoblastogenesis of BMSCs.%背景:孤儿核受体Rev-erbα及Rorα已经被广泛证实与糖代谢、脂肪代谢等密切相关,但与骨代谢的关系尚不明确.目的:探讨孤儿核受体Rev-erbα及Rorα在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用.方法:采用全骨髓贴壁法分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,进行形态学观察和成脂、成骨诱导分化,采用油红O染色,茜素红染色对其分化能力进行鉴定.在骨髓间充质干细胞成骨诱导分化第0,7，14天,采用Real Time PCR及Western Blot分别检测孤儿核受体Rev-erbα及Rorα的mRNA及蛋白表达变化.结果与结论:①骨髓间充质干细胞形态以梭形为主,呈典型的漩涡样生长.油红O染色及茜素红染色呈阳性;②在成骨诱导的第0,7,14天,Rev-erbα的mRNA及蛋白表达均呈下降趋势,而Rorα的mRNA及蛋白表达均呈上升趋势,提示Rev-erbα及Rorα在骨髓间充质干细胞成骨诱导过程中可能发挥了一定的作用.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2018(022)017【总页数】6页(P2625-2630)【关键词】干细胞;骨髓间充质干细胞;成骨分化;核受体;Rev-erbα;Rorα【作者】林富伟;徐晓梅;崔琰;谢乙加;赵青【作者单位】西南医科大学附属口腔医院正畸科,口颌面修复重建与再生实验室,四川省泸州市 646000;西南医科大学附属口腔医院正畸科,口颌面修复重建与再生实验室,四川省泸州市 646000;西南医科大学公共卫生学院,四川省泸州市 646000;西南医科大学附属口腔医院正畸科,口颌面修复重建与再生实验室,四川省泸州市646000;口腔疾病研究国家重点实验室,国家口腔疾病临床研究中心,四川大学华西口腔医院正畸科,四川省成都市 610041【正文语种】中文【中图分类】R394.2文章快速阅读：文题释义：Rev-erbα：又名Nr1D1，是孤儿核受体超家族中的一员，Rev-erbα基因位于人类第17号染色体上。
・研究进展・２０１０年１月第７卷第１期骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死研究进展戴双武１，丁帅ｚ，李章华２（１．深圳市宝安区石岩医院骨科，广东深圳５１８１０８；２．武汉大学人民医院骨科，湖北武汉４３００６０）【摘要】股骨头坏死是一种严重危害人类健康的常见疾病，早期有效治疗可以防止股骨头进一步病变，带来巨大的社会效益和经济效益。
骨髓间充质干细胞（ＢＭ—ＭＳＣｓ）具有良好的多向分化潜能和活跃的增殖特性。
成为目前股骨头坏死治疗研究中的热点。
联合其他方法，特别是髓：醛减压ＢＭ—ＭＳＣｓ移植、介入ＢＭ—ＭＳＣｓ移植、联合填充材料ＢＭ—ＭＳＣｓ移植在临床上已经取得良好效果，而基因转染ＢｌⅥ．－ＭＳＣｓ移植町能是未来新的研究方向。
本文对目前ＢＭ＿’ＭＳＣｓ在股骨头坏死治疗中的应用进行综述。
以期找到新的有效方法。
【关键字】骨髓间充质干细胞；股骨头坏死；治疗；进展【中图分类号】Ｒ６８１．８【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７３－－７２１０（２０１０）０１（ａ）－０１６－０４股骨头坏死（ｏｓｔｅｏｎｅｃｒｏｓｉｓｏｆｆｅｍｏｒａｌｈｅａｄ．ＯＮＦＨ）是一种严重危害人类健康、致残率极高的常见疾病．常累及中青年．呈进展性和致残性发展，８０％的患者在１—４年内进展为股骨头塌陷，最终因股骨头变形、毁损、髋关节剧烈疼痛而不得不行人工关节置换术。
骨髓间充质干细胞（ＢＭ—ＭＳＣｓ）具有良好的多向分化潜能、活跃的增殖特性、对外源基因的高效转染表达能力以及促进造血、在体外较易分离和培养等特性．较多地用于股骨头坏死的研究，显示了良好的应用前景。
１股骨头坏死的机制ＯＮＦＨ发病机制复杂多样，病因主要是创伤、应用激素、酗酒及结缔组织病阒素等。
微循环障碍是原发性股骨头坏死的共同病理机制．决定其病理演变的因素可概括为３个方面：病因、破骨细胞介导的骨吸收与骨的有效重建速度的平衡关系、生物力学作用。
病因最终造成微循环损害。
骨细胞、骨髓组织坏死、骨髓间充质细胞向成骨细胞分化能力下降。
