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一、实验目的1. 了解吞噬细胞吞噬功能的原理和方法。
2. 掌握吞噬细胞吞噬功能测定的操作步骤。
3. 通过实验，观察吞噬细胞对不同颗粒物质的吞噬能力，评估吞噬细胞的功能状态。
二、实验原理吞噬细胞是机体免疫系统的重要组成部分，具有吞噬和消化病原体、衰老细胞和外来颗粒物质的功能。
本实验通过观察吞噬细胞对颗粒物质的吞噬情况，评估吞噬细胞的功能状态。
三、实验材料1. 实验动物：ICR小鼠2. 实验试剂：3%硫代乙醇酸钠、1%羊红细胞悬液、瑞氏染液、甲醇、生理盐水、注射器、尖吸管、橡皮吸头、试管、载玻片等。
3. 实验仪器：显微镜、恒温水浴箱、天平、解剖器材等。
四、实验方法1. 实验动物分组：将ICR小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验组处理：实验组小鼠腹腔注射3%硫代乙醇酸钠3ml，对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。
3. 巨噬细胞聚集：注射后4天，实验组小鼠腹腔注射1%羊红细胞悬液1ml，对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。
4. 采集吞噬细胞：注射后1小时，将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖暴露腹腔，收集腹腔吞噬细胞。
5. 吞噬细胞染色：将收集到的吞噬细胞用瑞氏染液染色，镜检观察。
6. 吞噬细胞计数：计算每个视野中吞噬细胞的数量，并计算吞噬细胞吞噬羊红细胞的百分比。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔吞噬细胞数量明显多于对照组。
2. 实验组小鼠腹腔吞噬细胞吞噬羊红细胞的百分比明显高于对照组。
六、实验分析1. 吞噬细胞是机体免疫系统的重要组成部分，具有吞噬和消化病原体、衰老细胞和外来颗粒物质的功能。
2. 本实验结果表明，硫代乙醇酸钠可以刺激小鼠腹腔巨噬细胞的聚集，而生理盐水对巨噬细胞聚集没有明显影响。
3. 实验组小鼠腹腔吞噬细胞吞噬羊红细胞的百分比明显高于对照组，说明实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能较强。
七、实验结论1. 本实验成功观察了吞噬细胞对羊红细胞的吞噬情况，评估了吞噬细胞的功能状态。
2. 硫代乙醇酸钠可以刺激小鼠腹腔巨噬细胞的聚集，而生理盐水对巨噬细胞聚集没有明显影响。
转型不利，雅虎什么都打算卖了在雅虎首席财政官肯尼斯·古德曼（Kenneth Goldman）看来，如今雅虎受到的关注是出乎他意料的。
雅虎所受的关注甚至已经比科技巨头苹果、Google 还要多，而后两者的市值已经是雅虎的数倍。
尽管从 Google 被挖来担任 CEO 的玛丽莎·梅耶尔已经想出了不少办法来挽救雅虎的困境，但是雅虎的核心业务——门户的运营还是在苦苦挣扎。
在投资人的压力之下，这家曾经的互联网巨头自保的办法似乎只剩下了卖卖卖。
目前，雅虎的资产主要是以下几个部分组成：核心业务：即互联网业务，包括搜索、邮箱、雅虎金融、新闻网站等；雅虎日本 35.5% 的股份，这一部分的价值超过 70 亿美元；社交媒体 Tumblr，2013 年雅虎花 11 亿美金购入，但是最近一季财报显示，Tumblr 的估值下降了 23%；阿里巴巴 15.5% 的股份，这是雅虎目前最值钱的资产，价值 270 亿美元；专利、土地、房产和其他“非核心资产”。
基本上，除了 Tumblr，所有业务都有了拆开出售的消息。
有些来自雅虎管理层，有些来自投资人。
截至 3 月 4 日，雅虎的市值是 320.3 亿美元，其持有的阿里巴巴的股份价值 270 亿美元，再减去其持有雅虎日本的股份的价值 83.78 亿美元，结果剩下的核心业务的市值是负的 33 亿美元——市场对雅虎的态度可见一般。
去年年初，雅虎准备单独成立一家新公司来管理阿里巴巴的股份。
但是由于可能存在的税务风险，雅虎最终放弃了这项计划，转而在著名的激进投资者、对冲基金Starboard Value 的敦促之下，寻求出售包括门户网站、搜索、通讯、广告在内的公司核心业务。
根据彭博社的消息，雅虎已经从 2 月 21 日开始接触对于它主营业务感兴趣的潜在买家，目前这个名单包括运营商 Verizon、康卡斯特和 AT&T，Bain、KKR、TPG 等投资机构。
《时代》周刊的母公司也表达了收购的兴趣。
实验名称：体外巨噬细胞极化及其影响因素研究实验目的：1. 了解巨噬细胞在体外培养中的基本生物学特性。
2. 探究细胞因子对巨噬细胞极化的影响。
3. 分析巨噬细胞极化在不同条件下的变化规律。
实验材料：1. 原代人外周血单核细胞2. RPMI-1640培养基3. FBS（胎牛血清）4. 抗生素-抗真菌混合物5. 刺激剂：LPS（脂多糖）、IFN-γ（干扰素-γ）6. 细胞因子：IL-4（白细胞介素-4）、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）7. 流式细胞仪8. 免疫荧光检测抗体9. 荧光显微镜10. 细胞计数仪实验方法：1. 原代人外周血单核细胞分离：采用密度梯度离心法分离人外周血中的单核细胞。
2. 巨噬细胞培养：将分离得到的单核细胞用RPMI-1640培养基和FBS进行培养，培养至细胞融合度为80%左右。
3. 巨噬细胞极化：分别加入LPS和IFN-γ作为促炎细胞因子，IL-4和TNF-α作为抗炎细胞因子，观察巨噬细胞的极化情况。
4. 细胞因子影响观察：通过流式细胞仪检测巨噬细胞表面的M1/M2标志物表达，分析细胞因子对巨噬细胞极化的影响。
5. 巨噬细胞功能检测：通过吞噬实验和细胞毒性实验检测巨噬细胞的吞噬能力和细胞毒性。
实验结果：1. 成功分离并培养出原代人外周血单核细胞，并进行巨噬细胞培养。
2. 加入LPS和IFN-γ后，巨噬细胞极化为M1型，表现为高水平的M1标志物表达和吞噬能力增强。
3. 加入IL-4和TNF-α后，巨噬细胞极化为M2型，表现为低水平的M1标志物表达和吞噬能力减弱。
4. 不同细胞因子对巨噬细胞极化的影响存在差异，LPS和IFN-γ诱导M1极化，而IL-4和TNF-α诱导M2极化。
5. 巨噬细胞的吞噬能力和细胞毒性在不同极化状态下存在显著差异。
讨论：1. 本实验成功分离并培养出原代人外周血单核细胞，为后续研究巨噬细胞极化提供了基础。
2. 细胞因子在巨噬细胞极化过程中起着关键作用，LPS和IFN-γ诱导M1极化，IL-4和TNF-α诱导M2极化。
中性粒细胞吞噬实验报告篇一：小吞噬实验报告篇一：巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告实验二一巨噬细胞吞噬功能实验【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞，局域活跃的吞噬功能。
吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷亚甲蓝染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目，以判断吞噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
【方法】体内法：（1）实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
（2）实验时，每只小鼠注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。
（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片过，再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液，盖上盖玻片。
（4）高倍镜下进行观察，计数。
【结果】【分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
二沉淀反应双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，二者均可发生扩散，并且随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
本实验是定性实验，常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。
【方法】（1）制板：将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml（2）打孔：待琼脂凝固后，将载玻片置于打孔样板上，用打孔器打孔（3）加样：在中央孔内加抗体，上下两孔加抗原1，左右加抗原二，每孔加10μl（4）结果观察：将琼脂板置于湿盒，37℃一天后观察结果。
【结果】在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线，有抗原抗体反应，为阳性反应，说明抗原1与抗体相对应。
中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线，说明抗原2与抗体之间不相对应。
实验一细胞膜的通透性【实验目的】了解物质分子质量、脂溶性、电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响。
【实验原理】细胞膜在不断变化的环境中，必须保持自身的稳恒状态，才能生存。
细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻挡另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。
水分子可以自由通过细胞膜，当细胞处于低渗液环境时，水分子大量渗入到细胞内，使细胞膨胀，进而破裂，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这就是溶血现象。
溶血现象可作为测量物质进人血红细胞速度的一种指标。
红细胞置于乙二醇、丙三醇（甘油）、葡萄糖等摩尔浓度的高渗液中，乙二醇等分子进入血红细胞，使细胞内的渗透性活性分子的浓度大为增加，继而导致水的摄入，细胞膨胀，细胞膜破裂，发生溶血。
溶血现象发生的快慢与进入细胞的物质的分子质量大小有关。
分子质量大的进入细胞慢，发生溶血所需的时间也长。
非极性化合物易溶于脂溶剂，但在水中溶解度甚小。
碳链越长，脂溶性越大。
一种化合物在脂溶剂中的溶解度与其在水中溶解度之比，称为分配系数。
各种非电解质溶液，只要单位体积中所含的分子数相同，就具有相同的渗透压。
电解质溶液，如氯化钠与葡萄糖分子数相等时，氯化钠产生的渗透压要大得多。
具有相同渗透压的某非电解质溶液与某电解质溶液浓度之比，称为等渗系数，用i来表示。
i=葡萄糖的等渗摩尔浓度/氯化钠的等渗摩尔浓度发生溶血者为低渗液，所以把发生溶血的前一管溶液的浓度近似视为红细胞等渗摩尔浓度。
【实验仪器、材料和试剂】(1) 仪器、用具：小烧杯、试管、试管架、刻度吸管、注射器、秒表。
(2) 材料：含适量肝素的鸡血。
(3) 试剂：l mol/L乙二醇水溶液，l mol/L丙三醇水溶液，l mol/L 葡萄糖水溶液，3 mol/L甲醇，3 mol/L乙醇，3 mol/L 丙醇，1/8 mol/L、1/9 mol/L、1/10 mol/L、1/12 mol/L、1/14 mol/L葡萄糖溶液， 1/12 mol/L、1/13 mol/L、1/14 mol/L、1/16 mol/L、1/18 mol/L氯化钠溶液。
一、实验背景吞噬活性是机体免疫系统中的重要功能之一，主要由巨噬细胞等免疫细胞执行。
吞噬活性检测对于研究免疫细胞的生物学特性、疾病诊断及药物研发具有重要意义。
本实验旨在通过体外实验方法，检测巨噬细胞的吞噬活性，并分析影响吞噬活性的因素。
二、实验材料与仪器1. 材料：（1）小鼠巨噬细胞：购自某生物技术公司；（2）金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）：购自某微生物菌种保藏中心；（3）生理盐水、PBS缓冲液、DMEM培养基等；（4）台盼蓝染液、二甲基亚砜（DMSO）等；（5）激光共聚焦显微镜、倒置显微镜、流式细胞仪等。
2. 仪器：（1）CO2培养箱；（2）低温高速离心机；（3）超净工作台；（4）电子天平；（5）移液器、吸管等。
三、实验方法1. 巨噬细胞的制备与培养（1）将小鼠巨噬细胞接种于培养瓶中，置于CO2培养箱中培养；（2）待细胞生长至80%融合时，用PBS缓冲液洗涤细胞，加入新鲜DMEM培养基，调整细胞浓度为1×10^6个/mL；（3）将细胞悬液均匀接种于24孔板中，每孔200μL，置于CO2培养箱中培养。
2. 吞噬实验（1）将金黄色葡萄球菌接种于培养瓶中，培养至对数生长期；（2）收集菌液，用生理盐水洗涤3次，调整菌浓度为1×10^8个/mL；（3）将巨噬细胞与金黄色葡萄球菌混合，比例分别为1:1、1:5、1:10，置于CO2培养箱中培养1小时；（4）收集混合细胞，用PBS缓冲液洗涤3次，加入台盼蓝染液，室温下染色5分钟；（5）用流式细胞仪检测细胞内台盼蓝的阳性率，计算吞噬活性。
3. 影响吞噬活性的因素分析（1）观察不同温度（37℃、42℃、45℃）对吞噬活性的影响；（2）观察不同pH值（pH 6.5、7.0、7.5）对吞噬活性的影响；（3）观察不同细胞浓度对吞噬活性的影响。
四、实验结果1. 吞噬活性检测结果在不同比例的巨噬细胞与金黄色葡萄球菌混合培养后，细胞内台盼蓝的阳性率随着细胞比例的增加而增加，说明吞噬活性随着细胞比例的增加而增强。
生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日
题目：巨噬细胞吞噬作用的观察
一．实验目的
1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬
细胞在非特异性免疫中的功能。
2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
二．实验原理
1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量
巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。
连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细
胞。
2.台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。
活细胞的细胞质膜
对台盼蓝有不透过性。
巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤
后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼
蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。
是一种溶酶体染色的方法。
生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会
被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程
三．实验材料及设备
1.实验材料：
a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只
b)鸡红细胞悬液
c)生理盐水
2.实验设备：
a)普通光学显微镜
b)载玻片、盖玻片若干
c)注射器
d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等
生命科学学院专业生物技术 2016级生技班612组姓名同实验者 2018年 3 月 26日四．实验方法及步骤
1.小鼠处理与巨噬细胞采集
a)连续2-3天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀
粉肉汤。
b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。
c)一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔
中注射1ml鸡红细胞悬液。
按摩小鼠腹部。
d)20-30分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（0.9%NaCl）按
摩小鼠腹部。
e)3分钟后，引颈法处死小鼠
f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉
层），用无针头的注射器吸取腹腔液。
g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观
察。
2.观察
在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞
的巨噬细胞。
注意避免玻片液体干涸。
