临床常用免疫学检查 (2)优秀课件

T细胞分化抗原测定


白细胞分化抗原（cluster differentiation，CD）
CD3代表总T淋巴细胞，CD4是辅助、诱导T细胞的标 志，CD8是抑制、杀伤性T细胞的标志。应用单抗和荧 光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数 CD的百分率。 参考值 ：免疫荧光法（IFA）： CD3为63.1%±10.8%； CD4 为42.8%±9.5%；CD8 19.6%±5.9%；CD4 /CD8 为（2.2±0.7）/1。流式细胞术：CD3 61%~85%；CD4 28%~58%；CD8 19%~48%；CD4 /CD80.9~2.0/1。

意义 可用于T淋巴细胞计数， T淋巴细胞亚
群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。 CD3 分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面， 是总T淋巴细胞的重要标志，CD3+ 常见于甲 状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌 无力以及器官移植后排斥反应。 CD3+ 主要见 于免疫缺陷病，如AIDS、先天性胸腺发育不 全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶 性肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。
血清补体测定
血清C4测定：由肝脏、吞噬细胞合成， 参与补体的经典激活途径。 参考值：单向免疫扩散法：0.197+/0.109/L。 临床意义基本与C3相似，降低还见于多 发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性C4缺乏 症等。

血清补体测定
补体C1q测定 参考值：0.179±0.04g/L 临床意义：与C3相似，降低还见于活动 性混合性结缔组织病、重度营养不良、 肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。 B因子测定-C3激活剂前体
血清M蛋白测定 （M protein，monoclonal immunoglobulins）

（1）鉴定病原菌：诊断疾病 （2）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌 （3）检测血型抗原、HLA抗原：鉴定血型，亲子鉴定 （4）检测药物半抗原： 确认运动员是否服用兴奋剂
（二） 抗原或抗体的检测方法
凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 免疫标记技术
颗粒性抗原（红细胞、细菌、 乳胶颗粒等 ）与抗体特异性结合，形成肉眼可见的凝集块。
副作用：明显 ，主要是骨髓抑制、肝肾毒性等
其抑制作用是非特异性的，长期应用可导致：继 发性免疫缺陷 、 严重感染、 肿瘤
抗体为基础的免疫治疗
一、免疫血清
抗毒素血清、胎盘（丙种）球蛋白、抗菌免疫血清、抗病毒免疫血清、抗 淋巴细胞丙种球蛋白等
二、单克隆抗体（mAb）：用于靶向治疗等。 三、基因工程抗体：降低抗体的免疫原性
化学制剂 1、烷化剂：环磷酰胺 2、抗代谢药：激素：糖皮质激素 真菌代谢产物 1、 环孢素A：对T，尤其是TH有较好的选择性抑制作用 2、FK-506：其作用强于环孢素A10-100倍，且与环孢素A
有明显的协同作用。 中药及其有效成分 雷公藤多甙
适应症：免疫功能过高引起机体损害的患者
1、抗移植排斥 2、超敏反应性疾病：激素 3、自身免疫病：激素、雷公藤多甙 4、感染性炎症：激素
3、细胞因子检测
可用于鉴定分离的淋巴细胞亚群，监测某些疾病状态的细胞免疫功 能。IL-2、IL-2R、rIFN 、TNF等检测。 ①免疫学方法：ELISA、RIA等。 ②细胞生物学方法
③分子生物学方法，如聚合酶链反应（PCR）法等
4、体内免疫细胞功能测定：皮肤试验
（1）迟发型超敏反应：旧结核菌素试验（ OT试验 ） 皮试（+）——有一定的细胞免疫能力 皮试（—）——细胞免疫功能缺损

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二.血清M蛋白(monoclonal immunoglobulins)测 定
测定方法：蛋白电泳法、免疫比浊法和免疫 电泳法
参考值：阴性
意义：检测到 M蛋白，提示单克隆免疫球蛋 白增殖性疾病。见于多发性骨髓瘤、巨球 蛋白血症、重链病、轻链病和半分子病等
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三.血清补体检测
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一.体液免疫功能 检测
• 检测血清免疫球蛋白及其类别（尤 其是IgG、IgA和IgM ）和水平，可为诊 断免疫缺陷性疾病和免疫增殖性疾病 提供重要参数。
• 检测针对疫苗或感染因子的特异性抗 体及其水平，可较直接反映机体特异 性体液免疫功能状态。
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1．免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig)
3.补体 C 1q
方法：单向免疫扩散法 (0.197-0.04 g/L )
意义：1、增加见于骨髓炎、类风湿性关节炎、痛 风、过敏性紫癜等；2、降低见于SLE和混合性结 缔组织病等。
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4.BF
方法：单向免疫扩散法 (0.1-0.4g/L)
意义：增高见于某些自身免疫病、肾病综合征、慢 性肾炎、恶性肿瘤； 2、减低见于肝病、急性肾 小球肾炎、自身免疫性溶血性贫血。
• 基本概念
补体(complement)：是一组具有酶原活性的糖蛋白，由传 统途径的 9种成分C 1 - C 9 、旁路途径的3种成分及其 衍生物组成，参与灭活病原体的免疫反应，也参与破坏自 身组织和自身细胞而造成的免疫损伤。
1.补体 CH 50
方法：试管法
参考值：50000-100000u/l
意义：反映补体传统途径活化的活性程度。 1、CH 50

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• 检测方法：免疫比浊法 • 参考值： 成人 IgG：7.0～16.0 g/L
IgA：0.7～5.0 g/L IgM：0.4～2.8 g/L
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临床意义
免疫球蛋白增高
多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝 病 肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病， 如SLE、类风湿关节炎等
(high infectivity) HBV infection e-antibodyconversion (low infectivity) convalescent window stage early convalescent stage acute or chronic HBV infection
升高：见于甲亢、甲状腺炎、重症肌 无力、慢性活动肝炎等。
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CD4
T细胞亚群检测
CD3
CD8
CD3
CD3代表总T淋巴细胞
CD4是辅助、诱导T细胞 的标志
CD8是抑制、杀伤性T细 胞的标志
应用单抗和荧光标 记二抗反应在荧光显 微镜下或流式细胞仪 中计数CD的百分率。
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一、淋巴细胞表面标志物检测
E玫瑰花形成试验 ： T细胞表面有绵羊红 细胞受体，与SRBC 结合形成花结样的 细胞，可用于T淋巴细胞计数。
• 分化抗原测定：荧光标记的抗体与T细胞 反应，用荧光显微镜或流式细胞仪计数。
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临床意义
降低：见于免疫缺陷疾病，如恶性肿 瘤、免疫性疾病、某些病毒感染、大 面积烧伤、多发性神经炎、淋巴增殖 疾病。
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肋间后动脉的分支 浅动脉 腹壁浅动脉
旋髂浅动脉
胸腹壁静脉 浅静脉 腹壁浅静脉
旋髂浅静脉
腹壁的浅静脉是上、下腔静脉和 肝门静脉之间重要的侧支吻合
肌层
腹直肌 腹外斜肌
腹股沟韧带、 腔隙韧带、 耻骨梳韧带 腹股沟浅环（皮下环） 反转韧带 腹内斜肌 腹横肌 腹股沟镰（联合腱） 提睾肌
腹横筋膜
网膜与韧带
大网膜 小网膜 胃脾韧带 胃胰韧带 胃膈韧带
血管与淋巴
胃的动脉 来自腹腔干及其分支，形成 胃大弯动脉弓和胃小弯动脉弓。
胃左动脉 胃右动脉 胃网膜左动脉 胃网膜右动脉 胃短动脉 胃后动脉
胃的静脉
多与同名动脉伴行， 均汇入肝门静脉系统。
胃的淋巴
胃左、右淋巴结 胃网膜左、右淋巴结 贲门淋巴结 幽门上、下淋巴结 脾淋巴结 其他
2个段间裂：右后叶段间裂、左外叶段间裂
上段
右 前
左 内
右后叶 下段
叶
叶
上段 左外叶
下段
上段 右后叶
下段
右前叶 左内叶
左段 尾状叶
右段
上段 左外叶
下段
五、肝外胆道
由肝左、右管，肝总管，胆囊，胆总管组成
胆囊
形态：分底、体、颈、管四部 Hartmann囊 Heister瓣 胆囊三角（Calot三角）
腹直肌筋膜 构成腹股沟管后壁 腹股沟管深环 窝间韧带 精索内筋膜
腹膜外组织
（腹膜外脂肪、腹膜外筋膜）
壁腹膜
脐正中襞（内有脐尿管索） 脐内侧襞（内有脐动脉索） 脐外侧襞（内有腹壁下血管）
腹前外侧壁深层的血管和神经
腹壁下动脉 旋髂深动脉
髂腹下神经 髂腹股沟神经 生殖股神经
局部结构
腹直肌鞘