高三生物二轮复习 2.15.1 基因工程(含PCR技术)和细胞工程课件.pptx

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二、细胞工程 1.植物组织培养: (1)过程图解:
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(2)说明。 ①生长素与细胞分裂素的比值高时:利于根的分化,抑 制芽的形成。 ②生长素与细胞分裂素的比值低时:利于芽的分化,抑 制根的形成。 ③生长素与细胞分裂素的比值相当时:促进愈伤组织的 生长,不分化。
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2.植物体细胞杂交: (1)过程图解:
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(4)用限制酶切割运载体时,至少要保证一个标记基因 的完整性,以便于检 包含某种生物的部分基因。
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5.基因工程中的载体与细胞膜上的载体不同。 6.启动子、终止子: (1)启动子(DNA片段)≠起始密码子(位于RNA上)。 (2)终止子(DNA片段)≠终止密码子(位于RNA上)。 7.目的基因的插入位置是在启动子和终止子之间。
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①去壁(纤维素酶和果胶酶处理)。 ②诱导原生质体融合(物理法、化学法)。 ③再生出新的细胞壁(原生质体融合成功的标志)。
17Leabharlann (2)说明。 ①原理:细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。 ②植物体细胞杂交属于无性生殖,最终的结果是得到完 整的杂种植株。
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3.动物细胞培养: (1)过程图解。
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世纪金榜导学号
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(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用 ___________________两种限制酶切割,酶切后的载体 和目的基因片段,通过__________________酶作用后获 得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于 ___________________________态的大肠杆菌。
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(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选 平板培养基中添加___________________________,平 板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2 中_______________________________________。
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(4)结果:每一次循环后,目的基因的量增加一倍,即呈 指数形式扩增(约为2n,n为扩增循环次数)。 (5)与体内DNA复制不同:不需要解旋酶,需耐高温的DNA 聚合酶。
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4.蛋白质工程: (1)原理:中心法则的逆推。 (2)实质:改造基因。
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(3)步骤。 ①预期的蛋白质功能;②设计预期的蛋白质结构;③推 测应有的氨基酸序列;④找到相对应的脱氧核苷酸序列; ⑤鉴定蛋白质的生物功能。 (4)产物:产生自然界中没有的新蛋白质。
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7.动物细胞培养的2点提醒: (1)只能获得大量细胞,不能得到生物个体。 (2)培养液通常要添加血清,以补充合成培养基中不足 的成分。
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8.制备单克隆抗体的2点提醒: (1)需要先注射特定抗原免疫处理正常小鼠。 (2)杂交瘤细胞兼有两个亲本细胞的特性:能不断增殖 并能产生特异性抗体。
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题型一 基因工程 【典例1】(2016·江苏高考·T33)下表是几种限制酶 识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶 的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回 答下列问题:
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【易错·易混】 一、有关基因工程的提醒 1.限制酶使磷酸二酯键断开,解旋酶使氢键断开。 2.通过PCR技术扩增DNA时,利用高温使氢键断裂。
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3.使用限制酶的注意点: (1)一般用同一种限制酶切割载体和获取目的基因。 (2)不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。 (3)使用不同限制酶切割目的基因和质粒,可以避免目 的基因与质粒的自身环化。
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8.目的基因和受体细胞均可来自动植物或微生物。 9.目的基因插入质粒后,不会影响质粒的复制。 10.转基因抗虫作物与非转基因作物混合播种,会降低 害虫种群中的抗性基因频率的增长速率。
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11.选择PCR中引物的注意事项: (1)依据目的基因两端的部分核苷酸序列设计。 (2)两种引物之间以及每种引物内部不能发生碱基互补 配对。
专题15 现代生物科技专题 第1讲 基因工程(含PCR技术)和细胞
工程
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答案速填:①DNA连接酶
②目的基因的获取
③检测与鉴定
④基因
⑤全能性
⑥作物脱毒 ⑦细胞增殖 ⑧流动性
⑨动物细
胞融合和动物细胞培养
⑩骨髓瘤细胞
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【知识·方法】 一、基因工程和蛋白质工程 1.基因工程的3种工具: (1)限制性核酸内切酶:断开磷酸二酯键,产生黏性末端 或平末端; (2)DNA连接酶:连接两个DNA片段形成磷酸二酯键;
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5.动物细胞融合: (1)过程图解:
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(2)说明。 ①原理:细胞膜的流动性、细胞增殖。 ②诱导方法:物理法、化学法和生物法(灭活的病毒)。
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6.单克隆抗体: (1)过程图解:
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(2)两次筛选的目的。 第一次筛选:通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞。 第二次筛选:通过克隆化培养、抗体检测,筛选出能产 生特异性抗体的细胞群。
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(2)两次用到胰蛋白酶的目的。 第一次:是将剪碎后的动物胚胎或器官分解成单个细胞。 第二次:是使贴壁生长的细胞从瓶壁上脱离下来,进行 传代培养。
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4.核移植与克隆动物: (1)过程图解:
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(2)说明。 ①原理:动物细胞核的全能性。 ②卵母细胞去核的方法:显微操作法。 ③供体细胞:传代10代以内的细胞。因为10代以内的细 胞能保持正常的二倍体核型。 ④细胞核移植技术中也可将供体细胞直接注入去核卵 母细胞中。
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(3)载体:常用的有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物 病毒等。
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2.基因工程的操作程序:
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3.PCR技术: (1)原理:DNA双链复制。 (2)条件:引物、DNA模板、TaqDNA聚合酶、四种脱氧核 苷酸。
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(3)过程:90℃以上时,双链DNA受热解聚为单链(变 性)→50℃左右,引物与单链相应互补序列结合(复 性)→72℃左右,在TaqDNA聚合酶作用下进行互补链的 合成(延伸)。
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二、有关细胞工程的提醒 1.制备人工种子需要植物组织培养到丛芽或胚状体阶 段。 2.正确认识3类细胞的来源: (1)杂种细胞:植物体细胞杂交。 (2)重组细胞:核移植。 (3)杂交细胞:动物细胞融合。
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3.原代培养与传代培养的区别:是否进行了分瓶培养。 4.核移植技术获得的动物与供核动物的性状并不完全 相同。 5.动植物的体细胞进行离体培养都需要在无菌条件下 进行。 6.植物组织培养中添加蔗糖的目的是提供营养和调节 渗透压。