凝聚胺介质交叉配血试验操作规程

交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1，洁净试管，离心机，显微镜。

2，0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3，凝聚胺试剂*1 低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

*2 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

*3 复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

*4 阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。

4，抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1．凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2．有效期内可使用。

3．抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1．抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2．2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1．取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

临床交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管，离心机，显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

③复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

凝聚胺介质交叉配血试验操作规程(S O P文件) 1目的作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。

2检验原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM)，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺（Polybrene)溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。

最后，加入悬浮液（Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene)阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

3储存条件及有效期未开封试剂应贮存于2℃~25℃、相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。

4样本要求4.1新鲜血清，含EDTA抗凝血浆、3%~5%的红细胞悬液。

4.2不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。

5检验方法辅助交叉配血试验5.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。

5.2各加LIM0.65ml,混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。

5.3用离心机3400转/min(相当于1000g离心力）离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。

凝聚胺法交叉配血标准操作规程1.目的规范凝聚胺法交叉配血标准操作程序。

2.原理红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。

最后加入悬浮液（Resuspending）， Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

3.试剂由珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺法试剂盒，其组成：3.1低离子介质(LIM) 2×130ml。

3.2凝聚胺(Polybrene)溶液2×20ml。

3.3 Resuspending溶液2×20 ml4.仪器4.1 80-2离心机：上海医疗器械有限公司4.2电热恒温水浴箱：上海精宏实验设备有限公司4.3 OLYMPUS显微镜：日本5.操作步骤及结果判断按照试管法血型鉴定检验标准操作程序进行受血者血型鉴定, 并将鉴定结果写于申请单，并签名。

以“同型输注”为原则，取相对应的成分血源进行交叉配血。

5.1取洁净小试管2支,分别标明主、次侧管。

5.2于主侧管中加入受血者血浆2滴和供血者3-5%红细胞悬液1滴,次侧管中加入供血者血浆2滴和受血者3-5%红细胞悬液1滴, 轻轻混匀离心1000r/分钟, 仔细观察有无凝集,无凝集则可进行下一步骤,若有凝集则查找原因。

用凝聚胺做交叉配血试验的操作程序
1.目的：检出和鉴定意外抗体；红细胞血型抗原定型
2.原理：凝聚胺溶解后产生的阳离子中和红细胞表面的唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥的可逆的非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥的特异性凝集。

3.适用范围：交叉配血、免疫性抗体检查
4.所需材料：聚凝胺试剂、洁净试管、滴管、离心机
5.操作程序：（以交叉配血为例）
5.1以生理盐水洗涤受血者和献血者红细胞1—3次，配成3-5%的悬液。

5.2交叉配血试验：
主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%的RBC悬液。

次侧：2滴供者血清加1滴患者3-5%的RBC悬液。

5.3每只试管加600微升低离子液，混合放置1分。

5.4分别加2滴Polybrene应用液，混合放置15秒。

5.5离心3400转/分15秒，弃上清，控干。

5.6观察管底有无聚凝物，如果没有则需重做。

5.7每管各加2滴解聚液，轻轻混合10秒，观察结果并做记录。

5.8结果判定：10秒内若为Polybrene引起的聚合应该会散开，判为阴性。

若为抗原抗体引起的凝聚则不会散开，判为阳性。

6.注意事项：
6.1可以用EDTA血浆代替血清
6.2加入解聚液后应该在3分钟之内观察结果
6.3解聚液不可多加，以免降低试验灵敏度。

交叉配血操作规范（凝聚胺法）【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。

【适用仪器范围】双目显微镜、普通离心机。

【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。

【应用范围】交叉配血（凝聚胺法）的手工操作。

【标本采集和处理】1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。

备血使用的受血者标本必须是输血前三天之内的血样。

采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。

2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。

急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。

3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。

确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。

并按日期索引进行登记。

4. 将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。

保证血浆于血球有效分离。

溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。

【方法学原理】凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

【试剂和材料】1．供血者血清（血浆）；2．受血者血清（血浆）；3．BASO凝聚胺（Polybrene）试剂盒。

交叉配血操作规程凝聚胺法交叉配血是指将一定数量的输血者的红细胞与另一组供血者的血清进行混合，通过观察混合血后是否发生凝集反应来确定血型。

交叉配血操作主要采用凝聚胺法进行，以下是交叉配血操作规程的详细步骤。

1.准备工作a.配置所需试剂，包括输入血浆、配血瓶、试剂盘、标本管、溶血酶溶液、配血盘等。

b.通过测定输血者和供血者的血型，确认双方的血型信息，并记录在相关记录表中。

2.标本采集a.采集输血者和供血者的静脉血标本，放入标本管中，避免血样凝固。

b.标本采集的相关操作要符合严格的无菌原则，确保血样的无菌及安全性。

3.标本处理a.将标本管中的静脉血标本置于冰上，在4℃下保存。

b.用溶血酶溶液处理输血者的红细胞，将3滴红细胞加入到每一个配血瓶中，轻轻摇动混合均匀。

4.试剂配置a.将配血盘中的试剂盘取出，配置新鲜的抗血型血清和已知血型标准红细胞。

5.凝胶装配a.打开凝胶洞口，将配血盘的试剂盘放入凝胶洞中。

b.确保试剂盘的位置正确，使试剂液体触及到凝胶洞的底部。

6.样本混合a.取出保存在冰上的输血者和供血者的静脉血标本，放置于试剂盘的对应位置。

b.轻轻旋转试剂盘，使血样和试剂充分混合起来，注意避免搅拌过于激烈。

7.观察凝聚反应a.在一定的时间内，观察配血盘中是否发生凝聚反应。

b.根据凝聚反应的情况，判断输血者和供血者的血型是否兼容。

8.结果判读a.若输血者的红细胞与供血者的血清发生凝聚反应，表示两者的血型不兼容，不适合进行输血。

b.若输血者的红细胞与供血者的血清没有发生凝聚反应，表示两者的血型兼容，可以进行输血。

9.记录和报告a.记录每次交叉配血的操作过程和结果，包括输血者和供血者的血型信息、配血的凝聚反应情况等。

b.报告输血者的血型结果和是否适合进行输血。

交叉配血操作规程凝聚胺法主要是通过观察凝聚反应来判定血型的兼容性，该方法操作简单、结果可靠。

但需要注意的是，交叉配血结果只能作为指导输血的参考依据，还需要综合考虑患者的临床情况和输血指征等因素，确保安全有效地进行输血操作。

凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。

二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。

四、测定原理：红细胞表面带有大量的负电荷，凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生较多正电荷，可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞之间的距离减少。

若是未被抗体致敏的红细胞，加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏，则会被凝聚胺凝集，凝块就不会散开，试验结果为阳性。

五、试剂及材料(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术研究所)成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2~8℃贮存2年，试剂盒打开使用后可置于室温(二)材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求：(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml（注意核对病人信息）, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。

(二)标本保存：血液样本必须密封，2~8℃保存7天。

(三)用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本。

七、操作程序：(一)将受血者红细胞配成3%盐水悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。

(二)将供血者血样配制3%红细胞悬液，鉴定ABO血型及Rh血型。

(三)取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）或“主侧”；另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞(PC)或“次侧”。

（四）主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul。

次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul。

各加低离子介质溶液0.6 ml，混匀后静置1分钟，再各加聚凝胺溶液2滴，静置15s。

(五) 混合均匀后，在1000g条件下离心15s，然后倒掉上清液。

(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。

精心整理交叉配血（凝聚胺法）1.原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。

加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2.标本采集：2.1标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。

2.2标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。

3.标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。

4.标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准：细菌污染。

溶血标本，标签不齐全不能作测定。

6.试剂：6.1试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching)6.2试剂生产厂家：(台资)珠海贝索生物技术有限公司。

6.3试剂组成：试剂 1.低离子介质(LowLonicMedium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-25度贮存，有效期为2年。

试剂2.凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。

试剂3.重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。

试剂4.8.5％生理盐水。

7.仪器：7.1血型血清离心机：80-2型离心机江苏金坛市大地自动仪器厂7.2离心机：江苏金坛市大地自动仪器厂7.3电热恒温水箱：江苏金坛市医疗器械厂精心整理精心整理7.4显微镜：XSZ-H3(中国）8.操作步骤及结果判断：8.1供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。

加样量均为：血清2滴，红细胞悬液1滴。

主管：受血者血清+供者红细胞悬液;次管：受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。

凝聚胺法交叉配血操作规程一．【预期用途】本产品作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。

二．【检验原理】红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。

其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。

最后，加入悬浮液（Resuspending），Resuspending 具有中和凝聚胺（Polybrene）阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

三．【主要组成成分】试剂由低离子溶液（Low Ionic Medium）、凝聚胺溶液（Polybrene Reagent）、悬浮液（Resuspending）组成。

注：一般情况在有效期内不同批号试剂盒中的各组份可以互换使用，但不推荐此做法。

四．【储存条件及有效期】2℃～25℃保存，有效期2年。

未开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为2年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。

生产日期及有效期信息见标签。

五．【样本要求】1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3％～5％的红细胞悬液。

（如取分离血清后底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5％红细胞悬液）2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。

交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。

(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断供、受者间血液的相容性。

2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。

(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。

(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。

(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

凝聚胺交叉配血标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程.二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验.四、测定原理：红细胞表面带有大量的负电荷,凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物,溶解后产生较多正电荷,可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷,使红细胞之间的距离减少.若是未被抗体致敏的红细胞,加入悬浮液它具有中和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体所致敏,则会被凝聚胺凝集,凝块就不会散开,试验结果为阳性.五、试剂及材料一聚凝胺试剂盒合肥天一生物技术研究所成分：低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对照液；保存条件：2~8℃贮存2年,试剂盒打开使用后可置于室温二材料：玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求：一抽取受血者抗凝抗凝剂为静脉血2-3ml注意核对病人信息, 在3000r/min条件下离心5分钟备用.二标本保存：血液样本必须密封,2~8℃保存7天.三用于交叉配血必须是2~8℃保存3天以内的标本.七、操作程序：一将受血者红细胞配成3%盐水悬液,鉴定ABO血型及Rh血型.二将供血者血样配制3%红细胞悬液,鉴定ABO血型及Rh血型.三取洁净小试管2支,1支标明受血者血清PS+供血者细胞DC或“主侧”；另1支标明供血者血清DS+受血者细胞PC或“次侧”.四主侧管：受血者血清100ul+供血者红细胞悬液50ul.次侧管：供血者血清100ul+受血者红细胞悬液50ul.各加低离子介质溶液 ml,混匀后静置1分钟,再各加聚凝胺溶液2滴,静置15s.五混合均匀后,在1000g条件下离心15s,然后倒掉上清液.六轻轻侧动试管里的细胞扣,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做.七最后加入重悬液2滴,轻轻转动试管混合,并同时观察结果,必要时在显微镜下观察结果.八、结果判定：一阴性：60秒内凝块散开,代表由聚凝胺溶液引起的非特异性凝集,配血结果相合.二阳性：60秒内凝块不散开,代表红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合.三如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察.九、注意事项：一若病人血浆血清含肝素,须多加双倍量的聚凝胺溶液以中和肝素.二冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起的凝集反应,影响结果判断.三加入血清量应严格按照操作方法,多加血清会提高离子强度,降低致敏效果.四抗原抗体比例适当.。

凝聚胺交叉配血操作流程
凝聚胺交叉配血是一种重要的辅助性医学操作，它可以帮助医生和护士在紧急情况下，迅速、准确地给患者配血，保证患者得到优质的治疗。

本文将结合流程图，着重介绍凝聚胺交叉配血操作的基本流程。

自动交叉配血系统通常由凝聚胺交叉配血设备和血液实验室材
料组成，它可以完成一次全自动的交叉配血操作。

第一步是将血液实验室的样本置于设备上，将凝聚胺置入设备中。

耐普森凝聚胺具有双向交叉作用，能够将血液样本混合、交叉混合，达到所需的组成比例。

第二步是进行配血，将混合的血液样本注入接收者的血液管中，使血液按照所需的比例分配，从而使接收者得到最佳的治疗效果。

第三步是处理凝聚胺，经过操作后，凝聚胺被收集，然后经过处理处理，分解凝聚胺质粒，使其保持有效的状态，为下一次的操作做好准备。

第四步是清洗设备，在每次操作完成后，应当及时清洗设备，以确保本次操作在下一次使用时可用。

整个凝聚胺交叉配血操作不仅确保了患者得到优质的治疗，而且操作流程简单、安全，为医护人员提供了大量便利。

凝聚胺交叉配血操作提醒我们，要提高护理质量，做到安全、准确、快速，在每一个环节都要做到严谨慎重。

采用凝聚胺交叉配血的护理工作应该被视为一项重要的护理任务，必须认真对待，以保护患
者的生命安全。

总之，凝聚胺交叉配血是一项重要的护理操作，它不仅能够给患者提供优质的治疗，还可以保证医护人员的安全，为他们提供一个安全、可靠的治疗环境。

通过规范操作，准确按照操作规程，凝聚胺交叉配血操作可以确保操作的安全性和准确性，保护患者的安全和健康。

交叉配血操纵规程（凝集胺法）之袁州冬雪创作一．目标规范交叉配血试验操纵；包管临床用血的平安性和有效性.二．适用范围适用于临床配血标本.三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需资料和设备资料：凝集胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本.设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操纵步调1.凝集胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液.（2）取试管3支，标识表记标帜主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀.（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验成果.（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合平均，室温孵育1min.（5）每管各加2滴凝集胺溶液，混匀后静置15s.（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干.（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝固，如无凝固，必须重复步调（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察成果.（9）成果断定如凝离合开，则为凝集胺引起的非特异性凝固，判为阴性成果，配血相合；如凝集不散开，则为抗原抗体连系的特异性反应，判为阳性成果，配血不相合，如肉眼观察凝固强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝固.成果断定要求在1min内完成，最长不要超出3min，因为弱凝固的阳性成果，超出1min可以变成阴性.六．注意事项1.配血技术①惯例配血技术：选择的技术不但要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽量多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检.今朝认为盐水法交叉配血是输血前检查必不成少的试验，首先采取盐水法停止交叉配血，再采取可以检出IgG类抗体的方法停止交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于处理无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合.2.主侧交叉配血不相合的原因①患者或供者ABO血型定型不正确，或二者的ABO血型不配合；②患者血清中存在同种抗体，与供者红细胞上的相应抗原起反应；③患者血清中存在自身抗体，与供者红细胞中的相应抗原起反应；④供者红细胞上已经包被了抗体，导致抗球蛋白阳性；⑤患者血清不正常，如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝固，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性（用盐水添加试验来处理）；⑥试验系统被污染.3.次侧交叉配血不相合的原因①供者血清中存在针对患者红细胞抗原的抗体；②患者与供者的ABO血型不相合；③患者红细胞已经包被了抗体，直接抗球蛋白试验阳性.。

交叉配血操作规程（凝聚胺法）一．目的规范交叉配血试验操作；保证临床用血的安全性和有效性。

二．适用范围适用于临床配血标本。

三．职责血库技术人员负责交叉配血试验四．所需材料和设备材料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。

设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五．操作步骤1.凝聚胺法（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。

（2）取试管3支，标记主、侧和自身对照主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀。

（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。

（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。

（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。

（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。

（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步骤（3）-（6）（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。

（9）结果判定如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。

结果判定要求在1min内完成，最长不要超过3min，因为弱凝集的阳性结果，超过1min可能变为阴性。

六．注意事项1.配血技术①常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。

目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验，首先采用盐水法进行交叉配血，再采用能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血；②特殊配血技术，如：预温配血技术：主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。

交叉配血操作规程[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管，离心机，显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

③复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清：含抗D 血清，氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3 次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3 支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2 滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴，次测管：加入供血者血清（浆）2 滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴，对照管：加入2 滴*4 阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。

凝聚胺交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范输血科交叉配血试验的技术操作，确保鉴定结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。

2、适用范围本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。

3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。

4、试验方法及原理4.1试验方法：凝聚胺介质配血法4.2原理：针对不规则抗体的检出及鉴定多采用红细胞的凝聚反应试验，而凝聚反应试验的成效则与分布红细胞表面之电荷以及抗体的亲和性息息相关。

凝聚胺法是利用低离子介质（LIM）来降低介质的离子强度，进而减少红细胞之间距，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体发生特异性结合；接着加入凝聚胺（polybrene）此种多价阳离子聚合物来中和红细胞上的阴性电荷，使细胞间发生非特异性凝聚；最后加入重悬液，使之中和由凝聚胺所引起之非特异凝聚，倘若没有凝聚发生，则判定为阴性；若有凝集，则得知存在特殊性之抗原抗体反应，则判定为阳性。

5、样本采集和处理同盐水交叉配血试验。

6、试剂：贝索的试剂盒：1)低离子溶液（LIM）2)聚凝胺溶液（POLYBRENE）3)悬浮液（RESUSPENDING）7、操作步骤7.1 取试管两支,分别标明主次侧管,主侧管加入受血者血清两滴,再加入2~5%献血者红细胞悬液1滴,次侧管反之。

7.2每支试管中加入0.7mlLIM液,混匀;再各加入2滴POLYBRENE 液,混匀。

7.3 3400转离心10秒，弃上清液，不要沥干，让管底残留约0.1ml 液体。

7.4轻摇试管，目测红细胞有无凝集，若无凝集则必须重作。

7.5加2滴resuspeneing液，轻摇试管混合并同时观察结果。

8、结果判断立即目测并镜检观察凝集状态。

如果30秒内凝集散开，代表是由polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合。

若凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性凝集，配血结果不相合。

若反应可疑，可进一步用显微镜观察。

交叉配血（凝聚胺法）1. 原理凝聚胺（polymatching）法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。

加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2. 标本采集：2.1 标本种类：抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清，将细胞配成5％盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。

2.2 标本要求：抗凝和干燥管均可，如用抗凝血主张用EDTAK2（mg/dz）抗凝标本应无溶血，切标签齐全。

3. 标本储存：急诊标本30分钟内完成操作，标本应至4℃冰箱保存7天。

4. 标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：细菌污染。

溶血标本，标签不齐全不能作测定。

6. 试剂：6.1 试剂名称：凝聚胺试剂(polymatching)6.2 试剂生产厂家：(台资)珠海贝索生物技术有限公司。

6.3 试剂组成：试剂1. 低离子介质(LowLonic Medium，LIM).试剂打开使用后，可置室温贮存，未开封者2-25度贮存，有效期为2年。

试剂2. 凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。

试剂3. 重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。

试剂4. 8.5％生理盐水。

7. 仪器：7.1 血型血清离心机：80-2型离心机江苏金坛市大地自动仪器厂7.2 离心机：江苏金坛市大地自动仪器厂7.3 电热恒温水箱：江苏金坛市医疗器械厂7.4 显微镜：XSZ-H3(中国）8. 操作步骤及结果判断：8.1 供受者红细胞用生理盐水配成3-5％的细胞悬液。

加样量均为：血清2滴，红细胞悬液1滴。

主管：受血者血清+供者红细胞悬液;次管：受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。

2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程1.原理聚凝胺试验(PO1ybrene)使用低离子介质(IoWionicmedium,1IM)加速IgG 型抗体与红细胞之间的反应速度。

聚凝胺作为一种碱性分子可以和红细胞表面的酸性糖分子结合，在离心力的作用下聚凝胺使红细胞相互靠近,使得已经结合在红细胞表面的IgG抗体分子可以在不同的红细胞之间搭桥。

然后加入重悬液，使得聚凝胺的作用被消除。

被聚凝胺凝集起来的红细胞，此时会渐渐散开，但已经被IgG抗体分子搭桥连接起来的红细胞不会散开，以此检测血清或血浆中存在的血型抗体。

本试验具有敏感性高及快速等优点，已应用于血型检查、抗体筛选和鉴定交叉配血试验。

聚凝胺试剂目前国内市场有售。

2.试剂与器材2.1低离子介质(1IM)。

2.2Po1ybrene试剂。

2.32%~5%已知抗原的红细胞生理盐水悬液2.4重悬液。

3操作1.1主侧配血向试管中加入患者血清2滴和献血者2%~5%红细胞悬液1滴。

次侧配血：向试管中加入献血者血清2滴和患者2%~5%红细胞悬液1滴。

1.2立即以1000Xg离心，观察结果。

如果阴性则继续试验；如果阳性，需分析原因排除干扰后继续后续试验。

1.3加0.6m11IM试齐I」，室温放置1分钟。

1.4加入2滴po1ybrene试剂,立即以IOoOxg离心1分钟，弃去试管中液体，轻摇试管，肉眼判断红细胞凝集情况。

如果有凝集出现则继续操作。

如果没有凝集出现则该试验无效。

1.5加人1滴重悬液，轻摇试管，肉眼观察结果。

4.结果判定1分钟内凝集消失为聚凝胺试验阴性，1分钟内凝集不消失为聚凝胺试验阳性。

5.注意事项5.1通常情况下,使用1ISS和1IM试剂作为缩短抗原-抗体的反应时间是同时有效的。

5.2加人重悬液后，应尽快观察结果，以免弱反应消失。

5.3肝素会中和聚凝胺的作用，应避免用肝素抗凝的血样。

5.4聚凝胺方法不适合Ke11系统抗体的检测，所以对阴性结果需进行抗球蛋白试验，以免漏检。