医疗器械生物负载验证方案
医疗器械生物负载验证方案包括以下步骤：
1. 明确验证目的：例如验证产品起始微生物负载。
2. 列出所有用于验证的设备和材料，例如试验培养基、平板计数器、灭菌器等。
3. 详细描述验证方法，包括样品采集、样品处理、培养基类型和组成、培养条件、读数方法等。
4. 制定合适的验证标准，例如对于哪些微生物进行验证，验证结果应满足哪些要求等。
5. 制定完整的验证计划，包括样品采集时间、验证频率、验证时间等。
6. 收集并记录所有实验结果，及时进行统计分析，包括微生物菌落数、微生物种类、检出率等。
7. 编写完整的验证报告，对实验结果进行分析总结，提出改进措施或建议。
以上步骤仅供参考，具体方案需要根据医疗器械的特点和要求进行调整和完善。
同时，为保证验证结果的准确性和可靠性，建议在实施方案前进行充分的文献调研和实验准备，并遵循相关的标准和规范。
工作指引名称:生物负载检测方法的确认1 适用范围适用于运用重复性回收的方法对生物负载检测方法进行确认.2 参考文件2.1 ISO11737-1 Sterilization of medical devices --Microbiological methods--Part 1:Determination of a population of microorganisms on products2.2 WI.XXX 产品生物负载检测操作指引3 定义3.1 生物负载:产品或无菌阻隔系统上的存活微生物的总数.3.2 CF修正系数Correction Factor(CF):用于补偿无法从产品或培养基中完全除去微生物的数值;3.3 样品份额Sample item portion(SIP):从产品上取的用于测试的规定部分.4 职责4.1 实验员:具备微生物方面知识,熟悉测试操作,负责产品的测试及报告.4.2 实验工程师:熟悉测试,指导实验员测试,检查测试报告.4.3 质量主管/经理:负责审批测试报告.5 确认程序5.1 本方法的基础原理是生物负载测定方法应重复进行,直到回收的微生物累计数量没有明显增加.每重复一次,都将洗脱液从产品或产品部份上完全回收并计数,比较连续回收得到的累计结果.5.2 测定产品生物负载后,应将该技术再次应用于同一产品份额上研究微生物是否进一步移除,应用于同一产品份额的该过程可在规定次数的场合下重复进行;5.3 样品的选择,被测试样品必须具有代表性,可以体现产品的真实生物负载的情况;5.4 测试样品份额(SIP)的选择,若验证生物负载在产品上是均匀分布的,SIP可以是该产品的任何部份,否则样品应包含能代表所制产品的每种相应材质而随机选取的产品部位.若已知生物负载分布,可以从认为对灭菌工艺最有挑战性的产品部份选取SIP.可在长度,质量,体积或表面积基础上计算SIP:工作指引名称:生物负载检测方法的确认SIP的类型产品类型表面积植入类(无渗透吸收型)质量粉尘类衣服类植入类(可渗透吸收型)长度管道类(管径一致)体积液体类5.5 生物负载测定方法的选择,可参考以下图表制定: XXX 確認: 日期: 2-Mar-19 修訂版次: 2工作指引名称:生物负载检测方法的确认5.6 测试准备5.6.1 检测设备A. 洁净工作台B. 细菌过滤器C. 超声清洗机D. 恒温培养箱E. 高压蒸汽灭菌锅5.6.2 检测用品A. 洗脱液,稀释液:0.02%吐温80,0.9%NaCl,PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液;B. 营养琼脂培养基或胰蛋白胨大豆琼脂培养基;C. 剪刀,镊子,微孔滤膜(0.45μm);D. 酒精灯,75%酒精,培养皿;5.6.3 根据检测需要,按规定要求配制好培养基和洗脱液,稀释液;5.6.4 将配制好的培养基和洗脱液,稀释液分装到三角瓶中密封并用白纸包住封口,微孔滤膜用水润湿放入培养皿中,剪刀,镊子,培养皿,细菌过滤器不锈钢杯用白纸包好,所有物品经121℃高压蒸气灭菌30min;5.6.5 超声清洗机和细菌过滤器用75%酒精擦洗干净;5.6.6 实验前两小时打开洁净工作台,微生物限度室,更衣室的紫外灯进行环境消毒30min,在开启紫外灯时人员必须远离,以免灼伤眼睛和皮肤造成人身伤害;5.6.7 所有检测用品,样品由传递窗递入微生物限度室.5.7 操作步骤5.7.1 将样品包装去除,用灭菌镊子将样品放入超声清洗机中,如样品过大而无法放入可将样品进行适当拆分;5.7.2 将样品浸入含有适量洗脱液的超声清洗机中,加入适量的稀释液,以洗脱液浸满样品表面为准;5.7.3 打开超声清洗机,清洗5min,超声清洗频率不应过高,以免造成微生物死亡;5.7.4 清洗结束后将样品取出,洗脱液在细菌过滤器上进行过滤,应注意滤膜在使用前后的完整性;5.7.5 洗脱液经薄膜过滤后,可用PH7.0气化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量为100ml;工作指引名称:生物负载检测方法的确认5.7.6 过滤完成取出滤膜,菌面朝上贴于培养基表面上培养,计数,作为第一次移除的菌落数,表示为在菌落全部计数量中的百分率;5.7.7 将每个样品按照以上方法进行移除清洗5次,分别培养计数,每次移除的菌落数作为计算CF的证据;5.7.8 修正系数CF的计算举例如下:制定: XXX 確認: 日期: 2-Mar-19 修訂版次: 2工作指引名称:生物负载检测方法的确认5.7.9 计算得到的CF值即为该样品的修正系数值,在日后该样品的生物负载检测中,可用第一次移除菌落数×该修正系数作为该产品的生物负载结果.5.7.10 检测报告编号规则:CF-YY-XXXYY: 测试年份XXX: 产品项目号6 文件保存期限:相关检测报告保存10年.7 附录7.1 Repetitive Recovery Testing Report工作指引名称:生物负载检测方法的确认附录7.1 Repetitive Recovery Testing Report制定: XXX 確認: 日期: 2-Mar-19 修訂版次: 2XXX 有限公司文件编号 XXXPage 7 of 7工 作 指 引名称:生物负载检测方法的确认修订履历。
工作指引名称:生物负载检测方法的确认1 适用范围适用于运用重复性回收的方法对生物负载检测方法进行确认.2 参考文件2.1 ISO11737-1 Sterilization of medical devices --Microbiological methods--Part 1:Determination of a population of microorganisms on products2.2 WI.XXX 产品生物负载检测操作指引3 定义3.1 生物负载:产品或无菌阻隔系统上的存活微生物的总数.3.2 CF修正系数Correction Factor(CF):用于补偿无法从产品或培养基中完全除去微生物的数值;3.3 样品份额Sample item portion(SIP):从产品上取的用于测试的规定部分.4 职责4.1 实验员:具备微生物方面知识,熟悉测试操作,负责产品的测试及报告.4.2 实验工程师:熟悉测试,指导实验员测试,检查测试报告.4.3 质量主管/经理:负责审批测试报告.5 确认程序5.1 本方法的基础原理是生物负载测定方法应重复进行,直到回收的微生物累计数量没有明显增加.每重复一次,都将洗脱液从产品或产品部份上完全回收并计数,比较连续回收得到的累计结果.5.2 测定产品生物负载后,应将该技术再次应用于同一产品份额上研究微生物是否进一步移除,应用于同一产品份额的该过程可在规定次数的场合下重复进行;5.3 样品的选择,被测试样品必须具有代表性,可以体现产品的真实生物负载的情况;5.4 测试样品份额(SIP)的选择,若验证生物负载在产品上是均匀分布的,SIP可以是该产品的任何部份,否则样品应包含能代表所制产品的每种相应材质而随机选取的产品部位.若已知生物负载分布,可以从认为对灭菌工艺最有挑战性的产品部份选取SIP.可在长度,质量,体积或表面积基础上计算SIP:工作指引名称:生物负载检测方法的确认SIP的类型产品类型表面积植入类(无渗透吸收型)质量粉尘类衣服类植入类(可渗透吸收型)长度管道类(管径一致)体积液体类5.5 生物负载测定方法的选择,可参考以下图表制定: XXX 確認: 日期: 2-Mar-19 修訂版次: 2工作指引名称:生物负载检测方法的确认5.6 测试准备5.6.1 检测设备A. 洁净工作台B. 细菌过滤器C. 超声清洗机D. 恒温培养箱E. 高压蒸汽灭菌锅5.6.2 检测用品A. 洗脱液,稀释液:0.02%吐温80,0.9%NaCl,PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液;B. 营养琼脂培养基或胰蛋白胨大豆琼脂培养基;C. 剪刀,镊子,微孔滤膜(0.45μm);D. 酒精灯,75%酒精,培养皿;5.6.3 根据检测需要,按规定要求配制好培养基和洗脱液,稀释液;5.6.4 将配制好的培养基和洗脱液,稀释液分装到三角瓶中密封并用白纸包住封口,微孔滤膜用水润湿放入培养皿中,剪刀,镊子,培养皿,细菌过滤器不锈钢杯用白纸包好,所有物品经121℃高压蒸气灭菌30min;5.6.5 超声清洗机和细菌过滤器用75%酒精擦洗干净;5.6.6 实验前两小时打开洁净工作台,微生物限度室,更衣室的紫外灯进行环境消毒30min,在开启紫外灯时人员必须远离,以免灼伤眼睛和皮肤造成人身伤害;5.6.7 所有检测用品,样品由传递窗递入微生物限度室.5.7 操作步骤5.7.1 将样品包装去除,用灭菌镊子将样品放入超声清洗机中,如样品过大而无法放入可将样品进行适当拆分;5.7.2 将样品浸入含有适量洗脱液的超声清洗机中,加入适量的稀释液,以洗脱液浸满样品表面为准;5.7.3 打开超声清洗机,清洗5min,超声清洗频率不应过高,以免造成微生物死亡;5.7.4 清洗结束后将样品取出,洗脱液在细菌过滤器上进行过滤,应注意滤膜在使用前后的完整性;5.7.5 洗脱液经薄膜过滤后,可用PH7.0气化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量为100ml;工作指引名称:生物负载检测方法的确认5.7.6 过滤完成取出滤膜,菌面朝上贴于培养基表面上培养,计数,作为第一次移除的菌落数,表示为在菌落全部计数量中的百分率;5.7.7 将每个样品按照以上方法进行移除清洗5次,分别培养计数,每次移除的菌落数作为计算CF的证据;5.7.8 修正系数CF的计算举例如下:制定: XXX 確認: 日期: 2-Mar-19 修訂版次: 2工作指引名称:生物负载检测方法的确认5.7.9 计算得到的CF值即为该样品的修正系数值,在日后该样品的生物负载检测中,可用第一次移除菌落数×该修正系数作为该产品的生物负载结果.5.7.10 检测报告编号规则:CF-YY-XXXYY: 测试年份XXX: 产品项目号6 文件保存期限:相关检测报告保存10年.7 附录7.1 Repetitive Recovery Testing Report工作指引名称:生物负载检测方法的确认附录7.1 Repetitive Recovery Testing Report制定: XXX 確認: 日期: 2-Mar-19 修訂版次: 2XXX 有限公司文件编号 XXXPage 7 of 7工 作 指 引名称:生物负载检测方法的确认修订履历。
工作指引名称:产品生物负载检测1 适用范围Scope适用于对产品的生物负载检测及评估.2 参考文件Normative reference2.1 ISO 11737-1, Sterilization of medical devices—Microbiological methods— Part 1:Determination of a population of microorganisms on products;2.2 ISO 13485 Medical devices — Quality management systems — Requirementsfor regulatory purposes.2.3 GB19580 一次性使用医疗用品卫生标准3 定义Definitions3.1 生物负载Bioburden:产品或无菌阻隔系统上的存活微生物的总数;3.2 修正系数Correction Factor(CF):用于补偿无法从产品或培养基中完全除去微生物的数值;3.3 样品份额Sample item portion(SIP):从产品上取的用于测试的规定部分.4 职责Responsibility4.1 实验员:具备微生物方面知识,熟悉测试操作,负责产品的测试及报告.4.2 实验工程师:熟悉测试,指导实验员测试,检查测试报告.4.3 质量主管/经理:负责审批测试报告.5 确认程序Validation procedure5.1 实验员每月从生产车间随机三个单独批中抽取各10个样品测定批产品生物负载;5.2 样品的选择,被测试样品必须具有代表性,可以体现产品的真实生物负载的情况;5.3 测试样品份额(SIP)的选择,若验证生物负载在产品上是均匀分布的,SIP可以是该产品的任何部份,否则样品应包含能代表所制产品的每种相应材质而随机选取的产品部位.若已知生物负载分布,可以从认为对灭菌工艺最有挑战性的产品部份选取SIP.可在长度,质量,体积或表面积基础上计算SIP:工作指引名称:产品生物负载检测SIP的类型产品类型表面积植入类(无渗透吸收型)质量粉尘类衣服类植入类(可渗透吸收型)长度管道类(管径一致)体积液体类5.4 生物负载测定方法的选择,可参考以下图表工作指引名称:产品生物负载检测5.5 测试准备5.5.1 检测设备A. 洁净工作台B. 细菌过滤器C. 超声清洗机D. 恒温培养箱E. 高压蒸汽灭菌锅5.5.2 检测用品A. 洗脱液,稀释液:0.02%吐温80,0.9 %NaCl,PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液;B. 营养琼脂培养基或胰蛋白胨大豆琼脂培养基;C. 剪刀,镊子,微孔滤膜(0.45μm);D. 酒精灯,75%酒精,培养皿;5.5.3 根据检测需要,按规定要求配制好培养基和洗脱液,稀释液;5.5.4 将配制好的培养基和洗脱液,稀释液分装到三角瓶中密封并用白纸包住封口,微孔滤膜用水润湿放入培养皿中,剪刀,镊子,培养皿,细菌过滤器不锈钢杯用白纸包好,所有物品经121℃高压蒸气灭菌30min;5.5.5 超声清洗机和细菌过滤器用75%酒精擦洗干净;5.5.6 实验前两小时打开洁净工作台,微生物限度室,更衣室的紫外灯进行环境消毒30min,在开启紫外灯时人员必须远离,以免灼伤眼睛和皮肤造成人身伤害;5.5.7 所有检测用品,样品由传递窗递入微生物限度室.5.6 测试操作步骤5.6.1 直接接种法:适用于生物负载低和样品结构合适的样品;a) 将样品包装去除,以无菌操作手法放入培养皿,注入约45℃的溶化培养基,混匀,凝固,置36±1℃培养24～48小时,计数;b) 取试验用培养基置于无菌平皿中,凝固,倒置培养,作阴性对照,不得有菌生长;5.6.2 薄膜过滤法:a) 将样品包装去除,用灭菌镊子将样品放入超声清洗机中,如样品过大而无法放入可将样品进行适当拆分;b) 将样品浸入含有适量洗脱液的超声清洗机中,加入适量的稀释液,以洗脱液浸满样品表面为准;c) 打开超声清洗机,清洗5min,超声清洗频率不应过高,以免造成微生物死亡;工作指引名称:产品生物负载检测d) 清洗结束后将样品取出,洗脱液在细菌过滤器上进行过滤,应注意滤膜在使用前后的完整性;e) 洗脱液经薄膜过滤后,可用PH7.0气化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量为100ml;f) 过滤完成取出滤膜,菌面朝上贴于培养基表面上培养,计数;g) 取试验用的稀释液1ml,按上述方法操作,作为阴性对照,不得有菌生长;h) 结果计算B = FTB × CFB(bioburden):产品生物负载FTB (first treatment bioburden):初次处理菌落数CF(Correction factor):修正系数注:CF的计算参考ISO11737-1附录C和WI09.05-009.5.7 检测报告编号规则:P-XXX-YYYYXXX: 流水号YYYY: 年份6 结果判定6.1 每个单元产品生物负载,每一批的平均单元产品生物负载(批平均)和所有单元产品平均生物负载(总平均生物负载)不得大于100cfu/个;6.2 如产品的生物负载水平超过85cfu/个,应立即通知质量主管,及相关部门改善;6.3 如果每一批的平均单元产品生物负载(批平均)和所有单元产品平均生物负载(总平均生物负载)超出100cfu/个, 应从相同批次产品中重新抽样进行检测;6.4 如重新检测的结果仍超出合格水平,应立即通报相关部门并按COP14的要求发出内部纠正行动要求表作出跟踪及纠正改善行动,由上级决定该批产品是否需要增加灭菌次数或灭菌剂量;6.5 灭菌后对产品抽样进行无菌检测,如检测结果符合无菌要求,则该批产品可放行;如检测结果显示产品不能达到无菌的要求,由上级决定该批产品是否需重新灭菌;7 文件保存期限:相关检测报告保存10年.8 附录8.1 Product Bioburden Test Report8.2 Repetitive Recovery Testing Report工作指引名称:产品生物负载检测附录8.1 Product Bioburden Test Report工作指引名称:产品生物负载检测附录8.2 Repetitive Recovery Testing Report工作指引名称:产品生物负载检测修订履历。
